沙田柚F-box蛋白基因的克隆及序列分析

采用生物信息学方法,对沙田柚[Citrus maxima(Burm.)Merr.cv.Shatian Yu.]F-box蛋白基因编码的蛋白质从序列特征、理化性质、跨膜结构域、高级结构及功能域等方面进行了预测和分析。结果表明,该基因全长为1 427 bp(Gen Bank登录号为KR363148),开放阅读框(ORF)全长为1 101 bp,共编码366个氨基酸,编码蛋白质的分子质量43.09 ku,理论等电点5.15。沙田柚F-box蛋白基因编码蛋白含有一个植物F-box蛋白家族的保守结构域,为亲水性非分泌不稳定蛋白,不跨膜运动,共有30个可能的磷酸化位点。氨基酸序列分析表明,其编码的氨基酸与甜橙(Citrus sinensis,KDO71185)和克莱门柚(Citrus clementina,XP_006425495)F-box蛋白的同源性分别为99%、98%。系统进化树表明,沙田柚F-box蛋白基因与与甜橙(Citrus sinensis,KDO71185)和克莱门柚(Citrus clementina,XP_006425495)亲缘关系很近,属于同一进化分支。

不同施肥处理对枳及柠檬容器苗生长的影响

研究9个不同施肥处理对枳及柠檬容器苗生长的影响。结果表明:不同施肥处理对枳容器苗的苗高、地径、分枝高度及嫁接后柠檬苗的发芽率、株高、茎粗、分枝数及生物量都存在显著差异;不同施肥处理对枳及柠檬容器苗综合表现最好的为T4(撒施柠檬专用肥1.6 g)处理,其次是T2(撒施尿素0.6 g)、T3(撒施柠檬专用肥0.8 g)处理,表现最差的是T8(浇施5%柠檬专用肥)和T7(浇施3%柠檬专用肥)处理。在一定施肥浓度范围内,施肥对嫁接后柠檬容器苗的生物量积累有明显促进作用。柠檬容器苗培育时建议采用在基质中撒施柠檬专用肥1.6 g。

中心组合设计优化超声提取柠檬籽中的柠檬苦素

目的采用中心组合设计优化超声提取柠檬Citrus limon(L.)Burm.f.籽中的柠檬苦素。方法以乙醇为提取溶剂,超声提取柠檬籽中的柠檬苦素。在单因素试验基础上,中心组合设计对提取工艺进行优化。结果最佳条件为液固比17∶1,70%乙醇,提取时间33 min,提取温度50℃,平均提取率达0.454 5 mg/g。结论该方法重复性较好,可为柠檬苦素的提取提供一种新方法。

响应面法优化蜜橘柠檬复合饮料制作工艺

以蜜橘和柠檬为原料,研究蜜桔柠檬复合饮料的制作工艺,并对工艺进行优化。采用Design-Expert7.0软件设计实验并通过蜜橘柠檬复合饮料的感官评分作为指标,并对实验数据进行响应面分析,结果表明:蜜橘柠檬鲜果打浆比例3∶1、蜜橘柠檬汁35.33%、白砂糖5.22%、柠檬酸0.11%。在此条件下蜜橘柠檬汁复合饮料感官评分值为85.62分,得到的这款饮料色泽风味佳、口感好,适合于工业化生产。

柑橘木虱胁迫对柠檬叶代谢组挥发性成分的影响

柑橘木虱是柑橘黄龙病的自然传播媒介,为了解柑橘应对柑橘木虱胁迫的代谢组学变化,本文以柠檬为受体,进行柑橘木虱取食胁迫处理,分别于胁迫不同阶段(0、12、24、48、72和96h)采集柠檬叶为试验材料,静态顶空-气相色谱-质谱联用检测其挥发性物质。主要结果如下:结合保留指数从柠檬叶中共检出37种化合物,包含15种萜类,6种醛类,6种醇类等;含量较高的挥发性成分有(+)-柠檬烯、桧烯、月桂烯等;受柑橘木虱取食胁迫后,柠檬叶中的挥发性化合物含量产生明显变化,萜类、醛类和醇类物质相对含量均呈升高趋势。桧烯、里那醇、(+)-香茅醛和橙花醇4种物质的含量在柑橘木虱取食胁迫96h时分别升高2.1,2.9,7.8和3.2倍;α-石竹烯的含量下降1.9倍。(+)-柠檬烯、β-红没药烯和反式-α-香柑油烯等物质含量变化不明显,胁迫后的样品中新检出玫瑰呋喃氧化物、香叶醇和2-异丙基-5-甲基茴香醚等3种化合物。皮尔森相关性分析表明,桧烯、β-蒎烯、甲基庚烯酮、月桂烯、水芹烯等9种物质含量与柑橘木虱胁迫时间呈极显著正相关(P<0.01),α-蒎烯、莰烯、松油烯、γ-萜品烯等10种物质含量与柑橘木虱胁迫时间呈显著正相关(P<0.05),而邻甲氨基苯甲酸甲酯含量与柑橘木虱胁迫时间呈极显著负相关(P<0.01)。聚类和热图进一步分析表明,胁迫不同时间的样品具有显著差异,且胁迫时柠檬叶挥发性化合物大部分呈现上升的趋势,尤其是胁迫48、72和96h后,物质含量显著增加。研究结果为了解柑橘应对柑橘木虱等生物胁迫的代谢组学变化及柑橘木虱的生物防治提供了理论基础。

柠檬遗传转化体系的建立及优化

以pCAMBIA1391Z为载体,对农杆菌EHA105介导的柠檬[Citrus limon(L.)Burm.f.]遗传转化体系进行了优化。结果表明,培养基中植物激素的浓度、农杆菌浸染浓度以及浸染后共培养的时间对柠檬的再生和遗传转化效率均有明显影响。1.0 mg/L 6-BA和0.1 mg/L的NAA有利于柠檬上胚轴不定芽的再生,并且再生芽的质量最佳。农杆菌的浸染浓度以OD600 nm=0.6为最佳,浸染后共培养2 d,在含5.0 mg/L潮霉素的筛选培养基上筛选,有利于柠檬不定芽再生率的提高。

铁锌锰元素对矫治柠檬缺铁黄叶的研究

对缺铁尤力克柠檬幼苗，喷施０．３％尿素铁或０．３％硫酸亚铁或与０．２％硫酸锌、０．２％硫酸锰３者混合喷施，可获得较好的矫治缺铁复绿效果。其中，尿素铁优于硫酸亚铁，尤以尿素铁与硫酸锌、硫酸锰混合喷施的效果最佳，其叶绿素含量可恢复到正常幼苗叶的水平。同时还探讨了有关矫治缺铁复绿的机理，铁锌锰元素间的相助作用和拮抗作用等问题。

木里柠檬叶精油化学成份的研究

用毛细管气相色谱-质谱-计算机数据联用技术、标准品叠加法和毛细管保留指数定性法分析了木里柠檬(Citrus Liilion(L.)Burm.f.)的叶精油化学成分。从水蒸汽蒸馏叶精油被分离的110多个色谱峰中鉴定了41种化合物,并测定了其相对含量。其主要成分是香叶醛(21.3058％)、橙花醛(13.9580)、d-柠檬烯(9.8359)、β-水芹烯(9.3297)、橙花醇(4.4657)、乙酸橙花酯(2.8162)、香茅醛(2.6338)、乙酸芳樟酯(2.2179)、α-水芹烯(2.0390)、香芹酮(2.0213)、6-甲基-5-庚烯-2-酮(1.7250)和乙酸香叶酯(1.6586)。被鉴定的成份占总成份的96.6652％

木里柠檬果皮精油化学成分的研究

用毛细管气相色谱-质谱-计算机数据联用枝术、标准品叠加法和毛细管保留指数定性法分析了木里柠檬(Citrus Limun(L.)Burm.f.)的果皮精油化学成分。从蒸馏精油被分离出的78个色谱峰中鉴定了39种化合物,并测定了其相对含量。其主要成分是d-柠檬烯(69.4406％);;γ-萜品烯(8.3169);β-水芹烯(6.5947);芳樟醇(3.2172);香叶醛(1.7618);橙花醛(1.3422);α-蒎烯(1.3488);香叶烯(1.2371)和α-水芹烯(1.5753)。被鉴定的成分占总成分的99.1646％。比较了压榨法、蒸馏法和蒸馏-萃取法所得精油的化学成分,并与市售冷磨柠檬油和尤力克蒸馏油的主要成分进行了比较。

氮磷钾肥水平对柠檬产量和流胶病的影响

尤力克柠檬（ＣｉｔｒｕｓｌｉｍｏｎＢｕｒｍ）根际施用适当氨肥和提高钾肥用量，可显著增加柠檬产量。偏施氮肥则导致柠檬流胶病大量发生，但增大施钾量，可有效地控制流胶病发生。

柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及新城疫病毒抑制作用的初步研究

目的:初探柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑制作用及其机制,温度、酸碱度对提取物作用的影响;观察柠檬提取物对新城疫病毒的抑制作用。方法:利用滤纸片扩散法测定不同提取物浓度的相对抑菌活性,不同温度、酸碱度环境提取物相对抑菌活性。利用Vero细胞为载体观察提取物对新城疫病毒的抑制作用。结果:柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有显著的抑菌活性,其活性不受酸碱度影响,但受温度影响;提取物对新城疫病毒具有直接抑制作用,对该病的预防及治疗作用则不明显。结论:柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及新城疫病毒均具抑制作用。

柠檬挥发油成分的气相色谱–质谱分析

目的对柠檬挥发油成分进行分析。方法采用水蒸气蒸馏提取柠檬挥发油成分,气相色谱–质谱联用技术分离,面积归一化法分析。结果共分离出100余种成分,鉴别出其中40种成分,其量占挥发油总量的93.954%。结论柠檬挥发油中主要成分为柠檬烯、β-蒎烯等。

中药减压提取沸点与饱和蒸气压关系影响因素研究

目的研究减压提取工艺条件下水和不同体积分数乙醇沸点、饱和蒸气压的相关性,并比较不同药材(穿心莲、红花、白芷、钩藤、黄芩、丹参、陈皮)的加入和不同粒径药材的加入对饱和蒸气压的影响。方法采用理论计算和仪器实验测定结合方法,获取不同沸点下和饱和蒸气压的理论值及实测值,并进行统计分析。结果得到饱和蒸气压与溶剂乙醇体积分数和沸点之间的回归方程P=76.467 1+0.035 2 T2+1.201 0TV-30.749 4V2-3.123 9T-14.966 7V;实验条件下,水和不同体积分数乙醇纯溶剂饱和蒸气压理论值较实测值小;加入药材后饱和蒸气压实测值比纯溶剂实测值增大;药材粉碎后,提取温度达到一定温度后饱和蒸气压会降低。结论药材的加入和粉碎对溶剂饱和蒸气压有影响,但其变化范围小。