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Laser scanning fluorescence microscopic measurement of the movement of cleaving egg surface of Rana Amurensis
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作者 GU GUOYAN (FORMERLY KU KUOYEN) CHENGTANG XU +1 位作者 KONGHUA ZHANG QIRONG GAO.(Shanghai Institute of Cell Biology, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China) 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1995年第1期9-24,共16页
By laser scanning fluorescence microscopy for quan-titative measurement of fluorescence intensity changes on egg surface stained with fluorescein isothiocyanate duxing cleavage furrow extending forward, it was found t... By laser scanning fluorescence microscopy for quan-titative measurement of fluorescence intensity changes on egg surface stained with fluorescein isothiocyanate duxing cleavage furrow extending forward, it was found that in area of presumptive cleavage furrow the scanning curve became ∨ shape, indicating dark stripe appeared in that place. Then the fluorescence intensity increased at the place where the botton of ∨ shape had located, and the scanning curve tuxned to ∧ shape, indicating single stripe was formed. While enhanced fluorescence appeared on the borders of ∧ shape, an M shape curve was found, show-ing double stripe occurred. During the distance between two borders of M shape incresing from 50 μm to 100μm,a fluorescence peak came to sight in the middle of the M shape, which being the cleavge furrow bottom. The two lateral sides of furrow bottom with decreasing fluorescence were nascent membrane. At that time the curve became W shape. By the sides of cleavage furrow the the stress folds became conspicous after double stripe stage, showing the stretching of the egg surface being increased. With our[31, 33] and others[32] reports that polylysine could induce the appearance of nascent membrane and phyto-hemagglutinins could decrease or prevent the appearance of nascent membrane, we believed the idea of Schroeder[25] that increasing mechanical stress could initiate nascent membrane formation and thought that the stress lay to the outsides of cleavage furrow. 展开更多
关键词 cleavage egg surface movement initiating nascent membrane formation laser scanning fluorescence microscopy Rana Amurensis
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Transcriptome profiles of embryos before and after cleavage in Eriocheir sinensis:identification of developmental genes at the earliest stages
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作者 惠敏 崔朝霞 +1 位作者 刘媛 宋呈文 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2017年第4期770-781,共12页
In crab, embryogenesis is a complicated developmental program marked by a series of critical events. RNA-Sequencing technology offers developmental biologists a way to identify many more developmental genes than ever ... In crab, embryogenesis is a complicated developmental program marked by a series of critical events. RNA-Sequencing technology offers developmental biologists a way to identify many more developmental genes than ever before. Here, we present a comprehensive analysis of the transcriptomes of Eriocheir sinensis oosperms (Os) and embryos at the 2-4, cell stage (Cs), which are separated by a cleavage event. Atotal of 18 923 unigenes were identified, and 403 genes matched with gene ontology (GO) terms related to developmental processes. In total, 432 differentially expressed genes (DEGs) were detected between the two stages. Nine DEGs were specifically expressed at only one stage. These DEGs may be relevant to stage-specific molecular events during development. A number of DEGs related to 'hedgehog signaling pathway', 'Wnt signaling pathway' 'germplasm', 'nervous system', 'sensory perception' and 'segment polarity' were identified as being up-regulated at the Cs stage. The results suggest that these embryonic developmental events begin before the early cleavage event in crabs, and that many of the genes expressed in the two transeriptomes might be maternal genes. Our study provides ample information for further research on the molecular mechanisms underlying crab development. 展开更多
关键词 mitten crabs embryo development fertilized egg cleavage TRANSCRIPTOMICS
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SGK1对Cyclin B/Cdc2通路介导小鼠G_(1)期受精卵卵裂的调控作用及其机制
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作者 张慧灵 韩迪 +2 位作者 郭文秀 庞海垚 孟峻 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期628-637,共10页
目的:探讨血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1(SGK1)在小鼠细胞周期G_(1)期受精卵早期发育过程中的调控作用,并阐明相关机制。方法:取若干只4~6周龄且体质量约为20 g的雌鼠和若干只8周龄以上且体质量约为30 g的雄鼠,雌鼠腹腔注射孕马血清促... 目的:探讨血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1(SGK1)在小鼠细胞周期G_(1)期受精卵早期发育过程中的调控作用,并阐明相关机制。方法:取若干只4~6周龄且体质量约为20 g的雌鼠和若干只8周龄以上且体质量约为30 g的雄鼠,雌鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG),每只10 IU,48 h后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(HCG),每只10 IU,并将注射HCG的雌鼠与雄鼠1∶1合笼过夜。取交配成功的雌鼠受精卵,注射HCG后分别于12~21 h、21~26 h、26~28 h和28~30 h收集细胞周期G_(1)期、S期、G2期及M期的受精卵,并于光学显微镜下观察不同细胞周期的细胞形态表现。收集小鼠超排卵后G_(1)期受精卵,体外转录生成mRNA后,分为未注射组、Tris-EDTA缓冲液注射组(TE注射组)和SGK1-mRNA注射组。采用SGK1抗体与KSOM培养液配置1∶25、1∶50、1∶100、1∶200和0共5种不同浓度SGK1抗体组的培养液,培养小鼠G_(1)期受精卵。Western blotting法检测各组小鼠受精卵中SGK1蛋白表达水平和各组小鼠及不同浓度SGK1抗体组HCG注射不同时间受精卵中磷酸化细胞分裂周期因子2(Cdc2)酪氨酸15位点(Cdc2-pTyr15)去磷酸化情况,相差显微镜观察各组小鼠和不同浓度SGK1抗体组受精卵发育情况,Western blotting法检测HCG注射不同时间小鼠受精卵中磷酸化SGK1-苏氨酸256位点(SGK1-pThr256)和Cdc2-pTyr15蛋白表达水平。结果:与未注射组和TE注射组比较,SGK1-mRNA注射组SGK1蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。HCG注射后27~28 h,SGK1-mRNA注射组小鼠受精卵中Cdc2-pTyr15磷酸化信号逐渐消失,至HCG注射29 h,Cdc2-pTyr15磷酸化信号完全消失;HCG注射后28~29 h,未注射组和TE注射组小鼠受精卵中Cdc2-pTyr15磷酸化信号逐渐消失,至HCG注射后30 h,Cdc2-pTyr15磷酸化信号完全消失;随着SGK1抗体浓度升高,不同浓度SGK1抗体组受精卵中Cdc2-pTyr15磷酸化信号减弱和磷酸化信号消失的时间逐渐延长。HCG注射后27 h,SGK1-mRNA注射组小鼠受精卵开始卵裂;HCG注射后31 h,SGK1-mRNA注射组受精卵几乎全部分裂为G2期细胞受精卵;HCG注射后33 h,0和1∶200 SGK1抗体组受精卵全部发生卵裂;随着SGK1抗体浓度升高,1∶25、1∶50和1∶100 SGK1抗体组受精卵卵裂逐渐减少,在1∶25 SGK1抗体组受精卵卵裂减少最明显。HCG注射后31 h,与未注射组和TE注射组比较,SGK1-mRNA注射组小鼠受精卵死亡率明显降低(P<0.05),卵裂率明显升高(P<0.05)。注射HCG后31和33 h,随着SGK1抗体浓度升高,与1∶200 SGK1抗体组比较,1∶100、1∶50和1∶25SGK1抗体组受精卵死亡率逐渐升高(P<0.05),卵裂时间延长,受精卵卵裂率降低(P<0.05),并呈剂量依赖性,其中1∶25 SGK1抗体组受精卵卵裂率最低。HCG注射后27 h,小鼠受精卵中SGK1-pThr256蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05或P<0.01),并呈时间依赖性;HCG注射后28~29 h,小鼠受精卵中Cdc2-pTyr15蛋白表达水平逐渐降低(P<0.01),并呈时间依赖性,并于HCG注射后30 h完全消失。结论:过表达或抑制SGK1均会影响小鼠G_(1)期受精卵进入M期的时间,SGK1蛋白可能是小鼠G_(1)期受精卵早期发育的调控因子之一,其可能通过Cdc2调节G_(1)期受精卵发育。 展开更多
关键词 血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1 受精卵 细胞分裂 磷脂酰肌醇3-激酶 卵裂
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狮弓蛔虫卵卵壳的光镜及扫描电镜观察 被引量:2
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作者 孙晓陆 王钫 +1 位作者 王天兴 丁新民 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 1992年第3期55-57,共3页
本文用光学显微镜和扫描电子显微镜观察了狮弓蛔虫虫卵表面的微观形态。讨论和分析了其虫卵的形态学特征等。
关键词 狮弓蛔虫 卵壳 孵化 卵裂
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猪卵母细胞胞质内单精子注射影响因素的研究 被引量:1
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作者 张立苹 刘菊菊 +4 位作者 刘西梅 李莉 肖红卫 乔宪凤 郑新民 《江西农业学报》 CAS 2013年第1期125-127,131,共4页
探讨了猪卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)的有关影响因素。结果表明:在本实验室条件下,在体外成熟液中添加30 ng/mL的EGF可以明显促进ICSI胚胎的后续发育(P<0.05);当精子操作液中PVP浓度为20%时可以显著促进ICSI胚胎的后续发育(P<... 探讨了猪卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)的有关影响因素。结果表明:在本实验室条件下,在体外成熟液中添加30 ng/mL的EGF可以明显促进ICSI胚胎的后续发育(P<0.05);当精子操作液中PVP浓度为20%时可以显著促进ICSI胚胎的后续发育(P<0.05);操作液中添加5μg/mL的CB对ICSI胚胎的发育没有显著影响。 展开更多
关键词 胞质内单精子注射 卵母细胞 受精率 卵裂率
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Nuclear apoptosis induced by isolated mitochondria 被引量:2
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作者 JIANGZHENGFAN YUNZHAO 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2000年第3期221-232,共12页
We isolated and purified mitochondria from mouse livers and spinach leaves. When added into egg extracts of Xenopus laevis, they caused nuclei of mouse liver to undergo apoptotic changes. Chromatin condensation, margi... We isolated and purified mitochondria from mouse livers and spinach leaves. When added into egg extracts of Xenopus laevis, they caused nuclei of mouse liver to undergo apoptotic changes. Chromatin condensation, margination and DNA ladder were observed. After incubating isolated mitochondria in some hypotonic solutions, and centrifuging these mixtures at high speed, we got mitochondrial supernatants. It was found that in the absence of cytosolic factor, the supernatant alone was able to induce apoptotic changes in nuclei. The effective components were partly of protein. DNA fragmentation was partly inhibited by caspase inhibitors AC-DEVD-CHO and AC- YVADCHO. Meanwhile, caspase inhibitors fully blocked chromatin condensation. Primary characterization of the nuclear endonuclease(s) induced by mitochondrial supernatants was also conducted. It was found that this endonuclease is different from endonuclease G, cytochrome c-induced nuclease, or Ca2+-activated endonuclease. 展开更多
关键词 MITOCHONDRIA SUPERNATANT APOPTOSIS egg ex- tract NUCLEI DNA cleavage.
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微束激光照射黑眶蟾蜍早期胚胎产生骈联胚的研究 被引量:1
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作者 张开兴 丁汉波 《激光生物学》 CAS CSCD 1994年第4期547-550,共4页
用红宝石激光微束照射黑眶蟾蜍卵二细胞期的卵裂沟,具有产生双头或双头双尾的骈联胚。本文对获得的三只骈联胚进行研究。
关键词 激光微束 受精卵 骈联胚 蟾蜍 胚胎
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HA-PIPP^(H557A)对小鼠受精卵卵裂的影响
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作者 邓欣 张帆 +2 位作者 张国利 李亘松 于秉治 《中国实验诊断学》 北大核心 2011年第5期806-808,共3页
目的研究脯氨酸丰富的肌醇多磷酸5-磷酸酶(PIPP)在组氨酸557位点突变为丙氨酸时PIPPH557A对小鼠受精卵卵裂的调节作用。方法将HA-PIPPH557A重组质粒转染到小鼠受精卵中,用免疫荧光染色法检测HA-PIPPH557A对小鼠受精卵卵裂的影响。然后... 目的研究脯氨酸丰富的肌醇多磷酸5-磷酸酶(PIPP)在组氨酸557位点突变为丙氨酸时PIPPH557A对小鼠受精卵卵裂的调节作用。方法将HA-PIPPH557A重组质粒转染到小鼠受精卵中,用免疫荧光染色法检测HA-PIPPH557A对小鼠受精卵卵裂的影响。然后使用相差显微镜观察并计数HA-PIPPH557A对受精卵卵裂率的影响。结果 HA-PIPPH557A在小鼠受精卵的有丝分裂过程中对卵裂的调节与PIPP的作用相反。并且他们之间的比较具有显著意义(P<0.001)。结论 PIPPH557A在小鼠受精卵中通过调节PIPP的活性作用干扰受精卵卵裂。 展开更多
关键词 组氨酸557位点突变为丙氨酸的肌醇多磷酸5-磷酸酶(PIPPH557A) 小鼠受精卵 卵裂
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囊胚形成的影响因素及应用价值研究
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作者 曹芳 王宇峰 +3 位作者 于春梅 夏西洋 戴秀亮 杨海燕 《现代医药卫生》 2018年第22期3483-3486,共4页
目的探讨不同级别第3天(D3)卵裂期胚胎培养至第6天(D6)的囊胚形成情况,分析非优质胚胎继续培养至囊胚的形成率及形成速度的影响因素。方法选取2017年1—8月在该中心行辅助生殖技术助孕的180对夫妇患者,共收集1 009枚D3卵裂期冷冻后剩余... 目的探讨不同级别第3天(D3)卵裂期胚胎培养至第6天(D6)的囊胚形成情况,分析非优质胚胎继续培养至囊胚的形成率及形成速度的影响因素。方法选取2017年1—8月在该中心行辅助生殖技术助孕的180对夫妇患者,共收集1 009枚D3卵裂期冷冻后剩余胚胎,分为优质胚胎组(664枚)及非优质胚胎组(345枚),比较2组总囊胚形成率等。同时,据囊胚形成速度分为无囊胚形成亚组、第5天(D5)亚组、D6亚组和D5+D6亚组,根据囊胚形成情况分为A组、B组和C组,分析囊胚形成率和形成速率的影响因素。结果优质胚胎组中总囊胚形成率和D5、D6、D5+D6亚组优质囊胚形成率均优于非优质胚胎组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与A组比较,B组、C组卵裂期优质胚胎构成比、长方案构成比、体外受精构成比、人线毛膜促性腺激素(HCG)日雌二醇(E2)水平较高,而拮抗剂方案构成比、卵细胞浆内单精子注射构成比较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与无囊胚形成亚组比较,D5、D6、D5+D6亚组卵裂期优质胚胎构成比、HCG日E2水平较高,卵裂期非优质胚胎构成比、排卵障碍因素较低;D6、D5+D6亚组长方案构成比较高,拮抗剂方案构成比较低,而D5亚组输卵管因素构成比较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 D3非优质胚胎仍具有发育至囊胚的潜能,但优质囊胚的形成率、种植率均低于优质卵裂期胚胎。用药方案、授精方式、不孕原因影响囊胚总形成率,总囊胚形成率高的周期胚胎种植率更高。 展开更多
关键词 囊胚 胚胎 分裂期 移植
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两种散白蚁两性生殖与孤雌生殖胚胎发育比较研究 被引量:2
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作者 谈彦玲 党玉蕾 +4 位作者 张宏贵 郭晓慧 严兴荣 苏晓红 邢连喜 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期438-445,共8页
【目的】探究散白蚁两性生殖胚胎和兼性孤雌生殖胚胎各自的发育特点。【方法】以黑胸散白蚁Reticulitermes chinensis和尖唇散白蚁R.aculabialis各自的受精卵(雌雄配对所产的卵)和未受精卵(雌雌配对所产的卵)为研究对象,采用激光共聚焦... 【目的】探究散白蚁两性生殖胚胎和兼性孤雌生殖胚胎各自的发育特点。【方法】以黑胸散白蚁Reticulitermes chinensis和尖唇散白蚁R.aculabialis各自的受精卵(雌雄配对所产的卵)和未受精卵(雌雌配对所产的卵)为研究对象,采用激光共聚焦显微镜观测两种散白蚁的受精卵和未受精卵的卵裂状态,数码显微系统拍照观察卵的外部形态变化。【结果】黑胸散白蚁蚁后所产的受精卵和未受精卵在巢中均能进行卵裂,但是未受精卵在24和48 h时的卵核数无显著性差异,而受精卵卵核数在24和48 h时有显著性差异;15 d时未受精卵的体积没有发生显著变化,而受精卵的体积显著性增大;15-20 d时未受精的蚁卵死亡,而受精卵正常发育。尖唇散白蚁受精卵和未受精卵在相同的时间段内卵核数没有显著性差异,48 h时的卵核数明显比24 h时多;第10天时受精卵长度和宽度发生显著性变化,同时体积也明显增大,而未受精卵在第15天时长度和宽度才开始发生显著性变化,同时体积也开始显著增大。【结论】具有兼性孤雌生殖能力的尖唇散白蚁,受精卵和未受精卵卵裂速度相同,但受精卵外形体积变化比未受精卵早。黑胸散白蚁未受精卵能继续进行卵裂,但发育异常,不能孵化;两种白蚁卵发育过程中卵的长度和宽度同时发生变化。黑胸散白蚁孤雌卵的卵裂特性可能是白蚁两性生殖向兼性孤雌生殖进化的过渡适应阶段。 展开更多
关键词 散白蚁 黑胸散白蚁 尖唇散白蚁 胚胎发育 孤雌生殖 生殖进化 卵裂
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白乌鳢胚胎及胚后发育 被引量:1
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作者 符鹏 李艳 +4 位作者 安日古 李骞 李星霖 王永明 邹远超 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第12期65-68,293,共5页
为了研究白乌鳢胚胎发育各个阶段的形态变化以及发育时序,试验通过显微观察并拍摄白乌鳢(Opniocepnalus argus)胚胎发育及胚后发育过程的形态特征,并对白乌鳢胚胎发育各时期特征进行了详细描述。结果表明:成熟白乌鳢卵为球形、桔黄色,... 为了研究白乌鳢胚胎发育各个阶段的形态变化以及发育时序,试验通过显微观察并拍摄白乌鳢(Opniocepnalus argus)胚胎发育及胚后发育过程的形态特征,并对白乌鳢胚胎发育各时期特征进行了详细描述。结果表明:成熟白乌鳢卵为球形、桔黄色,为浮性卵,有油球,卵径为(2.35±0.05)mm,吸水膨胀后直径达(2.59±0.08)mm。在水温26~28℃条件下,受精卵在受精50 min后开始第一次卵裂,受精22 h 58 min后开始形成器官,受精41 h 48 min后孵出仔鱼,积温1 082.92℃。初孵仔鱼全长为(5.62±0.26)mm,卵黄囊大。根据白乌鳢胚胎发育过程中的形态特点,可将白乌鳢的胚胎发育过程分为7个阶段、27个发育期。 展开更多
关键词 白乌鳢 受精卵 胚胎发育 胚后发育 卵裂
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多聚赖氨酸引起林蛙卵表面的聚集以及对分裂沟的影响
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作者 吴亚兰 蒋俶 顾国彦 《实验生物学报》 CSCD 1993年第1期51-64,共14页
1.多聚赖氨酸能使经异硫氰基荧光素染色的卵表面均匀分布的荧光聚集成点状或块状的斑块,荧光聚集时膜下的色素颗粒随之同步聚集。早期的聚集有三种方式。2.聚集的迟早和出现斑块的大小在卵表面不同区域是不同的。腹方新月区最早;灰色新... 1.多聚赖氨酸能使经异硫氰基荧光素染色的卵表面均匀分布的荧光聚集成点状或块状的斑块,荧光聚集时膜下的色素颗粒随之同步聚集。早期的聚集有三种方式。2.聚集的迟早和出现斑块的大小在卵表面不同区域是不同的。腹方新月区最早;灰色新月区次之;动物性半球稍迟,荧光和色素颗粒最后都集中到动物性极形成顶帽,其余区域成为失去色素颗粒的区域;聚集引起收缩,最后植物性半球常常破裂。3.未受精卵亦出现与上述相同的反应,这提示腹方新月区可能是精子进入卵子的区域。4.细胞松弛素不能抑制多聚赖氨酸引起的聚集。5.多聚赖氨酸能抑制分裂沟的出现,能使已出现的分裂沟消失。6.失去色素颗粒区域的细胞膜在形态、功能等方面与分裂沟中的新膜相同。对新膜出现的位置和形成因素进行了讨论。 展开更多
关键词 林蛙 多聚赖氨酸
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