circFNDC3B在肿瘤中的研究进展

肿瘤是威胁人类健康的疾病种类之一。环状RNA(circRNA)是一种新型的非编码RNA,因其结构特异性,且有着作为miRNAs海绵、与RNA结合蛋白(RBP)相互作用、调节基因转录与表达、蛋白质翻译的生物学功能,在不同肿瘤中起到调控作用。circFNDC3B近期被人们广泛研究,在口腔癌、食管癌、膀胱癌等肿瘤中异常表达,与肿瘤的发生发展有关,可作为一种新型的生物标志物。本综述就circFNDC3B在不同肿瘤中的表达与功能、可能调控机制,以及在其他疾病的调控作用做一总结与探讨。

CircFndc3b对乳腺癌细胞侵袭和迁移的影响及机制预测

为探讨CircFndc3b对乳腺癌细胞侵袭和迁移的影响,并预测其调控机制,利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测CircFndc3b在不同乳腺癌细胞系中的表达;siRNA敲低CircFndc3b表达后,利用Transwell检测MCF-7和MDA-MB-231细胞侵袭能力变化,利用划痕实验检测MCF-7和MDA-MB-231细胞迁移能力变化,利用蛋白免疫印迹(Western blotting)检测侵袭迁移相关蛋白的表达变化;miRDB数据库预测CircFndc3b潜在靶点并通过qRT-PCR验证miRNA-5702和miRNA-7106-5p在乳腺癌中的表达水平。结果表明:CircFndc3b在人乳腺癌细胞中表达水平显著高于人正常乳腺上皮细胞(均P<0.01);敲低CircFndc3b表达后,侵袭的MCF-7和MDA-MB-231细胞显著降低(均P<0.01),同时MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞的迁移距离显著降低(均P<0.01);Western blotting检测显示敲低CircFndc3b表达导致MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中E-cadherin表达明显升高,而N-cadherin表达显著降低(均P<0.01)。CircFndc3b具有47个潜在的靶点miRNAs,敲低CircFndc3b后,miRNA-5702和miRNA-7106-5p表达水平在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中显著升高(均P<0.01)。综上所述,CircFndc3b促进了乳腺癌细胞侵袭和迁移,其作用可能与调控miRNAs表达有关。

circFNDC3B通过抑制miR-147表达促进恶性黑素瘤迁移与侵袭

目的探究正常表皮黑素细胞和恶性黑素瘤细胞中环状RNA circFNDC3B的表达水平及其对恶性黑素瘤A2058细胞迁移和侵袭的影响。方法RT-QPCR实验检测恶性黑素瘤A2058和A375细胞和正常表皮黑素HEMa-LP细胞中circFNDC3B表达水平;siRNAs敲低恶性黑素瘤A2058细胞中circFNDC3B的表达;转染si-NC和si-circFNDC3B的A2058细胞分别为对照组和实验组,应用细胞划痕实验比较细胞迁移距离,应用免疫印迹实验检测E-cadherin和N-cadherin表达,应用RT-QPCR进行检则miRNAs表达。结果与正常表皮黑素细胞HEMa-LP相比,circFNDC3B在恶性黑素瘤细胞中的表达上调。沉默A2058细胞中circFNDC3B表达后,细胞的迁移和侵袭能力均显著降低(P<0.05),E-cadherin表达显著增强,N-cadherin表达显著减弱,抑癌性miRNA miR-147表达升高。结论circFNDC3B在恶性黑素瘤细胞中高表达,可通过抑制miR-147表达促进上皮间质转化,进而促进细胞迁移及侵袭。

CircFndc3b通过调控巨噬细胞分化抑制病理性心肌肥厚

目的探讨CircFndc3b调控巨噬细胞分化抑制病理性心肌肥厚及相关机制。方法临床征集40例心衰患者血清样本,选择10只自然衰老导致的心衰小鼠。荧光定量PCR检测患者血清和小鼠心脏组织中CircFndc3b表达。年轻和心衰小鼠分别尾静脉注射抑制CircFndc3b和过表达CircFndc3b的腺相关病毒,检测小鼠心功能和病理性肥厚相关变化以及M1/M2巨噬细胞比例变化。结果荧光定量PCR结果显示,心衰患者血清中CircFndc3b表达升高(P<0.05),心衰小鼠心脏组织中CircF⁃ndc3b表达升高(P<0.05)。与年轻小鼠比较,心衰小鼠心功能变弱,M1/M2型巨噬细胞比例降低,心肌细胞明显变大,ANP和BNP表达明显升高,纤维化水平升高(P<0.05)。心衰小鼠尾静脉注射AAV-OE-CircFndc3b后,小鼠心功能变强,M1/M2型巨噬细胞比例升高,心肌细胞明显变小,ANP和BNP表达降低,纤维化水平降低(P<0.05)。心衰小鼠尾静脉注射AAV-sh-CircFndc3b后,小鼠心功能更加恶化,M1/M2型巨噬细胞比例进一步降低,心肌细胞变为最小,ANP和BNP表达明显升高,纤维化水平进一步升高(P<0.05)。结论过表达CircFndc3b通过调控脾脏巨噬细胞分化抑制病理性心肌肥厚。

circFNDC3B/miR-655-3p轴调控乳腺癌细胞增殖、细胞周期和凋亡

为了探讨circFNDC3B对乳腺癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及可能机制,该研究首先采用RT-qPCR法检测了83例乳腺癌组织及乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D、Bcap-37)中circFNDC3B和miR-655-3p表达;然后分别转染circFNDC3B小干扰RNA、miR-655-3p模拟物、miR-655-3p抑制剂或共转染circFNDC3B小干扰RNA与miR-655-3p抑制剂至MCF-7细胞中,采用CCK-8法检测了细胞增殖,流式细胞术检测了细胞凋亡和周期,Western blot法检测了细胞中CyclinD1与Cleaved-caspase-3的蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验验证了miR-655-3p与circFNDC3B的调控关系。结果显示,乳腺癌组织和细胞系中circFNDC3B表达升高(P<0.05),而miR-655-3p表达降低(P<0.05)。下调circFNDC3B或上调miR-655-3p后,MCF-7细胞增殖活性和CyclinD1蛋白表达量降低,细胞周期进程受到阻滞,细胞凋亡率与Cleaved-caspase-3蛋白表达量增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。circFNDC3B靶向结合并负调控miR-655-3p。下调miR-655-3p对MCF-7细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响与上调miR-655-3p相反。下调miR-655-3p逆转下调circFNDC3B对MCF-7细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。这说明,circFNDC3B可能通过抑制miR-655-3p的表达促进乳腺癌细胞增殖和细胞周期进程,并阻碍细胞凋亡。