Content Determination of Cistanches Herba in Zhenrongdan Mixture by HPLC

[Objectives]To establish a HPLC-UV method for the determination of Cistanches Herba in Zhenrongdan mixture.[Methods]According to the content determination method of Cistanches Herba in the 2020 edition of Chinese Pharmacopoeia,using HPLC-UV method,the content determination method of Cistanches Herba in Zhenrongdan mixture was established,and the content of echinacoside was determined.The related chromatographic conditions were explored,and the methodological investigation was carried out.[Results]The chromatographic conditions were determined as follows:octadecylsilane bonded silica gel as filler(C_(18));80%acetonitrile solution(containing 0.2%phosphoric acid)-0.2%phosphoric acid aqueous solution(15∶85)as mobile phase;detection wavelength was 330 nm.The number of theoretical plates should not be less than 3000 according to the peak of echinacoside.The methodological investigation showed that the method had better precision,accuracy and repeatability.Under the conditions of this study,echinacoside had better linear relationship in the range of 74.9-1498 ng,and the average recovery was 99.1%,RSD=0.5%(n=6).[Conclusions]A method for the determination of Cistanches Herba in Zhenrongdan mixture by HPLC-UV was established.The method is sensitive,rapid,accurate and suitable for the determination of Cistanches Herba in Zhenrongdan mixture.

肉苁蓉的药理作用及其在中枢神经系统疾病中的研究进展

肉苁蓉(Cistanches)是列当科植物肉苁蓉的肉质茎,又名金笋、地精、大芸。肉苁蓉的提取物主要包括肉苁蓉总苷、苯乙醇苷类、环烯醚萜类、挥发性成分、木脂素类、多糖、生物碱等。肉苁蓉的传统中药作用有补肾壮阳、润肠通便、女子不孕、滋补强身等;现代药理作用包括抗氧化、抗凋亡、调控自噬、增强体力和抗疲劳、改善学习认知功能。相关研究表明肉苁蓉对中枢神经系统疾病具有良好的治疗效果。脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)发生常伴随着脑水肿、血脑屏障的破坏、神经炎症、神经元凋亡,肉苁蓉提取物肉苁蓉总苷可抑制神经细胞炎症及凋亡,减少脑梗死面积,对CIRI模型大鼠具有神经保护作用。肉苁蓉通过减少自由基堆积、抑制氧化应激和炎症反应,提高阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)和血管性痴呆(Vascular dementia,Va D)模型大鼠的学习记忆能力。肉苁蓉可以改善帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠运动行为异常,发挥神经保护作用。肉苁蓉能够抑制肌萎缩侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis,ALS)兴奋性氨基酸的水平,减轻神经毒性作用,改变星形胶质细胞功能,提高神经细胞存活率。目前肉苁蓉对于中枢神经系统疾病的应用越来越广泛,就其药理作用及其在中枢神经系统疾病中的研究进展进行综述,以期为肉苁蓉的开发和利用提供新的思路。

肉苁蓉干膏粉致畸性毒性实验研究

目的通过动物实验观察肉苁蓉干膏粉是否有致畸作用,初步确定不引起致畸作用的NOAEL值,为安全食用和相关产品开发提供参考。方法雌雄SD大鼠按1︰2合笼,查见阴栓当天为妊娠第0天,此后1 d为第1天。完全随机法将交配成功的雌鼠分入阴性对照组、1250 mg/kg、2500 mg/kg、5000 mg/kg、阳性对照组(环磷酰胺,15 mg/kg)5组,每组不少于18只。孕第6~15 d,剂量组以10 ml/kg经口灌胃给予受试物、阴性对照组灌胃给予相同体积蒸馏水、阳性组于孕第12天按2 ml/kg体重腹腔注射环磷酰胺1次。第0、6、9、12、15、20天称量体重,调整灌胃量。妊娠第20天,孕鼠称重后行安乐死,取出子宫,称子宫连胎鼠总重,摘除卵巢称重并计数黄体数,剖开子宫记录总着床数、活胎数、死胎数、吸收胎数,取出活胎仔称重、量体长、逐个检查外观,取下胎盘称重。将1/2活胎鼠放入鲍氏液中固定两周,检查脏器发育情况;其余活胎鼠去内脏,经固定、染色、透明后以检查骨骼发育情况。结果环磷酰胺组孕鼠增重显著低于阴性对照组(P=0.000),死胎发生率显著高于阴性对照组(P=0.000),胎仔平均体重及平均身长均显著低于阴性对照组(P=0.000、0.000),外观畸形、骨骼畸形及内脏畸形窝发生率均显著高于阴性对照组(χ^(2)=38.000、10286、18.000,P=0.000、0.001、0.000),提示试验系统及操作可靠。第0天(χ^(2)=5.664,P=0.227)、6天(F=0.906,P=0.464)、9天(F=1.098,P=0.363)、12天(F=1.081,P=0.371)、15天(F=0.627,P=0.644)孕鼠体重和体重净增重比较,组间差异无统计学意义(χ^(2)=5.790,P=0.215)。各剂量组第20天体重及体重增重与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P=1.000、1.000、1.000,0.670、0.518、0.340)。窝平均活胎数(χ^(2)=1.869,P=0.760)、黄体数(χ^(2)=6.230,P=0.183)、吸收胎发生率(χ^(2)=1.109,P=0.894)组间差异无统计学意义;着床数(χ^(2)=9.964,P=0.041)、胎仔平均体重(χ^(2)=48.968,P=0.000)、胎仔平均身长(χ^(2)=48.264,P=0.000)、死胎发生率(χ^(2)=196.912,P=0.000)组间差异均有统计学意义,但各剂量组着床数、胎仔平均体重、胎仔平均身长、死胎发生率与阴性对照组差异无统计学意义(P=1.000、1.000、0.592,0.553、0.389、0.193,0.928、0.650、0.518,0.758、0.221、0.863)。2500 mg/kg体重组观察到1例短指,剂量组未观察到其它类型外观畸形;阴性对照组、1250 mg/kg、2500 mg/kg和5000 mg/kg体重组胸骨骨化不全发生率分别为15.2%、21.3%、20.0%和25.0%,组间差异无统计学意义(χ^(2)=3.421,P=0.332);剂量组未观察到胎仔内脏发育异常。结论肉苁蓉干膏粉无母体毒性,对SD大鼠胎仔发育无抑制作用,无致畸性毒性作用,不引起致畸作用NOAEL值为5000 mg/kg体重。

基于抗氧化谱效关系的肉苁蓉质量标志物研究

目的:建立基于抗氧化谱效关系的肉苁蓉质量标志物(Q-marker)研究方法,为其药效物质基础及质量控制研究提供依据。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC)建立10批肉苁蓉指纹图谱。利用H2O2建立细胞氧化损伤模型,以活性氧自由基半数抑制率、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶含量为药效指标测定肉苁蓉抗氧化能力。通过主成分分析、皮尔逊相关性分析和偏最小二乘法-回归分析共同构建谱效关系,并对筛选出的活性成分进行药效验证。结果:建立了肉苁蓉的UPLC指纹图谱,共确定了17个共有峰。基于谱效关联分析筛选出9个成分,活性成分验证结果显示京尼平苷酸、8-表马钱子酸、松果菊苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、管花苷A具有抗氧化活性且呈浓度依赖性。结论:基于谱效关系探讨了肉苁蓉的Q-marker,为其药效物质基础及质量标准提升提供参考。

肉苁蓉的主要化学成分及生物活性研究进展

肉苁蓉始载于《神农本草经》,是一味补益药,具有补肾壮阳,益精血,润肠通便的作用。主要化学成分有苯乙醇苷类、环烯醚萜及其苷类、木脂素及其苷类、多糖类、核苷、氨基酸及含氮类化合物、单萜类及有机酸类成分,具有补肾、保护肝脏、润肠通便、抑制细胞增殖等多种生物活性。就肉苁蓉的主要化学成分及生物活性等方面的研究进展进行综述,为新药研发提供参考。

中药肉苁蓉治疗帕金森病的药理机制研究进展

帕金森病(PD)是一类属于锥体外系的神经系统退行性疾患,对人们日常生活造成极大影响,以中脑黑质致密区多巴胺神经元丢失和神经元胞质内出现嗜酸性包涵体为病理特征。肉苁蓉作为治疗帕金森病常用中药,具有补肾阳、益精血、润肠通便之功效。该药药理作用十分广泛,查阅相关文献,发现肉苁蓉可通过多靶点、多途径治疗帕金森病,能有效延缓病情进展。肉苁蓉中含有多种有效成分,主要包括毛蕊花糖苷、松果菊苷、槲皮素、花生四烯酸、β-谷固醇、去水杨酸、丁香二酚、紫杉醇等,发挥抗氧化应激、调节神经炎症、调控细胞自噬、抑制神经细胞凋亡及调节肠道菌群等作用,且治疗帕金森病疗效显著。该文总结了肉苁蓉中有效成分治疗帕金森病的药理机制,为肉苁蓉治疗帕金森病的未来研究方向提供参考。

肉苁蓉?咀饮片最佳规格优选研究

目的:优选肉苁蓉?咀饮片最佳规格。方法:将肉苁蓉制备成不同规格?咀饮片,以肉苁蓉传统厚片作为对照组,对比?咀饮片性状、休止角、煎出率及毛蕊花糖苷和松果菊苷转移率。结果:除“排列成波状环纹”特征外,?咀饮片保留了传统饮片的其他性状特征。?咀规格为5 mm和8 mm立方块的休止角相近且较小,这表明其具有较好的流动性。?咀规格为8 mm的立方块与传统饮片的质量属性较为接近,且均一性显著优于传统饮片。对15批次的传统饮片与?咀饮片进行比较发现,8 mm立方块的肉苁蓉?咀饮片与传统饮片质量属性基本一致。结论:8 mm的立方块可达到较佳的流动性、均一性、质量属性一致性,适宜于做肉苁蓉?咀饮片规格。

肉苁蓉治疗阿尔茨海默病的作用机制研究进展

肉苁蓉(Herha Cistanches)又名金笋、地精、习称、大芸,为列当科肉苁蓉属植物肉苁蓉的干燥带鳞叶的肉质茎,具有补肾阳、益精血、润肠通便等功效,为著名补益中药。现代药理学研究证实,肉苁蓉及其提取物具有显著的神经保护作用,可用于防治阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)、帕金森病(Parkinson's disease,PD)、亨廷顿病(Huntington's dis⁃ease,HD)、肌萎缩侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis,ALS)等神经退行性疾病。AD是一种常见的慢性疾病,主要发生在中老年人群中,随着人口老龄化,该病带来的各种负担愈发严重。目前,鲜有对肉苁蓉及其提取物防治AD的系统评价。现有实验研究发现,肉苁蓉及其提取物除了具有抗炎、抗氧化、抗神经元损伤、免疫调节作用、保护线粒体功能外,还有良好的降血糖活性,可以参与肠道菌群、自噬、性激素等生理调节。对肉苁蓉及其提取物在AD中的作用机制及治疗靶点的研究,将为临床提供新的治疗思路,具有重要意义。对肉苁蓉及其提取物的广泛生物活性展开综述,全面回顾了肉苁蓉及其提取物在防治AD中的可能作用机制,并提出几点展望。

肉苁蓉药材本草考证

通过查阅本草古籍,对肉苁蓉的产地、基原、功效主治、性味归经和用药禁忌进行考证。结果发现,古籍中肉苁蓉产区以内蒙古及甘肃产区为最佳,品质方面首推肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma.,其主治病症主要涉及妇科和内科,主治及功效中的诸多内容均未被纳入《中华人民共和国药典》,应结合基础研究及临床试验加以开发。《中华人民共和国药典》中对肉苁蓉性味归经进行了删减,且并未载其用药禁忌。

肉苁蓉治疗肾阳虚有效部位筛选

目的研究肉苁蓉不同提取部位对肾阳虚大鼠的改善作用,明确其补肾壮阳有效部位。方法采用水提醇沉法制备肉苁蓉总多糖部位,大孔吸附树脂柱富集肉苁蓉总寡糖和总苷部位。灌胃丙基硫氧嘧啶制备肾阳虚大鼠模型,分别予肉苁蓉总多糖143 mg/kg、总寡糖110 mg/kg、总苷82 mg/kg,ELISA测定各组大鼠血清三碘甲状腺原氨酸(T_(3))、甲状腺素(T_(4))、促甲状腺激素(TSH)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、皮质醇(Cor)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、睾酮(T)、雌二醇(E_(2))水平,计算cAMP/cGMP比值,RT-PCR测定大鼠下丘脑促甲状腺素释放激素(TRH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA表达,HE染色观察大鼠右肾组织病理改变情况。结果肉苁蓉总苷、总多糖和总寡糖对肾阳虚大鼠血清T_(3)、E_(2)、cGMP含量均表现出很好的回调作用,肉苁蓉总苷、总寡糖对肾阳虚大鼠血清T_(4)、TSH、ACTH含量及TRH、CRHmRNA表达有显著回调作用。结论肉苁蓉总苷、总多糖、总寡糖对大鼠肾阳虚症状有改善效果,其中总苷效果最佳。

专利中药复方治疗功能性便秘的用药规律及机制研究

目的探讨专利中药复方治疗功能性便秘(functional constipation)的用药规律及作用机制。方法检索国家知识产权局中国专利公布公告网中治疗功能性便秘的中药复方专利,运用Excel表和中医传承计算平台进行用药频数统计、关联分析、聚类分析等;通过网络药理学方法探讨核心高频药组治疗功能性便秘的作用靶点及机制,最后进行分子对接验证。结果纳入中药复方专利72项,涉及中药262味,高频药物为白术(26次,36.11%)、甘草(24次,33.33%)等;以补虚、理气、清热、泻下、化湿和活血化瘀药为主;核心高频药物组是肉苁蓉-当归-白术;核心高频药物组肉苁蓉-当归-白术治疗功能性便秘的主要活性成分可能为槲皮素、β-谷甾醇、豆甾醇等,主要靶点为蛋白激酶B1(AKT1)、热休克蛋白90AA1(HSP90AA1)、MYC、缺氧诱导因子1亚基α(HIF1A)、肿瘤抑制因子P53(TP53)和细胞周期蛋白1(CCND1)等,主要的作用通路为磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)、糖基化终产物(AGE)/糖基化终产物受体(RAGE)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素(IL)-17、缺氧诱导因子(HIF)-1信号通路等。结论专利中药复方主要通过补虚、理气、清热、泻下、化湿和活血化瘀治疗功能性便秘,核心高频药组肉苁蓉-当归-白术可能通过恢复肠道动力、调节肠道菌群、抑制炎症反应等作用治疗功能性便秘。

基于R语言探讨古代中医文献中治疗骨质疏松症的中药用药规律

【目的】挖掘分析古代中医文献中采用中药治疗骨质疏松症的用药规律,为临床运用中药治疗骨质疏松症提供参考。【方法】以“骨痿”“骨枯”“肾痿”为关键词,计算机检索第5版《中华医典》中采用内服中药治疗骨质疏松症的方剂。采用Excel软件对方药信息进行提取,采用R语言对中药进行使用频次分析、关联规则分析及聚类分析。【结果】共筛选得到治疗骨质疏松症的方剂88首,中药183味,总频次为902次;高频中药(使用频次≥10次)有25味,使用频次居于前5位的依次为牛膝、熟地黄、菟丝子、肉苁蓉、杜仲。高频药物根据其功效进行分类,主要可分为补虚药、利水渗湿药、收涩药、清热药、温里药、祛风湿药。关联规则分析得到281条关联规则,其中关联度最高的前5个药对为熟地黄-牛膝、菟丝子-肉苁蓉、菟丝子-牛膝、肉苁蓉-牛膝、杜仲-牛膝。关联规则分析和聚类分析形成以牛膝、熟地黄、菟丝子、肉苁蓉、杜仲为基础的核心药物组合。【结论】古代医家采用中药治疗骨质疏松症以补肾为基本原则,酌情加入针对湿浊、血瘀、脾虚等病机的中药。挖掘得到的核心药物组合可为骨质疏松症的临床治疗提供一定的参考。

肉苁蓉多糖对便秘型肠易激综合征大鼠的影响

目的探讨肉苁蓉多糖(简称CDPS)对便秘型肠易激综合征(IBS-C)大鼠的影响。方法将SD大鼠分为对照组(20只)和造模组。造模组大鼠灌胃0~4℃生理盐水2 mL(每天1次,连续14 d)诱导IBS-C模型。将造模成功的大鼠分为模型组、阳性对照组(枸橼酸莫沙必利,1.35 mg/kg)和CDPS低、高剂量组(50、100 mg/kg),每组20只。各药物组大鼠灌胃相应药液,对照组和模型组大鼠灌胃等体积水,每次1次,持续28 d。检测各组大鼠的粪便含水量、血清5-羟色胺(5-HT)含量、炭末推进率,观察其结肠组织病理形态并检测结肠组织中神经生长因子(NGF)、原肌球蛋白受体激酶A(TrkA)mRNA及蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠的粪便含水量和炭末推进率均显著降低(P<0.05),结肠组织黏膜肌层断裂,炎症细胞浸润和细胞水肿明显,血清5-HT含量和结肠组织中NGF、TrkA mRNA及蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,各药物组大鼠的粪便含水量和炭末推进率均显著升高(P<0.05),结肠组织病理改变明显减轻,血清5-HT含量和结肠组织中NGF、TrkA mRNA及蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05),其中,阳性对照组和CDPS高剂量组的上述指标普遍接近于对照组(P>0.05)。结论CDPS可缓解IBS-C大鼠的症状,该作用可能与NGF/TrkA信号通路被抑制有关。

动力学结合现代技术的肉苁蓉润制过程表征

目的:利用现代技术直观、量化表征肉苁蓉的润制过程,为肉苁蓉润制关键技术参数的确定提供依据。方法:构建肉苁蓉吸水和膨胀动力学曲线并进行非线性拟合,研究肉苁蓉润制动力学特征;采用低场核磁共振及其成像技术(LF-NMR/MRI)和物性分析技术,分别研究肉苁蓉润制过程的水分相态及其分布状态变化、物性特性变化;采用高效液相色谱法(HPLC)分析肉苁蓉不同润制时间指标成分含量变化。结果:肉苁蓉润制的吸水和膨胀过程符合一级动力学方程。LF-NMR/MRI结果显示随着润制时间的延长,水分逐渐由外周向内部渗入,结合水比例逐渐减少,自由水比例逐渐增多。随着润制时间的增加,各物性指标逐渐下降。润制36 h内,肉苁蓉浸出物有下降趋势,指标成分含量未发生明显变化。结论:动力学结合LF-NMR/MRI和质构仪分析技术可直观量化表征肉苁蓉的润制过程,为阐明肉苁蓉润制传统经验的科学内涵提供了科学依据。

响应面法优化内蒙古肉苁蓉多糖提取工艺

目的:确定热水浸提法提取内蒙古肉苁蓉多糖的最优条件。方法:选取热水浸提法提取内蒙古肉苁蓉多糖,把内蒙古肉苁蓉作为原材料,以内蒙古肉苁蓉多糖提取率为响应值,通过单因素实验找到最优单因素条件,再将单因素实验结果利用响应面法对内蒙古肉苁蓉多糖的提取条件进行优化。结果:实验结果表明,热水浸提法的最优条件是:液料比为45∶1(mL∶g)、热水浸提温度为100℃,时间为130 min、乙醇醇沉浓度为100%。在此条件下,内蒙古肉苁蓉的多糖提取率为11.207%,与响应面法预测值11.609%非常接近。结论:通过实验证明采用响应面法对内蒙古肉苁蓉多糖提取工艺得到的优化条件合理可靠,可为下一步工业化生产提供可靠的依据。

肉苁蓉分离部位通便作用的实验研究

目的:寻找肉苁蓉的通便有效成分。方法:采用不同溶剂提取、分离及重结晶等方法将肉苁蓉分为半乳糖醇等4个组份,进行对小鼠通便时间的影响实验。结果:半乳糖醇具有显著的缩短通便时间作用,其他各组份作用不显著。结论:半乳糖醇为肉苁蓉的主要通便有效成分。

肉苁蓉总甙的抗脂质过氧化作用及抗辐射作用

肉苁蓉总甙（ＧＣｓ）可明显增强小鼠红细胞ＳＯＤ活性，降低血清ＭＤＡ含量，提高肝、肾组织中ＤＮＡ，ＲＮＡ含量，能明显促进受６０Ｃｏ照射损伤后小鼠红细胞ＳＯＤ活性及脾核酸含量的恢复，降低肝ＭＤＡ含量，提示ＧＣｓ对核酸的保护作用及辐射防护作用与其抗脂质过氧化作用密切相关。

基于网络药理学探讨肉苁蓉治疗血管性痴呆的作用机制

目的基于网络药理学探讨肉苁蓉治疗血管性痴呆(vascular dementia,VD)的作用机制。方法采用TCMSP分析平台检索中药活性成分和中药靶点,利用GeneCards数据库和OMIM数据库筛选肉苁蓉治疗VD的作用靶点,构建蛋白互作网络(PPI),进行GO功能富集分析及KEGG通路富集分析,构建可视化的中药-疾病靶点相关的信号通路。结果从肉苁蓉中筛选出4个有效成分,作用于60个血管性痴呆靶点,肉苁蓉治疗VD的核心基因主要有IL6、VEGFA、EGFR、CASP3、MYC、CCND1、FOS、PPARG、AR、RELA、NOS3、ICAM1等。中药-疾病靶点涉及的GO功能主要包括DNA结合转录激活活性、核受体活性、转录因子活性,直接配体调节的序列特异性DNA、乙酰胆碱受体活性、泛素蛋白连接酶结合、RNA聚合酶II转录因子结合等。中药-疾病靶标涉及的KEGG通路主要包括流体剪切应力与动脉粥样硬化信号通路、前列腺癌信号通路、糖尿病并发症中AGE-RAGE信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、癌症中的蛋白多糖信号通路、PI3K-Akt信号通路、肝细胞癌信号通路、细胞凋亡信号通路、丙肝信号通路等。结论基于网络药理学探讨了肉苁蓉治疗血管性痴呆的分子机制,为中药现代化研究提供了理论基础。

三种肉苁蓉补肾壮阳作用的比较

口服三种肉苁蓉的水煎液均能显著增加小白鼠体重、延长持续游泳时间、提高耐缺氧能力；使“阳虚”小白鼠降低的体重增长率、耐冻时间、红细胞ＳＯＤ活力和血红蛋白含量在一定程度上恢复正常。

肉苁蓉挥发性化学成分分析

报道了用同时蒸馏-萃取法提取肉苁蓉挥发性物质,测得肉苁蓉挥发油的含量为3.5％;利用GC/MS法分离确认出24种化学成分;用峰面积归一化法得出各化学成分在挥发油中的相对百分含量,其中主要成分为丁香酚,占总挥发油的83.60％;又用单离子法分离出丁香酚,并用IR,EI-MS法对其进行分析确认。