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环状RNA circ_0120051通过miR-144-3p/IDH2轴抑制心肌成纤维细胞的纤维化表型研究
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作者 梁俣 胡志琴 +5 位作者 温艺红 伍华燕 王娅 刘宇鹏 单志新 方咸宏 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期196-205,共10页
【目的】研究环形RNA circ_0120051对心肌成纤维细胞的纤维化表型的调控作用和机制。【方法】通过实时萤光定量PCR(RT-qPCR)检测健康器官捐献者(n=24)与心力衰竭(HF)病人(n=21)心肌标本中circ_0120051及其宿主基因溶质载体家族8成员A1(S... 【目的】研究环形RNA circ_0120051对心肌成纤维细胞的纤维化表型的调控作用和机制。【方法】通过实时萤光定量PCR(RT-qPCR)检测健康器官捐献者(n=24)与心力衰竭(HF)病人(n=21)心肌标本中circ_0120051及其宿主基因溶质载体家族8成员A1(SLC8A1)的表达水平。核糖核酸外切酶(RNase R)消化实验鉴定circ_0120051的RNA稳定性。RT-qPCR检测circ_0120051在人心肌细胞AC16中的核质分布情况。利用腺病毒在C57BL/6乳小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)中过表达circ_0120051,通过RT-qPCR和Western blot检测过表达circ_0120051对mCFs中纤维化相关基因表达的影响,利用细胞划痕实验检测对mCFs迁移能力的影响。通过RNA免疫共沉淀技术(RIP)验证circ_0120051与miR-144-3p间的结合作用,利用双萤光素酶报告基因实验鉴定miR-144-3p与靶基因异柠檬酸脱氢酶2(Idh2)3’-UTR的结合位点。【结果】Circ_0120051在心衰病人心肌中表达显著增加,而其宿主基因SLC8A1表达无显著差异。Circ_0120051主要定位于人心肌细胞的胞质中。RNase R消化实验证实circ_0120051相对于线性SLC8A1 mRNA具有典型的环状RNA稳定性。过表达circ_0120051可抑制mCFs中纤维化相关基因表达和mCFs的迁移能力。RIP实验证实circ_0120051与miR-144-3p之间具有明显结合作用。在mCFs中转染miR-144-3p可促进纤维化相关基因的表达,并有效逆转circ_0120051对mCFs纤维化表型的抑制作用。双萤光素酶报告基因实验证实miR-144-3p与Idh2的3’-UTR存在结合作用。miR-144-3p可在转录水平抑制mCFs中Idh2表达,而过表达circ_0120051可增加mCFs中IDH2表达。在mCFs中转染miR-144-3p和Idh2的小干扰RNA(siRNA),可一致性地逆转circ_0120051对纤维化相关基因表达和mCFs迁移的抑制作用。【结论】Circ_0120051通过特异结合miR-144-3p并增加其靶基因IDH2表达来发挥抑制mCFs纤维化表型的作用。 展开更多
关键词 心肌纤维化 环状RNA 微RNA circ_0120051 心肌成纤维细胞
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败酱草水提物通过调控circ_0000936/miR-665抑制胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭
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作者 张正平 李坤正 +3 位作者 吴彬杰 刘熹 巨虎 张晓璐 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第6期1017-1024,共8页
目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制。方法:收集2019年2月至2020年1月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665的表达量;Pear... 目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制。方法:收集2019年2月至2020年1月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中circ_0000936和miR-665表达量的相关性;体外培养人胶质瘤细胞LN229,不同浓度的败酱草(0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL)处理LN229细胞,si-NC、si-circ_0000936分别转染至LN229细胞,pcDNA-circ_0000936转染至LN229细胞后加入2.0 mg/mL败酱草处理细胞;CCK-8、平板克隆形成实验、Transwell小室实验与流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及凋亡能力;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000936与miR-665的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果:胶质瘤组织中circ_0000936的表达量高于正常脑组织(P<0.05),而miR-665的表达量低于正常脑组织(P<0.05);circ_0000936和miR-665呈负相关(r=-0.980,P<0.001);败酱草能够以浓度依赖性方式降低细胞活力、细胞克隆形成率、Bcl-2蛋白水平和circ_0000936的表达量(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),而凋亡率、Bax蛋白水平和miR-665的表达量升高(P<0.05);转染si-circ_0000936后miR-665的表达量升高(P<0.05),细胞活力、细胞克隆形成率和Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),凋亡率和Bax蛋白水平升高(P<0.05);转染pcDNA-circ_0000936能够逆转败酱草对LN229细胞生物学行为的作用。结论:败酱草水提物可通过调控circ_0000936/miR-665诱导胶质瘤细胞凋亡,并阻碍增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 败酱草 胶质瘤 circ_0000936 miR-665 细胞增殖 迁移 侵袭
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circ_0114427靶向微小RNA-330-5p调控脂多糖诱导的肺泡上皮细胞凋亡及炎症反应
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作者 杨忠信 周冉 +4 位作者 黄智超 梅笑寒 李一锃 杨学峰 李晓宇 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第6期24-29,36,共7页
目的探讨circ_0114427对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症的影响及其机制。方法体外培养人肺泡上皮细胞,分别转染si-circ_0114427、微小RNA(miR)-330-5p mimics或共转染si-circ_0114427与anti-miR-330-5p后,用10 mg/L LPS处理2... 目的探讨circ_0114427对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症的影响及其机制。方法体外培养人肺泡上皮细胞,分别转染si-circ_0114427、微小RNA(miR)-330-5p mimics或共转染si-circ_0114427与anti-miR-330-5p后,用10 mg/L LPS处理24 h。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中circ_0114427和miR-330-5p表达量;采用蛋白免疫印迹评估活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase3)和活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(Cleaved-caspase9)蛋白水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达;采用流式细胞术分析细胞凋亡。采用双荧光素酶报告实验验证circ_0114427和miR-330-5p的互作关系。结果肺泡上皮细胞经LPS处理后,细胞中circ_0114427表达升高,miR-330-5p表达降低(P<0.05)。敲减circ_0114427或上调miR-330-5p可以抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡、Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase9表达以及IL-6和TNF-α水平(P<0.05)。circ_0114427靶向结合并负调控miR-330-5p。miR-330-5p下调可以逆转circ_0114427敲低对LPS诱导的细胞凋亡和炎症的抑制作用。结论敲减circ_0114427可抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症,这可能与miR-330-5p上调有关。 展开更多
关键词 肺泡上皮细胞 circ_0114427 微小RNA-330-5p 细胞凋亡 炎症
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山羊环状RNA circ_0008219 SNPs位点与生产性能的关联分析
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作者 赵华 刘泽林 +3 位作者 杨娟 张年 刘静波 陶虎 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期153-160,共8页
实验旨在分析山羊环状RNA circ_0008219序列中单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位点与产羔、生长性状之间的关联性,为山羊分子育种提供新的遗传标记。选取波尔山羊、黑头羊和麻城黑山羊作为实验对象,利用SNaPshot分... 实验旨在分析山羊环状RNA circ_0008219序列中单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位点与产羔、生长性状之间的关联性,为山羊分子育种提供新的遗传标记。选取波尔山羊、黑头羊和麻城黑山羊作为实验对象,利用SNaPshot分型技术分析候选SNPs位点的遗传多样性,并对circ_0008219的SNPs位点与3个品种山羊的产羔性状和黑头羊的周岁生长性状进行关联分析。结果表明山羊circ_0008219中存在3个SNPs位点均具有多态性。卡方适应性检测结果表明,g.1082G>T、g.1310A>G在3个山羊群体中均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),g.651G>A在波尔山羊和麻城黑山羊群体均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。黑头羊群体中,g.651G>A位点与山羊周岁体高存在相关;g.1082G>T与周岁体重、周岁体斜长、周岁胸围和管围性状存在相关。关联分析结果显示,g.651G>A位点与黑头羊总体产羔数显著关联,g.1082G>T位点与波尔山羊头胎产羔数极显著关联。连锁不平衡分析表明,在波尔山羊群体中,g.1082G>T和g.1310A>G位点之间处于强连锁平衡状态(D’=1,r^(2)=1);在黑头羊群体中,g.651G>A和g.1310A>G位点之间处于强连锁平衡状态(D’=1,r^(2)=1);在麻城黑山羊群体中,g.651G>A和g.1310A>G位点之间处于强连锁平衡状态(D’=0.917,r^(2)=1)。本研究筛选出3个SNPs位点即g.651G>A、g.1082G>T和g.1310A>G,可以作为山羊育种的潜在遗传标记,该研究结果为山羊品种培育提供了理论依据。 展开更多
关键词 circ_0008219 SNPS 山羊 繁殖性能 关联分析
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白头翁皂苷D通过调控circ_0001178/miR-885-5p对甲状腺癌细胞的生物学行为的影响
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作者 潘巧虹 周影 +4 位作者 颜卫文 李莉 孙雯 陶桂兰 肖欢 《河北医药》 CAS 2024年第9期1296-1300,共5页
目的探讨白头翁皂苷D对甲状腺癌细胞生物学行为的影响及其对circ_0001178/miR-885-5p分子轴的调控作用。方法不同浓度的白头翁皂苷D处理人甲状腺癌细胞SW579,si-NC、si-circ_0001178、miR-NC、miR-885-5p mimics转染至SW579细胞,pcDNA-c... 目的探讨白头翁皂苷D对甲状腺癌细胞生物学行为的影响及其对circ_0001178/miR-885-5p分子轴的调控作用。方法不同浓度的白头翁皂苷D处理人甲状腺癌细胞SW579,si-NC、si-circ_0001178、miR-NC、miR-885-5p mimics转染至SW579细胞,pcDNA-circ_0001178、anti-miR-885-5p转染至SW579细胞后加入白头翁皂苷D处理;qRT-PCR检测circ_0001178与miR-885-5p的表达量;MTT、平板克隆形成实验、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0001178与miR-885-5p的靶向关系。结果白头翁皂苷D可降低circ_0001178的表达量、细胞活力及N-cadherin蛋白水平(P<0.05),可抑制克隆形成数、迁移及侵袭,还可促进miR-885-5p表达及E-cadherin的表达(P<0.05),且呈剂量依赖性;转染si-circ_0001178或转染miR-885-5p mimics可抑制细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;circ_0001178能够靶向调控miR-885-5p;转染pcDNA-circ_0001178或转染anti-miR-885-5p均可逆转白头翁皂苷D对细胞生物学行为的作用。结论白头翁皂苷D可通过调控circ_0001178/miR-885-5p分子轴而抑制甲状腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 白头翁皂苷D circ_0001178 miR-885-5p 细胞增殖 迁移 侵袭
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木香烃内酯通过调控circ_0000285/miR-409-3p影响胃癌细胞恶性表型
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作者 刘昭 郑志超 +1 位作者 张亚鹏 任玉川 《肿瘤药学》 CAS 2024年第2期193-202,共10页
目的探讨木香烃内酯对胃癌细胞恶性表型的影响及可能机制。方法体外培养胃癌细胞HGC-27,采用不同剂量(2.5、10、40μmol·L^(-1))木香烃内酯干预HGC-27细胞24 h,或转染circ_0000285小干扰RNA至HGC-27细胞后培养24 h。采用40μmol... 目的探讨木香烃内酯对胃癌细胞恶性表型的影响及可能机制。方法体外培养胃癌细胞HGC-27,采用不同剂量(2.5、10、40μmol·L^(-1))木香烃内酯干预HGC-27细胞24 h,或转染circ_0000285小干扰RNA至HGC-27细胞后培养24 h。采用40μmol·L^(-1)木香烃内酯干预转染circ_0000285过表达载体的HGC-27细胞24 h。CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,划痕实验和Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blotting检测细胞中Bcl-2、Bax、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达,RT-qPCR检测circ_0000285和miR-409-3p表达,双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000285和miR-409-3p的调控关系。结果木香烃内酯可降低HGC-27细胞的OD值、集落形成数、迁移距离、侵袭数,以及Bcl-2、N-cadherin蛋白表达水平,提高细胞凋亡率及Bax、E-cadherin蛋白表达水平,并呈剂量依赖性。木香烃内酯可抑制HGC-27细胞中circ_0000285的表达,促进miR-409-3p表达。干扰circ_0000285表达可降低HGC-27细胞的增殖、迁移能力,并促进细胞凋亡。circ_0000285可靶向结合并负调控miR-409-3p。过表达circ_0000285可逆转木香烃内酯对HGC-27细胞恶性表型的影响。结论木香烃内酯可能通过调控circ_0000285/miR-409-3p轴抑制胃癌细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 木香烃内酯 胃癌 circ_0000285 miR-409-3p 细胞增殖 迁移 侵袭 凋亡
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circ_0000502靶向miR-1231调控甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖和凋亡
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作者 李颖胜 陈利灵 王亮 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第2期187-192,共6页
目的探讨circ_0000502对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法选取26例甲状腺乳头状癌组织及相应癌旁组织。将TPC-1细胞分为NC组、si-NC组、si-circ_0000502组、miR-NC组、miR-1231组、si-circ_0000502+anti-miR... 目的探讨circ_0000502对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法选取26例甲状腺乳头状癌组织及相应癌旁组织。将TPC-1细胞分为NC组、si-NC组、si-circ_0000502组、miR-NC组、miR-1231组、si-circ_0000502+anti-miR-NC组、si-circ_0000502+anti-miR-1231组。qRT-PCR检测circ_0000502和miR-1231的表达水平;MTT检测细胞活性;Transwell、流式细胞术检测细胞的迁移、侵袭和细胞凋亡情况;Western blotting检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000502和miR-1231的靶向关系。结果甲状腺乳头状癌组织和细胞中circ_0000502呈高表达,miR-1231呈低表达。沉默circ_0000502或过表达miR-1231降低了TPC-1细胞增殖活力、迁移、侵袭细胞数,抑制PCNA、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达,促进细胞凋亡和Bax蛋白表达(P<0.05)。circ_0000502靶向调控miR-1231表达(P<0.05),下调miR-1231表达逆转了沉默circ_0000502对TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响(P<0.05)。结论沉默circ_0000502通过靶向上调miR-1231调控TPC-1细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡。 展开更多
关键词 circ_0000502 miR-1231 甲状腺乳头状癌 增殖 迁移 侵袭 凋亡 TPC-1细胞
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Circ_0003855 involvement of esophageal cancer progression through miR-622/FLOT1
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作者 JINGJING TIAN XIBAO HU XINRONG ZHANG 《Oncology Research》 SCIE 2024年第5期925-931,共7页
To confirm the relationship between Circ_0003855 and EC,we purchased the Human esophageal carcinoma cell line Eca109 and normal human esophageal epithelial cells HEEC,and the expression levels of Circ_0003855,miR-622,... To confirm the relationship between Circ_0003855 and EC,we purchased the Human esophageal carcinoma cell line Eca109 and normal human esophageal epithelial cells HEEC,and the expression levels of Circ_0003855,miR-622,and FLOT1 were detected.The results show that Circ_0003855 and FLOT1 were highly expressed in Eca109 cells,while miR-622 was lowly expressed(p<0.05).Subsequently,Circ_0003855 small interfering RNA(si-Circ_0003855)and its negative control(si-NC)were used to detect changes in cellular biological behaviors.We found that the activity of Eca109 cells was reduced after interfering with the expression of Circ_0003855,and miR-622 expression was elevated,while FLOT1 was decreased(p<0.05).Additionally,si-Circ_0003855 and miR-622 inhibitor sequence(miR-622-inhibition)were co-transfected into cells with miR-622-inhibition alone,and untreated Eca109 cells were used as a control to detect the expression of FLOT1.Co-transfection of si-Circ_0003855 and miR-622-inhibition showed no significant difference in FLOT1 expression compared to the control cells(p>0.05).Synthesizing the results of these experiments above,we believe that interfering with the expression of Circ_0003855 can inhibit the activity of EC cells,and its mechanism is related to miR-622 and FLOT1. 展开更多
关键词 Circ_0003855 miR-622 FLOT1 Esophageal cancer Cell proliferation
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环状RNA circ_104939在肺腺癌组织中的作用研究
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作者 戴万辉 彭辉勇 +1 位作者 戴锦东 朱栋炜 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第1期35-41,共7页
目的:探讨环状RNA circ_104939在肺腺癌组织中的临床意义。方法:采集10例肺腺癌病人的肿瘤组织和癌旁组织进行环状RNA测序分析,以肿瘤组织表达明显增高的环状RNA circ_104939作为研究对象。利用qRT-PCR检测30对肺腺癌组织与癌旁组织中ci... 目的:探讨环状RNA circ_104939在肺腺癌组织中的临床意义。方法:采集10例肺腺癌病人的肿瘤组织和癌旁组织进行环状RNA测序分析,以肿瘤组织表达明显增高的环状RNA circ_104939作为研究对象。利用qRT-PCR检测30对肺腺癌组织与癌旁组织中circ_104939的表达量,验证测序结果。用qRT-PCR检测和分析circ_104939在肺腺癌细胞系(HCC-78、A549、KTA-7以及PC-9)和正常人支气管上皮细胞BEAS-2B中的表达差异。siRNA敲减circ_104939后,用MTT、平板划痕实验、Transwell实验、流式细胞术检测细胞周期实验分别检测肺腺癌细胞(KTA-7和PC-9)增殖、迁移、侵袭以及细胞周期的变化。利用RNA pulldown和荧光素酶报告实验验证circ_104939的可能靶标miR-191-5p。siRNA敲减circ_104939后,将肺腺癌细胞(KTA-7和PC-9)分别皮下注射到裸鼠体内构建荷瘤小鼠模型,检测移植瘤体积以及质量。结果:相比癌旁组织,肺腺癌组织中的circ_104939表达显著增高(P<0.01);circ_104939在肺腺癌细胞中的表达水平明显高于正常人支气管上皮细胞(P<0.05或P<0.01)。circ_104939敲减后,KTA-7和PC-9细胞增殖、侵袭能力、细胞周期进展、PC-9细胞迁移能力下降(P<0.05或P<0.01)。circ_104939能够海绵样吸附miR-104939。circ_104939敲减后,荷瘤小鼠肿瘤体积减小(P<0.05或P<0.01),肿瘤质量显著降低(P<0.01或P<0.001)。结论:circ_104939在肺腺癌组织中呈高表达,有望作为肺腺癌诊断和治疗的靶点。 展开更多
关键词 肺腺癌 环状RNA circ_104939
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Circ_0038467通过靶向miR-940调控缺氧缺糖诱导神经细胞损伤的机制
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作者 孔炫栋 周黎琴 +2 位作者 王宁 吴天涯 赵明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期887-893,共7页
目的探讨circ_0038467对缺氧缺糖(hypoxia-glucose deprivation,OGD)诱导的神经细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法分离培养原代大鼠皮质神经细胞,采用OGD诱导大鼠皮质神经细胞建立细胞损伤模型;si-NC、si-circ_0038467、miR-NC、miR... 目的探讨circ_0038467对缺氧缺糖(hypoxia-glucose deprivation,OGD)诱导的神经细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法分离培养原代大鼠皮质神经细胞,采用OGD诱导大鼠皮质神经细胞建立细胞损伤模型;si-NC、si-circ_0038467、miR-NC、miR-940 mimics分别转染至大鼠皮质神经细胞后OGD处理6 h,si-circ_0038467和anti-miR-NC或anti-miR-940分别共转染至大鼠皮质神经细胞后OGD处理6 h;qRT-PCR法检测circ_0038467、miR-940的表达量;CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;LDH法检测细胞损伤情况;双荧光素酶报告实验用于靶向关系检测;Western blot检测cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达。结果OGD诱导的神经细胞中circ_0038467上调且miR-940下调(P<0.01);转染si-circ_0038467或miR-940 mimics后,细胞存活率升高(P<0.01),而LDH释放率、凋亡率和cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平下降(P<0.01);circ_0038467可靶向结合miR-940;相对于OGD+si-circ_0038467+anti-miR-NC组,细胞存活率在OGD+si-circ_0038467+anti-miR-940中降低(P<0.01),而LDH释放率、凋亡率和cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平增加(P<0.01)。结论干扰circ_0038467可上调miR-940表达保护神经细胞免受OGD诱导的氧化应激以及凋亡。 展开更多
关键词 大鼠皮质神经细胞 circ_0038467 miR-940 细胞增殖 凋亡 氧糖剥夺
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circ_0000515靶向miR-924调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究
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作者 张瑛琦 《长春中医药大学学报》 2024年第3期276-280,共5页
目的探讨circ_0000515调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制。方法采用qRT-PCR法检测circ_0000515、miR-924的表达量;体外培养人卵巢癌细胞SKOV3,增殖、克隆形成、迁移及侵袭分别经CCK-8、平板克隆形成、划痕与Transwell实验... 目的探讨circ_0000515调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制。方法采用qRT-PCR法检测circ_0000515、miR-924的表达量;体外培养人卵巢癌细胞SKOV3,增殖、克隆形成、迁移及侵袭分别经CCK-8、平板克隆形成、划痕与Transwell实验分析;miR-924和circ_0000515的关系经双荧光素酶报告实验证实;Western blot检测蛋白表达量。结果相对于癌旁组织,circ_0000515在卵巢癌组织中上调,而miR-924下调(P<0.05);与si-NC组比较,si-circ_0000515组细胞活力降低,细胞克隆形成数减少(P<0.05);与si-NC组比较,si-circ_0000515组的划痕愈合率、侵袭细胞数、N-cadherin蛋白水平均降低,E-cadherin蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-924组的WT-circ_0000515降低(P<0.05);与pcDNA组比较,pcDNA-circ_0000515组的miR-924升高,与si-NC组比较,si-circ_0000515组的miR-924升高,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-924组细胞活力、划痕愈合率和N-cadherin蛋白水平降低,细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少,E-cadherin蛋白水平升高(P<0.05);与si-circ_0000515+anti-miR-NC组比较,si-circ_0000515+anti-miR-924组细胞活力、划痕愈合率和N-cadherin蛋白水平中升高,细胞克隆形成数和侵袭细胞数增多,E-cadherin蛋白水平降低(P<0.05)。结论circ_0000515沉默通过靶标miR-924抑制卵巢癌细胞恶性行为。 展开更多
关键词 卵巢癌 circ_0000515 miR-924 细胞增殖 迁移 侵袭
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miR-558对肺癌细胞增殖、迁移与凋亡的影响
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作者 郭淑娟 郑成玲 +1 位作者 高晓盼 孙晓彤 《中国药业》 CAS 2024年第11期57-61,共5页
目的 探讨miR-558对肺癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法 收集医院2020年5月至8月收治的35例肺癌患者的癌组织及其癌旁组织样本,并取对数生长期的人肺癌细胞A549、人支气管上皮细胞BEAS-2B,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测c... 目的 探讨miR-558对肺癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法 收集医院2020年5月至8月收治的35例肺癌患者的癌组织及其癌旁组织样本,并取对数生长期的人肺癌细胞A549、人支气管上皮细胞BEAS-2B,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测circ_0001017和miR-558表达水平。取对数生长期的A549细胞进行转染,并分为空质粒(pcDNA)组(A组)、pcDNA-circ_0001017组(B组)、pcDNA-circ_0001017+miR-NC组(C组)、pcDNA-circ_0001017+miR-558组(D组)。采用双荧光素酶报告实验检测circ_0001017与miR-558的靶向关系;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、平板克隆形成实验、Transwell实验、流式细胞术分别检测细胞的活性、克隆、迁移、凋亡情况;采用qPCR法检测circ_0001017、miR-558表达水平;采用免疫印迹(Westernblot)法检测B细胞淋巴瘤因子-2蛋白(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果 与癌旁组织比较,肺癌组织中circ_0001017的表达水平显著降低(P<0.05),miR-558的表达水平显著升高(P<0.05);与BEAS-2B细胞比较,A549细胞中circ_0001017的表达水平显著降低(P<0.05),miR-558的表达水平显著升高(P<0.05)。miR-558过表达可显著降低野生型载体(WT)-circ_0001017的荧光素酶活性(P<0.05)。与A组比较,B组细胞的增殖抑制率、凋亡率、circ_0001017和Bax表达水平均显著升高(P<0.05),细胞克隆形成数、迁移细胞数均显著减少(P<0.05),miR-558和Bcl-2表达水平均显著降低(P<0.05);与C组比较,D组细胞的增殖抑制率、凋亡率、circ_0001017和Bax表达水平均显著降低(P<0.05),细胞克隆形成数、迁移细胞数均显著增多(P<0.05),Bcl-2和miR-558表达水平均显著升高(P<0.05)。结论 过表达miR-558会减弱过表达circ_0001017对肺癌细胞的增殖、克隆形成、迁移的抑制作用及促细胞凋亡作用。 展开更多
关键词 circ_0001017 miR-558 肺癌 A549细胞 细胞增殖 迁移 细胞凋亡
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shRNA沉默circ_0089153对TPC-1甲状腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响
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作者 郑述建 宋霖 +1 位作者 严成 陈榕 《福建医药杂志》 CAS 2024年第3期90-93,共4页
目的探讨circ_0089153对TPC-1甲状腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响.方法采用circ_0089153 shRNA沉默TPC-1细胞中的circ_0089153表达并分成空白对照组、阴性对照组及shRNA沉默组,通过RT-PCR及Western blot检测不同组TPC-1细胞中circ_0089... 目的探讨circ_0089153对TPC-1甲状腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响.方法采用circ_0089153 shRNA沉默TPC-1细胞中的circ_0089153表达并分成空白对照组、阴性对照组及shRNA沉默组,通过RT-PCR及Western blot检测不同组TPC-1细胞中circ_0089153 mRNA及蛋白的表达,采用CCK-8法检测不同组TPC-1细胞增殖,采用Transwell实验检测不同组细胞迁移和侵袭能力.结果shRNA沉默组circ_0089153 mRNA及蛋白表达水平较空白对照组、阴性对照组低(P<0.05);沉默hsa_circ_0089153后,TPC-1细胞增殖受到抑制;shRNA沉默组细胞增殖率、迁移和侵袭的细胞数较对照组低(P<0.05).结论circ_0089153与甲状腺癌细胞增殖、迁移及侵袭密切相关. 展开更多
关键词 甲状腺癌 circ_0089153 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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circ_0010423通过吸附miR-423-5p和miR-3184-5p上调COL1A1对宫颈癌恶性生物学行为的影响
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作者 毛雪宝 王秀虹 +3 位作者 邱彬 李美灵 马丹 蒋金朋 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第11期2001-2009,共9页
目的:探讨环状RNA circ_0010423对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及机制。方法:采用qRT-PCR检测40对宫颈癌组织与癌旁组织、5种宫颈癌细胞株(HeLa、ME180、CaSki、HCC94和Si... 目的:探讨环状RNA circ_0010423对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及机制。方法:采用qRT-PCR检测40对宫颈癌组织与癌旁组织、5种宫颈癌细胞株(HeLa、ME180、CaSki、HCC94和SiHa)与正常宫颈上皮细胞株(End1/E6E7)中circ_0010423、miR-423-5p、miR-3184-5p及Ⅰ型胶原α1(collagen type I alpha 1 chain,COL1A1)的表达;SiHa细胞株中转染sh-NC(sh-NC组)、sh-circ_0010423(sh-circ_0010423组)、sh-circ_0010423+control vector(sh-circ_0010423+control vector组)及sh-circ_0010423+COL1A1 vector(sh-circ_0010423+COL1A1 vector组),CCK-8实验检测细胞增殖,Transwell侵袭和迁移实验检测细胞侵袭和迁移,Western blot法检测EMT标记物(E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白)表达;通过生信分析、荧光素酶及RIP实验验证circ_0010423与miR-423-5p、miR-3184-5p的靶向关系,miR-423-5p、miR-3184-5p与COL1A1的靶向关系。结果:与癌旁组织和正常宫颈上皮细胞株比较,宫颈癌组织和细胞株中circ_0010423、COL1A1表达水平升高,miR-423-5p、miR-3184-5p表达水平降低(P<0.05)。与sh-NC组比较,sh-circ_0010423组SiHa细胞24 h、48 h、72 h OD值、侵袭、迁移细胞数、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均降低,E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。COL1A1是miR-423-5p、miR-3184-5p靶基因,circ_0010423作为miR-423-5p、miR-3184-5p分子海绵解除对COL1A1的抑制作用。与sh-circ_0010423+control vector组比较,sh-circ_0010423+COL1A1 vector组SiHa细胞24 h、48 h、72 h OD值、侵袭、迁移细胞数、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均升高,E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。结论:circ_0010423在宫颈癌组织和细胞中表达上调,并可以通过吸附miR-423-5p和miR-3184-5p上调COL1A1表达,促进SiHa细胞增殖、侵袭、迁移及EMT,导致宫颈癌发展。 展开更多
关键词 circ_0010423 宫颈癌细胞 miR-423-5p miR-3184-5p COL1A1
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覆盆子酮对高糖诱导的HK-2损伤的影响
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作者 赵丽君 樊耀华 徐文华 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期196-199,共4页
目的研究覆盆子酮对高糖(HG)诱导的人肾小管上皮细胞(HK)-2损伤的影响及其可能作用机制。方法采用HG诱导HK-2细胞建立肾小管上皮细胞损伤模型,随机分组为NG组、HG组、HG+覆盆子酮低剂量组、HG+覆盆子酮中剂量组、HG+覆盆子酮高剂量组、H... 目的研究覆盆子酮对高糖(HG)诱导的人肾小管上皮细胞(HK)-2损伤的影响及其可能作用机制。方法采用HG诱导HK-2细胞建立肾小管上皮细胞损伤模型,随机分组为NG组、HG组、HG+覆盆子酮低剂量组、HG+覆盆子酮中剂量组、HG+覆盆子酮高剂量组、HG+si-NC组、HG+si-circ_0068087组、HG+覆盆子酮+pcDNA组、HG+覆盆子酮+pcDNA-circ_0068087组;采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;利用试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测circ_0068087的表达量。结果与NG组比较,HG组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显升高,MDA水平和circ_0068087表达明显量升高,SOD活性明显降低(P<0.05);与HG组比较,HG+覆盆子酮低剂量组、HG+覆盆子酮中剂量组、HG+覆盆子酮高剂量组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显降低,MDA的水平和circ_0068087的表达量明显降低,SOD活性明显增加(P<0.05),呈剂量依赖性;与HG+si-NC组比较,HG+si-circ_0068087组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显降低,SOD活性明显升高,MDA水平明显降低(P<0.05);与HG+覆盆子酮+pcDNA组比较,HG+覆盆子酮+pcDNA-circ_0068087组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显升高,MDA水平明显升高,SOD活性明显降低(P<0.05)。结论覆盆子酮可通过抑制circ_0068087表达而促进细胞增殖及抑制细胞凋亡、氧化应激从而减轻HG诱导的肾小管上皮细胞损伤。 展开更多
关键词 人肾小管上皮细胞HK-2 覆盆子酮 circ_0068087 细胞增殖 细胞凋亡 氧化应激
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circ_0081666/miR-330-5p对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制 被引量:1
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作者 王婧雯 郑大炜 +3 位作者 郭娜 孙辉 段东奎 门翔 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期2730-2734,共5页
目的探讨circ_0081666对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法选取30例非小细胞肺癌患者癌组织及癌旁组织;A549细胞分为si-con组(转染si-con)、si-circ_0081666组(转染si-circ_0081666)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-... 目的探讨circ_0081666对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法选取30例非小细胞肺癌患者癌组织及癌旁组织;A549细胞分为si-con组(转染si-con)、si-circ_0081666组(转染si-circ_0081666)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-circ_0081666组(转染pcDNA-circ_0081666)、miR-con组(转染miR-con)、miR-330-5p组(转染miR-330-5p)、si-circ_0081666+anti-miR-con组(共转染si-circ_0081666和anti-miR-con)、si-circ_0081666+anti-miR-330-5p组(共转染si-circ_0081666和anti-miR-330-5p)。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测circ_0081666和miR-330-5p表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测circ_0081666和miR-330-5p的靶向关系。结果非小细胞肺癌组织和A549细胞中circ_0081666表达水平显著升高,miR-330-5p表达水平显著降低(P<0.05)。敲低circ_0081666或过表达miR-330-5p后,A549细胞活性显著降低,迁移、侵袭细胞数显著减少(P<0.05)。circ_0081666靶向调控miR-330-5p;敲低miR-330-5p逆转了抑制circ_0081666对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论敲低circ_0081666可能通过上调miR-330-5p抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 circ_0081666 miR-330-5p 非小细胞肺癌 增殖 迁移 侵袭
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circ_0092315通过调控微小RNA-1256/高迁移率族蛋白A2促进甲状腺乳头状癌细胞的增殖和侵袭 被引量:1
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作者 柯淑红 孔彩霞 +1 位作者 徐瑶 彭聪 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期16-21,共6页
目的研究circ_0092315对甲状腺乳头状癌细胞增殖和侵袭的影响,并探讨其分子机制。方法采用实时荧光定量PCR方法检测人甲状腺乳头状癌细胞中circ_0092315的表达水平,CCK-8法和Transwell实验检测TPC-1细胞的增殖和侵袭能力,Western blot... 目的研究circ_0092315对甲状腺乳头状癌细胞增殖和侵袭的影响,并探讨其分子机制。方法采用实时荧光定量PCR方法检测人甲状腺乳头状癌细胞中circ_0092315的表达水平,CCK-8法和Transwell实验检测TPC-1细胞的增殖和侵袭能力,Western blot检测高迁移率族蛋白A2(HMGA2)蛋白表达水平。通过生物信息数据库、双荧光素酶报告基因检测、实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法探讨circ_0092315、微小RNA-1256(miR-1256)和HMGA2的靶向调控关系。结果circ_0092315在人甲状腺乳头状癌细胞中呈现高表达(P均<0.001)。circ_0092315促进TPC-1细胞增殖和侵袭能力(P均<0.001)。转染circ_0092315小干扰RNA可上调miR-1256的表达水平(P<0.001)。miR-1256抑制物上调HMGA2蛋白表达(P<0.001)。结论circ_0092315在人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中呈高表达,通过调控miR-1256/HMGA2轴促进TPC-1细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 circ_0092315 微小RNA-1256 高迁移率族蛋白A2
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circ_0000069靶向miR-338-3p对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:1
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作者 张伟 刘青春 +4 位作者 张潍 饶汕 王辉 陈奕戈 米卫国 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第2期197-201,共5页
目的 探讨环状RNA 0000069(circ_0000069)是否靶向miR-338-3p调控非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖、迁移和侵袭。方法 采用qRT-PCR技术检测NSCLC患者癌组织、癌旁正常组织中circ_0000069和miR-338-3p表达量。采用CCK-8、Transwell实验... 目的 探讨环状RNA 0000069(circ_0000069)是否靶向miR-338-3p调控非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖、迁移和侵袭。方法 采用qRT-PCR技术检测NSCLC患者癌组织、癌旁正常组织中circ_0000069和miR-338-3p表达量。采用CCK-8、Transwell实验分析抑制circ_0000069或过表达miR-338-3p对A549细胞增殖活力、迁移和侵袭的影响。使用荧光素酶酶报告实验和qRT-PCR分析circ_0000069和miR-338-3p之间的相互作用。结果NSCLC组织中circ_0000069表达量较癌旁组织升高(P<0.05),而miR-338-3p表达量显著降低(P<0.05)。抑制circ_0000069或过表达miR-338-3p后A549细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低(P<0.05)。miR-338-3p是circ_0000069的靶基因,circ_0000069靶向负调控miR-338-3p表达。干扰miR-338-3p表达显著减弱circ_0000069对A549细胞增殖、迁移和侵袭的抑制(P<0.05)。结论 抑制circ_0000069通过上调miR-338-3p抑制NSCLC细胞A549增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 circ_0000069 miR-338-3p 非小细胞肺癌 细胞增殖 迁移 侵袭
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玄参提取物调控circ_0038467/miR-495对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响 被引量:1
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作者 余莉萍 余淑菁 +2 位作者 李旭成 崔金涛 陆佳鑫 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期257-260,266,共5页
目的:探讨玄参提取物对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响及作用机制。方法:采用肺炎链球菌诱导肺泡上皮细胞建立细胞损伤模型并给予不同剂量玄参提取物处理。si-NC、si-circ_0038467分别转染肺泡上皮细胞,1×108 CFU/ml肺炎... 目的:探讨玄参提取物对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响及作用机制。方法:采用肺炎链球菌诱导肺泡上皮细胞建立细胞损伤模型并给予不同剂量玄参提取物处理。si-NC、si-circ_0038467分别转染肺泡上皮细胞,1×108 CFU/ml肺炎链球菌处理,pcDNA-circ_0038467转染肺泡上皮细胞,40µg/ml玄参提取物与1×108 CFU/ml肺炎链球菌处理;MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;ELISA检测IL-6、IL-10水平;qRT-PCR检测circ_0038467、miR-495表达;双荧光素酶报告实验检测circ_0038467与miR-495的靶向关系;Western blot检测Cleaved-caspase3蛋白表达。结果:玄参提取物可浓度依赖性地增强肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞活力(P<0.05),并提高miR-495表达和IL-10水平(P<0.05),而降低circ_0038467表达、IL-6水平、细胞凋亡率和Cleaved-caspase3蛋白表达(P<0.05);转染si-circ_0038467可促进miR-495表达(P<0.05),提高细胞活力和IL-10水平(P<0.05),降低IL-6水平、细胞凋亡率和Cleaved-caspase3蛋白水平(P<0.05);circ_0038467可靶向调控miR-495表达及活性;转染pcDNA-circ_0038467可减弱玄参提取物对细胞增殖、凋亡及炎症的作用。结论:玄参提取物可通过调控circ_0038467/miR-495表达促进细胞增殖,抑制细胞凋亡及炎症反应,从而减轻肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤。 展开更多
关键词 玄参提取物 circ_0038467 miR-495 肺炎链球菌 肺泡上皮细胞 细胞增殖 凋亡
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circ_0003221/miR-330-3p在骨肉瘤组织中的表达及对U2-OS增殖迁移的影响 被引量:1
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作者 闫晓红 方美花 +1 位作者 王伟 张军 《河北医药》 CAS 2023年第16期2427-2430,共4页
目的探讨circ_0003221在骨肉瘤组织中的表达及对U2-OS增殖迁移的影响和分子机制。方法选择37例骨肉瘤患者瘤组织及瘤旁组织,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circ_0003221和miR-330-3p的表达水平,Pearson进行相关性分析。双荧光素酶报告实... 目的探讨circ_0003221在骨肉瘤组织中的表达及对U2-OS增殖迁移的影响和分子机制。方法选择37例骨肉瘤患者瘤组织及瘤旁组织,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circ_0003221和miR-330-3p的表达水平,Pearson进行相关性分析。双荧光素酶报告实验检测circ_0003221和miR-330-3p的靶向关系。将骨肉瘤细胞U2-OS分为si-NC组、si-circ_0003221组、miR-NC组、miR-330-3p mimic组、si-circ_0003221+anti-miR-NC组、si-circ_0003221+miR-330-3p Inhibitor组;MTT法检测细胞增殖抑制率;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;Transwell检测细胞迁移数;划痕实验检测划痕愈合率。结果与瘤旁组织比较,骨肉瘤组织中circ_0003221表达水平升高,miR-330-3p表达水平降低(P<0.05);circ_0003221与miR-330-3p的表达呈负相关。circ_0003221靶向调控miR-330-3p。干扰circ_0003221或过表达miR-330-3p,U2-OS增殖抑制率升高,克隆形成数和迁移细胞数减少,划痕愈合率降低(P<0.05)。抑制miR-330-3p表达可逆转干扰circ_0003221对U2-OS细胞增殖和迁移的影响。结论circ_0003221再骨肉瘤组织中高表达,干扰circ_0003221可通过上调miR-330-3p抑制骨肉瘤细胞U2-OS增殖、迁移。 展开更多
关键词 circ_0003221 miR-330-3p 骨肉瘤 增殖 迁移
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