慢性阻塞性肺疾病患者血清Clara细胞蛋白-16和单核细胞趋化蛋白-1的表达与病情严重程度的相关性分析

目的分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清Clara细胞蛋白-16(CC-16)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达与病情严重程度的相关性。方法回顾性收集2021年1月至2022年12月期间辽宁省健康产业集团阜新矿总医院收治的80例COPD患者作为研究对象,根据入院时动脉血氧分压(PaO_(2))的不同,分为A组:轻度或无缺氧组(PaO_(2)>60 mmHg,n=31)、B组:中度缺氧组(40 mmHg<PaO_(2)<60 mmHg,n=28)和C组:重度缺氧组(PaO_(2)<40 mmHg,n=21)。比较3组患者的PaO_(2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))及肺功能指标[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)],采用酶联免疫吸附试验检测血清CC-16和MCP-1水平。分析COPD患者血清CC-16、MCP-1水平与病情严重程度的关系,并采用多元Logistic回归分析分析血清CC-16和MCP-1水平对COPD患者病情严重程度的影响。结果3组患者血气分析指标、肺功能指标及血清CC-16、MCP-1水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);B组和C组患者的PaO_(2)、FVC、FEV1及血清CC-16水平显著低于A组,PaCO_(2)和血清MCP-1水平显著高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05);C组患者PaO_(2)、FVC、FEV1及血清CC-16水平显著低于B组,PaCO_(2)和血清MCP-1水平显著高于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,COPD患者血清CC-16水平与病情严重程度呈明显负相关(P<0.05),MCP-1水平与COPD病情严重程度得分呈显著正相关(P<0.05)。多元Logistic回归分析显示,血清CC-16(OR=1.255,95%CI:1.118~1.409)和MCP-1(OR=2.421,95%CI:1.311~4.470)水平均为影响COPD患者病情严重程度的独立危险因素。结论COPD患者血清CC-16和MCP-1水平与病情严重程度密切相关,可作为早期诊断和评估病情的重要生物学指标。

急性呼吸窘迫综合征患者血清趋化因子、Clara细胞蛋白-16表达水平与疾病严重程度相关性研究

目的:探讨血清趋化因子、Clara细胞蛋白-16(CC-16)表达水平与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)严重程度的相关性。方法:选择80例ARDS患者,根据氧合指数将其分为轻度组(n=25)、中度组(n=34)和重度组(n=21),检测血清趋化因子白细胞介素(IL)-6、IL-8及CC-16水平,分析各参数之间的相关性,绘制受试者操作特征曲线(ROC)判断各指标对重度ARDS的预测效能。结果:IL-6、IL-8、CC-16随着ARDS病情的加重而升高,三组血清IL-6、IL-8、CC-16比较差异有统计学意义(均P<0.05)。相关性分析显示,血清IL-6、IL-8、CC-16与氧合指数均呈中等强度相关(r=0.472、0.439、0.433),IL-6与IL-8呈中等强度相关(r=0.582),IL-6与ICU停留天数呈弱相关(r=0.302)。血清IL-6、IL-8、CC-16对ARDS病情严重程度均具有预测价值,预测重度ARDS的曲线下面积(AUC)分别为0.804、0.716、0.722,敏感度分别为80.3%、76.4%、78.3%,特异度分别为84.0%、78.1%、77.5%,阳性预测值分别为83.8%、76.9%、80.5%,阴性预测值分别为70.2%、74.8%、68.3%。结论:血清趋化因子IL-6、IL-8、CC-16对判断ARDS严重程度具有潜在价值。

血清激活素A和Clara细胞分泌蛋白-16及脑钠肽水平对急性呼吸窘迫综合征患者预后预测的临床意义

目的探讨血清激活素A(Activin-A)、Clara细胞分泌蛋白-16(CC-16)及脑钠肽(BNP)水平与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者病情严重程度的关系,及其预测预后的价值。方法采用回顾性研究方法,收集2017年1月至2020年9月海口市第三人民医院收治的ARDS患者的临床资料,包括发病当天的一般资料及入重症监护病房(ICU)1、3、7 d血清Activin-A、CC-16、BNP水平。根据氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))将ARDS患者分为轻度组(200 mmHg<PaO_(2)/FiO_(2)≤300 mmHg,1 mmHg≈0.133 kPa)、中度组(100 mmHg<PaO_(2)/FiO_(2)≤200 mmHg)、重度组(PaO_(2)/FiO_(2)≤100 mmHg);根据入ICU 28 d内的生存情况将ARDS患者分为存活组和死亡组。分析不同病情严重程度和不同预后ARDS患者血清Activin-A、CC-16、BNP水平的变化趋势;绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),分析血清Activin-A、CC-16、BNP水平对ARDS患者28 d死亡的预测价值。结果共入选103例ARDS患者,其中轻度ARDS 20例,中度ARDS 41例,重度ARDS 42例;28 d存活68例,死亡35例。不同病情程度及不同预后各组患者入ICU后1、3、7 d血清Activin-A、CC-16、BNP水平逐渐升高,均于3 d时达峰值,且ARDS重度组入ICU 1、3、7 d各指标均明显高于ARDS轻中度组〔Activin-A(ng/L):1395.36±164.20比806.40±121.75,1683.25±190.17比865.35±136.40,1594.80±172.65比842.50±124.37;CC-16(ng/L):63.58±15.30比53.48±13.37,89.24±19.38比57.85±15.36,82.62±15.74比54.60±13.26;BNP(ng/L):401.86±118.45比254.36±72.50,560.74±175.30比326.62±84.37,592.35±184.73比286.24±76.25,均P<0.01〕。死亡组入ICU 1、3、7 d各指标均明显高于存活组〔Activin-A(ng/L):1410.27±171.38比730.50±108.35,1820.36±205.37比806.25±121.27,1750.38±181.42比775.38±116.20;CC-16(ng/L):70.26±15.38比45.37±11.86,95.68±22.73比51.26±13.05,86.92±19.64比49.36±12.85;BNP(ng/L):452.73±131.62比205.60±63.24,615.60±190.37比272.35±81.50,648.25±210.62比238.36±68.40,均P<0.01〕。ROC曲线分析显示,各时间点血清Activin-A、CC-16或BNP水平对ARDS患者死亡均有一定预测价值,且以入ICU 3 d的预测价值较大,Activin-A、CC-16、BNP的曲线下面积(AUC)以及95%可信区间(95%CI)分别为0.852(0.785~0.907)、0.836(0.774~0.896)、0.793(0.735~0.853),最佳截断值分别为Activin-A 1248.36 ng/L、CC-1673.50 ng/L和BNP 468.30 ng/L。入ICU 3 d血清Activin-A、CC-16、BNP 3项指标联合预测ARDS患者死亡的AUC最大,为0.940(0.883~0.997),其敏感度和特异度均较高,分别为96.2%和88.5%。结论血清Activin-A、CC-16、BNP水平越高,ARDS患者病情严重程度越重,预后越差;入ICU后3 d血清Activin-A、CC-16、BNP水平3项联合检测对ARDS患者28 d死亡具有较好的预测价值。

结核分枝杆菌Rv3425-16kD融合蛋白原核表达及其刺激ATB患者IFN-γ释放水平研究

目的 原核系统表达与纯化结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis, MTB)融合蛋白抗原Rv3425-16kD,检测其能否被活动性结核病(active tuberculosis, ATB)中肺结核患者和结核潜伏性感染(latent TB infection, LTBI)者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)识别,探讨作为诊断抗原鉴别活动性结核感染的可行性。方法 利用原核表达系统表达融合蛋白Rv3425-16kD并进行亲和纯化,以Western Blot法鉴定;收集结核病医学部收治的的ATB患者、LTBI者和健康人外周血,分离PBMCs,分别用Rv3425-16kD融合蛋白、早期分泌靶抗原6/培养液蛋白10(ESAT-6/CFP10)和MTB全菌裂解液刺激后,提取细胞总RNA,荧光定量PCR方法检测γ-干扰素(Interferon-γ,INF-γ) mRNA的表达,通过t检验分析刺激前后PBMCs IFN-γ mRNA的表达差异。结果 原核系统表达及纯化的Rv3425-16kD融合蛋白相对分子质量均为37kD。健康人PBMCs刺激前,IFN-γ mRNA表达量为4.2±1.6,MTB全菌裂解液刺激后为14.7±3.5,差异具有统计学意义(P<0.001),另外两组刺激没有明显变化;ATB患者PBMCs刺激前,IFN-γ mRNA表达量为3.7±1.2,经Rv3425-16kD融合蛋白、ESAT-6/CFP10抗原多肽和H37Rv全菌裂解液分别刺激后IFN-γ mRNA表达量为:166.0±29.7、13.7±5.8和213.0±33.5,三组抗原在刺激前后IFN-γ mRNA表达量差异均具有统计学意义(P<0.001)。结论 原核重组的Rv3425-16kD融合蛋白可被ATB患者PBMCs细胞识别,具有较强抗原刺激作用和特异性,可用作MTB感染的预防及诊断。

沉默lncRNA SLC16A1-AS1对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨沉默长链非编码RNA(lncRNA)SLC16A1-AS1对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法PCR检测2021年5月至2023年1月手术切除的62例脑胶质瘤组织lncRNA SLC16A1-AS1、微小RNA(miR)-584-5p以细胞外蛋白调节激酶1(MAPK1)m RNA,免疫印迹法检测MAPK1蛋白表达;以瘤旁组织(距离肿瘤边缘>2 cm)作为正常脑组织。从胶质瘤组织中分离、培养胶质瘤细胞,进行CD133、Neatin免疫荧光染色鉴定;转染不同质粒沉默lncRNA SLC16A1-AS1、上调或下调miR-584-5p表达;应用CCK-8法、划痕实验、Transwell实验和流式细胞术检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡情况;免疫印迹法检测细胞MAPK1、细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、caspase-3蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA SLC16A1-AS1、miR-584-5p和MAPK1的靶向关系。结果胶质瘤组织lncRNA SLC16A1-AS1、MAPK1呈高表达(P<0.05),miR-584-5p呈低表达(P<0.05)。免疫荧光染色显示,分离培养的细胞CD133、Nestin均呈阳性表达。沉默lncRNA SLC16A1-AS1表达,明显抑制体外培养的胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05),明显下调细胞CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05),明显上调miR-584-5p、caspase-3表达。抑制miR-584-5p明显逆转沉默lncRNA SLC16A1-AS1对体外培养的价胶质瘤细胞的作用。双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA SLC16A1-AS1与miR-584-5p/MAPK1存在靶向调节关系。结论胶质瘤组织lncRNA SLC16A1-AS1呈高表达,沉默lncRNA SLC16A1-AS1可以上调miR-584-5p表达,抑制MAPK1表达,进而抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡。

美洲大蠊提取物CⅡ-3调控p16^(INK4a)诱导SKOV3细胞衰老

目的探讨美洲大蠊提取物CⅡ-3调控p16^(INK4a)蛋白诱导卵巢癌细胞SKOV3衰老的作用。方法通过CCK-8法测定不同浓度和时间美洲大蠊提取物CⅡ-3对SKOV3细胞增殖的作用;运用细胞集落形成实验测定美洲大蠊提取物CⅡ-3对SKOV3细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测CⅡ-3作用后SKOV3细胞周期的变化;衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测CⅡ-3作用后SKOV3细胞衰老变化;Western Blotting检测CⅡ-3作用后SKOV3细胞衰老调控分子p16^(INK4a)蛋白表达的变化。结果美洲大蠊提取物CⅡ-3可有效抑制SKOV3细胞增殖,最佳作用浓度为80μg/mL,作用时间为48 h;CⅡ-3作用后,SKOV3细胞集落形成能力下降;阻滞于G_(0)/G_(1)期细胞比例增高,S期细胞比例减少;SA-β-Gal阳性细胞百分比增加;衰老调控分子p16^(INK4a)蛋白表达上调。结论美洲大蠊提取物CⅡ-3通过调控衰老调控分子p16^(INK4a)蛋白表达诱导SKOV3细胞衰老。

LncRNA FGD5-AS1靶向miR-16-5p/CREB1轴减轻缺氧/复氧诱导大鼠H9c2心肌细胞凋亡的机制研究

目的:探究长链非编码RNA(LncRNA)FGD5反义RNA1(FGD5-AS1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡的影响以及对微小RNA-16-5p/cAMP响应元件结合蛋白1(miR-16-5p/CREB1)轴的调节机制。方法:将H9c2细胞分为对照组和H/R组(缺氧6 h,复氧6 h),然后将H/R组细胞分别进行转染,分为oe-NC组、oe-FGD5-AS1组、oe-FGD5-AS1+miR-16-5p mimic-NC组、oe-FGD5-AS1+miR-16-5p mimic组。实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测细胞中FGD5-AS1、miR-16-5p、CREB1的mRNA水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)法测定裂解凋亡蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;CCK-8法测定细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶活性实验分别验证miR-16-5p和FGD5-AS1、CREB1的靶向关系。结果:与对照组比较,H/R组细胞中FGD5-AS1和CREB1的mRNA水平、细胞存活率、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),miR-16-5p mRNA水平、细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达升高(P<0.05);与H/R组和oe-NC组比较,转染过表达FGD5-AS1基因的H9c2细胞中FGD5-AS1和CREB1的mRNA水平、细胞存活率、Bcl-2蛋白表达增高,凋亡率及miR-16-5p、cleaved Caspase-3、Bax水平下降(P<0.05)。双荧光素酶活性实验验证了FGD5-AS1、CREB1均与miR-16-5p有结合位点。结论:过表达FGD5-AS1可能通过靶向下调miR-16-5p表达,上调CREB1表达,抑制H/R诱导的H9c2心肌细胞凋亡。

支气管肺泡灌洗液中β-联蛋白、转化生长因子β_1、Clara细胞分泌蛋白16、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6在支气管肺发育不良中的表达及意义

目的探讨β-联蛋白、转化生长因子β1(TGF-β1)、Clara细胞分泌蛋白16(cc16)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6(KL-6)在支气管肺发育不良(BPD)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中的表达及其意义。方法机械通气早产儿70例,其中40例诊断为BPD的患儿作为观察组,30例非BPD患儿作为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测两组患儿机械通气1、24、48、72hBALF中β-联蛋白、TGF-β1、cc16、KL-6水平。结果观察组平均胎龄及出生体质量显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),吸氧时间及机械通气时间显著长于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。随机械通气时间的延长,观察组cc16水平呈逐渐降低趋势,而β-联蛋白、TGF-β1、KL-6水平呈逐渐升高趋势,且48、72h时均与1h时各指标水平差异有统计学意义(P<0.01)。对照组TGF-β1、cc16于机械通气72h时与1h时水平差异有统计学意义(P<0.01),而β-联蛋白、KL-6水平在各时间点的差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组机械通气各时间点β-联蛋白、TGF-β1水平均显著高于对照组各相应时间点指标水平,cc16显著低于对照组水平,差异有统计学意义(P<0.05),而KL-6在机械通气48、72h时高于对照组相应时间点,差异有统计学意义(P<0.05),余时间点差异无统计学意义(P>0.05)。各时间点比较,BPD中重度组β-联蛋白、TGF-β1、KL-6水平均显著高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05),而cc16水平显著低于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。多元逐步回归分析结果显示,机械通气时间、吸氧时间的延长及低cc16水平是BPD发生的危险因素(P<0.01)。结论机械通气早产儿BPD的发生与机械通气、吸氧时间的延长及低cc16水平密切相关,通过监测早产儿初始机械通气BALF中β-联蛋白、TGF-β1、cc16水平可对早产儿BPD的发生提供预测依据。

慢性阻塞性肺疾病患者血清Clara细胞分泌蛋白16、人中性粒细胞多肽表达及临床意义

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清Clara细胞分泌蛋白16(CC16)、人中性粒细胞多肽1-3(HNP1-3)表达及临床意义。方法 选取2018年6月—2022年6月收治的COPD 154例作为COPD组,同期健康体检者90例作为对照组。另根据气流受限程度将COPD 154例分为轻中度组(57例)、重度组(73例)和极重度组(24例)3组;根据病情分期将COPD 154例分为急性加重期组(52例)和稳定期组(102例)。比较COPD组和对照组血清CC16、HNP1-3水平及肺功能指标[第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)],不同气流受限程度及病情分期组血清CC16、HNP1-3水平。采用Pearson相关性分析探讨COPD患者血清CC16和HNP1-3水平与肺功能指标相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CC16和HNP1-3对COPD急性加重的预测价值。结果 COPD组血清CC16水平及FEV1%、FEV1/FVC低于对照组,血清HNP1-3水平高于对照组(P<0.01)。不同气流受限程度COPD 3组随着气流受限程度加重,血清CC16水平逐渐降低,血清HNP1-3水平逐渐升高(P<0.05)。急性加重期组血清CC16水平低于稳定期组,血清HNP1-3水平高于稳定期组(P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,COPD患者血清CC16水平与FEV1%、FEV1/FVC呈正相关,血清HNP1-3水平与FEV1%、FEV1/FVC呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清CC16、HNP1-3及二者联合预测COPD急性加重的曲线下面积分别为0.738、0.867和0.893。结论 COPD患者血清CC16水平降低、HNP1-3水平升高,且与肺功能指标具有相关性。血清CC16和HNP1-3水平对COPD急性加重有一定预测价值。

miR-10b介导NKG2D调节脑胶质瘤细胞免疫效应的实验研究

目的:观察微小核糖核酸-10b(miR-10b)对脑胶质瘤细胞免疫效应的调节作用并探讨其作用机制。方法:取人脑胶质瘤细胞U251进行培养和传代,获得处于对数生长期的细胞。按照1.0×105个/ml浓度制备细胞悬液,并设置对照组、过表达组、低表达组、空白组,每组6个复孔。对照组、过表达组、低表达组分别采用脂质体转染法转染阴性对照、miR-10b模拟物、miR-10b抑制剂,空白组予以等量无菌生理盐水。分离和培养1例健康志愿者外周血自然杀伤(NK)细胞。MTT法检测不同效靶比时NK细胞的杀伤活性;流式细胞仪检测各组NK细胞表面NK细胞激活受体(NKG2D)表达,并检测各组人脑胶质瘤细胞U251表面主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因A(MICA)、UL16结合蛋白2(ULBP2)、UL16结合蛋白3(ULBP3)表达。结果:对照组、过表达组、低表达组转染效率分别为(93.55±2.05)%、(95.67±3.14)%、(94.18±3.26)%;与对照组和空白组相比,过表达组miR-10b表达升高,低表达组miR-10b表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组和空白组miR-10b表达差异无统计学意义(P>0.05);与对照组和空白组相比,过表达组NK细胞不同效靶比杀伤活性均降低、NKG2D表达降低,低表达组NK细胞不同效靶比杀伤活性均增高、NKG2D表达增高,差异均有统计学意义(P<0.05),各组NK细胞杀伤活性均随效靶比增加而增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组与空白组相比,相同效靶比NK细胞杀伤活性、NKG2D表达差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组和空白组相比,过表达组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达均降低,低表达组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达均增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组与空白组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:抑制miR-10b表达能够增加NK细胞表面NKG2D和人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达,增强NK细胞对人脑胶质瘤细胞U251的杀伤活性。

血清微小RNA-206和Clara细胞蛋白16表达水平与支气管哮喘患儿糖皮质激素疗效的相关性

目的:探讨支气管哮喘患儿经糖皮质激素治疗后血清微小RNA-206(miR-206)和Clara细胞蛋白16(CC16)的表达水平,分析其对糖皮质激素治疗效果的影响。方法:选取河南省第三人民医院2017年11月至2019年11月收治的98例支气管哮喘患儿为支气管哮喘组,另选同期常规体检健康儿童90例为健康对照组。支气管哮喘组参照指南给予合理糖皮质激素治疗,并评价治疗效果。比较两组儿童血清miR-206和CC16表达水平,观察不同糖皮质激素治疗效果的患儿血清miR-206和CC16表达水平,分析血清miR-206和CC16表达的相关性及其对糖皮质激素疗效的影响。结果:支气管哮喘组血清miR-206和CC16表达水平均低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);显效组血清miR-206和CC16表达水平最高,其次为有效组、无效组(P<0.05);通过线性回归分析得到回归方程:Y=1.895-1.131X1-0.046X2,结果显示血清miR-206和CC16低表达可能是儿童哮喘糖皮质激素疗效的影响因素(P<0.05);支气管哮喘患儿血清miR-206与CC16表达水平呈正相关(r=0.483,P<0.01)。结论:血清miR-206和CC16低表达可能是支气管哮喘患儿糖皮质激素治疗效果的影响因素,临床可考虑在入院时检测支气管哮喘患儿的血清miR-206和CC16表达水平,高度重视低表达患儿,并进行合理干预,以提高糖皮质激素治疗效果。

血清激活素-A Clara细胞分泌蛋白-16和IL-18预测急性呼吸窘迫综合征患者预后的价值

目的探讨血清激活素A(Activin-A)、Clara细胞分泌蛋白-16(CC-16)及白细胞介素-18(IL-18)预测急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者预后的价值。方法选择2017年1月至2019年12月海口市第三人民医院收治的98例ARDS患者,根据ARDS患者28 d生存情况分为存活组(n=66)和死亡组(n=32);根据ARDS患者氧合指数(oxygenation index,OI)分为轻度组(200 mmHg<OI≤300 mmHg,n=19)、中度组(100 mmHg<OI≤200 mmHg,n=40)和重度组(OI≤100 mmHg,n=39)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组第1、3、5天血清ActivinA、CC-16和IL-18水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析血清Activin-A、CC-16和IL-18水平预测ARDS患者死亡的价值。结果死亡组第1、3、5天血清Activin-A(pg/m L:1286.40±155.37 vs.719.62±105.73,1607.42±185.26 vs.795.70±126.38,1530.36±170.20 vs.775.24±118.30)、CC-16(ng/L:66.35±14.72 vs.44.28±10.73,89.40±19.65 vs.49.25±12.68,83.16±17.52 vs.47.84±13.15)和IL-18(pg/m L:113.60±12.58 vs.81.46±7.92,152.93±18.24 vs.88.75±9.63,146.28±17.15 vs.86.53±9.17)水平均明显高于存活组(P<0.001)。重度组第1、3、5天血清Activin-A(pg/m L:1225.30±149.36 vs.786.25±115.27,1563.75±180.46 vs.857.72±124.83,1493.50±168.20 vs.830.65±119.27)、CC-16(ng/L:61.95±13.84 vs.47.52±12.58,85.74±18.20 vs.52.95±13.36,82.36±17.70 vs.50.73±12.84)和IL-18(pg/m L:106.82±11.74 vs.87.20±9.05,148.30±17.36 vs.91.15±9.40,141.85±16.9290.63±9.42)水平均明显高于轻中度组(P<0.001)。ROC曲线分析显示,第3天血清Activin-A、CC-16和IL-18水平三项联合预测ARDS患者死亡的曲线下面积最大(0.934,95%CI 0.877~0.993),其敏感度(95.8%)和特异度(88.0%)均较高。结论ARDS患者血清Activin-A、CC-16和IL-18水平升高与病情严重程度有关,第3天血清Activin-A、CC-16和IL-18水平三项联合预测ARDS患者预后具有较好的价值。

转化生长因子-β1、Clara细胞分泌蛋白16、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6与支气管肺发育不良的相关性研究

目的探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、克拉拉细胞分泌蛋白16(clara cell secretory protein,CC16)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6 (krebs yon denlungen-6,KL-6)在支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)大鼠肺组织中的表达,以及这些蛋白的表达与肺细胞凋亡的关系。方法按随机数字表法随机将SD新生鼠随机分为对照组、模型组,模型组持续暴露在80%~85%氧中构建BPD模型,对照组始终暴露在空气中。每组在7 d,14 d,21 d时(简称为7 d模型组、14 d模型组、21 d模型组)随机选出8只新生鼠处死,留取5 m L血清。HE染色观察各组肺组织病理学改变,并分析辐射状肺泡计数(radial alveolar count,ROC),肺泡平均截距(mean linear intercept,MLI)。TUNEL染色检测各组肺组织中的细胞凋亡。ELISA检测各组新生鼠的血清中TGF-β1、CC16、KL-6的水平。Western blot检测各组肺组织中TGF-β1、CC16、KL-6的表达水平。同时分析肺组织中TGF-β1、CC16、KL-6的表达与肺组织细胞凋亡率的关系。结果与正常组相比,模型组肺组织随暴露氧时间的延长BPD损伤加剧,RAC、血清中CC16的水平以及肺组织中CC16的表达明显减少,MLI、细胞凋亡率、血清中TGF-β1、KL-6的水平,肺组织中TGF-β1、KL-6的表达明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,模型组新生鼠肺组织中TGF-β1、KL-6的表达与肺组织的细胞凋亡率呈正相关(r=0.977、0.970,均P=0.000),CC16的表达与细胞凋亡率呈现负相关(r=-0.982,P=0.000)。结论肺组织中TGF-β1、CC16、KL-6的表达与BPD肺组织的细胞凋亡密切相关。

Clara细胞蛋白16和E-选择素与婴幼儿支气管哮喘及其相关性的临床研究

目的探求支气管哮喘患儿血清中Clara细胞蛋白16(CC16蛋白)和可溶性E-选择素(sE-selectin,sE-SLT)在支气管哮喘中的作用机制及临床检测价值。方法血清CC16蛋白和sE-SLT检测采用双抗体夹心ELISA法,对30例发作期和25例缓解期支气管哮喘患儿采血进行CC16蛋白和sE-SLT定量检测,同时以36名健康体检儿童为对照(NC)组。并进行相关性及曲线分析。结果(1)支气管哮喘患儿发作期、缓解期血清CC16蛋白水平显著低于对照组,血清sE-SLT水平显著高于对照组(P<0.01);发作期血清CC16蛋白水平显著低于缓解期,血清sE-SLT水平显著高于缓解期;发作期支气管哮喘患儿血清CC16蛋白和sE-SLT异常率显著高于缓解期(P<0.01)。(2)支气管哮喘患儿血清sE-SLT与CC16蛋白的相关方程y=-0.493x+18.168,相关系数r=-0.8758,R2=0.767。(3)在ROC曲线上,支气管哮喘患儿血清CC16蛋白和sE-SLT的最佳临界值(cut off point)分别为10ng/ml、22.5 g/L。敏感性分别为80%(24/30)、70%(21/30),特异性分别为80%(20/25)、80%(20/25),阳性预测值分别为82.8%(24/29)8、0.8%(21/26),阴性预测值分别为76.9%(20/26)、69%(20/29),准确度分别为80%(44/55)、74.5%(41/55)。结论CC16蛋白可能是支气管哮喘气道炎症的下调因子,sE-SLT可能是支气管哮喘气道炎症的上调因子。测定血清CC16蛋白和sE-SLT水平可作为支气管哮喘患儿病情判定和疗效评价的良好指标。

重度肺炎患儿血清Clara细胞分泌蛋白16和肺表面活性蛋白D水平及临床意义

目的探讨肺炎患儿血清Clara细胞分泌蛋白16(CC16)、肺表面活性蛋白D(SP-D)的变化及其临床意义。方法选取社区获得性肺炎患儿81例,其中重度肺炎机械通气组(21例)、重度肺炎非机械通气组(30例)与轻度肺炎组(30例),对照组为同期体检健康儿童(20例);采用ELISA法检测四组儿童血清CC16、TNF-α、IL-6、SP-D浓度,运用ROC曲线评价CC16、TNF-α、IL-6、SP-D对于重度肺炎的诊断价值;记录机械通气患儿肺动态顺应性(Cdyn)、气道阻力(Raw)、气道峰压(PIP)、呼吸做功(WOB)等呼吸力学参数,分析CC16与TNF-α、IL-6、SP-D及呼吸力学参数间的相关性。结果肺炎组患儿血清CC16浓度均明显低于对照组,重度肺炎组低于轻度肺炎组,机械通气组低于非机械通气组;肺炎组患儿血清TNF-α、IL-6、SP-D浓度均明显高于对照组,重度肺炎组高于轻度肺炎组,机械通气组高于非机械通气组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与撤机前相比,重度肺炎组机械通气1小时血清CC16浓度明显降低,机械通气72小时更低;而机械通气1小时血清TNF-α、IL-6、SP-D明显升高,机械通气72小时更高,差异均有统计学意义(P<0.05);与撤机前相比,重度肺炎组机械通气72小时,Cdyn值明显下降,机械通气1小时更低;而机械通气72小时Raw、PIP、WOB值明显升高,机械通气1小时更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清CC16浓度与TNF-α、IL-6、SP-D均呈负相关,与Cdyn呈正相关(P均<0.01)。ROC曲线中,CC16、TNF-α、IL-6、SP-D诊断重度肺炎的曲线下面积分别为0.905、0.704、0.832、0.825(P均<0.01)。结论社区获得性肺炎患儿血清CC 16、SP-D浓度与疾病严重程度相关;机械通气患儿CC 16浓度水平与Cdyn呈正相关关系;CC16对于重度肺炎病情变化具有较好的预测及评价作用。

BiPAP呼吸机联合坎地沙坦酯对肺心病急性期合并呼吸衰竭老年患者心肺功能及血清内皮素-1、Clara细胞蛋白和Copeptin水平的影响

目的分析BiPAP呼吸机联合坎地沙坦酯对肺心病急性期合并呼吸衰竭老年患者心肺功能及血清内皮素(ET)-1、Clara细胞蛋白(CC)16、和肽素(Copeptin)水平的影响。方法96例肺心病急性期合并呼吸衰竭老年患者随机分为两组各48例,对照组接受BiPAP无创呼吸机治疗,观察组接受BiPAP无创呼吸机联合坎地沙坦酯治疗。比较两组治疗2 w后的疗效、心肺功能指标及血清ET-1、CC16和Copeptin水平,并统计不良反应发生情况。结果观察组总有效率较对照组显著高(P<0.05)。治疗2个疗程后观察组肺动脉压(PASP)显著低于对照组,而每搏输出量(SV)、射血分数(EF)、舒张早期峰值速度与舒张晚期峰值速度比值(E/A)、1 s用力呼气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC)、FEV1%、呼吸流量峰值(PEF)指标水平显著高于对照组(P<0.05)。两组治疗后血清ET-1、CC16和Copeptin水平均显著下降,且观察组降低较多(P<0.05)。主要不良反应为低血压、头痛、恶心、发热等,两组发生率无统计学差异(P=0.726)。结论BiPAP呼吸机联合坎地沙坦酯对老年患者肺心病急性期合并呼吸衰竭疗效显著。

血清基质金属蛋白酶⁃12、纤维蛋白原、Clara细胞分泌蛋白⁃16联合临床特征预测慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者预后的风险

目的研究血清标志物及临床特征预测慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者预后的价值。方法比较急性加重期COPD不同预后患者临床资料,利用ROC分析基质金属蛋白酶⁃12(MMP⁃12)、纤维蛋白原(FIB)、Clara细胞分泌蛋白⁃16(CC⁃16)预测其预后不良的价值,并进行多因素该分析。结果预后不良患者中年龄≥60岁、肺功能Ⅲ-Ⅳ级、吸烟、合并冠心病、合并糖尿病、合并消化道出血出现比例及MMP⁃12、FIB、CC⁃16水平高于预后良好患者,差异有统计学意义(P<0.05)。不同血清标志物预测患者预后不良的下曲线面积为0.719、0.824、0.683。经logistic回归性分析证实MMP⁃12≥20.930 pg/mL,FIB≥3.465 g/L,CC⁃16≥0.405 pg/mL、年龄≥60岁、肺功能Ⅲ-Ⅳ级、吸烟、合并症是患者预后不良的危险因素。结论年龄、肺功能分级、合并症等临床特征及血清MMP⁃12、FIB、CC⁃16水平对急性加重期COPD患者预后有重要的预测作用。

N-乙酰半胱氨酸对COPD大鼠Clara细胞及CC16的影响

目的:观察抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型Clara细胞数量及其分泌蛋白CC16表达的影响。方法:单纯熏香烟法建立Wistar大鼠COPD模型。将大鼠随机分为对照组、COPD组和NAC干预组,每组10只。应用透射电镜观察COPD大鼠肺组织Clara细胞超微结构的变化。免疫组织化学方法检测各组大鼠肺组织Clara细胞数量。酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中CC16含量。RT-PCR法检测肺组织中CC16mRNA的含量。结果:COPD组大鼠终末细支气管上皮Clara细胞占上皮细胞的百分比明显低于对照组(P<0.01);NAC干预组明显高于COPD组(P<0.01)。COPD组大鼠BALF和血清中CC16蛋白水平明显低于对照组(P<0.01);NAC干预组明显高于COPD组(P<0.05)。COPD组大鼠肺组织中CC16mRNA的含量明显低于对照组和NAC干预组(均P<0.01)。结论:COPD大鼠的气道炎症可导致Clara细胞数量及CC16的合成及分泌量减少,抗氧化剂NAC可通过促进CC16的合成和分泌抑制气道炎症反应。

哮喘患儿血清白细胞介素-16、-10和免疫球蛋白E测定的意义

目的探讨哮喘患儿血清IL-16、IL-10和IgE水平测定的意义。方法对18例哮喘患儿及对照组14例健康儿童进行IL-16、IL-10和IgE水平测定并作相关性分析。结果哮喘患儿IL-16、血总IgE水平明显高于对照组P<0.05,P<0.01,而IL-10水平则低于对照组(P<0.05)。哮喘患儿血清IL-16水平与总IgE呈正相关(r=0.715P<0.01);IL-10水平与IgE呈负相关(r=-0.885P<0.01)。结论哮喘患儿气道炎症与IL-16的升高、IL-10降低有关,提示可针对IL-16、IL-10在气道炎症中作用的不同特点采取治疗十分必要。

右美托咪定对行非体外循环冠状动脉旁路移植术患者肺损伤及血清白细胞介素-10、肿瘤坏死因子-α和克拉拉细胞蛋白16水平的影响

目的探讨右美托咪定(DEX)对非体外循环冠状动脉旁路移植术(OPCABG)患者血清白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及克拉拉细胞蛋白16(CC16)水平的影响及DEX对肺的保护作用。方法采用随机数字表法将2016年8月至2018年9月于新乡医学院第一附属医院行OPCABG的112例冠状动脉性心脏病(CHD)患者分为观察组和对照组,每组56例。麻醉诱导前20 min,观察组患者静脉滴注DEX 1μg·kg^(-1),对照组患者静脉滴注等体积的生理盐水;第1支移植血管吻合结束后,观察组患者静脉滴注DEX 0.2~0.5μg·kg^(-1)·h^(-1)至手术结束,对照组患者静脉滴注等体积的生理盐水至手术结束。对2组患者麻醉诱导前30 min(T_(0))、气管插管后即刻(T_(1))、手术结束时(T_(2))、术后12 h(T_(3))、术后24 h(T_(4))、术后48 h(T_(5))时的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、脑电双频指数(BIS)、呼吸指数(RI)、氧合指数(OI)及血清IL-10、TNF-α、CC16水平进行比较;术前、术后48 h采用高分辨率计算机体层摄影术(HRCT)行胸部扫描,观察肺损伤情况;观察2组患者不良反应事件及术后吗啡使用情况。结果2组患者T_(0)时MAP、HR、BIS、RI及OI比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)、T_(5)时MAP显著低于T_(0)时(P<0.05);对照组患者T_(1)、T_(4)、T_(5)时MAP显著高于T_(0)时,T_(2)、T_(3)时MAP显著低于T_(0)时(P<0.05);T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)、T_(5)时观察组患者MAP显著低于对照组(P<0.05)。观察组患者T_(1)、T_(2)时HR显著低于T_(0)时(P<0.05),对照组患者T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)、T_(5)时HR显著高于T_(0)时(P<0.05);T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)、T_(5)时观察组患者HR显著低于对照组(P<0.05)。2组患者T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)时BIS显著低于T_(0)时(P<0.05),T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)、T_(5)时2组患者BIS比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组患者T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)、T_(5)时RI显著高于T_(0)时(P<0.05),观察组患者T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)时RI显著高于T_(0)时(P<0.05)。T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)、T_(5)时观察组患者RI显著低于对照组(P<0.05)。对照组患者T_(2)、T_(3)、T_(4)、T_(5)时OI显著低于T_(0)时(P<0.05),观察组患者T_(2)、T_(3)、T_(4)时OI显著低于T_(0)时(P<0.05)。T_(1)时2组患者OI比较差异无统计学意义(P>0.05);T_(2)、T_(3)、T_(4)、T_(5)时观察组患者OI显著高于对照组(P<0.05)。术前2组患者肺部HRCT图像未见异常;术后48 h,观察组患者肺部HRCT图像可见轻微“毛玻璃”样改变,对照组患者可见较明显“毛玻璃”样改变,且伴实变影。T_(0)时2组患者血清IL-10、TNF-α、CC16水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。T_(0)~T_(5),2组患者血清IL-10水平整体呈升高趋势(F=36.759、5.725,P<0.05);T_(3)、T_(4)、T_(5)时观察组患者血清IL-10水平显著高于对照组(P<0.05)。观察组患者T_(4)时血清TNF-α水平显著高于T_(0)时(P<0.05),对照组患者T_(3)、T_(4)、T_(5)时血清TNF-α水平显著高于T_(0)时(P<0.05)。T_(0)、T_(1)时2组患者血清TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05);T_(2)、T_(3)、T_(4)、T_(5)时,观察组患者血清TNF-α水平显著低于对照组(P<0.05)。对照组患者T_(3)时血清CC16水平显著高于T_(0)时(P<0.05);T_(3)、T_(4)、T_(5)时观察组患者血清CC16水平显著低于对照组(P<0.05)。2组患者均未出现呼吸抑制、心动过缓、低血压等不良反应事件。对照组和观察组患者术后吗啡使用率分别为19.6%(11/56)、0.0%(0/56),观察组患者术后吗啡使用率显著低于对照组(χ^(2)=12.198,P<0.05)。结论DEX有利于维持行OPCABG患者的血流动力学稳定,抑制机体炎症反应,减轻肺损伤。