桂枝不同萃取部位抗过敏作用的研究

目的:观察解表药桂枝不同萃取部位的抗过敏作用,探讨该药抗过敏作用的有效物质基础,为其功效和临床应用提供药理依据。方法:采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱发的小鼠迟发型超敏反应模型,及小鼠异种被动皮肤过敏反应模型观察各受试药液对模型动物毛细血管通透性的影响,以初步筛选有效部位。进一步采用DNCB致小鼠迟发型超敏反应以及组胺、5-羟色胺所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高模型,和体外透明质酸酶抑制实验验证桂枝去油水煎液、乙酸乙酯部位与水提部位的抗过敏作用。结果:桂枝去油水煎液(6g生药/kg)、乙酸乙酯萃取部位(6g生药/kg)、水提部位(6g生药/kg)能显著降低迟发型过敏反应模型小鼠的毛细血管通透性,乙酸乙酯部位组亦能明显抑制该模型小鼠的耳廓肿胀度;三者对小鼠异种被动皮肤过敏反应有明显抑制作用。桂枝去油水煎液及乙酸乙酯部位对组胺、5-HT所致小鼠毛细血管通透性的增加有显著抑制作用;两者在浓度0.5g/ml时,体外对透明质酸酶有较强的抑制作用,抑制率分别为52.48%、52.17%。结论:桂枝去油水煎液、乙酸乙酯部位具有较好的抗过敏作用,提示桂枝抗过敏作用的有效组分以极性较高的水溶部位为主,其作用机制与抗过敏介质(如His、5-HT)效应有关。

桂枝挥发油抗甲型流感病毒作用

目的:观察桂枝挥发油及其主要成分桂皮醛体外对甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)增殖的影响及对该流感病毒株感染小鼠的治疗作用。方法:MTT法检测受试药物对狗肾传代细胞(MDCK)的半数中毒浓度(TC50)及最大无毒浓度(TC0);血凝法测定甲型流感病毒(H1N1)对MDCK细胞的感染性;MTT法和细胞病变法(CPE)测定两种药物体外抑制流感病毒增殖的有效浓度(IC50)和治疗指数(TI)。计算肺指数及HE染色观察药物对流感病毒(H1N1)感染小鼠的治疗作用。结果:桂枝挥发油和桂皮醛对MDCK细胞的TC50分别为5.38×10-3mg/ml和5.49×10-3mg/ml,TC0均为2.5×10-3mg/ml。桂枝挥发油和桂皮醛能抑制流感病毒在MDCK细胞内的增殖,其IC50分别为5.80×10-5mg/ml与5.31×10-5mg/ml,TI分别为92.82和103.35。桂枝挥发油0.174mg/kg和桂皮醛0.132mg/kg连续灌胃5d,明显降低病毒感染小鼠的肺指数,抑制率分别为26.7%和27.4%,并对病理组织形态有改善作用。结论:桂枝挥发油与桂皮醛体外明显抑制甲型流感病毒(H1N1)在MDCK细胞中的增殖,并对流感病毒株感染小鼠有较好的治疗作用。表明桂枝挥发油及桂皮醛具有抗甲型流感病毒作用,桂皮醛是桂枝挥发油抗病毒效应的主要有效成分之一。

桂枝挥发油与桂皮醛对病毒性肺炎小鼠死亡保护作用及TLR/IFN信号机制研究

目的:观察桂枝挥发油、桂皮醛的抗甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)作用,探讨其TLR/IFN信号通路机制。方法:制备流感病毒性肺炎小鼠模型,观察药物对模型小鼠的死亡保护作用;ELISA法测定模型小鼠血清IFN-α、IFN-β水平,Real-Time PCR法测定模型小鼠肺组织TLR7、MyD88、TRAF-6 mRNA的表达量。结果:桂枝挥发油0.348 mg/kg,桂皮醛0.264 mg/kg、0.132mg/kg治疗给药,及桂枝挥发油0.348 mg/kg预防给药,均能明显提高模型小鼠的死亡保护率。桂枝挥发油0.348 mg/kg显著提高模型小鼠血清IFN-α含量及肺组织TLR7 mRNA表达水平,桂皮醛0.264 mg/kg显著升高IFN-β含量。结论:桂枝挥发油、桂皮醛能提高流感病毒性肺炎小鼠的死亡保护率,表现出抗流感病毒作用,抗病毒作用机制与激活TLR7信号通路,促进IFN的分泌有关。

桂枝对大鼠中枢神经系统作用的研究

目的:考察桂枝对大鼠中枢神经系统的影响。方法:本实验根据中医临床用药习惯,按照桂枝生药量计分设立5、12、30g/kg的桂枝给药组,并设立生理盐水空白对照组和桂皮醛24mg/kg阳性对照组。采用行为药理学实验方法,通过高架十字迷宫实验和旷场实验观察不同剂量桂枝对大鼠一般行为、自主活动及探索活动的影响;通过戊巴比妥钠诱导睡眠实验观察不同剂量桂枝对大鼠睡眠潜伏期和睡眠持续时间的影响。结果:相比生理盐水组,桂皮醛与不同剂量桂枝水煎液灌胃给药后,大鼠外观行为表现为自主活动减少,修饰及嗅探次数增加。随着桂枝给药剂量的增加,大鼠进入高架十字桥开臂的次数和时间明显增加;大鼠进入闭臂的次数明显降低,其中,桂枝12、30g/kg剂量组与生理盐水组相比差异有统计学意义。桂枝12、30g/kg剂量组大鼠在旷场中心区域的停留时间和比例明显增加;大鼠的跨格次数和站立次数明显增加,其中,桂枝30g/kg剂量组与生理盐水对照组相比差异具有统计学意义;桂枝5、12、30 g/kg剂量组大鼠总的运动距离明显降低。以上3个剂量组的桂枝水煎液可增强戊巴比妥钠诱导的催眠作用。结论:本实验研究表明桂枝对大鼠中枢神经系统具有镇静和抗焦虑作用,随着用药剂量的增加镇静作用增强。

桂枝历代临床用量分析

目的总结桂枝从汉代至今两千多年的临床用量特点,为桂枝临床用量策略制定提供依据。方法建立从汉代至今桂枝剂量数据库,选取各朝代最具代表的医学著作,将含桂枝方剂的方名、总药量、桂枝药量、整方药味数、加水量、服法等逐一录入。统计含桂枝方剂中桂枝出现的频次、最常用量、常用量上限、常用量下限、最大用量、最小用量、平均用量。结果整个汉唐宋时期,桂枝的用量范围很大,平均用量均在20g以上;金元以后桂枝用量逐渐减少;至明清以后,由于温病学说盛行,桂枝作为一味辛温药物,其平均用量和最常用量都处于一个低剂量范围,但仍有一些医家在治疗某些病例时应用大剂量的桂枝,最大用量达298.4g。结论桂枝超大剂量使用,发汗解肌力量较强,可治疗风寒表虚感冒久不能解者;大剂量主要用于温经通脉。

麻黄桂枝配伍对小鼠自主活动及脑内氨基酸水平的影响

目的:研究麻黄桂枝配伍对小鼠自主活动和脑内氨基酸水平的影响。方法:选择自主活动情况稳定的小鼠随机分为空白对照组、桂枝组(0.45 g/kg)、麻黄组(0.75 g/kg)和麻桂配伍组(1.5 g/kg),记录各组给药20,60,90,180,240 min后小鼠的水平活动次数,处死后迅速采集脑组织,采用高效液相色谱-荧光检测法进行小鼠大脑皮层内氨基酸含量测定。结果:与空白对照组比较,麻黄组(0.75 g/kg)小鼠在180 min时水平活动次数显著增加,麻黄与桂枝药对间存在交互作用,麻桂配伍组(1.5 g/kg)的水平活动次数较麻黄组有降低趋势。实验建立的色谱条件对脑组织匀浆液中17种氨基酸分离较好,日内和日间精密度的RSD分别<8.09%、8.70%,平均回收率均>81.68%。与空白对照组相比,在给药90 min后,麻黄组(0.75 g/kg)脑内抑制性氨基酸类神经递质(GABA、Ala)、缬氨酸(Val)、酪氨酸(Tyr)水平均明显降低,桂枝组(0.45 g/kg)、麻桂配伍组(1.5 g/kg)脑内GABA、Ala、Val、Tyr水品较麻黄组明显升高。结论:麻黄对小鼠中枢具有兴奋作用,桂枝的配伍能拮抗其中枢兴奋作用,其机制可能与抑制麻黄对脑内氨基酸水平的改变有关。

脑透析法考察麻黄-桂枝药对配伍对麻黄碱在额叶皮层部位药代动力学的影响

目的:采用脑部微透析法考察麻黄-桂枝药对配伍对麻黄碱局部药代动力学的影响。方法:采用液质联用(UPLCMS/MS)技术,建立测定脑透析液中麻黄碱含量的方法。分别灌胃给予SD大鼠麻黄碱、麻黄和麻黄-桂枝药对3:2配伍水煎液,测定给药不同时间脑透析液的麻黄碱浓度。采用DAS3.0软件进行非房室模型拟合,计算AUC、MRT、Cmax和Tmax等药动学参数,比较不同给药组间的药动学差异。结果:本实验成功建立了UPLC-MS/MS测定脑透析液中麻黄碱含量的方法。不同给药组间药动学参数AUC和Cmax无显著性差异;与麻黄碱组相比,配伍组Tmax、T1/2和MRT显著缩短,VZ/F显著降低,CLZ/F显著增加;与麻黄组相比,配伍组Tmax、T1/2和MRT显著缩短,VZ/F显著降低。结论:麻黄-桂枝药对配伍后加速了麻黄碱在额叶皮层部位的代谢,降低了麻黄碱产生的蓄积毒性,可能是桂枝降低麻黄相对毒性的作用机制之一。

麻黄桂枝配伍对小鼠行为活动及中枢多巴胺神经递质水平的影响

目的:研究麻黄桂枝配伍对小鼠行为活动和中枢多巴胺神经递质水平的影响。方法:40只KM小鼠按体重随机分为空白对照组、麻黄组(10 g/kg)、麻黄-桂枝3:2组(10 g/kg+6.67 g/kg)、麻黄-桂枝3:1组(10 g/kg+3.33 g/kg)、桂枝组(6.67 g/kg),灌胃给药7 d,进行旷场实验;灌胃给药12 d,进行避暗实验,24 h后重复试验;灌胃给药14 d,免疫组化法检测小鼠大脑海马、纹状体、皮层多巴胺(DA)、多巴胺转运体(DAT)含量,HE染色观察小鼠大脑海马、纹状体、皮层病理变化。结果:与空白对照组比较,麻黄组(10 g/kg)小鼠自主活动增加,静止时间降低,运动时间及路程增加,小鼠进入暗箱的潜伏期缩短,错误次数和错误只数增加,大脑海马、纹状体、皮层中DA、DAT含量显著降低,病理检测有明显损伤;桂枝组(6.67 g/kg)与空白对照组相比无明显差异。与麻黄组(10 g/kg)相比,麻黄-桂枝3:2组(10 g/kg+6.67 g/kg)、麻黄-桂枝3:1组(10 g/kg+3.33 g/kg)小鼠自主活动减少,静止时间增加,运动时间及路程降低,小鼠进入暗箱的潜伏期延长,错误次数和错误只数减少,小鼠大脑海马、纹状体、皮层中DA、DAT含量增加,其病理损伤均有不同程度改善。结论:桂枝能够抑制麻黄所致的中枢的兴奋作用,改善小鼠行为活动的不良影响,减少中枢多巴胺能神经元损伤,且具有一定的量效关系,随着桂枝比例的增加,桂枝拮抗麻黄中枢毒副作用更为显著,其作用机制可能与增加多巴胺神经递质含量有关。