评估茶枝柑黄龙病病情的3种定量方法的比较研究

【目的】为比较3种不同黄龙病病情定量评估方法的优劣之处。【方法】运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术,定量分析了柑橘黄龙病菌(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas)在茶枝柑的叶脉、叶肉、果皮、囊壁、果实中柱、树皮、根系等多个部位的分布情况,并进一步使用“橘园黄龙病病情指数分析、病树中CLas含量分析及黄龙病发病率检测”3种方法定量评估了新会区两个茶枝柑果园中黄龙病的发病情况。【结果】CLas在茶枝柑各部位含量的大小:叶脉>橘络>果实中柱>根>叶肉>绿树皮>果皮白瓤>囊壁>外果皮。茶枝柑叶脉中CLas 16S rDNA基因平均含量为10^(7.89)CN/g FW,茶枝柑外果皮中CLas 16S rDNA基因平均含量为10^(4.54)CN/g FW。三江镇联合村果园20棵茶枝柑的平均病情指数为52.75;随机采集叶片样品,可在其中18棵茶枝柑的叶脉样品中检出CLas,其16S rDNA平均含量为10^(5.57)CN/g FW;选择性采集显症叶片样品,可检测出20棵茶枝柑树的黄龙病发病率为100%。双水镇大树村果园20棵茶枝柑的平均病情指数为30.75;随机采集叶片样品,可在其中3棵茶枝柑的叶脉样品中检出CLas,其16S rDNA基因的平均含量为10^(4.99)CN/g FW;选择性采集显症叶片样品,可检测出20棵茶枝树的黄龙病发病率为100%。【结论】明确CLas在茶枝柑不同部位的定量分布情况,为茶枝柑的黄龙病定量分析提供了参考依据;3种定量评估茶枝柑黄龙病病情的方法各有优劣,综合运用才能更准确全面地反映出黄龙病在果园的发病情况。

南丰县金秋砂糖橘叶片营养水平对果实品质的影响

为探究金秋砂糖橘叶片营养状况与果实品质的关系,测定了南丰县7个果园金秋砂糖橘叶片中的矿质营养元素含量和果实品质指标。结果表明,大部分果园叶片中的N、Ca、Cu含量偏低,P、K、Mg和Zn含量处于适宜或过量范围;所有果园叶片中的S、Fe和Mn含量处于适宜或偏高水平;3个果园叶片中的Cu含量低于适宜范围,2个果园叶片中的B含量处于较低水平。相关性分析结果表明,果实单果重与叶片的P、Zn、Mn等含量均呈显著负相关;果实的可食率与叶片中的N含量呈极显著正相关;可溶性固形物含量与叶片中的N含量呈显著正相关,与Cu含量呈显著负相关;总酸含量与P、S含量呈显著负相关,与Mn、Zn呈极显著负相关;固酸比与P、Zn、Mn等含量呈极显著正相关;VC含量与除Mn、B硼外的其他元素均呈极显著相关性。本研究表明,影响金秋砂糖橘果实品质的叶片养分因子主要为N、Ca、Cu,因此,生产上要重视及时补充相应元素,同时适当控制磷钾肥的施用量。

黄龙病病菌侵染对茶枝柑果实类黄酮和挥发性物质的影响

为分析黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB)病菌侵染对茶枝柑(Citrus reticulata cv.chachiensis)果实品质的影响,采用高效液相色谱法和气相色谱-质谱联用技术,分析了花后180 d感病与正常茶枝柑果实中类黄酮物质和挥发性物质的差异。结果表明:茶枝柑感染黄龙病病菌后,果皮中橘皮素等4种聚甲氧基黄酮以及α-蒎烯、辛醛等39种挥发性物质含量显著升高,而氮甲基邻氨基苯甲酸甲酯、胡椒烯等16种挥发性物质显著降低;果肉中川陈皮素等2种聚甲氧基黄酮及D-柠檬烯、β-芳樟醇等27种挥发性物质含量显著降低。因此,黄龙病病菌侵染可能会显著影响茶枝柑果皮和果肉中的次生代谢,进而改变其苦味和香味品质,其改变可能与其感病防御应答机制有关。

干燥条件对茶枝柑果皮黄酮和精油成分的影响

采用HPLC对日晒和不同温度热风干燥下的茶枝柑果皮中的黄酮进行定性和定量分析,同时利用GC-MS检测分析了其精油成分及相对含量。结果表明,36、40、45和50℃干燥条件下的茶枝柑果皮的主要黄酮类化合物的含量与日晒相比有显著差异,42℃热风干燥与日晒相比则无显著差异。不同热风干燥条件下茶枝柑果皮精油的总离子流图基本一致,但是精油成分的总含量均显著高于日晒,此外精油成分的种类、数目、相对含量也存在一定的差异性,42℃热风干燥下的精油成分与日晒最为接近。结论:从保证茶枝柑果皮品质和节约能源提高生产效率的角度出发,42℃热风干燥是有利于保存茶枝柑果皮黄酮和精油成分的较佳干燥方式。

不同柑橘砧木对砂糖橘果实品质的影响

砂糖橘是广东乃至华南地区栽培面积最大的柑橘品种,筛选合适的砧木对提高砂糖橘的产量、果实品质等园艺性状有重要意义。分别以粗柠檬、枸头橙、红?檬、枳橙、酸橘、香橙、枳壳、砂糖橘(本砧)8种柑橘砧木嫁接砂糖橘,研究不同砧木对砂糖橘果实内在和外在品质的影响。结果表明:与其他砧木相比,以枳橙为砧木的砂糖橘果面粗糙,果顶放射沟纹明显,果实亮度低;以香橙为砧木的果面较光滑,果皮较厚,果实红色度指标较亮,果实偏向圆形,果肉硬度显著大于其他砧的砂糖橘果肉硬度,中等糖酸型,但产量低;以枳壳为砧木的砂糖橘果皮色泽较亮,果皮较粗糙,果实纵横径、果肉汁胞、可滴定酸、单果重显著小于其他砧果实,可溶性糖和固酸比显著高于其他砧果实,单果轻,单株高产。说明枳砧的柑橘果实品质优于其他砧,可考虑作为广东省砂糖橘主产区的合适砧木。

鄂柑一号椪柑少核芽变的AFLP分析

利用AFLP技术,对鄂柑一号椪柑(Citrus reticulata Blanc.cv.ponkan)的3个少核芽变及其母株进行分子鉴定。筛选了64对引物,有60对引物可扩增出清晰的条带,共获得2 281条清晰的扩增谱带,其中有9对引物可扩增出明显多态性条带,多态性位点共15个,占总数的0.66%。结果表明,鄂柑一号椪柑的少核芽变由遗传物质改变引起,通过AFLP技术可以有效鉴定。

瓯柑南瓜果酒的研制

以瓯柑、南瓜为原料,开发果酒产品。研究酶解时间、温度及酶用量对果汁果胶酶解程度的影响,酵母添加量、初始糖度、发酵时间和发酵温度对果酒发酵的影响,确定果酒酿造的最佳工艺参数。结果表明:果胶酶添加量0.015%,酶解时间2.5h,酶解温度45℃,酵母菌接种量0.265‰,发酵液初始糖度21.0%,发酵温度32.1℃,发酵时间4d,酿制的瓯柑果酒香气浓郁,具有特有的苦味,营养丰富。

春季防虫网温湿度变化对砂糖橘春梢生长的影响

探讨了防虫网覆盖栽培技术对网室温湿度和砂糖橘(Citrus reticulata Blanco cv.Shatangju)春梢生长的影响。结果显示,40目透光防虫网对1-4月份(春季)砂糖橘春梢的生长具有促进作用;同时比较了防虫网内外温湿度变化对粉虱类、红蜘蛛类、潜叶蛾类数量的影响,认为防虫网对砂糖橘春梢生长的促进作用可能是通过对柑橘害虫和网室温湿度的调控这两个方面来实现的。

扁柑种质资源的SCoT分析

采用SCoT分子标记技术对广西地方柑橘26份种质材料进行遗传多样性研究。结果显示:9条引物共扩增出65条DNA片段,其中43条具有多态性,占66%。用UPGMA软件进行聚类分析,26份柑橘资源的遗传系数在0.70～1.00,说明SCoT标记能够有效揭示柑橘材料间的遗传多样性,为扁柑种质亲缘关系的鉴别和分类提供理论依据。

不同采收期广陈皮药材三种黄酮类成分的含量测定

目的比较不同采收期广陈皮药材中三种黄酮类成分橙皮苷、川陈皮素、橘皮素的含量动态变化。方法采用加热回流法提取黄酮类成分,HPLC法测定含量,Platisil ODS柱(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相:甲醇(A)-乙腈(B)-4%醋酸水溶液(C),梯度洗脱;柱温30℃,流速1 mL/min。检测波长:0~50 min,283 nm;50~70 min,332 nm。结果橙皮苷、川陈皮素、橘皮素含量范围分别为:1.500%~3.060%;0.236%~0.453%;0.182%~0.344%;线性范围分别为:20μg^120μg;14.6μg^84.6μg;16μg^96μg;平均回收率分别为97.57%、102.34%、101.90%,RSD%分别为3.42%、1.29%、1.31%。结论三种黄酮类成分的含量随着采收期的推迟而逐渐下降。

春见橘橙耐贮性及理化性状变化研究

为了确定春见橘橙的最佳销售时期,提高经济效益,将春见橘橙[(Citrus reticulata×C.sinensis)cv.Okitsu No.44]果实采收后常温贮藏135天,对储藏期的果实单果重、果皮厚度、果汁率,可溶性固形物、酸含量、固酸比、糖酸比,腐果率、果实病害类型等变化规律进行研究。结果表明:春见橘橙贮藏性能较好;糖含量在贮藏75天内呈上升趋势,75天后开始缓慢下降;贮藏90天后单果重较显著下降;可食率和果汁率在贮藏90天内呈上升趋势,随后逐渐呈下降趋势;贮藏期间腐果率呈幂函数变化;青绿霉病是引起果实腐烂的主要病害。贮藏前期(45天)含酸量的大幅降低是导致糖酸比值和固酸比值升高、品质提升的最主要原因;贮藏45天后是较为适宜的食用时期;春见橘橙在采收时并未进入真正的成熟期,翌年1月中旬真正成熟。

外源H_2O_2对低温胁迫下大红柑生长及叶片生理指标的影响

以陕西汉中地区栽培的柑橘品种大红柑秋梢为试材,采用Hoagland营养液培养方法,研究了外源过氧化氢(H_2O_2)对低温(4℃)胁迫下大红柑叶片生长状况及生理指标的影响,筛选缓解柑橘低温伤害的最佳H_2O_2处理浓度,并探讨外源H_2O_2处理对柑橘耐寒能力的影响机制。结果显示,随低温胁迫时间的延长,大红柑叶片卷曲和叶片细胞膜伤害程度逐渐加重。0.1和1.0 mmol·L-1H_2O__2处理均能缓解低温胁迫引起的大红柑叶片卷曲和萎蔫,但1.0 mmol·L-1H_2O_2比0.1 mmol·L-1H_2O_2缓解低温胁迫对大红柑的伤害效果更为显著。1.0 mmol·L-1H_2O_2显著降低叶片中相对电导率(REC)和丙二醛(MDA)含量的升高,减轻叶片细胞中超氧阴离子(O.-_2)和内源H_2O_2含量的积累,提高超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,从而降低低温对柑橘叶片细胞膜的伤害。较高浓度的外源H_2O_2不仅未起到缓解作用,反而产生了一定的毒害作用。

江西樟头红和南丰橘皮的生药学研究

本文对樟头红和南丰橘皮进行了生药学的研究,并与四种陈皮药材作了比较鉴别,为资源开发利用提供了依据。

广陈皮挥发油成分

与陈皮比较,测定了广陈皮各种商品药材中挥发油的含量,并用气相色谱/质谱计算机联用方法(GC/MS/DS)鉴定了挥发油中的37多个成分,测定了相对含量。广陈皮中均含柠檬烯、β-月桂烯、a-菠烯及a-松油醇等镇咳、祛痰、抗菌的有效成分。

郁南沙糖桔果园土壤营养状况及结果树叶片营养动态变化

对广东郁南7个代表性沙糖桔果园土壤和结果树叶片营养状况进行了分析。结果显示,坡地果园的酸度比水田果园大。土壤质地以黏土和黏壤土为主,其中砂页岩坡地果园土壤质均为黏土,而花岗岩坡地为粉砂质黏土,水田改种的多为黏壤土。土壤有机质含量总体处于中等偏低水平。土壤全氮主要在中等至偏低水平之间;坡地果园的有效磷大多偏低,水田果园有效磷处于适量至高量水平;缺磷和缺钾的主要是坡地果园,而高磷和高钾的主要是水田果园。土壤交换钙、交换镁和有效硼普遍缺乏,有效铜、有效锌个别缺乏,部分果园缺有效铁,有效锰、有效硫含量普遍较高。沙糖桔结果树周年叶片营养状况存在动态变化,土壤有效磷和有效钾高的果园其叶片磷钾水平并不是全都相应提高。叶片氮、磷、钾、铜平均含量在开花期最高,此期氮、钾、铜含量均处于适量范围,磷则高于适量范围;叶片氮、磷平均含量在幼果期最低。叶片钙含量在果实成熟期最高。叶片镁含量低于适量水平的情况较多。叶片铁、锰含量从开花期最低至成熟期达到最高;地下水位较高的果园叶片锰含量全年每个生育期均较高。

盐胁迫对坪山柚、福橘幼苗叶片蛋白质合成的影响

以坪山柚和福橘幼苗为材料,研究不同浓度NaC l胁迫8 d后叶片中可溶性蛋白质的变化.结果表明,盐胁迫下,坪山柚和福橘幼苗叶片中可溶性蛋白质含量增加并随NaC l浓度的增高而增至较高水平.相同浓度NaC l胁迫下,坪山柚叶片可溶性蛋白质含量增加幅度比福橘大,因此,可能是蛋白质的增加幅度而不是其绝对含量对坪山柚的耐盐性起作用.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)图谱分析显示,盐胁迫后,分子质量为80、67、54、32、28、18、17和16 ku蛋白质不受影响而稳定表达.福橘叶片中80、67、32、28、21、18、17、16和15 ku蛋白质为稳定表达的蛋白质.当NaC l浓度≥40 mmol.L-1时,诱导坪山柚叶片新产生35和24 ku 2种蛋白质;当NaC l浓度≥80 mmol.L-1时,诱导福橘叶片新产生72、43和24 ku 3种蛋白质,且它们的活性均随盐胁迫强度的增大而增强.

气相色谱-质谱联用法分析茶枝柑籽油脂肪酸和不皂化物组成

目的研究茶枝柑籽油的脂肪酸和不皂化物成分。方法采用气相色谱-质谱联用(gas chromatographymass spectrometry,GC-MS)法对茶枝柑籽油脂肪酸和不皂化物成分进行分析和鉴定。结果共分离鉴定出13种脂肪酸,不饱和脂肪酸占67.62%,其中最主要的脂肪酸为亚油酸和油酸,相对含量分别为36.93%和26.91%。茶枝柑籽油的不皂化物以植物甾醇、生育酚和萜类化合物为主,其中β-谷甾醇含量最高,达2544.73mg/kg。结论本研究为茶枝柑籽油作为功能性油脂的开发利用提供了基础数据。

ICP-AES法测定砂糖橘中的矿质元素含量

以市售广西砂糖橘为材料,采用微波消解法处理样品,以电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP-AES）检测砂糖橘中Cu、Fe、Zn、Mn、Na、K、Ca、Mg、P等14种矿质元素的含量,结果表明,砂糖橘果皮和果肉中K、Ca、Mg、P等元素的含量较高;果肉中K含量尤其高,达到9 082.23 ug/g,而Na含量则很低,果肉中仅含80.45ug/g,元素Cr在果皮和果肉中均未检出;Sr在果肉中未检出,在果皮中含量为10.24ug/g;在砂糖橘果皮中B、Ca、Mg、Fe、Mn、Si、Zn 7种元素含量均高于果肉。加标回收率实验表明,各元素的相对标准偏差（RSD）为0.18%～4.77%,各元素的回收率在95.15%～106.1%之间,说明该方法测定广西砂糖橘中矿质元素具有较好的精密度和准确度。

分隔壁精馏塔分离椪柑皮精油中D-柠檬烯的模拟研究

应用Aspen Plus软件分析柠檬烯与椪柑(Citrus reticulata Blanco cv.Ponkan)皮精油其他主要成分的二元系统在0.1 k Pa下相平衡关系,并建立常规双塔精馏和分隔壁塔精馏分离(DWC)模型对椪柑皮精油提纯D-柠檬烯进行工艺模拟。通过三塔模型对分隔壁精馏塔进行计算,计算结果作为初值,利用Aspen Plus软件中Multifrac-Petlyuk模块对DWC进行严格模拟计算,并利用灵敏度分析回流比、进料位置、测线采出位置、互联位置以及互联物流气液相流率对分离效果及再沸器热负荷的影响,在优化条件下,得到纯度为97.20%的D-柠檬烯,回收率为93.75%。分隔壁塔精馏比双塔精馏的再沸器热负荷节省39.65%。

柑桔错峰成熟技术及果实错峰上市效益初探

8～9月向贡柑植株喷施两次0.2%KH2PO4+0.1%H3BO3,可促进向阳果实于11月初成熟上市;采收后立即喷施DA-6,可显著增加留树果实的可溶性固形物含量,提高冷期的好果率。GA3、DA-6和NPK复合肥联合处理可极显著减轻迟采收沙糖桔果实的冷害,使其在1月底至2月初上市。以上技术措施由于可使果实提早和推迟成熟上市,因此可减轻中段的销售压力,从而使剩下的果品在中段避开峰期、按市场需要上市,获得较好的经济效益。