转染ClC-3 siRNA的大鼠成骨细胞增殖、分化观察

目的观察转染Cl C-3 siRNA的大鼠成骨细胞增殖、分化情况。方法原代提取成骨细胞,将细胞分为四组,Control组细胞不做任何处理,NC组细胞转染无序siRNA,Lipo组细胞转染LipofectamineTM2000转染试剂,Cl C-3 siRNA组细胞转染Cl C-3 siRNA,各组细胞加载流体剪切力行力学刺激。采用MMT法检测各组细胞培养24、48、72 h时的光密度值;同时检测各组细胞碱性磷酸酶水平及成骨细胞钙化结节形成能力。结果与Control组相比,Cl C-3 siRNA组细胞各时点光密度值降低(P均<0.01)。Cl C-3 siRNA组、Lipo组、NC组、Control组成骨细胞碱性磷酸酶水平分别为(32.434±2.130)、(46.199±1.900)、(47.347±2.500)、(49.540±1.550)U/m L,钙化结节形成能力分别为25.02%±3.46%、36.83%±4.54%、38.45%±4.84%、40.57%±2.22%,Cl C-3 siRNA组与Control组相比,P均<0.01。结论转染Cl C-3 siRNA可抑制大鼠成骨细胞的增殖、分化。

ClC-3在人肺癌中的表达及分布

目的:探讨ClC-3在人肺癌组织中的表达及其生物学意义.方法:应用免疫组织化学染色技术检测76例人肺癌标本中ClC-3蛋白的表达.结果:76例人肺癌标本中阳性表达69例(90.8%),对照组10例正常肺组织ClC-3蛋白的表达为阴性;而蛋白表达阳性的69例肺癌中,ClC-3主要位于瘤细胞和微血管内皮细胞的胞浆内或细胞膜上.随着TNM分期升级,ClC-3蛋白表达也呈逐渐上调趋势(P<0.01).结论:ClC-3在人肺癌及肺转移癌组织中普遍表达,并且可能与肺癌TNM分期相关.

硫化氢激活H9c2心肌细胞容积调节性氯通道

目的观察硫化氢(H2S)对H9c2心肌细胞容积调节性氯通道(VRCC)的影响。方法培养大鼠H9c2心肌细胞,用H2S供体硫氢化钠(NaHS)处理H9c2心肌细胞。分别应用Western blot和全细胞膜片钳技术分析蛋白的表达和VRCC的开放和关闭。结果等张灌流液处理的H9c2心肌细胞可记录到微弱的背景氯电流。低张灌流液处理可明显增加H9c2心肌细胞的氯电流(P<0.01),高张灌流液处理则可减弱这种增强作用(P<0.05)。Western blot检测显示H9c2心肌细胞上存在ClC-3氯通道蛋白的表达。用400μmol/L NaHS处理0～30 min可激活H9c2心肌细胞上的氯通道,高张灌流液处理抑制NaHS处理诱导的氯通道激活。400μmol/L NaHS处理0～30min对H9c2心肌细胞ClC-3氯通道蛋白的表达无明显影响(P>0.05)。结论 H9c2心肌细胞存在VRCC和ClC-3氯通道蛋白的表达,H2S处理可激活VRCC而不影响ClC-3氯通道蛋白的表达。