CIRCE——新型鱼雷对抗系统

新型鱼雷对抗系统(CIRCE)是德国和意大利为满足海军新型212型潜艇对软杀伤鱼雷对抗系统(TCM)的需求而设计的，通过发射水声干扰器和诱饵来有效迷惑鱼雷，实现对先进小型鱼雷及线导或非线导的声自导大型鱼雷进行对抗，系统反应快、防御功能强。

circ0000799经miR-1287-5p/GPX4轴调控铁死亡促进三阴乳腺癌脑转移

目的探索circ0000799经miR-1287-5p/GPX4轴对铁死亡促进三阴乳腺癌脑转移的影响机制。方法检测circ0000799在乳腺癌细胞系及乳腺癌组织中的表达。沉默亲代三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231和子代脑转移细胞MDA-MB-231-BM中circ0000799的表达。比较各组细胞生长、侵袭能力、脑转移结节数目。使用双荧光素酶报告基因实验验证circ0000799、miR-1287-5p、GPX4调控关系。检测circ0000799对铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)表达和总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比的影响。结果与人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)或癌旁组织比较,circ0000799在三阴乳腺癌细胞系及乳腺癌组织中上调,且在子代三阴乳腺癌细胞系及脑转移灶中上调最为显著(P<0.05)。与sh-circCTR组比较,sh-circ0000799组细胞生长、侵袭能力降低(P<0.05)。sh-circCTR组、sh-circ0000799组、sh-circ0000799+RSL3组脑转移结节数量依次降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,circ0000799可与miR-1287-5p相互作用,miR-1287-5p可与GPX4相互作用。与sh-circCTR组比较,sh-circ0000799组miR-1287-5表达增加,总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比和GPX4表达降低(P<0.05)。与miR-CTR组比较,miR-1287-5p组GPX4 mRNA表达降低(P<0.05)。结论circ0000799在三阴乳腺癌中高表达且可能通过miR-1287-5p/GPX4轴促进三阴乳腺癌脑转移。

circ_0013958/miR-545轴对子宫内膜癌细胞RL-95-2增殖、凋亡和迁移的影响

目的探讨circ_0013958对子宫内膜癌细胞RL-95-2增殖、凋亡和迁移影响及可能机制。方法收集51例子宫内膜癌组织和癌旁组织,即时聚合酶链锁反应(qRT-PCR)法检测组织中circ_0013958和miR-545表达。体外培养RL-95-2细胞,分别转染sh-circ_0013958、miR-545模拟物、si-circ_0013958与miR-545抑制剂后,CCK-8、流式细胞术、Transwell分别检测细胞增殖、凋亡和迁移。凋亡蛋白水平使用Western blot。Circ_0013958和miR-545的靶向关系使用双荧光素酶报告实验验证。结果子宫内膜癌组织中相较于癌旁组织高表达circ_0013958(P<0.05),而低表达miR-545(P<0.05);敲减circ_0013958或上调miR-545后,RL-95-2细胞增殖及迁移能力抑制而细胞凋亡升高(P<0.05);circ_0013958靶向负调控miR-545,下调miR-545逆转了敲减circ_0013958介导的抗增殖,抗迁移以及促凋亡的作用。结论circ_0013958通过靶向下调miR-545促进子宫内膜癌RL-95-2细胞增殖和迁移,并阻碍细胞凋亡。

Upregulation of circ0000381 atienuates microglial/macrophage pyroptosis after spinal cord injury

Neuroinflammation exacerbates secondary damage after spinal cord injury,while microglia/macrophage pyroptosis is important to neuroinflammation.Circular RNAs(circRNAs)play a role in the central nervous system.However,the functional role and mechanism of circRNAs in regulating microglia/macrophage pyroptosis after spinal cord injury are still poorly studied.In the present study,we detected microglia/macrophage pyroptosis in a female rat model of spinal cord injury,along with upregulated levels of circ0000381 in the spinal cord.Our further experimental results suggest that circ0000381 may function as a sponge to sequester endogenous microRNA423-3p(miR-423-3p),which can increase the expression of NOD-like receptor 3(NLRP3),a pyroptosis marker.Therefore,upregulation of circ0000381 may be a compensatory change after spinal cord injury to attenuate microglia/macrophage pyroptosis.Indeed,knockdown of circ0000381 expression exacerbated microglia/macrophage pyroptosis.Collectively,our findings provide novel evidence for the upregulation of circ0000381,which may serve as a neuroprotective mechanism to attenuate microglia/macrophage pyroptosis after spinal cord injury.Accordingly,circ0000381 may be a novel therapeutic target for the treatment of spinal cord injury.

沉默circ9119调控miR-126抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和自噬

目的:探讨环状RNA-9119(circular-RNA-9119,circ9119)在肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中的作用及其作用机制。方法:qRT-PCR检测收集的组织样本和购买的细胞系中circ9119、miR-126的表达,并对细胞进行筛选。借助荧光原位杂交(FISH)实验、RNA结合蛋白免疫共沉淀(RIP)实验与双荧光素酶报告实验对circ9119和miR-126的关系进行明确。凋亡相关因子和自噬标记物借助qRT-PCR、Western blot测定。CCK8、Transwell、流式细胞术分别测定HCC细胞的增殖、侵袭和凋亡。裸鼠成瘤实验观测肿瘤生长状况。结果:HCC组织和细胞中,circ9119的表达上调、miR-126的表达下调(均P<0.05)。circ9119能够作为miR-126的ceRNA对其进行调控。沉默circ9119有利于抑制HCC细胞的增殖、侵袭和自噬,促进细胞的凋亡,且能够抑制小鼠体内肿瘤的生长(均P<0.05)。而过表达circ9119则变化与之相反。上调miR-126的表达与沉默circ9119中细胞变化趋势一致。上调miR-126的作用能够被过表达circ9119所逆转。结论:circ9119作为促癌因子负调控miR-126在HCC中发挥作用。

血清外泌体circ_0023461在冠状动脉疾病相关急性心肌梗死诊断和预后评估中的价值

目的分析血清外泌体circ_0023461对冠状动脉疾病(CAD)相关急性心肌梗死(AMI)的诊断和预测预后价值。方法选择2019年12月至2022年1月北京航天总医院诊治的CAD相关AMI患者383例(AMI组),慢性稳定性CAD非AMI患者200例(对照组),健康体检者200例(健康组)。使用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清外泌体circ_0023461水平。分析血清外泌体circ_0023461水平与临床病理特征及氧化应激指标。结果AMI组血清外泌体circ_0023461水平明显高于对照组及健康组[3.54(1.39,9.82)vs0.86(0.62,1.23)、0.65(0.41,0.79),P<0.01]。ROC曲线分析显示,当血清外泌体circ_0023461≥1.31时,其诊断AMI的曲线下面积为0.857(95%CI:0.827~0.887),敏感性和特异性分别为78.90%、83.50%。Kaplan-Meier生存曲线显示,高水平组无主要不良心血管事件(MACE)生存时间明显短于低水平组,差异有统计学意义(χ^(2)=19.390,P_(log rank)<0.01)。多变量Cox回归分析显示,年龄、外周动脉疾病和外泌体circ_0023461仍为AMI患者随访期间MACE发生的独立预测因素(P<0.05,P<0.01)。Pearson相关性分析显示,血清外泌体circ_0023461水平与谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶呈负相关(r=-0.395,r=-0.193,P<0.01),与丙二醛呈正相关(r=0.194,P<0.01)。结论血清外泌体circ_0023461可能是CAD相关AMI诊断和预后的潜在生物标志物,其作用机制似乎与调节人体氧化应激水平进而影响心肌损伤有关。

circLAMP1靶向miR-1193调控肺癌细胞顺铂耐药性及机制

目的探讨circ重组人溶酶体相关膜蛋白(LAMP)1对肺癌细胞顺铂(DDP)耐药性的影响及其机制是否与miR-1193有关。方法用浓度为1.25、2.50、5.00、10.00、20.00、40.00μg/ml的DDP处理A549细胞、A549/DDP细胞,噻唑蓝(MTT)检测A549、A549/DDP细胞抑制率及半数抑制浓度(IC50);将A549/DDP细胞分为DDP+si-circLAMP1组、DDP+si-NC组、DDP+miR-1193组、DDP+miR-NC组、DDP+si-circLAMP1+anti-miR-1193组、DDP+si-circLAMP1+anti-miR-NC组;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测A549及A549/DDP细胞中circLAMP1和miR-1193的表达水平;CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖;划痕实验和Transwell分别检测迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹法检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测circLAMP1和miR-1193的靶向关系。结果与A549细胞相比,A549/DDP细胞抑制率降低,IC50值升高,circLAMP1表达水平升高,miR-1193表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰circLAMP1表达或miR-1193过表达联合DDP处理后,A549/DDP细胞活性、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及N-cadherin蛋白表达降低,凋亡率及E-cadherin、cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。下调miR-1193表达逆转了干扰circLAMP1表达联合DDP对A549/DDP细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的作用。circLAMP1靶向负调控miR-1193。结论干扰circLAMP1表达可通过靶向调控miR-1193增强DDP对A549/DDP细胞增殖、迁移、侵袭的抑制和凋亡促进作用,可降低肺癌细胞的DDP耐药性。

胃癌组织中circ0076704、HER2、ICAM-1的表达

目的 探讨胃癌组织中circ0076704、人表皮生长因子受体2(HER2)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达及意义.方法 选取50例胃癌患者,术中采集患者的胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织标本,荧光实时定量PCR检测组织标本中circ0076704表达;免疫组化法检测组织标本中HER2、ICAM-1表达.收集患者的人口学特征、肿瘤部位、组织分化程度、肿瘤直径、浸润深度、淋巴结转移情况、远处转移情况、幽门螺杆菌感染情况.从纳入本研究起对患者进行3 a的随访,记录其生存情况.结果 胃癌组织中circ0076704相对表达量及HER2阳性表达率明显高于正常胃组织,ICAM-1阳性表达率明显低于正常胃组织(P<0.01).胃癌组织中circ0076704相对表达量、HER2、ICAM-1阳性表达率在不同浸润深度、淋巴结转移、远处转移的胃癌患者间比较差异均具有统计学意义(P<0.01).ROC曲线分析显示,circ0076704、HER2、ICAM-1单独和联合检测在胃癌患者预后评估中具有较高的应用价值(P<0.01),其中联合检测的诊断价值最高(AUC=0.958),灵敏度、阳性预测值高于各指标单独检测.50例胃癌患者3 a生存率为52.00%(26/50).血清circ0076704≥22.37 U/L、HER2阳性、ICAM-1阴性的胃癌患者3 a生存率明显低于血清circ0076704<22.37 U/L、HER2阴性、ICAM-1阳性的胃癌患者(Log-rank χ2值分别为26.392、14.681、17.045,均P<0.01).结论 胃癌组织中circ0076704、HER2高表达,ICAM-1则低表达;联合检测对胃癌患者预后具有较高的评估价值.

circBPTF靶向miR-98-5p对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响及其机制

目的 探讨circ溴结构域PDH指转录因子(BPTF)对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响及分子机制。方法 肾小管上皮细胞分为对照组(Con)、高糖组(HG)、HG+si-NC组、HG+si-circBPTF组、HG+miR-NC组、HG+miR-98-5p组、HG+si-circBPTF+anti-miR-NC组、HG+si-circBPTF+anti-miR-98-5p组。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circBPTF和miR-98-5p表达;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平;双荧光素酶报告实验证实circBPTF和miR-98-5p的靶向关系。结果 与Con组比较,HG组肾小管上皮细胞中circBPTF表达、IL-6、TNF-α水平和凋亡率升高,miR-98-5p表达水平降低(P<0.05)。与HG+si-NC组或HG+miR-NC组比较,HG+si-circBPTF组和HG+miR-98-5p组IL-6,TNF-α水平降低,细胞凋亡率降低(P<0.05)。circBPTF靶向调控miR-98-5p;下调miR-98-5p逆转了抑制circBPTF表达对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用。结论 抑制circBPTF表达通过靶向上调miR-98-5p对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤起保护作用。

客船人员高级撤离分析模拟及审图流程

利用Pathfinder软件建立某客船的实船仿真模型进行高级撤离分析,通过调整撤离方案优化拥堵情况,缩短撤离时间,提高逃生效率,结果表明,Pathfinder软件能够满足指南中各个案例的要求,对客船的人员撤离过程进行有效地模拟,直观地展示人员的撤离过程,有效识别出撤离过程中的拥挤点,并且调整撤离方案后极大地缩短总撤离时间,证明高级撤离分析方法可以更加准确地评估客船人员撤离方案。

环状RNA的表达在非小细胞肺癌细胞中的作用及机制研究

目的 探讨环状RNA Circ NFIX对非小细胞癌细胞A549增殖作用及其调控分子机制。方法 体外培养A549细胞,以正常培养的细胞为对照组,将构建的CircRNA NFIX过表达载体、CircRNA NFIX沉默表达载体、CircRNA NFIX、miR-132-3p均过表达载体及对应的对照载体分别转染至A549细胞中,分别命名为pLCDHCircRNA NFIX组、pLCDH组,si-CircRNA NFIX组、si-control组、pLCDH-CircRNA NFIX+miR-132-3p mimics组、pLCDH-CircRNA NFIX+miR-control组,每组设置9个复孔,48 h后RT-PCR验证CircRNA NFIX和miR-132-3p表达量,CCK-8检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3及IGF1R蛋白表达。结果 CircRNA NFIX过表达,细胞存活率、Bcl-2蛋白表达显著升高,细胞凋亡率、Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达显著降低,CircRNA NFIX沉默表达和CircRNA NFIX、miR-132-3p均过表达,细胞存活率、Bcl-2蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。CircRNA NFIX过表达IGF1R表达量为(2.88±1.41),miR-132-3p过表达IGF1R表达量(0.48±0.06),差异有统计学意义(t=5.102,P<0.05)。结论 环状RNA CircNFIX在A549细胞中可通过miR-132-3p调控IGF1R表达促进细胞增殖,RNA CircNFIX有望成为非小细胞肺癌靶向治疗的新靶点。

circ0023642通过调控miR-508-3p/ERBB4分子轴促进胃癌GMC-803细胞的恶性生物学行为

目的:探讨circ0023642通过调控miR-508-3p/ERBB4分子轴对胃癌GMC-803细胞增殖和转移的影响及其作用机制。方法:选取2015年5月至2018年3月南通市第二人民医院手术切除的31例胃癌患者癌组织及配对的癌旁组织标本和胃癌细胞系,使用qPCR检测胃癌组织、癌旁组织和细胞系中circ0023642和miR-508-3p的表达情况;WB实验检测MGC-803细胞中ERBB4、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达;CCK-8和Transwell实验检测调控circ0023642和miR-508-3p的表达对MGC-803细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;双荧光素酶报告基因验证miR-508-3p是否能够结合circ0023642和ERBB4的3’UTR。结果:circ0023642在胃癌组织和细胞系中的表达水平分别显著高于癌旁组织和正常胃黏膜细胞(P<0.05或P<0.01),且在MGC-803细胞中表达水平最高。敲降circ0023642后MGC-803细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)受到明显抑制(均P<0.05或P<0.01);circ0023642与ERBB4均可以靶向结合miR-508-3p的作用位点,并进一步实验证实circ0023642通过海绵吸附miR-508-3p促进MGC-803细胞增殖、迁移、侵袭和EMT(P<0.05或P<0.01)。结论:circ0023642通过与ERBB4竞争性结合miR-508-3p的作用位点,进而促进胃癌MGC-803细胞增殖和转移,其可作为胃癌临床诊断的标志物。

circ_0001246调节miRNA30a对骨肉瘤化疗敏感性影响的机制研究

目的:探讨circ0001246调节miRNA30a及影响骨肉瘤化疗敏感性的机制。方法:将骨肉瘤细胞随机分为3组,分别置于6孔板中,包括未转染组(空白组)、siRNA阴性对照转染组(NC组)和siRNA转染组(circ0001246 siRNA转染组),转染后荧光倒置显微镜观察转染效率,检测各组细胞circ0001246、miRNA30a的表达,用流式细胞AnnexinV/7AAD双染法检测各组细胞对化疗药物依托泊苷(etoposide-VP16)的敏感性,荧光素酶报告基因实验验证circ0001246对miRNA30a的"吸附"作用。结果:circ0001246 siRNA转染组的细胞miRNA30a表达较NC组和空白组明显上调(P <0.05),骨肉瘤中circ0001246和miRNA30a的表达呈现负反馈。circ0001246 siRNA转染组细胞凋亡率较NC组和空白组明显升高(P <0.05)。circ0001246可以通过直接碱基配对吸附miRNA30a发挥调控作用。结论:circ0001246是骨肉瘤相关癌基因,靶向抑制骨肉瘤中circ0001246表达可以增强肿瘤细胞对化疗药物依托泊苷的敏感性,该作用可能是通过circ0001246的吸附功能负调控miRNA30a表达而实现的。

环状RNA circ0008016在胶质瘤患者组织中的表达及临床意义

目的探讨circ0008016在胶质瘤患者组织标本中的表达及临床意义。方法收集我院确诊的胶质瘤患者组织标本92例,同时收集33例正常脑组织标本作为对照组。通过实时荧光定量PCR检测circ0008016在胶质瘤组织及细胞中的表达,χ2检验分析circ0008016的表达与患者临床预后的关系;Kaplan Meier法分析circ0008016的表达与患者生存时间的关系;下调circ0008016的表达,观察其对细胞增殖凋亡及对替莫唑胺敏感性的变化。单因素及COX多因素回归模型分析影响胶质瘤预后的因素。结果与正常脑组织及正常人脑胶质细胞(HEB)比较,circ0008016在胶质瘤组织及细胞中的高表达,差异有统计学意义(均P<0.001);circ0008016的在高级别的胶质瘤患者明显高表达,与胶质瘤级别呈正相关,差异有统计学意义(P<0.001);circ0008016的表达与患者的肿瘤WHO分级、化疗敏感性及生存状态明显相关(均P<0.05)。高表达circ0008016的患者的总生存时间及无复发生存时间较低表达者明显缩短(P<0.001)。下调circ0008016的表达可抑制细胞的增殖,增加细胞对化疗药物的敏感性。单因素及COX多因素回归模型分析提示,circ0008016的表达、WHO分级是胶质瘤患者独立的预后因素(P<0.05)。结论circ0008016在胶质瘤患者组织标本中高表达,与患者的预后相关,可作为潜在的胶质瘤早期诊断和预后评估的分子标志物。

灯盏乙素对乳腺癌细胞中环状RNA OXNAD1与SMARCA5的影响

目的检测灯盏乙素对乳腺癌MDA-MB-231细胞中的环状RNA(Circular RNA,circRNA)的相对表达量的影响,进一步探索灯盏乙素对肿瘤的作用机制。方法采用实时荧光定量PCR的方法,检测对照组与不同剂量组的灯盏乙素处理后的乳腺癌细胞中circRNA OXNAD1与SMARCA5的相对表达量。结果灯盏乙素在低剂量(1、10、25μm)的情况下,使得乳腺癌MDA-MB-231细胞中circRNA OXNAD1的表达量显著降低(P<0.05),在高剂量(100μm)时显著升高(P<0.05)。灯盏乙素在低剂量(1、10、25、50μm)的情况下,使得乳腺癌MDA-MB-231细胞中环状RNA SMARCA5的表达量显著降低(P<0.05),在高剂量(100μm)时显著升高(P<0.05)。结论灯盏乙素影响circRNA OXNAD1与SMARCA5的表达,并且存在剂量反应关系,低剂量与高剂量呈现出相反的表达量变化。

网络信息资源编目与CORC系统

CORC是 OCLC这一世界上最大的计算机联机图书馆中心的第二代联机编目系统 ,它为网络信息资源的有序组织、适度控制及高效检索提供一条有效的途径。本文根据笔者在国外对 CORC系统的了解及试用的经验体会 ,介绍了该系统的由来、运作方式、主要数据库组成、性能、主要特点等。最后 ,对我国网络信息资源合作编目提出了一些看法 。

原发性非小细胞肺癌中circPVT1的表达水平及诊断价值研究

目的:探讨环状RNA PVT1(circPVT1)在原发性非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织和血液中的表达情况及其在NSCLC早期诊断的应用价值。方法:选取本院收治的68例NSCLC患者作为病例组,另选取同期于本院进行体检的68例正常人作为对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测病例组的肺癌组织与癌旁正常组织及两组血清circPVT1表达情况,分析circPVT1表达水平及其与NSCLC临床病理特征的关系,应用ROC曲线分析circPVT1对于NSCLC早期诊断的应用价值。结果:病例组肺癌组织circPVT1表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05)。病例组血清circPVT1表达水平高于对照组(P<0.05)。不同性别、年龄、病理类型、肿瘤大小、组织学分化程度的肺癌组织circPVT1表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05),是否吸烟、不同肿瘤分期、有无淋巴结转移的肺癌组织circPVT1表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。组织circPVT1表达水平诊断NSCLC的ROC曲线下面积为0.805[P<0.001,95%CI(0.731,0.880)]。血清circPVT1表达水平诊断NSCLC的ROC曲线下面积为0.782[P<0.001,95%CI(0.704,0.860)]。结论:circPVT1在NSCLC组织和血清中的表达水平均明显增高,肿瘤组织中circPVT1高表达与吸烟、肿瘤分期及淋巴结转移有关,circPVT1对于NSCLC具有一定的诊断价值。

非编码环状RNA circ_0024597促进大肠癌细胞增殖侵袭研究

目的探讨非编码环状RNA circ0024597在调控大肠癌细胞增殖方面的作用。方法选择2018年5月至8月天津医科大学肿瘤医院6例经病理诊断证实为大肠癌患者,年龄41~78岁,平均年龄52.4岁(标准差4.65岁);病理诊断均为腺癌,ⅢA期2例,ⅢB期4例。取该临床病例标本和距离癌变边缘> 5 cm处的癌旁组织。通过高通量circRNA芯片,筛选出高表达于大肠癌组织中的非编码环状RNA circ0024597,通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法在组织层面(33例病理诊断明确腺癌的Ⅲ期大肠癌患者)验证circ0024597在癌组织和癌旁组织的表达情况;构建针对非编码环状RNA circ0024597的质粒,通过转染人大肠癌Colo-320细胞系,上调circ0024597表达(Colo-320-circl-H细胞组),设计针对circ0024597的小干扰RNA,转染Colo-320细胞系,下调非编码环状RNA circ0024597表达(Colo-320-circl-L细胞组);用CCK-8试剂盒检测细胞增殖的变化和Transwell方法检测细胞侵袭情况。结果大肠癌组织中高表达circ0024597,癌旁组织中极少表达,两者间差异有显著统计学意义(ΔCt:26.850±0.384 vs 18.350±0.468。P <0.000 1)。上调非编码环状RNA circ0024597可以促进大肠癌Colo-320细胞系的增殖(培养72 h,约高于Colo-320细胞1.7倍)和侵袭能力(与Colo-320细胞比,侵袭力为2.310±0.573)(P <0.05);下调非编码环状RNA circ0024597表达则抑制大肠癌Colo-320细胞系的增殖(培养72 h,约低于Colo-320细胞0.5倍)和侵袭力(与Colo-320细胞比,侵袭力为0.580±0.482)(P <0.05)。结论非编码环状RNA circ0024597能够促进大肠癌细胞增殖和侵袭,在大肠癌进展过程中起着重要作用。

靶向Wnt1的miRNA与circRNA及其靶基因间相互作用的生物信息学分析

为对靶向Wnt1的7种mi RNAs进行circ RNAs及其靶基因的预测,同时分析其与circ RNAs及靶基因间的相互作用,分别采用Starbase及mi RWALK软件,对文献报道的靶向Wnt1基因的let-7e、mi R-21、mi R-34a、mi R-122、mi R-148a、mi R-148b与mi R-152等7种mi RNAs的circ RNAs和对应的靶基因进行生物信息学预测.利用Cytoscape 3.2.1对这7种mi RNAs和预测所得到的circ RNAs及对应的靶基因进行网络分析.并进一步对预测到的靶基因通过DAVID软件进行通路分析.Starbase软件对这7种不同mi RNAs所预测的靶circ RNAs的数量分别为58、15、41、20、28、28、28个.分别比较mi RWALK中7～9个以上软件共有的mi RNAs及其与靶基因的关系,发现CHD7基因是唯一一个在三种不同预测范围内与mi R-21、mi R-148a、mi R-148b和mi R-152等4种mi RNAs相对应的靶基因.CNOT6、NBEA、ZFYVE26与ZDHHC17是在两种不同预测范围内与至少4个mi RNAs相对应的靶基因.在7种mi RNAs所预测靶基因相关的KEGG信号通路中,7～9个软件以上共有的信号通路为Focal adhesion信号通路、MAPK信号通路、Notch信号通路与TGF-beta信号通路.在MAPK信号通路中DUSP1与MRPS35_hsa_circ_001042均分别是与mi R-21、mi R-148a、mi R-148b及mi R-152等4种mi RNAs相互作用的靶基因与circ RNA.本研究对靶向Wnt1的mi RNAs及其相互作用的circ RNAs、靶基因与信号通路等进行了网络分析与预测,为进一步分析它们之间的相互作用奠定了基础.

Circ0066629促进结直肠癌细胞活力的体外研究

目的探讨环状RNA circ0066629促进结直肠癌细胞活力作用及其调控的分子机制。方法 35例结直肠癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)及伊立替康耐药和不耐药患者组织来源于南京医科大学附属上海市松江中心医院,不同结直肠癌细胞系来源于美国菌种保藏中心,利用RT-q PCR测定circ0066629在结直肠癌组织及细胞系中的表达水平。Circ0066629过表达质粒、siRNA质粒、miR-219a-2-3p过表达质粒(miR-219a-2-3p mimics)及miR-219a-2-3p干扰质粒(miR-219a-2-3p inhibitor)用于调控circ0066629和miR-219a-2-3p的表达。RT-q PCR用于测定转染效率。随后,应用CCK-8和细胞划痕实验测定LOVO细胞活力。荧光素酶报告基因实验用于评估circ0066629与miR-219a-2-3p以及p53与miR-219a-2-3p的靶向关系。蛋白免疫印迹实验用于测定p53和鼠双微体基因2(MDM2)在LOVO细胞中的蛋白表达水平。结果 circ0066629在结直肠癌5-Fu及伊立替康耐药患者组织中表达下调,但在不同结直肠癌细胞系中表达上调。过表达circ0066629明显促进了5-Fu和伊立替康处理下的LOVO细胞活力。MiR-219a-2-3p被预测为circ0066629的靶基因,并且miR-219a-2-3p过表达对LOVO细胞活力的作用与circ0066629相反。另外,p53是miR219a-2-3p的预测靶向基因,p53特异性抑制剂(PFT-α)明显抑制LOVO细胞活力。结论 circ0066629通过调控miR-219a-2-3p/P53/MDM2轴促进结直肠癌细胞活力。