肉苁蓉多糖的巨噬细胞活化作用

目的观察肉苁蓉多糖(CDPS)对巨噬细胞的活化作用。方法采用中性红法测定吞噬活性;Griess试剂法测定NO释放量;L929细胞法及小鼠胸腺细胞法测定TNF-α及IL-1释放。结果CDPS在6.25～50mg.L-1剂量范围内可剂量依赖性地增强BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力和促进NO释放;在2.8～100mg.L-1剂量范围内可使正常和免疫抑制的RAW264.7细胞NO释放明显增加;在0.56～7.2mg.L-1或3.6～10mg.L-1范围促进RAW264.7细胞TNF-α或IL-1产生,均具有良好的量效关系。结论CDPS可明显提高巨噬细胞吞噬及分泌功能,活化巨噬细胞。肉苁蓉免疫增强作用可能与此有关。

肉苁蓉多糖的促淋巴细胞增殖作用

目的研究肉苁蓉多糖(CDPS)对小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法MTT法检测小鼠脾淋巴细胞的增殖。环磷酰胺(Cy)复制免疫功能低下的动物模型,分别测定正常及免疫低下动物脾脏、胸腺指数。胸腺细胞增殖法测定白细胞介素-2(IL-2)活性。结果CDPS对丝裂原(ConA及LPS)活化淋巴细胞及未活化正常细胞均有明显促增殖作用,并促进淋巴细胞IL-2的分泌。腹腔给药显示CDPS具明显提高正常及免疫低下小鼠的脾指数,对因Cy所致胸腺指数的降低也有显著的对抗作用。结论CDPS可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖,该作用可能与其促IL-2分泌有关。

肉苁蓉多糖的分离、纯化和鉴定

目的 分离、纯化和鉴定壮阳中药肉苁蓉 Cistanche deserticola中的多糖成分。方法 经脱脂、沸水抽提、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白得到的粗多糖 ,再经 DEAE- Sephadex A- 5 0离子交换层析和 Sephacryl S- 2 0 0凝胶柱层析得到纯净的肉苁蓉多糖 (CDPS) ,用红外光谱和紫外光谱分析鉴定该多糖。结果 红外光谱分析具有典型的多糖特征吸收峰 ,紫外光谱分析未见核酸和蛋白质的特征吸收峰。结论 本实验所提取的肉苁蓉多糖为单一、纯净的多糖。

肉苁蓉多糖的碱提取及其化学分析

用4％NaOH提肉苁蓉多糖，并对其进行分析。粗提肉苁蓉多糖蛋白含量为7．55％，其中97．12％为游离态，其余部分为结合态；总糖含量为63．84％；大体含有4个分子量级别的组分，平均分子量在67．18万以上，其中分子量在128．29万左右的占48．64％。肉苁蓉多糖的糖基组成为D-葡萄糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-半乳糖、D-甘露糖、D-半乳糖醛酸和D-木糖，它们的摩尔比约为22．77：12．40：8．67：6．56：3．15：2．52：1．00。此结果显示，碱提取的肉苁蓉多糖是糖基组成比较简单但构型和碳原子数多样的大分子酸性杂多糖。

用生物测定法研究肉苁蓉多糖在体外的吸收转运

目的用生物测定法考察肉苁蓉多糖(CDPS)在Caco-2细胞模型的吸收转运。方法用培养于Transwell上的Caco-2细胞模型研究CDPS的吸收转运;采用生物活性测定法测定CDPS在接受侧介质中的含量。结果Caco-2细胞单层极性与完整性符合实验要求,CDPS在1.87～40mg·mL-1内,与RAW264.7细胞NO分泌呈明显量效关系,转运量随供侧(AP侧)浓度的增加而增大,不同浓度CDPSPapp(A-B)均小于1×10-7cm.s-1。结论采用生物活性测定CDPS的Papp具可行性,该药属吸收不良药物,口服吸收率应小于1%。