子宫内膜癌病人血清circWHSC1和circPUM1的表达及诊断价值

目的检测子宫内膜癌病人血清circWHSC1和circPUM1表达水平,并探究其在子宫内膜癌中的诊断价值。方法收集2018年6月至2020年6月自贡市第一人民医院120例子宫内膜癌病人、123例子宫内膜增生病人及125例体检健康者分别作为子宫内膜癌组、子宫内膜增生组与对照组。qRT-PCR法测定研究对象血清circWHSC1和circPUM1表达水平,分析血清circWHSC1和circPUM1表达水平与子宫内膜癌病人临床分期、分化程度的相关性,logistic回归分析血清circWHSC1和cir⁃cPUM1表达水平与子宫内膜癌发病的相关性;ROC曲线分析血清circWHSC1和circPUM1表达水平对子宫内膜癌的诊断价值。结果与对照组、子宫内膜增生组相比,子宫内膜癌组病人血清circWHSC1(1.93±0.24比1.02±0.21、1.04±0.19)、circPUM1(1.76±0.25比1.01±0.18、1.02±0.17)表达水平均升高(P<0.05);高分化(G1)组、中分化(G2)组、低分化(G3)组子宫内膜癌病人血清circWHSC1、circPUM1表达水平均依次升高(P<0.05);Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期子宫内膜癌病人血清circWHSC1、circPUM1表达水平均依次升高(P<0.05);circWHSC1、circPUM1表达水平与子宫内膜癌的发病密切相关(OR=2.75、3.71,P<0.05);血清circWHSC1、circPUM1以及联合检测对子宫内膜癌诊断的曲线下面积为0.88(灵敏度为88.2%,特异度为81.5%)、0.82(灵敏度为79.8%,特异度为83.1%)、0.95(灵敏度为89.1%,特异度为93.5%)。结论子宫内膜癌病人血清circWHSC1、circPUM1表达水平均较高,且与病人临床分期和子宫内膜癌的分化程度有关,有望作为筛查子宫内膜癌病人的血清标志物,为子宫内膜癌的早期诊断做贡献。

circPUM1通过调控miR-524-5p表达对结肠癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨环状RNA PUM1(circPUM1)对结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其分子机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结肠癌组织、癌旁组织中circPUM1、微小RNA-524-5p(miR-524-5p)的表达量。体外培养人结肠癌细胞株SW620,分别将si-NC、si-circPUM1、miR-NC、miR-524-5p mimics、si-circPUM1与anti-miR-NC、si-circPUM1与anti-miR-524-5p转染至SW620细胞。甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证circPUM1是否能够结合miR-524-5p;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、p21、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)表达量。结果结肠癌组织circPUM1的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),miR-524-5p的表达水平显著降低(P<0.05);干扰circPUM1表达或miR-524-5p过表达后,细胞活力显著降低(P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Cyclin D1、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05),p21、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实circPUM1可靶向结合miR-524-5p的作用位点;抑制miR-524-5p表达可减弱干扰circPUM1表达对SW620细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的作用。结论circPUM1可通过海绵吸附miR-524-5p促进结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭,抑制细胞凋亡。

CircPUM1通过miR218-5p/IGF1调节乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭

目的:选择乳腺癌细胞作为研究对象,分析circPUM1对乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭的影响及作用机制。方法:将MCF-7细胞分为MCF-7组、空载体组、circPUM1干扰组;circPUM1干扰组使用circPUM1 siRNA转染干扰circPUM1表达,空载体组使用空载体转染,MCF-7组不做其他处理;检测细胞增殖、迁移、侵袭能力及miR218-5p/IGF1水平。结果:MCF-7组、空载体组和circPUM1干扰组3组细胞增殖、迁移、侵袭活性存在明显差异,其中circPUM1干扰组细胞增殖、侵袭活性最低,迁移距离最小,且差异有统计学意义(P<0.05);MCF-7组、空载体组和circPUM1干扰组3组细胞miR218-5p、IGF1水平存在明显差异,其中circPUM1干扰组细胞miR218-5p水平最高、IGF1水平最低,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:circPUM1可能通过miR218-5p/IGF1调节乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭活性。

circPUM1靶向调控miR-144-3p对宫颈癌细胞放射抵抗的影响

目的:探讨环状RNA pumilio RNA结合家族成员(circPUM)1对宫颈癌细胞放射抵抗的影响及其可能的作用机制。方法:收集2019年8月至2020年2月郑州大学第二附属医院收治的47例宫颈癌患者的癌组织及其相应癌旁组织(距离癌组织5 cm处正常组织)标本。定量反转录聚合酶链反应法检测宫颈癌组织与癌旁组织中circPUM1、miR-144-3p的表达量;Pearson法分析宫颈癌组织中circPUM1与miR-144-3p表达量的相关性。将circPUM1慢病毒短发夹RNA(sh-circPUM1)及其阴性对照(sh-NC)、miR-144-3p寡核苷酸模拟物(miR-144-3p mimic)及其阴性对照(miR-NC)、sh-circPUM1与miR-144-3p抑制物(anti-miR)、sh-circPUM1与anti-miR阴性对照(anti-miR-NC)分别转染至人宫颈癌细胞SiHa,并通过0、4 Gy照射剂量照射,采用细胞计数试剂盒(CCK-8法)、平板克隆形成实验、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞增殖、集落形成、凋亡、迁移及侵袭能力;蛋白质印迹法检测活化的胱天蛋白酶3(cleaved-caspase3)蛋白表达量;Starbase平台分析及细胞实验检测circPUM1与miR-144-3p的靶向关系。结果:与癌旁组织比较,宫颈癌组织中circPUM1的表达量增加(P<0.05),miR-144-3p的表达量减少(P<0.05);circPUM1与miR-144-3p呈负相关(r=–0.9282,P<0.01);转染sh-circPUM1或miR-144-3p mimic后,细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和cleaved-caspase3蛋白表达水平升高(均P<0.05),集落形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均P<0.05);circPUM1可靶向结合miR-144-3p;共转染sh-circPUM1与anti-miR后,细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和cleaved-caspase3蛋白表达水平降低(均P<0.05),集落形成数、迁移及侵袭细胞数增多(均P<0.05)。结论:沉默circPUM1可通过靶向调控miR-144-3p表达而抑制宫颈癌细胞增殖、集落形成、迁移、侵袭能力及诱导细胞凋亡,从而减弱细胞放射抵抗性。