评估茶枝柑黄龙病病情的3种定量方法的比较研究

【目的】为比较3种不同黄龙病病情定量评估方法的优劣之处。【方法】运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术,定量分析了柑橘黄龙病菌(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas)在茶枝柑的叶脉、叶肉、果皮、囊壁、果实中柱、树皮、根系等多个部位的分布情况,并进一步使用“橘园黄龙病病情指数分析、病树中CLas含量分析及黄龙病发病率检测”3种方法定量评估了新会区两个茶枝柑果园中黄龙病的发病情况。【结果】CLas在茶枝柑各部位含量的大小:叶脉>橘络>果实中柱>根>叶肉>绿树皮>果皮白瓤>囊壁>外果皮。茶枝柑叶脉中CLas 16S rDNA基因平均含量为10^(7.89)CN/g FW,茶枝柑外果皮中CLas 16S rDNA基因平均含量为10^(4.54)CN/g FW。三江镇联合村果园20棵茶枝柑的平均病情指数为52.75;随机采集叶片样品,可在其中18棵茶枝柑的叶脉样品中检出CLas,其16S rDNA平均含量为10^(5.57)CN/g FW;选择性采集显症叶片样品,可检测出20棵茶枝柑树的黄龙病发病率为100%。双水镇大树村果园20棵茶枝柑的平均病情指数为30.75;随机采集叶片样品,可在其中3棵茶枝柑的叶脉样品中检出CLas,其16S rDNA基因的平均含量为10^(4.99)CN/g FW;选择性采集显症叶片样品,可检测出20棵茶枝树的黄龙病发病率为100%。【结论】明确CLas在茶枝柑不同部位的定量分布情况,为茶枝柑的黄龙病定量分析提供了参考依据;3种定量评估茶枝柑黄龙病病情的方法各有优劣,综合运用才能更准确全面地反映出黄龙病在果园的发病情况。

不同柑橘砧木对砂糖橘果实品质的影响

砂糖橘是广东乃至华南地区栽培面积最大的柑橘品种,筛选合适的砧木对提高砂糖橘的产量、果实品质等园艺性状有重要意义。分别以粗柠檬、枸头橙、红?檬、枳橙、酸橘、香橙、枳壳、砂糖橘(本砧)8种柑橘砧木嫁接砂糖橘,研究不同砧木对砂糖橘果实内在和外在品质的影响。结果表明:与其他砧木相比,以枳橙为砧木的砂糖橘果面粗糙,果顶放射沟纹明显,果实亮度低;以香橙为砧木的果面较光滑,果皮较厚,果实红色度指标较亮,果实偏向圆形,果肉硬度显著大于其他砧的砂糖橘果肉硬度,中等糖酸型,但产量低;以枳壳为砧木的砂糖橘果皮色泽较亮,果皮较粗糙,果实纵横径、果肉汁胞、可滴定酸、单果重显著小于其他砧果实,可溶性糖和固酸比显著高于其他砧果实,单果轻,单株高产。说明枳砧的柑橘果实品质优于其他砧,可考虑作为广东省砂糖橘主产区的合适砧木。

干燥条件对茶枝柑果皮黄酮和精油成分的影响

采用HPLC对日晒和不同温度热风干燥下的茶枝柑果皮中的黄酮进行定性和定量分析,同时利用GC-MS检测分析了其精油成分及相对含量。结果表明,36、40、45和50℃干燥条件下的茶枝柑果皮的主要黄酮类化合物的含量与日晒相比有显著差异,42℃热风干燥与日晒相比则无显著差异。不同热风干燥条件下茶枝柑果皮精油的总离子流图基本一致,但是精油成分的总含量均显著高于日晒,此外精油成分的种类、数目、相对含量也存在一定的差异性,42℃热风干燥下的精油成分与日晒最为接近。结论:从保证茶枝柑果皮品质和节约能源提高生产效率的角度出发,42℃热风干燥是有利于保存茶枝柑果皮黄酮和精油成分的较佳干燥方式。

春季防虫网温湿度变化对砂糖橘春梢生长的影响

探讨了防虫网覆盖栽培技术对网室温湿度和砂糖橘(Citrus reticulata Blanco cv.Shatangju)春梢生长的影响。结果显示,40目透光防虫网对1-4月份(春季)砂糖橘春梢的生长具有促进作用;同时比较了防虫网内外温湿度变化对粉虱类、红蜘蛛类、潜叶蛾类数量的影响,认为防虫网对砂糖橘春梢生长的促进作用可能是通过对柑橘害虫和网室温湿度的调控这两个方面来实现的。

扁柑种质资源的SCoT分析

采用SCoT分子标记技术对广西地方柑橘26份种质材料进行遗传多样性研究。结果显示:9条引物共扩增出65条DNA片段,其中43条具有多态性,占66%。用UPGMA软件进行聚类分析,26份柑橘资源的遗传系数在0.70～1.00,说明SCoT标记能够有效揭示柑橘材料间的遗传多样性,为扁柑种质亲缘关系的鉴别和分类提供理论依据。

外源H_2O_2对低温胁迫下大红柑生长及叶片生理指标的影响

以陕西汉中地区栽培的柑橘品种大红柑秋梢为试材,采用Hoagland营养液培养方法,研究了外源过氧化氢(H_2O_2)对低温(4℃)胁迫下大红柑叶片生长状况及生理指标的影响,筛选缓解柑橘低温伤害的最佳H_2O_2处理浓度,并探讨外源H_2O_2处理对柑橘耐寒能力的影响机制。结果显示,随低温胁迫时间的延长,大红柑叶片卷曲和叶片细胞膜伤害程度逐渐加重。0.1和1.0 mmol·L-1H_2O__2处理均能缓解低温胁迫引起的大红柑叶片卷曲和萎蔫,但1.0 mmol·L-1H_2O_2比0.1 mmol·L-1H_2O_2缓解低温胁迫对大红柑的伤害效果更为显著。1.0 mmol·L-1H_2O_2显著降低叶片中相对电导率(REC)和丙二醛(MDA)含量的升高,减轻叶片细胞中超氧阴离子(O.-_2)和内源H_2O_2含量的积累,提高超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,从而降低低温对柑橘叶片细胞膜的伤害。较高浓度的外源H_2O_2不仅未起到缓解作用,反而产生了一定的毒害作用。

盐胁迫对坪山柚、福橘幼苗叶片蛋白质合成的影响

以坪山柚和福橘幼苗为材料,研究不同浓度NaC l胁迫8 d后叶片中可溶性蛋白质的变化.结果表明,盐胁迫下,坪山柚和福橘幼苗叶片中可溶性蛋白质含量增加并随NaC l浓度的增高而增至较高水平.相同浓度NaC l胁迫下,坪山柚叶片可溶性蛋白质含量增加幅度比福橘大,因此,可能是蛋白质的增加幅度而不是其绝对含量对坪山柚的耐盐性起作用.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)图谱分析显示,盐胁迫后,分子质量为80、67、54、32、28、18、17和16 ku蛋白质不受影响而稳定表达.福橘叶片中80、67、32、28、21、18、17、16和15 ku蛋白质为稳定表达的蛋白质.当NaC l浓度≥40 mmol.L-1时,诱导坪山柚叶片新产生35和24 ku 2种蛋白质;当NaC l浓度≥80 mmol.L-1时,诱导福橘叶片新产生72、43和24 ku 3种蛋白质,且它们的活性均随盐胁迫强度的增大而增强.

郁南沙糖桔果园土壤营养状况及结果树叶片营养动态变化

对广东郁南7个代表性沙糖桔果园土壤和结果树叶片营养状况进行了分析。结果显示,坡地果园的酸度比水田果园大。土壤质地以黏土和黏壤土为主,其中砂页岩坡地果园土壤质均为黏土,而花岗岩坡地为粉砂质黏土,水田改种的多为黏壤土。土壤有机质含量总体处于中等偏低水平。土壤全氮主要在中等至偏低水平之间;坡地果园的有效磷大多偏低,水田果园有效磷处于适量至高量水平;缺磷和缺钾的主要是坡地果园,而高磷和高钾的主要是水田果园。土壤交换钙、交换镁和有效硼普遍缺乏,有效铜、有效锌个别缺乏,部分果园缺有效铁,有效锰、有效硫含量普遍较高。沙糖桔结果树周年叶片营养状况存在动态变化,土壤有效磷和有效钾高的果园其叶片磷钾水平并不是全都相应提高。叶片氮、磷、钾、铜平均含量在开花期最高,此期氮、钾、铜含量均处于适量范围,磷则高于适量范围;叶片氮、磷平均含量在幼果期最低。叶片钙含量在果实成熟期最高。叶片镁含量低于适量水平的情况较多。叶片铁、锰含量从开花期最低至成熟期达到最高;地下水位较高的果园叶片锰含量全年每个生育期均较高。

不同采收期广陈皮药材三种黄酮类成分的含量测定

目的比较不同采收期广陈皮药材中三种黄酮类成分橙皮苷、川陈皮素、橘皮素的含量动态变化。方法采用加热回流法提取黄酮类成分,HPLC法测定含量,Platisil ODS柱(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相:甲醇(A)-乙腈(B)-4%醋酸水溶液(C),梯度洗脱;柱温30℃,流速1 mL/min。检测波长:0~50 min,283 nm;50~70 min,332 nm。结果橙皮苷、川陈皮素、橘皮素含量范围分别为:1.500%~3.060%;0.236%~0.453%;0.182%~0.344%;线性范围分别为:20μg^120μg;14.6μg^84.6μg;16μg^96μg;平均回收率分别为97.57%、102.34%、101.90%,RSD%分别为3.42%、1.29%、1.31%。结论三种黄酮类成分的含量随着采收期的推迟而逐渐下降。

气相色谱-质谱联用法分析茶枝柑籽油脂肪酸和不皂化物组成

目的研究茶枝柑籽油的脂肪酸和不皂化物成分。方法采用气相色谱-质谱联用(gas chromatographymass spectrometry,GC-MS)法对茶枝柑籽油脂肪酸和不皂化物成分进行分析和鉴定。结果共分离鉴定出13种脂肪酸,不饱和脂肪酸占67.62%,其中最主要的脂肪酸为亚油酸和油酸,相对含量分别为36.93%和26.91%。茶枝柑籽油的不皂化物以植物甾醇、生育酚和萜类化合物为主,其中β-谷甾醇含量最高,达2544.73mg/kg。结论本研究为茶枝柑籽油作为功能性油脂的开发利用提供了基础数据。

ICP-AES法测定砂糖橘中的矿质元素含量

以市售广西砂糖橘为材料,采用微波消解法处理样品,以电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP-AES）检测砂糖橘中Cu、Fe、Zn、Mn、Na、K、Ca、Mg、P等14种矿质元素的含量,结果表明,砂糖橘果皮和果肉中K、Ca、Mg、P等元素的含量较高;果肉中K含量尤其高,达到9 082.23 ug/g,而Na含量则很低,果肉中仅含80.45ug/g,元素Cr在果皮和果肉中均未检出;Sr在果肉中未检出,在果皮中含量为10.24ug/g;在砂糖橘果皮中B、Ca、Mg、Fe、Mn、Si、Zn 7种元素含量均高于果肉。加标回收率实验表明,各元素的相对标准偏差（RSD）为0.18%～4.77%,各元素的回收率在95.15%～106.1%之间,说明该方法测定广西砂糖橘中矿质元素具有较好的精密度和准确度。

分隔壁精馏塔分离椪柑皮精油中D-柠檬烯的模拟研究

应用Aspen Plus软件分析柠檬烯与椪柑(Citrus reticulata Blanco cv.Ponkan)皮精油其他主要成分的二元系统在0.1 k Pa下相平衡关系,并建立常规双塔精馏和分隔壁塔精馏分离(DWC)模型对椪柑皮精油提纯D-柠檬烯进行工艺模拟。通过三塔模型对分隔壁精馏塔进行计算,计算结果作为初值,利用Aspen Plus软件中Multifrac-Petlyuk模块对DWC进行严格模拟计算,并利用灵敏度分析回流比、进料位置、测线采出位置、互联位置以及互联物流气液相流率对分离效果及再沸器热负荷的影响,在优化条件下,得到纯度为97.20%的D-柠檬烯,回收率为93.75%。分隔壁塔精馏比双塔精馏的再沸器热负荷节省39.65%。

不同产地南丰蜜桔果实品质和蔗糖代谢相关酶研究

[目的]探索不同产地南丰蜜桔果实品质的差异及其与蔗糖代谢相关酶活性的关系,为指导南丰蜜橘的适度生产、保持地域产品声誉以及科学发展名贵稀有物种提供参考依据。[方法]研究分析了6个不同产地南丰蜜桔果实的主要品质特性和蔗糖代谢相关酶活性特征。[结果]南丰原产地的南丰蜜桔中总糖含量、尤其还原糖含量、糖酸比、固酸比均优于其他产地的果品,故体现出品质优异;不同产地南丰蜜桔中积累的可溶性糖种类含量存在差异;通过对蔗糖中性转化酶(NI)活性与还原糖含量、蔗糖合成酶(SS)活性和蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性与蔗糖含量的相关性分析发现,还原糖与NI活性存在极显著正相关,蔗糖含量与SPS和SS活性之和存在显著相关性。[结论]该研究结果为南丰蜜桔引种种植范围的界定及品质的保证提供了参考依据。

云浮砂糖橘病虫发生情况及生态控制措施

砂糖橘在广东省云浮市大农业产业中占有举足轻重的地位,南盛镇90%以上的农户种植砂糖橘,是农村经济发展的重要组成部分和农民主要收入来源之一。同时,随着砂糖橘栽培规模的不断扩大,砂糖橘病虫害为害逐渐加重。针对"中国砂糖橘第一镇"南盛镇砂糖橘主要病虫害及其发生规律和为害特点,采用无公害的生态控制措施控制砂糖橘主要病虫害,以保证"南盛"品牌砂糖橘的优良品质。

福橘大小自动分选控制系统的设计与实现

为了降低福橘分选的劳动力成本,提高分选效率和精度,以维控LEVI777A型触摸屏为人机界面,台达DVP12SA211T可编程控制器为控制核心,构建了一套基于机器视觉的福橘大小自动分选控制系统。该系统运行稳定、操作简便、人机界面友好,实现了福橘的自动化分选,有效提高了分选的精度与效率,降低了劳动力成本,具有良好的科研和经济价值。

黄龙病病菌侵染对茶枝柑果实类黄酮和挥发性物质的影响

为分析黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB)病菌侵染对茶枝柑(Citrus reticulata cv.chachiensis)果实品质的影响,采用高效液相色谱法和气相色谱-质谱联用技术,分析了花后180 d感病与正常茶枝柑果实中类黄酮物质和挥发性物质的差异。结果表明:茶枝柑感染黄龙病病菌后,果皮中橘皮素等4种聚甲氧基黄酮以及α-蒎烯、辛醛等39种挥发性物质含量显著升高,而氮甲基邻氨基苯甲酸甲酯、胡椒烯等16种挥发性物质显著降低;果肉中川陈皮素等2种聚甲氧基黄酮及D-柠檬烯、β-芳樟醇等27种挥发性物质含量显著降低。因此,黄龙病病菌侵染可能会显著影响茶枝柑果皮和果肉中的次生代谢,进而改变其苦味和香味品质,其改变可能与其感病防御应答机制有关。

AB-8大孔吸附树脂精制芦柑皮总黄酮及黄酮类化合物的分离

目的:研究AB-8大孔吸附树脂精制芦柑皮总黄酮的工艺条件及芦柑皮黄酮类化合物的分离纯化。方法:采用AB-8大孔吸附树脂动态法精制芦柑皮总黄酮,考察上样液总黄酮质量浓度、pH值、上样流速、洗脱液乙醇体积分数对吸附解吸性能的影响;然后将精制的芦柑皮总黄酮经硅胶柱层析、半制备高效液相等技术进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化学结构。结果:AB-8大孔树脂精制芦柑皮总黄酮的最佳工艺条件为上样液总黄酮质量浓度3.03 mg/mL、上样液pH 3.0、上样流速3.0 BV/h、洗脱液乙醇体积分数为90%,最优条件下可使芦柑皮总黄酮的纯度从17.8%提高到63.1%;此外,从精制的芦柑皮黄酮中分离到8个黄酮类化合物,分别鉴定为:橘皮素、川陈皮素、4’,5,7,8-四甲氧基黄酮、5-去甲基-橘皮素、橙黄酮、橙浸膏、柚皮苷、橙皮苷。结论:AB-8大孔树脂能很好地富集纯化芦柑皮总黄酮,该法简单、可行;从精制的芦柑皮黄酮中分离到8个黄酮类化合物,其中,4’,5,7,8-四甲氧基黄酮、5-去甲基-橘皮素、橙浸膏、柚皮苷、橙皮苷首次从芦柑皮中分得。

不同品种(系)南丰蜜橘叶片解剖结构比较

【目的】比较不同品种（系）南丰蜜橘叶片解剖结构的差异，评价其抗寒和耐旱性能，为南丰蜜橘引种及品种区域布局提供参考依据。【方法】按照常规石蜡切片程序制作切片，荧光显微镜下观测广西特色作物研究院资源圃内7个品种（系）南丰蜜橘成熟叶片的解剖结构，分别采用叶片组织结构紧密度（CTR）和隶属函数法评价其抗寒性和耐旱性。【结果】蜜广橘、柳城蜜橘、桂橘1号、南丰1号、特早南丰蜜橘、南丰2号和杨小2-6的叶片厚度为196.53-255.76μm，上表皮厚度为15.04-18.09μm，栅栏组织厚度为32.37-42.88μm，海绵组织厚度为131.55-181.05μm，下表皮厚度为13.08-15.77μm，CTR为16.60-19.43。抗寒性强弱排序为南丰2号＞南丰1号＞特早南丰蜜橘＞柳城蜜橘＞桂橘1号＞蜜广橘＞杨小2-6，耐旱性强弱排序为柳城蜜橘＞南丰1号＞蜜广橘＞南丰2号＞特早南丰蜜橘＞桂橘1号＞杨小2-6。【结论】南丰2号、南丰1号、柳城蜜橘和特早南丰蜜橘比桂橘1号和杨小2-6更抗寒和耐旱，蜜广橘较耐旱但不抗寒。在南丰蜜橘实际生产中需根据种植区域的地形、气候进行引种和推广，并制定合理的栽培管理措施。

利用地下室简易贮藏温州蜜柑试验初报

用不同药剂、不同浓度、不同包装方法处理温州蜜柑果实,在地下室进行贮藏试验。结果表明:贮藏期有2个烂果高峰,第1个为12月上旬,烂果率为1 0.13%～37.50%;第2个为次年3月下旬～4月上旬,烂果率为9.40%～23.17%。从防腐效果来看,用50%多菌灵500倍加2,4-D100mg/L混合液洗果的效果最好,贮后61d、167d的贮藏合格率分别为73.19%、36.23%。从包装方法来看,以用薄膜包单果的贮藏效果最好,大袋装多果贮藏后期腐烂率高。贮后61d,还原糖的含量有所增加,酸的含量略有下降,V_c的含量变化很小,果实风味有所改善;但贮藏时间过长(167d),糖、酸、V_c等营养物质含量明显下降,品质变劣。建议温州蜜柑果实贮藏以山地果实、精细采收、加药剂保护进行短期贮藏(60d左右)效果最佳。

新会柑皮HPLC指纹图谱的研究

目的:建立新会柑皮的HPLC指纹图谱。方法:RP-HPLC法,AgilentZorbaxC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),甲醇与水进行梯度冼脱,流速为1.0ml/min,检测波长为283nm。结果:在实验条件下测定不同的新会柑皮样品,在色谱图中得到11个共有指纹峰。结论:通过对色谱图的相对保留时间和相对峰面积进行相关性分析对比,建立了新会柑皮的HPLC指纹图谱,为新会柑皮的质量评价提供了科学的依据。