川佛手化学成分研究(Ⅰ)

目的研究川佛手Citrus medica var.sarcodactylis的化学成分。方法对川佛手95%乙醇提取物的石油醚和醋酸乙酯部分进行色谱分离,根据光谱数据和理化性质确定各化合物的结构。结果分离得到5种已知成分,分别为柠檬内酯(limettin,Ⅰ)、6,7-二甲氧基香豆素(scoparone,Ⅱ)、5-异戊烯氧基-7-甲氧基香豆素(7-methoxy-5-prenyloxy-coumarin,Ⅲ)、白当归素(byak-angelicin,Ⅳ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅴ)。结论化合物Ⅳ为首次从芸香科植物中分离得到,其余4个化合物为首次从川佛手中分离得到。

佛手化学成分的研究

目的 :对佛手的化学成分进行研究。方法 :采用硅胶柱层析 ,SephadexLH 2 0凝胶柱层析对佛手化学成分进行分离 ,通过理化性质和波谱分析方法鉴定其结构。结果 :从佛手中分离得到的 9个化合物 ,分别为 5 甲氧基糠醛 (Ⅰ ) ;5 羟基 2 羟甲基 4H 吡喃 4 酮 (Ⅱ ) ;香叶木素 (Ⅲ ) ;香叶木苷 (Ⅳ ) ;黄柏酮 7 酮 (Ⅴ ) ;Aviprin(Ⅵ ) ;3 甲氧基 4 羟基苯丙烯酸 (Ⅶ ) ;3 甲氧基 4 羟基苯甲酸 (Ⅷ )和 3,4 二羟基苯甲酸 (Ⅸ )。结论 :化合物I为一新天然产物 ,化合物Ⅱ ,Ⅳ Ⅸ首次从该属植物中发现 ,化合物Ⅲ为首次从该种植物中发现。

佛手挥发油不同提取方法的比较研究

应用冷榨法、水蒸汽蒸馏法、有机溶剂回流法、同步蒸馏-萃取法提取佛手油,并比较了不同提取方法的佛手油得率。采用GC和GC-MS分析方法分析了这几种提取方法对佛手油化学成分的影响。结果表明,水蒸汽蒸馏法与其它方法相比,具有提取快速完全、节省时间、成本低,所提取的有效成分含量较高等优点。

川佛手化学成分研究(Ⅱ)

目的研究芸香科柑橘属植物川佛手Citrusmedica var. sarcodactylis的化学成分,为该药材的开发利用和质量评价提供依据。方法采用各种色谱技术进行分离纯化,通过理化常数测定和波谱分析进行。结果从川佛手中又分离得到7个化合物,其结构鉴定为:5-羟基-7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素(sibiricol,Ⅵ)、6-羟基-7-甲氧基香豆素(7-methylesculetin,Ⅶ)、佛手柑内酯(bergapten,Ⅷ)、Sigmasteryl acetate(Ⅸ)、5-甲氧基-糠醛(5-methoxyfurfural,Ⅹ)、柠檬苦素(limonin,Ⅺ)、胡萝卜苷(daucosterol,Ⅻ)。结论化合物Ⅵ、Ⅶ、Ⅸ为从芸香科植物中首次分离得到。

佛手化学成分研究

从佛手(Citrus medica L.var.sarcodactylis)乙醇提取物中分得3个化合物,经理化鉴定和光谱法确定其化学结构分别为柠檬内酯(Ⅰ),△^(5,22)-豆甾烯醇(Ⅱ)和棕榈酸(Ⅲ)。其中△^(5,22)-豆甾烯醇为首次从佛手中分离得到。

农杆菌介导佛手遗传转化主要影响因素的研究

采用根癌农杆菌介导的佛手叶盘转化法,在建立转海藻糖合酶基因(TPS)佛手体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行了研究。结果表明,佛手叶盘需在黑暗条件下MT培养基上预培养2-3d,与农杆菌共培养3d较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.6-0.8,感染时间20min;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)250mgL-1和羧苄青霉素(Cb)250mgL-1且延迟筛选时间4d最好;共培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮(AS)和400mgL-1半胱氨酸(L-Cys)对佛手遗传转化有明显的促进作用。经GUS报告基因和PCR技术检测,初步证实TPS基因已整合到佛手基因组中,且GUS报告基因瞬时表达率为5.9%。

金华佛手遗传多态性的RAPD分析与品种的分子鉴定

目的 通过对佛手 RAPD反应的优化 ,分析其遗传多态性 ,并对 3个品种作出了分子水平上的鉴定。方法RAPD反应在以下条件下进行 :10～ 10 0 ng/μL模板 DNA,3.0～ 5 .0 mm ol/ L Mg Cl2 ,2 0 0μm ol/ L d NTP,0 .2μm ol/ L 10 - m er Prim er,lunit Taq Polym erase/ 2 5 μL 反应体积。结果 从 38个引物中挑出 12个有效稳定的引物。用距离系数 UPGMA法聚类分析产生了树状图。根据 RAPD分析及形态学观察 ,品种白花青皮与白花白皮的亲缘关系较近。不同的品种 RAPD反应有各自独特的扩增带型。结论 本方法简单、高效 ,适宜用于中药佛手的遗传多态性和品种分子鉴定。

广佛手主要病害及综合防治

目的 制定广佛手病害的综合防治措施 ,以降低病害 ,促进广佛手生产的发展。方法 文献查找和实地调查。结果 综述了广佛手主要病害衰退病、黄龙病、炭疽病及溃疡病的发病状况和防治措施 ,分析了其发病原因和传播方式 ,制定了广佛手病害的综合防治措施。结论 认为广佛手病害的防治应采取预防为主、综合防治的原则 ,将农业防治、生物防治和药剂防治相结合。

佛手茎尖微嫁接技术研究

目的探讨佛手茎尖微嫁接技术,为佛手无病苗木的培育奠定基础。方法黑暗条件下培养柠檬实生苗用作砧木,以佛手茎尖为接穗,采用倒"T"字形法进行茎尖微嫁接试验,并对影响嫁接成活率的因素进行研究。结果成功获得了佛手茎尖微嫁接苗,并优化了微嫁接的条件:选取苗龄为14d的柠檬实生苗为砧木,嫁接成活率较高;以带4个叶原基的佛手茎尖为接穗,效果较好,嫁接成活率可达65.2%;茎尖微嫁接后,切口外缠parafilm膜,能明显提高成活率。结论建立了佛手茎尖微嫁接的方法,获得了嫁接成活苗。

Gus基因在佛手叶片中的瞬间表达

采用基因枪法对佛手(Citrus medicaL.var.sarcodactylis(Noot)Swingle)嫩叶和老叶叶盘进行了Gus基因转化和瞬时表达研究,分析了轰击距离、叶片组织特性对转化效果的影响.结果显示,在7.584 5×106Pa轰击压力下,采用6 cm轰击靶距转化嫩叶可获得比较高的Gus基因瞬间表达频率;老叶的转化效果比嫩叶差;增加轰击次数并不一定能提高瞬间表达频率.

几种组织培养植物的染色体分析

本文报道了紫参（ＳａｌｖｉａｃｈｉｎｅｎｓｉｓＢｅｎｔｈ）、马铃薯（ＳｏｌａｎｕｍｔｕｂｅｒｏｓｕｍＬ．）、水稻（ＯｒｙｚａＳａｔｉｖｅＬ．）佛手（Ｃ、ＭｅｄｉｃａＬ．ｖａｒｓａｒｃｏｄａｃｔｙｌｉｓＳｗｉｎｇｌｅ）组织培养再生植株的染色体研究。结果表明：组培植物茎尖中的分裂相多于根尖。组培植物取材方便、材料丰富、不受生长周期限制，适用范围广。佛手染色体数属首次报道。

佛手化学成分的研究

目的对佛手的化学成分进行研究。方法运用硅胶柱层析、SephadexLH-20柱层析等手段进行分离,运用UV、IR、1HNMR、13CNMR、MS等波谱方法进行结构鉴定。结果共分离鉴定了6个化合物,分别为柠檬油素(Ⅰ)、5-异戊烯氧基-7-甲氧基香豆素(Ⅱ)、6,7-二甲氧基香豆素(Ⅲ)、7-羟基-6-甲氧基香豆素(Ⅳ)、4-甲氧基联卞(Ⅴ)、单棕榈酸甘油酯(Ⅵ)。结论化合物Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ为首次从该种植物中分离得到。

中药佛手柑中总黄酮含量的紫外分析

目的 :测定中药佛手柑中总黄酮的含量。方法 :以槲皮素为对照品 ,紫外分光光度法测定佛手柑中总黄酮的含量。结果 :佛手柑中总黄酮含量为 2 5 .6 5 % (RSD:0 .9% ) ,平均回收率为 10 2 .0 % (RSD:0 .7% )。结论 :该法简单便捷 ,结果准确 ,重现性好。

佛手种质资源遗传多样性的随机扩增多态性DNA分析

目的研究佛手种质资源多样性和遗传关系。方法采用随机扩增多态性随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析了佛手13份种质材料的亲缘关系。结果从110条引物中筛选出16条多态性高的引物,共扩增出185条DNA带,其中多态性带有168条,多态率为90.8%。通过聚类分析,在相似系数0.67的水平上将13份材料分为3类。结论佛手种质间存在较丰富的遗传多样性,聚类结果与以产地为依据对佛手进行品种类群划分较为一致。

响应面法优化佛手总黄酮提取工艺

以乙醇溶液为提取溶剂从佛手(Citrus medica var.sarcodactylis)中提取总黄酮,在单因素试验的基础上以佛手总黄酮提取率为指标,选择提取温度、提取时间和液料比3个因素进行Box-Behnken中心组合试验,优化佛手总黄酮的提取工艺条件。结果表明,优化的提取工艺条件为体积分数60%的乙醇溶液作提取溶剂、提取温度69℃、提取时间1.9 h、液料比V乙醇:m佛手粉=32:1(mL/g)、提取2次,该条件下佛手总黄酮提取率为0.565 9%。

减压内部沸腾提取川佛手多糖工艺的优化

目的优化减压内部沸腾提取川佛手多糖工艺。方法在单因素试验基础上,以多糖提取量为评价指标,乙醇体积分数、提取压力、提取温度、提取时间为影响因素,Box-Behnken响应面法优化工艺。结果最佳条件为乙醇体积分数50%,提取压力0.07 MPa,提取温度75℃,提取时间5 min,多糖提取量70.105 mg/g。结论该方法稳定可行,可用于减压内部沸腾提取川佛手多糖。

佛手的研究进展

本文综述了中药佛手化学成分和药理作用的研究成果，为该植物的进一步开发和利用提供科学依据，并对佛手目前存在的问题进行了讨论。

应用聚合酶链反应技术检测广佛手黄龙病病原的研究

[目的]建立鉴定广佛手黄龙病病原的有效方法,为无毒苗木的选育及病害防治提供早期诊断依据。[方法]在广佛手主要种植区进行调查,了解黄龙病的发病状况;根据柑桔黄龙病病原的DNA序列设计特异性的引物,对样品的DNA进行聚合酶链式反应(PCR)扩增。[结果]广东肇庆地区的广佛手出现类似柑桔黄龙病的症状,PCR检测结果表明,在表现发病症状的广佛手样品中有403 bp的特异性DNA片段出现,而健康的样品中则没有扩增出特征带,表明广佛手的感病症状是由黄龙病病原引起的。[结论]PCR技术是广佛手黄龙病病原鉴定的有效方法之一。

佛手组织培养和Km敏感性试验

以佛手的叶片、茎段为材料,建立了其组织培养系统。研究表明,B5比M S更适合作为诱导佛手愈伤组织的基础培养基,诱导愈伤组织效率较高的培养基配方为B5+2.0 m g.L-12,4-D+0.2 m g.L-1ZT和B5+1.5 m g.-L 12,4-D+1.0 m g.L-1NAA+0.4 m g.L-16-BA。在叶片对卡那霉素敏感性的试验中发现,叶片外植体预培养2 d后进行筛选的效果较好,卡那霉素的适宜筛选浓度为25 m g.L-1。

佛手乙酸乙酯提取液镇咳祛痰作用的实验研究

目的研究佛手乙酸乙酯提取液(EAEB)的镇咳祛痰作用。方法采用小鼠氨水引咳法观察EABA的镇咳作用;采用小鼠气道酚红排泄法观察药物的祛痰作用。结果EAEB灌胃给药(10 g/kg、20 g/kg)7 d能显著延长小鼠的咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数;同时增加小鼠呼吸道酚红排泌量。结论佛手乙酸乙酯提取液具有良好的止咳、祛痰作用。