对1例罕见CisAB01/B血型的基因学研究

目的探讨ABO血型系统中血型血清学定型正反定不一致的情况下,采用PCR-SSP技术与ABO基因测序技术对CisAB血型进行直接鉴定。方法采用常规血型血清学技术检测ABO血型,采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法进行CisAB血型的基因鉴定,然后经核酸测序分析其ABO基因EXON6,EXON7序列及突变位点。结果血型血清学鉴定表明患者血型为A亚B,用PCR-SSP基因分型确定为CisAB01/B,其ABO位点的第6、第7外显子序列分析发现该标本EXON6测序结果2条等位基因261没出现碱基G缺失,说明不存在O基因,出现的有:297G/A。EXON7测序结果 467C>T;803G>C结果鉴定是CisAB01;526C>G;657C>T;703G>A796C>A;803G>C,930G>A结果鉴定是B101。结论基因学鉴定可对血清学试验结果进行确认。

CisAB01血型鉴定及家系分析——附1例报告

目的对一份血清学检测疑为CisAB型的标本进行基因分型,并测序确认以及进行家系分析。方法血清学方法采用试管正反定型法;基因分型方法为序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-sequence specific primer,PCRSSP);DNA测序采用ABO血型基因6、7外显子序列分析,单倍型6、7外显子及第6内含子序列分析,分析先证者及家系血型遗传规律。结果该家系7个标本发现5例血清学结果正反定型结果不符,正定型为AB型,反定型检出抗-B,先证者血清学符合CisAB表现,标本2、7为正常的A型。ABO基因分型的结果分成2组,标本1和标本3基因分型结果显示为O1/B;标本4、5、6基因分型结果显示为A/B;ABO基因直接测序及单倍型测序结果显示:标本1为CisAB01/O02;标本2、7为A102/O02;标本3为CisAB01/A101;标本4为CisAB01/A102;标本5为CisAB01/A102;标本6为CisAB01/A101。结论采用DNA序列分析法可以对ABO血型血清学正反定型不符的标本进行验证,并能阐述ABO血型正反定型不符或弱表达现象的分子基础。

A205cisAB01亚型1例无偿献血者的分子遗传学分析及家系调查

目的探讨A205cisAB01亚型先证者的分子生物学鉴定及家系调查与遗传学分析。方法选择2019年1月21日于日照市中心血站参加无偿献血时,因血型复检正反定型不符需进一步血型确认的1例先证者及其姐姐、妻子、女儿和儿子为研究对象。先证者为男性,48岁,汉族,既往体健,无输血史。采用试管法对受试者的ABO血型进行血型血清学鉴定,采用Sanger测序法对受试者ABO基因第6、7外显子进行直接测序和单克隆测序,确定其ABO基因型,并且根据检测结果分析该亚型等位基因在家系中的遗传情况。本研究遵循的程序符合2013年修订版《世界卫生协会赫尔辛基宣言》要求,并且与所有受试者签署知情同意书。结果①本例先证者及其姐姐、女儿的血清学分型一致,均为cisAB型;先证者妻子和儿子的血清学分型分别为AB和AwB型。②直接测序结果显示,先证者ABO基因第7外显子存在3个突变位点:c.467C>T纯合、c.803G>C杂合和c.1009A>G杂合突变。单克隆测序结果确认其ABO基因型为A2.05/cisAB.01。③先证者姐姐、妻子、女儿、儿子的ABO基因型分别为A2.05/cisAB.01、A1.02/B.01、A1.02/cisAB.01、cisAB.01/B.01。④家系调查结果显示,先证者的ABO*cisAB.01等位基因稳定遗传至其女儿和儿子。结论对ABO基因直接测序能够明确碱基突变位点,单克隆测序可确认其基因型。ABO*cisAB.01等位基因的表达受不同等位基因的影响,存在不同的血清学表现。采用分子生物学检测技术和家系调查有助于准确鉴定ABO亚型,明确血清学表型的分子基础。

CisAB01血型的血清学及基因型分析——附2例报告

在ABO血型鉴定的工作中,时常会遇到正反定型不符,难以确定血型的情况,在排除人为及操作因素之后,亚血型往往是我们考虑的因素之一。亚型对血型鉴定和输血都会带来一定的困难。同种亚型会有多种血清学表现形式,而相同的血清学反应格局可能会是不同的亚型所致[1],故传统的血清学方法有时不能很好的确定亚型,而血型基因检测就能较好的解决此问题。

cisAB基因型与表型分析2例

目的对父子(先证者1,先证者2)2例ABO疑难血型标本鉴定血清型和基因型。方法用血清学方法检测标本ABO血清型,用ABO基因亚型检测试剂盒检测基因型,测序法对ABO基因的第6、7外显子测定序列。结果血清学结果显示,先证者1红细胞上具有高凝集强度的A2抗原、H抗原和弱凝集强度的B抗原,血浆中含有弱凝集强度的抗-B,初步判定为A2Bx型;先证者2红细胞上具有高凝集强度的B抗原和弱凝集强度的A2抗原、H抗原,血浆中含有弱凝集强度的抗-A,初步判定为A2B型。基因亚型分型结果显示,先证者1为AO2型,先证者2为AB型。直接测序结果显示,先证者1第6外显子为261delG和A297G,第7外显子为C467T,T646A,G681A,C771T,G803C,G829A;先证者2第6外显子为A297G,第7外显子为C467T,C526G,C657T,G703A,C796A,C803C,G930A。克隆测序法显示2名先证者均具有CisAB01等位基因,先证者1同时具有O2等位基因,先证者2同时具有B101等位基因。结论由于与cisAB杂合的等位基因不同,造成均具有cisAB01等位基因的2名先证者在血清学上的显著差异。