导入APX基因提高了普那菊苣植株的抗逆性

采用农杆菌介导的方法,把CaMV35S启动子驱动的来自棉花(Gossypiumspp.)的抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)基因导入普那菊苣(Cichorium intybus L.cv.Puna)。结果表明:经过卡那霉素(Km)筛选和对抗性植株的PCR和Southern杂交分析,证明APX基因成功地整合到普那菊苣基因组中。转APX基因普那菊苣植株对NaCl和甘露醇胁迫表现出一定的抗性,在NaCl浓度为500mmol.L-1、甘露醇浓度为30g.L-1的条件下,转APX基因不定芽能够正常生根和生长,转基因植物叶片外植体能够形成愈伤组织和再生植株,而野生型植株不定芽不能正常生根、已生根幼苗不能正常成长,野生型植株叶片不能形成愈伤组织。

普那菊苣总酚提取工艺的研究

研究了普那菊苣中总酚的最佳提取工艺条件。在单因素试验的基础上,用正交试验法对总酚的提取工艺进行优选,选用L9(34)进行正交试验,以总酚含量为指标,考察提取温度、提取时间以及料液比对总酚提取的影响。得到的最佳工艺条件为:以水为提取溶剂,温度80℃,时间2 h,料液比(质量∶体积)1∶15,提取2次。

2种菊苣再生体系及遗传转化效率的比较

以普那菊苣和将军菊苣子叶为材料,通过植物组织培养的方法,探讨了不同激素浓度配比对二者愈伤组织诱导、芽分化以及根再生的影响,并通过农杆菌介导法将编码獐茅液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AlNHX)导入菊苣中,比较普那菊苣和将军菊苣的遗传转化效率。结果表明:不同基因型的菊苣愈伤组织诱导和芽分化条件不同,普那菊苣最佳培养基为MS+1.5mg/L 6-BA+0.2mg/L IBA;将军菊苣最佳培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA;二者最佳生根培养基均为1/2MS+0.1mg/L NAA。获得的抗性芽经PCR检测,初步证实AlNHX已插入到菊苣基因组中,且普那菊苣转化效率为10.0%,将军菊苣转化效率为13.3%。

用HBSG法对多枝赖草、普那菊苣根尖染色体进行C-分带的研究

利用HBSG法对多枝赖草、普那菊苣的根尖染色体进行了C分带研究.根据李懋学等(1991年)对C分带的描述方法,首次确认多枝赖草染色体的C分带为2n=28=5CT+2CTI++2CT++1CTI++1CTI+1C+1T+1TI,普那菊苣各染色体的C分带为2n=18=2CT+4CTI++1CT++1CTI++1CT+I+.另外还对C分带实验中的一些技术细节做了初步的分析.

响应曲面法优化普那菊苣总酚提取工艺

采用Design-Expert 7.0软件的Box-Behnken响应曲面中心组合设计法研究普那菊苣中总酚的提取工艺条件。以总酚含量为指标考察提取温度、提取时间以及料液比对总酚提取的影响。得到的优化工艺条件为:提取温度83.73℃,液料比16.16,提取时间2.25 h,总酚得率为1.366 9%。

菊苣组织培养与植株再生的研究

以菊苣叶片、茎段、花蕾和花瓣为外植体 ,进行离体培养试验 ,结果表明 ,叶片、茎段、花蕾可产生淡黄色的愈伤组织 ,并可诱导出不定芽 ,出愈率为 10 0 % ,叶片和茎段的分化率为 10 0 %。诱导愈伤组织及分化的最佳培养基为 :MS+BA2 mg/ L+IBA0 .3mg/ L;生根培养基为 :1/ 2 MS+NAA0 .1mg/ L,生根率为 10 0 %。

普那菊苣引种选育研究

为满足贵州省草业生产发展的需要,在对普那菊苣引种驯化的基础上进行了品比和区域性试验。试验表明:普那菊苣的产草量、再生性及种子产量等综合表现较欧洲菊苣、美国菊苣好。区域性试验其产草量、再生性及种子产量,经方差分析各试点品种间差异达极显著水平,普那菊苣最好,欧洲菊苣次之,美国菊苣最差。区试各试点间相同品种其差异也达极显著水平,罗甸最好,独山居中,大方较差。参试品种在各试点均能正常开花结实,适应性较强,但从生产性能、营养成分进行综合分析,普那菊苣是较理想的菊苣品种,可作为优质饲草在贵州不同生境条件下推广应用。

不同土壤不同种植方式普那菊苣的产量分析

在砂土、粘土、壤土3种不同的土壤上以穴播、条播、撒播和育苗移栽4种种植方式种植黔引普那菊苣Cichorium intybus cv.Puna,测定其鲜草产量和再生速度。结果表明:黔引普那菊苣在各种不同质地土壤上采用各种种植方式均有较高的产量。在同质地土壤上,鲜草产量以条播为最高,穴播次之,育苗移栽产量最低。同一播种方式以在壤土上的产量为最高,砂土次之,粘土最低。再生速度在不同处理之间差异均不显著。黔引普那菊苣适宜在各种土壤上种植,但以在土壤肥沃的壤土上种植产量较高,条播、穴播为推广的种植方式。

黔育1号菊苣生产试验

选择贵州省独山县、道真县、毕节市、松桃县4个具有代表性的县(市)为试点,以普那菊苣为对照品种,对黔育1号菊苣进行了大田生产试验。旨在通过对在不同地区种植的黔育1号菊苣鲜、干草产量的测定,来明确黔育1号菊苣的生产力水平,从而为其将来大面积用于生产提供科学依据。结果表明,4个试点生产试验中,黔育1号菊苣的产量均较高,其在独山县、道真县、毕节市、松桃县的平均鲜草产量为95 001.6kg/hm2以上,普那菊苣的平均鲜草产量为83 732.0 kg/hm2,黔育1号菊苣比对照品种普那菊苣平均增产13.4%。

利用因子分析法分析影响欧洲菊苣产量的因素

在春播、秋播两个播期下,以穴播、条播、撒播3种方式种植欧洲菊苣(Cichorium intybus cv.Europe)测定其鲜草产量。结果表明:欧洲菊苣产量最佳组合A3B3C3,即采用撒播种植方式、密度在55株/m2、盖度为95%以上时产量最高。对影响产量较多的因素进行分析,无法确定影响产量的主要因素时,通过降维采用因子分析,利用公共因子进行分析。这样既减少了干扰因素,又抓住了影响产量的主要因素。