α-Glucosidase Inhibitory Activity-guided Identification of Compounds from Clerodendrum bungei Steud by HPLC-ESI-QTOF-MS/MS

Objective To identify the compounds withα-glucosidase inhibitory activity from Clerodendrum bungei Steud(Chou Mu Dan,臭牡丹)using HPLC-ESI-QTOF-MS/MS.Methods The ethanol extracts of Clerodendrum bungei Steud(Chou Mu Dan,臭牡丹)were partitioned with petroleum ether,ethyl acetate,n-butanol,and water.The assay forα-glucosidase inhibitory activity revealed strongα-glucosidase inhibitory activity in the ethyl acetate fraction,and the bioactive compounds present in this fraction were identified by the HPLCESI-QTOF-MS/MS method.Results A total of 29 compounds were determined,among the identified bioactive components;these included 12 phenylethanoid glycosides(compounds 5,6,17,20-22,24),7 flavonoids(compounds 10,19,23,25-28),5 phenolic acids(compounds 2-4,7,9),and 5 other compounds.Compounds 2-4,7,9-10,12-13,15,19,and 26,with a potentialα-glucosidase inhibitory activity,have been reported previously.Conclusions Our results show that the methodology used in this study is feasible,credible,and rapid in identifying known compounds and also for characterizing new natural glucosidase inhibitory candidates from Clerodendrum bungei Steud(Chou Mu Dan,臭牡丹).

Anorectal Pharmacodynamics and In Vitro Drug Release of Clerodendrum bungei Steud.Extract Gel

[Objectives]To determine the optimal preparation technology of Clerodendrum bungei Steud.extract gel by orthogonal test and gel quality test method in General Rule 0114 of Chinese Pharmacopoeia(Volume IV,2020 Edition),and to study its anorectal pharmacodynamics and drug release in vitro.[Methods]Carbomer 940,propylene glycol and absolute ethyl alcohol were selected as the main factors,and the preparation technology of C.bungei Steud.extract gel was optimized by orthogonal test.The mouse model of ulcerative hemorrhoids was established with glacial acetic acid(HAC)and compared with Ma Yinglong musk hemorrhoids ointment.The recovery of trauma was compared between the two groups.At the same time,porcine small intestine was used as semi-permeable membrane to make diffusion cell to simulate anal environment,and the drug release in vitro was studied.[Results]The C.bungei Steud.extract gel was smooth in appearance and good in stability.It could effectively treat anal ulcer in mice and release quickly in vitro.[Conclusions]The formula is reasonable,and the effect of animal experiment is remarkable,which can provide a new treatment plan for ulcerative hemorrhoids.

遮光对臭牡丹生长和光合特性的影响

对全光照(遮光率0%,对照)以及遮光率25%、50%和75%条件下臭牡丹(Clerodendrum bungei Steud.)生长和光合特性的变化进行了研究。结果表明:随遮光率的提高臭牡丹枝长生长量和比叶面积逐渐增加、枝条直径生长量和比叶质量逐渐减小,叶面积呈波动变化,其中在遮光率25%条件下叶面积最小。在遮光条件下叶片以及栅栏组织和海绵组织厚度差异不显著,但均显著小于对照。在遮光条件下叶片叶绿素a和总叶绿素含量以及叶绿素a/b值总体上随遮光率提高逐渐增加且均高于对照,仅在遮光率25%条件下叶绿素b以及总叶绿素含量低于对照。在遮光率25%和75%条件下叶片净光合速率(Pn)有明显"午休"现象,Pn日变化曲线近似于"双峰型";而在对照和遮光率50%条件下Pn无"午休"现象,日变化曲线近似于"单峰型";4个处理组Pn峰值的大小以及峰值出现时间有差异。在上午9:00,在遮光率25%和50%条件下叶片气孔导度(Gs)略有降低,而在对照和遮光率75%条件下Gs明显升高;此后随时间的延长各处理的Gs总体上呈逐渐下降的趋势。各处理组叶片胞间CO2浓度(Ci)的日变化曲线基本一致,均呈早晚略高、中午略低的趋势,谷值均出现在13:00。在对照及遮光率25%和75%条件下,叶片蒸腾速率(Tr)的日变化曲线均呈"双峰型";而在遮光率50%的条件下Tr呈逐渐降低的趋势,日变化曲线近似于"单峰型"。总体上看,4个处理组叶片的Pn、Gs、Ci和Tr日平均值均无显著差异;且在遮光率25%、50%和75%条件下臭牡丹叶片的Pn与Tr间有显著或极显著相关性。综合分析结果表明:臭牡丹是偏阴生植物,在栽培中适度遮光有利于臭牡丹的生长发育。

重金属镉胁迫下臭牡丹的生理响应及富集研究

为探究镉胁迫对臭牡丹生理响应及各部位镉富集特征的影响,进行盆栽试验,设置不同浓度(0.00、0.10、0.30、0.60和0.90mmol·L^(-1))镉梯度,测定12、24和36 d后植物抗氧化酶活性、叶绿素含量、叶绿素荧光参数及各部位镉含量。结果表明,SOD、CAT活性随胁迫浓度增加总体先升后降,POD活性在高浓度下变化显著,前期增强,后期减弱;短时间、低浓度的镉污染会刺激臭牡丹提高叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总量和叶绿素a/b以适应不良环境,长时间、高浓度的胁迫则产生较强的抑制效应;叶片Fv/Fm在高浓度后期明显减小,ETR先升后降;臭牡丹各器官镉富集能力存在显著差异,表现为根>茎>叶,其富集系数与各部位镉富集量呈负相关,表明胁迫加深会阻碍根部镉富集过程从而产生毒害效果。

臭牡丹通过促炎细胞因子和NF-κB缓解大鼠神经病理性疼痛

目的:探讨中药臭牡丹(clerodendrum bungei steud,CBS)对坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)所致神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及可能机制。方法:雄性成年SD大鼠32只,随机分为空白对照组(Ctrl)、假手术组(Sham)、模型组(SNI)和给药组(30 g/kg CBS组)。CBS组于SNI术后第7天给予30 g/kg CBS,0.5 ml/100 g灌胃,持续28天;其它3组给予同等体积生理盐水灌胃。于术前1天、术后7、14、21、28、35天测定机械缩足反射阈值(Paw withdrawal threshold,PWT)。灌胃28天后,应用qPCR及Western blot检测臭牡丹对NF-κB、TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA及蛋白表达水平影响。结果:与SNI组相比,CBS干预后的第14、21和28天,机械缩足反射阈值显著上升(P<0.05);给予30 g/kg CBS灌胃后可使SNI大鼠脊髓和背根神经节NF-κB、TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA和蛋白含量的表达显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论:CBS对SNI模型所致神经病理性疼痛的机械痛敏具有缓解作用,其镇痛机制可能是通过抑制促炎细胞因子与NF-κB信号通路来发挥其作用的。

逆境条件下镉对臭牡丹幼苗生理变化的影响

为探究镉胁迫对臭牡丹幼苗生理变化的影响,进行土培试验,设0、0.1、0.3、0.6、0.9 mmol/L 5种镉胁迫浓度处理,测定其对臭牡丹叶片叶绿素荧光参数、丙二醛、脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白含量的影响。结果表明:随着镉处理浓度升高,叶片PSⅡ潜在活性(Fv/Fo)和光化学淬灭系数(q P)逐渐减小,最高抑制率分别为43.10%和37.82%,而非光化学淬灭系数(q N)逐渐增加,最大增幅达48.13%;低浓度镉胁迫使臭牡丹幼苗可溶性糖和可溶性蛋白含量分别提高39.01%和73.07%,而高浓度镉则对植株可溶性糖和可溶性蛋白含量产生抑制作用。叶片MDA、脯氨酸含量随镉浓度的增加而上升,其中丙二醛含量在胁迫前期增长平缓,后期增长趋势显著,最高增长率达45.29%。可见臭牡丹对镉胁迫具有一定的适应性,可以通过调节自身光合特性和累积渗透调节物质缓解胁迫伤害。

铝锰复合胁迫下臭牡丹抗逆性及其DNA损伤的研究

以臭牡丹(Clerodendrum bungei Steud.)幼苗为试验对象,配制Al^(3+)浓度梯度为0.00、0.05、0.20、0.40和0.80 mmol·L^(-1),Mn^(2+)浓度梯度为0.00、2.00、4.00、8.00和12.00 mmol·L^(-1)的胁迫液,在土培条件下进行单一和复合胁迫处理,研究10、20、30 d后臭牡丹幼苗的抗氧化酶含量等生理应答及DNA状态,以探究臭牡丹对Al、Mn胁迫的抗性,以期为臭牡丹的扩大生产提供参考,为植物抗逆性研究奠定基础。实验结果表明:(1)Al-Mn复合胁迫对3种抗氧化酶的互作效应有所不同,超氧化物歧化酶活性随胁迫浓度升高而降低,最高抑制率达45.1%,趋势与单一胁迫处理大致相似;过氧化物酶活性在复合胁迫下呈先升后降趋势,且低浓度复合胁迫处理所受影响小于单一胁迫处理,高浓度下则抑制效应加重;相较铝、锰单一胁迫处理,低浓度复合胁迫使过氧化氢酶活性分别提高84.1%和140.1%,高浓度则分别降低61.5%和40.1%;(2)Al^(3+)、Mn^(2+)共存时均促进丙二醛、脯氨酸含量的积累,表现为协同效应;(3)利用CASP软件对彗星电泳图像进行分析,结果显示,低浓度Al^(3+)、Mn^(2+)单一及复合胁迫下,臭牡丹根系DNA几乎没有受到损伤,而当胁迫较强时(Al 0.80 mmol·L^(-1)、Mn 12.00 mmol·L^(-1)、Al 0.40 mmol·L^(-1)-Mn 8.00 mmol·L^(-1)、Al 0.80 mmol·L^(-1)-Mn 12.00 mmol·L^(-1)),OTM大幅增加,Al 0.40 mmol·L^(-1)-Mn 8.00 mmol·L^(-1)复合胁迫分别是单一胁迫的1.40倍和1.44倍,且T3较T4增幅达67.9%,说明高浓度胁迫造成的损害较严重,复合胁迫产生的损伤较单一胁迫更强。综合分析认为:低浓度单一金属离子对臭牡丹生长具有一定促进作用,而当铝、锰浓度分别大于或等于0.40 mmol·L^(-1)和8.00 mmol·L^(-1)时则会对其造成损伤,且复合处理对不同指标具有不同效应。因而,在实际大规模生产中应考察土壤金属离子的种类和浓度,依据臭牡丹的耐受程度选择合适的培育土壤。

臭牡丹对SNI诱导的神经病理性痛大鼠模型痛敏行为的影响

目的:观察臭牡丹(Clerodendrum Bungei Steud,CBS)对坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)诱导的神经病理性痛大鼠所致机械痛敏及热痛敏的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为空白对照组(Ctrl)、假手术组(Sham)、模型组(SNI)和给药组(30 g·kg^(-1)CBS组)。术后第7天开始,SNI+CBS组大鼠p.o给予30 g·kg^(-1)的CBS,以0.5 m L·100 g^(-1)为给药体积,连续灌胃28 d,Ctrl组、Sham组和SNI组大鼠均p.o给予同体积生理盐水。于术前1 d和术后第7、14、21、28和35 d分别测定机械缩足反射阈值(Paw withdrawal threshold,PWT)及热辐射刺激缩爪反应潜伏期(Paw Withdrawal Latency,PWL)。结果:与假手术组相比,模型组PWT在各时间点均明显降低(P<0.001);而PWL值变化无统计学差异(P>0.05)。与模型组相比,给予剂量30 g·kg^(-1)CBS干预后的第14、21、28和35 d,机械缩足反射阈值显著上升(P<0.05,P<0.01);热辐射刺激缩爪反应潜伏期有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:30 g·kg^(-1)CBS灌胃给药可显著减轻SNI所致神经病理性痛大鼠的机械缩足反射阈值,但对大鼠热辐射刺激缩爪反应潜伏期作用效果不明显。

雷公山民族地区臭牡丹的分布及实用价值研究

[目的]摸清雷公山民族地区野生臭牡丹的分布和实用价值。[方法]采用文献调查、实地田野调查访问等方法,分析雷公山民族地区野生臭牡丹资源分布、储量及在这些地区的应用情况,并与传统中医中药应用进行对比,研究其药理作用的差异。[结果]臭牡丹在雷公山民族地区资源分布广、储量较丰富,在这些地区被广泛应用;雷公山民族地区臭牡丹除了有传统的药用及园林绿化作用外,还有防虫、除虫、防害防盗等作用。[结论]该研究为臭牡丹的开发提供参考途径。

臭牡丹中糖苷类化学成分研究

目的:研究臭牡丹Clerodendrum bungei Steud.中的糖苷类成分。方法:采用硅胶、ODS和半制备液相色谱等方法对臭牡丹70%乙醇提取物的乙酸乙酯部位进行分离纯化,并通过1D-NMR、MS等现代波谱技术对化合物结构进行鉴定。结果:从臭牡丹70%乙醇提取物的乙酸乙酯部位分离得到11个糖苷类化合物,分别鉴定为:金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(1)、田蓟苷(2)、香叶木苷(3)、芹菜素-7-O-β-D-芦丁糖苷(4)、金合欢素-7-O-β-D-芦丁糖苷(5)、香叶木素-7-O-(2″-O-β-D-葡萄糖醛酸,6″-O-α-L-鼠李糖)-β-D-葡萄糖苷(6)、金合欢素-7-O-(2″-O-β-D-葡萄糖醛酸,6″-O-α-L-鼠李糖)-β-D-葡萄糖苷(7)、芹菜素-7-O-(2″-O-β-D-葡萄糖醛酸,6″-O-α-L-鼠李糖)-β-D-葡萄糖苷(8)、松果菊苷(9)、毛蕊花糖苷(10)、异毛蕊花糖苷(11)。结论:其中,化合物1~9为首次从该植物中分离得到。

臭牡丹化学成分及药理作用的研究进展

臭牡丹Clerodendrum bungei Steud.为马鞭草科大青属植物臭牡丹全草,为民间常用中草药,具有消肿解毒、活血散瘀之功效。通过对臭牡丹化学成分、药理作用及临床应用进行文献综述,总结出臭牡丹中含有苯乙醇苷类、萜类、甾醇类等多类化学成分;作用广泛,具有抗肿瘤、镇痛、抑菌及抗炎等诸多药理作用;临床上具有治疗荨麻疹、癌症及改善月经不调等作用。为臭牡丹的深入研究和开发利用提供参考。

臭牡丹调控脊髓N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基缓解神经病理性疼痛

目的:探讨臭牡丹(Clerodendrum bungei Steud.,CBS)的镇痛作用是否与N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-Daspartate,NMDA)受体相关。方法:雄性成年SD大鼠24只,随机分为假手术组(Sham组)、坐骨神经分支选择性损伤(Spared nerve injury,SNI)模型组(SNI组)和30 g·kg^(-1)CBS治疗组(SNI+CBS组)。SNI+CBS组于SNI术后第7 d灌胃给予CBS,持续21 d,Sham组和SNI组给予同等体积的生理盐水灌胃。于术后第26~28 d检测大鼠步态;第28 d取脊髓,qPCR方法检测NMDA受体亚基GluNR1、GluN2A、GluN2B和GluN3A mRNA表达,Western blot和免疫荧光方法检测GluN2A和GluN2B蛋白水平,分子对接方法模拟CBS中主要成分与GluN2B的亲和力。结果:与Sham组相比,SNI模型组大鼠患肢的站立时间、最大接触时的最大强度、足印长度、足印宽度和爪印面积降低,最大接触时间百分比升高,脊髓GluN2A、GluN2B和GluN3A mRNA表达降低,GluN2A和GluN2B蛋白水平升高。与SNI组相比,SNI+CBS组大鼠患肢的站立时间、最大接触时的最大强度、足印长度和足印宽度升高,最大接触时间百分比降低,脊髓GluN2A、GluN2B和GluN3A mRNA表达升高,GluN2A和GluN2B蛋白水平降低。各组GluNR1 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。分子对接实验结果显示,原始配体Ro25-6981与GluN2B对接的结合自由能(△G)为−11.72 KJ·mol^(-1),估计抑制常数(Ki)为2.58 nmol;CBS主要成分α-香树脂醇、赪桐酮和木栓酮与GluN2B对接的△G及Ki与Ro25-6981接近,甚至优于Ro25-6981;从对接构象上看,Ro25-6981与木栓酮占据了GluN1B结合位点,α-香树脂醇和赪桐酮则占据了GluN2B结合位点,呈现出较强的NMDA受体抑制作用。结论:CBS对SNI模型所致神经病理性疼痛具有缓解作用,其机制可能是通过抑制NMDA受体来实现。

臭牡丹提取物体外抑菌及免疫毒理学研究

目的:臭牡丹(CBS)在传统中医药中运用广泛,具有一定的抗菌性和提高人体免疫功能的功效,本文探讨CBS对地塞米松(DXMS)所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响,为后续综合开发免疫性疾病新药提供参考。方法:通过不同浓度CBS提取物对致病大肠杆菌等6种细菌进行体外抑菌实验,根据外观和抑菌效果,选择合适供试品,用不同浓度CBS对免疫抑制小鼠进行腹腔注射,以云芝多糖(CVP)为阳性对照,检测腹腔免疫器官指数、巨噬细胞吞噬功能及T淋巴细胞亚群等免疫指标。结果:发现CBS水提物在125g/L时,对致病大肠杆菌等6种细菌均有理想的抑制作用;CBS提纯处理后在10~20g/L浓度范围内提高免疫器官指数及增强巨噬细胞吞噬功能,对剂量有依赖性,对免疫器官有明显保护作用,同时高浓度CBS使免疫抑制小鼠降低CD4^+T细胞数量、升高CD8^+T细胞数量、CD4^+/CD8^+T细胞数量明显降低至正常值,表明了高浓度CBS可使DXMS导致的细胞免疫功能正常化。结论:CBS可提高免疫抑制小鼠免疫器官及细胞的免疫功能,且效果优于CVP。

臭牡丹大黄素对急性肝衰竭小鼠生化指标及肝细胞内质网应激的影响

目的观察臭牡丹大黄素对小鼠急性肝衰竭的治疗作用及肝细胞内质网应激的影响并探讨其作用机制。方法提取臭牡丹大黄素,将30只雄性C57BL/6小鼠随机均分为对照组、模型组和干预组。干预组在建模前6 h腹腔给予臭牡丹大黄素(80 mg/kg)。模型组和干预组腹腔注射D-氨基半乳糖(700 mg/kg)和脂多糖(10μg/kg),对照组给予等量0.9%氯化钠注射液,6 h后造模成功,对肝组织进行HE染色,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(GOT)水平,El检测肝组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、GSK3β、p-GSK3β、ERK、JNK、p38和Caspase-3表达水平及肝组织细胞凋亡情况。结果对照组大鼠肝脏结构正常;模型组出现肝小叶结构紊乱,出血,存在炎性细胞浸润和肝细胞坏死;干预组病理改变较模型组减轻。与对照组比较,模型组ALT、GOT、IL-1β、IL-6、TNF-α、GSK3β、p-GSK3β、ERK、JNK、p38、Caspase-3和细胞凋亡水平显著增高(P <0.05);与模型组比较,干预组ALT、GOT、IL-1β、IL-6、TNF-α、GSK3β、p-GSK3β、ERK、JNK、p38、Caspase-3和细胞凋亡水平显著降低(P<0.05)。结论臭牡丹大黄素可以减轻小鼠ALF的炎症反应,减轻肝细胞坏死和凋亡,发挥治疗作用,其机制可能与通过抑制ERS相关信号分子有关。

臭牡丹对神经病理性痛大鼠背根神经节N-甲基-D-天冬氨酸受体的影响

目的:探索臭牡丹(Clerodendrum bungei Steud.,CBS)是否通过调控N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-Daspartate,NMDA)受体缓解坐骨神经分支损伤(Spared nerve injury,SNI)诱导的大鼠神经病理性疼痛。方法:雄性SD大鼠18只,随机分成假手术组(Sham组)、SNI模型组(SNI组)、SNI+CBS治疗组(SNI+CBS组)。各组连续给予30 g·kg^(-1)CBS或等体积生理盐水治疗21 d。PCR方法检测背根神经节(Dorsal root ganglion,DRG)中NMDA受体亚基NR1、GluN2A、GluN2B、GluN3A mRNA表达;Western blot方法检测DRG中GluN2A、GluN2B和IL-10蛋白表达。结果:与Sham组相比,SNI模型大鼠DRG中NR1、GluN2B和GluN3A mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与SNI组相比,SNI+CBS治疗组NR1、GluN2B和GluN3A mRNA表达升高,各组GluN2A mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05);与Sham组相比,SNI模型大鼠DRG中GluN2A和GluN2B蛋白水平升高,IL-10蛋白水平下降;与SNI组相比,SNI+CBS组GluN2A和GluN2B降低、IL-10升高,差异均有统计学意义(P<0.05);各组GluN2A的mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:臭牡丹可能通过抑制DRG炎症和调控NMDA受体缓解SNI诱导的大鼠神经病理性疼痛。

臭牡丹总黄酮通过调控Wnt/β-catenin通路影响A549细胞上皮间质转化研究

目的探讨臭牡丹总黄酮对人肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制。方法将pcDNA3.1+空载体与S45位点突变的β-链蛋白(S45A-β-catenin)真核过表达载体转染A549细胞,给予臭牡丹总黄酮干预。MTT法检测细胞的相对存活率,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室侵袭实验检测细胞的侵袭能力,Western blotting法检测各组细胞β-catenin、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、转录因子Snail 2(Slug)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、p-GSK-3β的表达水平。结果转染S45A-β-catenin质粒后,A549细胞增殖、迁移、侵袭能力均明显增强,β-catenin、vimentin蛋白表达水平显著上调,E-cadherin、GSK-3β、P-GSK-3β蛋白的表达水平显著下调。臭牡丹总黄酮可抑制A549细胞的增殖、迁移与侵袭能力,对转染S45A-β-catenin质粒组的细胞作用尤为明显。对转染空载质粒的A549细胞,可上调E-cadherin、GSK-3β、P-GSK-3β表达,下调β-catenin、vimentin表达;对转染S45A-β-catenin质粒的A549细胞,可下调β-catenin、vimentin表达。结论抑制细胞中β-catenin的高表达并调控下游的一系列因子,从而影响Wnt/β-catenin通路诱导的上皮间质转化(EMT)现象可能是臭牡丹总黄酮抑制肺癌侵袭、转移的重要作用机制之一。

大青属常见药用植物的研究进展

综述近年来国内外对大青属植物的化学成分与药理作用的研究,大青属植物中含有的化学成分主要为甾醇类、黄酮类、挥发性成分等;其药理作用主要有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、治疗高血压等。

臭牡丹不同提取物的抗肿瘤活性筛选及其对裸鼠移植瘤中EMT相关蛋白的影响

目的:比较臭牡丹不同提取部位的抗肿瘤作用及其作用机制。方法:根据前期研究结果,采用乙酸乙酯、石油醚萃取、大孔树脂纯化方法,将臭牡丹苯乙醇苷类、黄酮类、萜类成分进行分离提取并纯化。建立CCK8、划痕试验、Transwell侵袭小室经典的抗肿瘤药理模型,检测臭牡丹三大活性部位对人肺腺癌A549体外增殖、迁移、侵袭的影响。并通过建立A549裸鼠移植瘤模型,检测各组裸鼠癌组织与癌旁组织中β-连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)、上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、糖原合成酶激酶-3(GSK-3β)、磷酸化糖原合成酶激酶-3蛋白(p-GSK-3β)蛋白的表达水平。结果:苯乙醇苷部位以类叶升麻苷和异类叶升麻苷为对照,峰面积归一化法测得苯乙醇含量为88.93%;黄酮类部位以芦丁为对照,紫外分光度法测得黄酮含量均值为60%;萜类以齐墩果酸为对照品,紫外分光光度法测得石油醚部位萜类成分含量为50.99%。CCK8法测得臭牡丹苯乙醇苷、黄酮、萜类成分的IC50平均值分别为0.125、0.46、1.43 mg/ml。划痕试验测得臭牡丹苯乙醇苷、黄酮、萜类成分的24 h愈合率分别为14.6%、16.9%、19.9%;48 h愈合率分别为22.4%、20.4%、29.7%,均明显降低(P<0.01)。与模型对照组相比,Transwell侵袭小室试验显示各药物干预组的穿膜细胞数均显著降低(P<0.01),0.4 mg/ml黄酮组与0.15 mg/ml苯乙醇苷组尤为显著。体内实验中,模型对照组瘤组织中的β-catenin、Vimentin蛋白表达增强(P<0.01),E-cadherin、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。与模型对照组比较,臭牡丹0.2 g/kg组能下调瘤组织中的β-catenin、Vimentin蛋白表达(P<0.05),上调GSK-3β、p-GSK-3β(P<0.05)蛋白表达。结论:臭牡丹苯乙醇苷、黄酮、萜类成分均对人肺腺癌A549细胞的增殖、迁移与侵袭具有一定的抑制作用,其中苯乙醇苷部位、黄酮部位对A549细胞体外抑制作用均明显,且具量效关系。萜类部位显示出的抗肿瘤作用不突出,可能与其纯度有关。臭牡丹提取物的抗肿瘤作用可能是通过调节瘤组织中β-catenin、Vimentin、E-cadherin、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白的表达从而阻断肿瘤局部的上皮间质转化(EMT)而起作用。