Circ⁃OGDH调节miR⁃127⁃3p/PSMB5轴对口腔鳞状细胞癌增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨环状RNA酮戊二酸脱氢酶(circular oxoglutarate dehydrogenase,Circ⁃OGDH)调节miR⁃127⁃3p/蛋白酶体β5亚基(proteasome subunit beta type⁃5,PSMB5)轴对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)增殖、迁移和侵袭的影响。方法:qRT⁃PCR与Western Blotting测定人口腔上皮细胞及人OSCC细胞系CAL⁃27、HN6、Bca885中Circ⁃OGDH、miR⁃127⁃3p及PSMB5表达。体外培养CAL⁃27细胞并分组转染后测定细胞Circ⁃OG⁃DH、miR⁃127⁃3p及PSMB5表达;Ki67免疫荧光及TUNEL染色检测细胞增殖、凋亡,细胞划痕及Transwell侵袭实验检测细胞迁移、侵袭;Western Blotting检测细胞凋亡(Bcl⁃2、Bax)及上皮间充质转化相关蛋白(Vimentin、E⁃cadherin)表达。于裸鼠皮下接种分组转染后的CAL⁃27细胞构建其移植瘤模型,测定裸鼠肿瘤体积与质量,瘤组织中Ki67阳性表达,TUNEL染色检测细胞凋亡情况。双荧光素酶报告基因实验验证CAL⁃27细胞Circ⁃OGDH对miR⁃127⁃3p、miR⁃127⁃3p对PSMB5的靶向调控作用。结果:与人口腔上皮细胞相比,CAL⁃27、HN6、Bca885细胞Circ⁃OGDH、PSMB5 mRNA及蛋白表达均升高,miR⁃127⁃3p表达均降低(P<0.05)。与对照组相比,Circ⁃OGDH敲低组、miR⁃127⁃3p过表达组细胞和瘤组织中PSMB5 mRNA及蛋白表达、细胞增殖率、迁移率、侵袭数目、瘤体积及质量、Ki67阳性表达、细胞和瘤组织中Bcl⁃2与Vimentin蛋白表达降低,miR⁃127⁃3p表达、凋亡率、Bax与E⁃cadherin蛋白表达升高(P<0.05);与Circ⁃OGDH敲低组相比,Circ⁃OGDH敲低+miR⁃127⁃3p敲低组细胞和瘤组织中PSMB5 mRNA及蛋白表达、细胞增殖率、迁移率、侵袭数目、瘤体积及质量、Ki67阳性表达、细胞和瘤组织中Bcl⁃2与Vimentin蛋白表达升高,miR⁃127⁃3p表达、凋亡率、Bax与E⁃cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。Circ⁃OGDH可靶向下调CAL⁃27细胞miR⁃127⁃3p表达,miR⁃127⁃3p可靶向下调其PSMB5表达。结论:敲低Circ⁃OGDH可通过上调miR⁃127⁃3p而降低PSMB5表达,进而减弱OSCC细胞增殖、迁移、侵袭能力,抑制其在裸鼠体内生长,并促使其凋亡。