DTA突变在初诊急性髓系白血病患者中的预后价值

目的:探讨DTA(DNMT3A、TET2、ASXL1)突变在非M3型急性髓系白血病(AML)患者中的预后意义。方法:回顾性分析2018年1月至2022年4月就诊于常州市第一人民医院的180例AML患者的临床资料,采用二代测序技术检测患者的150种基因突变情况,采用log-rank检验和Cox回归模型分析影响预后的因素。结果:180例AML患者中,有83例(46.1%)患者检出DTA基因突变。与无DTA突变组相比,DTA突变组患者年龄更大(P<0.001)。DTA突变型组较无DTA突变组的中位总生存时间(OS)及无病生存时间(DFS)均明显缩短(P<0.05)。多因素分析结果显示,年龄≥60岁(P<0.001)、伴DTA突变(P=0.018)、预后中等(相对于预后良好)(P=0.005)是影响患者OS的独立危险因素。结论:伴DTA突变的AML患者年龄偏大,中位OS和中位DFS时间短,预后不佳。

利用 Genescan 分析 TCRVβ 亚家族CDR3长度的方法检测AML的T细胞克隆性

分析急性髓性白血病（ＡＭＬ）的Ｔ细胞克隆性，方法利用反转录一多聚酶链反应（ＲＴ┐ＰＣＲ）法分析５例ＡＭＬ、８例正常人的外周血单个核细胞和Ｔ细胞株Ｊｕｒｋａｔ的Ｔ细胞受体ＴＣＲＶβ２４个亚家族的互补决定区３（ＣＤＲ３）长度，ＰＣＲ产物进一步进行基因扫描（ｇｅｎｅｓｃａｎ）和核苷酸序列分析。结果ＲＴ┐ＰＣＲ分析显示８例正常人外周血单个核细胞除Ｖβ２０外，存在各Ｖβ亚家族的Ｔ细胞，而５例病人则仅存在部分亚家族的Ｔ细胞，Ｊｕｒｋａｔ细胞则仅表达Ｖβ８亚家族，基因扫描分析显示３例病人的个别亚家族产物呈一主峰图像，而对照组８例正常人的全部Ｖβ产物均显示为多峰图像，Ｊｕｒｋａｔ细胞的Ｖβ８家族ＰＣＲ产物呈单峰。结论ＡＭＬ病人外周血存在克隆性生长Ｔ细胞，这可能是宿主对白血病相关抗原的直接反应。该方法可以作为一种新的临床研究方法用于检测微小残留病变。

抗CD44单克隆抗体A3D8对人白血病细胞系HL-60细胞增殖及分化的影响

目的 探讨抗CD4 4单克隆抗体A3D8对HL 6 0细胞增殖及分化的影响 ,寻找急性髓系白血病(AML)治疗的新靶点。方法 以AML细胞株HL 6 0为模型 ,通过观察细胞生长、形态学、表面分化抗原、细胞周期和细胞因子表达 ,以及应用硝基四氮唑蓝 (NBT)还原实验来研究抗CD4 4单克隆抗体A3D8对细胞增殖及分化的影响。结果 HL 6 0细胞高表达CD4 4 ;A3D8以浓度和时间依赖性方式抑制HL 6 0细胞生长。A3D8使HL 6 0细胞周期阻滞在G0 /G1期 ,CD11b、CD14表面抗原阳性率明显增高 ,细胞体积增大 ,核 /浆比例减小 ,核染色质聚集 ,NBT还原实验阴性 ,细胞表达粒细胞集落刺激因子mRNA ,呈现向单核细胞系方向分化。结论 A3D8可抑制HL 6 0细胞增殖 ,并诱导其向单核系细胞分化 ,CD4 4有可能成为AML治疗的新途径。

急性髓系白血病免疫治疗的研究进展与展望

大多数急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者化疗诱导缓解后不可避免地面临复发。异基因造血干细胞移植作为AML最有效的治疗,通过免疫介导的移植物抗白血病效应根除白血病细胞,能有效预防AML复发。移植技术和单倍体移植模式进展使得"人人都能进行造血干细胞移植"。靶向治疗,如基因工程T细胞(嵌合抗原受体T细胞)、单克隆抗体、新型双特异性单抗,能特异性杀伤表达特殊抗原的白血病细胞,而不伤害正常细胞,将成为AML免疫治疗的新策略。研究发现高表达于急性单核细胞白血病细胞的新抗原急性单核细胞白血病相关抗原-34(monocytic leukemia associated antigen-34,MLAA-34)具有抗白血病细胞凋亡作用,且MLAA-34多肽可诱导特异性CTL杀伤活性,具有较强的免疫原性,MLAA-34可作为急性单核细胞白血病免疫治疗新的理想靶抗原。总之,新近进展有价值的免疫治疗白血病相关抗原的鉴定有可能根除化疗后白血病微小残留病变,有望降低AML复发,延长AML患者生存。

人源化CD33单克隆抗体联合化疗与单用化疗在初次复发或难治性急性髓性白血病治疗中比较的Ⅲ期多中心随机研究的评价

4背景 CD33是一种细胞表面的受体，它只存在于粒单细胞表面。体外研究表明，抗CD33抗体与受体结合后导致了剂量依赖性的细胞凋亡．这与其他抗体如CD22在淋巴系统恶性肿瘤中的方式是相似的。由于CD33在急性髓性白血病（acute myeloid leukemia，AML）的幼稚细胞中广泛表达（〉90％），而在大多数的非血液系统的组织则不表达．故针对CD33的抗体类药物．如联合了刺孢霉素的抗CD33抗体吉姆单抗奥佐米星（Gemtuzumab Ozogamicin，GO）已用于治疗AML的病人。

急性髓系白血病缓解前后克隆性演变探讨

为了动态观察急性髓系白血病（AML）完全缓解（CR）前后的克隆性演变及其与骨髓细胞染色体核型和临床转归的关系。采用人雄激素受体（HUMARA）基因多态性──甲基化分析的方法对15例杂合子女性AML患者缓解前后的克隆性进行了分析。结果显示：15例AML患者缓解方均为单克隆造血，经化疗完全缓解（CR）后其中的11的恢复为多克隆性造血，余4例仍为单克隆性造血，后者中的一例在检查后3个月复发，未发现CR后的克隆性与骨髓三系病态造血有何关系。AML为一克隆性疾病，大部分AML患者CR后恢复正常多克隆性造血，但的有1／4的患者仍为单克隆造血。

抗急性髓系白血病M_2型单克隆抗体1D_1特异性的观察

应用长春生物制品研究所提供的抗急性髓系白血病(AML)—M_2型单克隆抗体1D_1与10例AML—M_2型及40例其他类型白血病细胞反应。结果表明:1D_1抗体与M_2型白血病有特异性反应,与其他类型白血病无明显的交义反应,说明1D_1抗体具有很好的特异性。

SPR生物传感器在急性白血病髓系抗原CD33检测中的应用

采用自组装膜技术,在传感芯片表面修饰抗CD33单克隆抗体,利用自行构建的SPR生物传感器检测人骨髓血液中急性白血病髓系抗原CD33的表达。实验结果表明SPR生物传感器对AML患者骨髓血液的响应值远远大于对健康人骨髓血液的响应值。与传统的流式细胞术(FCM)方法相比,SPR方法具有能快速给出定量分析结果,操作简单等优点。用该SPR生物传感器对分离的骨髓血液和全血进行比较检测,结果显示SPR生物传感器对CD33抗原具有很好的特异选择性。SPR生物传感器在急性白血病髓系抗原CD33的检测中有着广阔的应用前景。

美罗他格——CD33单抗偶联物治疗急性髓细胞白血病

CD33抗原大量表达于急性髓细胞白血病(AML)细胞表面,可成为靶向免疫治疗的目标。美罗他格是人源化抗CD33单克隆抗体与强效抗肿瘤抗生素——乙酰棘孢霉素偶联物,与髓性白血病细胞表面CD33抗原结合,进入细胞后释放棘孢霉素,对髓细胞白血病细胞有明显杀灭作用,用于治疗复发、难治的CD33+AML,获得良好疗效,与其它化疗药物联合应用治疗AML的临床试验正在进行中。美罗他格的耐受性一般较好,但肝脏毒性及肝静脉阻塞综合征等毒副反应值得关注。美罗他格的耐药机制可能来自多方面,其中包括P-糖蛋白介导的药物排出等。

散发型CEBPA双突变急性髓系白血病患者复发后克隆衍变3例报道并文献复习

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)伴CEBPA双突变预后良好,但复发风险较高。本文总结3例经标准治疗缓解后复发的CEBPA双突变AML患者,通过对比初诊及复发后骨髓白血病细胞基因突变结果,进而探讨此类白血病复发后克隆衍变模式,以期为优化临床患者管理提供参考。

FLT3与TET2突变的急性髓系白血病伴IgA-κ型单克隆免疫球蛋白血症1例报告

1病例资料患者男,53岁,因“反复胸闷1个月余”于2020年3月5日就诊于我院。患者入院前1个多月无明显诱因出现胸闷伴心悸,多于劳累后出现,每次持续3~5 min,休息后可缓解,无其他不适。入院后体格检查:生命体征平稳,皮肤黏膜、口唇苍白,皮下无出血点;全身浅表淋巴结未及肿大,胸骨无压痛,双肺呼吸音粗,左肺可闻及哮鸣音,右肺未闻及干、湿性啰音,肝脾肋下未触及。

t(8;21)急性髓系白血病的免疫表型特点

目的 研究用流式细胞术免疫表型分析t(8;2 1) (q2 2 ;q2 2 )急性髓系白血病 (AML)的免疫表型特点。方法 采用常规细胞形态学 /细胞化学、流式细胞术间接免疫荧光标记技术和R显带核型分析 (MIC)进行分型 ,部分加用RT PCR检测AML1/ETO融合基因。结果 ① 2 94例初治AML患者中 ,6 4例t(8;2 1)AML ,占 2 1.8% ,在M2 中高达 5 4.7%。 6 4例t(8;2 1)AML中M2 占 81.3% ;②与对照组比较 ,t(8;2 1)AML高表达CD19和CD3 4,低表达CD3 3 (P <0 .0 0 1) ;③以 2 0 %阳性细胞作为阳性标准 ,CD19阳性率在AML为 13.6 % (2 94例中 40例 ) ,t(8;2 1)AML为 5 0 % (6 4例中 32例 ) ,显著高于无t(8;2 1)AML组的 3 5 % (2 30例中 8例 ) (P <0 .0 0 1) ;④在t(8;2 1)AML患者中 ,CD19+ 和 (或 )CD3 4+ 5 8例 (90 .6 % )、CD19-和 (或 )CD3 4-6例 (9.4% )。结论 t(8;2 1)AML特别是M2 /t(8;2 1)高表达CD19与CD3 4,CD19与t(8;2 1)密切相关 ,CD19是预测t(8;2 1)

获得性再生障碍性贫血克隆性进展为骨髓增生异常综合征/急性髓系白血病：19例临床分析及文献复习

目的 观察获得性再生障碍性贫血（AA）患者克隆性演变为骨髓增生异常综合征/急性髓系白血病（MDS/AML）的临床特征及转归.方法 回顾性分析1994年12月至2011年12月进展为MDS/AML的19例AA患者临床特征及转归,包括治疗方案、治疗前后染色体核型变化、治疗反应及生存情况.结果 中位随访49（15～97）个月,进展为MDS/AML 19例AA患者中极重型AA10例、重型AA 8例、非重型AA1例.G-CSF治疗中位时间为270（29～510）d,进展后其染色体异常核型以-7为主（19例中11例）,AA进展为MDS/AML中位时间为33（11～88）个月.AA治疗后有效组进展为MDS/AML中位时间（54.2个月）显著长于无效者（25.7个月）,差异有统计学意义（t=3.677,P＜0.01）.结论 AA患者进展为MDS/AML常伴有染色体核型异常,预后较差.

应用 X 连锁 HUMARA 基因多态性分析血细胞群的克隆性

目的：探讨血细胞克隆性分析的方法。方法：采用ＰＣＲ和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法对Ｘ连锁人雄激素受体（ＨＵＭＡＲＡ）基因在我国女性中的杂合率以及该基因甲基化位点与Ｘ染色体灭活的相关性进行了研究，并采用ＨＵＭＡＲＡ基因多态性为标志分析了２０名正常女性和３０例女性急性髓系白血病（ＡＭＬ）未治患者的血细胞克隆性。结果：我国女性ＨＵＭＡＲＡ基因的杂合率为８８％，并且其甲基化方式与Ｘ染色体灭活稳定相关，１７名杂合子正常女性中１５名为多克隆性造血，２名呈现假性单克隆造血。２７例杂合子ＡＭＬ患者均为单克隆性造血。结论：Ｘ连锁ＨＵＭＡＲＡ基因多态性是一个很实用的克隆性标志，可用于血细胞的克隆性分析。

成人急性髓系白血病的免疫学特点及预后

目的 :探讨急性髓细胞白血病 ( AML)的免疫表型特点。方法 :使用淋系和髓系单抗 ,用间接免疫荧光法对 70例原发性 AML 进行免疫表型分析。结果 :所有 AML 患者的细胞至少被 1种髓系单抗标记 ,各髓系抗原的表达率依次为 CD3 3 >CD1 3 >CD1 5 。所有 M3 患者 CD9为阳性。 16 /70例 ( 30 % )表达 CD3 4 抗原、CD+3 4 AML 组在年龄、外周血象及骨髓原始、幼稚细胞比例等方面与 CD- 3 4 组相比较无显著差别 ,但表达 CD3 4 抗原的 AML常伴有HL A - DR、CD3 8、CD7等不成熟细胞表面标记的表达 ,而较成熟的髓系细胞表面标记 CD1 5 则不表达。 70例 AML中有 16例表达淋系抗原 ,CD+4 6例 ( 13.8% ,M2 为 8.8% ,M46 0 % ) ;CD+79例 ( 16 .9% ,M1 为 5 0 % ,M2 18% ,M5 b16 .7% )。CD+4 的 AML 患者 CD3 4 为低表达 ,CD3 3 高表达。结论 :CD+9、CD- 3 4 、HL A- DR-及 CD+1 3 和 /或 CD+3 3 、CD+1 5 是典型M3 的免疫表型特点。CD+3 4 AML与 AML - M1 有着密切的关系 ,且对化疗反应较差 ,证明 CD+3 4 的 AML是一组分化程度较差的类型 ;提示 CD+7和 CD+4 的 AML 预后差 ,CD+7的 AML 是 AML

急性淋巴细胞白血病患儿T细胞受体γ基因重排的检测及临床意义

目的探讨儿童ALL患者初诊时T细胞受体γ(TCRγ)基因的重排方式,病程中是否发生了克隆演化,并探讨其临床意义。方法选择2004年9月-2007年9月在广西医科大学第一附属医院儿科确诊的ALL患儿70例。男51例,女19例;平均年龄8.5(2～14)岁。采用酚/酚-异戊醇-氯仿/异戊醇法从骨髓细胞或静脉血细胞中提取DNA。通过多聚酶链反应及单链构象多态性分析,确定ALLTCRγ基因的重排方式。结果70例中23例初诊时检测出TCRγ基因重排。23例中10例完全缓解时仍可检出TCRγ基因重排,且对化疗药物敏感性差。23例中4例存在寡/亚克隆重排。23例中2例存在克隆演化,预后欠佳。结论病程中TCRγ基因的重排方式反映了白血病细胞的不断演化。发生演化的寡/亚克隆在缓解期持续存在,并进一步增殖从而导致临床复发。通过TCRγ基因的检测对ALL患儿的预后、复发的判断及制定相应的个体化治疗方案有重要的指导意义,可使患儿最大程度的达到长期无病生存,减少化疗导致的远期不良反应。

抗CD44抗体治疗急性髓系白血病的研究进展

CD44分子是一种广泛分布的细胞表面跨膜糖蛋白,在许多方面发挥着重要的生理和病理作用,其中之一就是CD44分子参与血细胞的生成,在血细胞分化成熟的过程中发挥着关键性作用。CD44与一些特异的抗体结合后能够逆转急性髓系白血病幼稚细胞的分化阻滞,从而逆转其恶性细胞的表型,最终使肿瘤细胞的抗原性、功能和细胞生物学特征与正常分化的骨髓系细胞相一致。

用定量多色荧光原位杂交检测t（8；21）急性髓系白血病的异质性及亚克隆间的进化关系

目的用定量多色荧光原位杂交（QM．FISH）的方法检测t（8；21）急性髓系白血病（AML）中是否存在异质性亚克隆，及不同亚克隆之间在遗传学上的承继关系。方法在UCSC Genome Bioinformatics数据库中定位检索含目的基因AMLl、ETO、WTl、c-kit和p27的细菌人工染色体（BAC）克隆，用缺口平移的方法将荧光素染料标记的dUTP或dCTP连接到目的基因上制成五色FISH探针。白血病细胞低渗、同定后湿法滴片。将制备好的FISH探针杂交到患者标本上，经荧光显微镜采集荧光信号从而获得清晰稳定的多色图像。计数AMLl．ETO阳性细胞中AMLl-ETO融合基因及基因AMLl、ETO、WTl、c-kit和p27的拷贝数。将各个基因拷贝数相同的细胞定义为同一亚克隆，统计同一患者标本中亚克隆的种类及比例，进而推测不同亚克隆之间的进化关系；比较配对的初诊、复发患者中优势亚克隆的演变，推测与白血病复发、耐药相关的基因异常。结果共检测36例初诊的t（8；21）AML患者骨髓标本，1例与初诊患者配对的复发标本。在36例初诊患者中，4例（11．1％）具有AML1-ETO融合信号增加，3例（8．3％）有AMLl信号增加，10例（27．8％）有AMLl信号缺失，并且这种信号缺失具有性别差异，主要出现在男性患者中，4例（11．1％）有ETO信号增加，20例（55．6％）有wTl信号增加，15例（41．7％）有p27信号增加，14例（38．9％）有c-kit信号增加；28例（77．8％）可检测到异质性亚克隆，不同亚克隆之间呈线性或树状进化关系；1例复发病例标本与配对的初诊病例标本相比较，表现出明显的克隆演变，包括优势克隆比例改变及亚克隆的消失与新生。结论t（8；21）AML的遗传学异常具有广泛异质性，亚克隆之间不仅具有承继关系，而且处于动态进化演变状态。

抗CD33单抗治疗由复发难治急性髓系白血病转化的混合表型急性白血病一例并文献复习

目的探讨抗CD33单抗吉妥单抗治疗由复发难治急性髓系白血病(RR-AML)转化的混合表型急性白血病(MPAL)患者的效果及预后。方法回顾性分析苏州大学附属第一医院诊治的1例由RR-AML转化的MPAL(B淋系和髓系双表型)患者的临床资料,并复习相关文献。结果该患者采用吉妥单抗3 mg/m2第1、5、9天联合三尖杉酯碱、小剂量阿糖胞苷及VP(长春新碱、泼尼松)方案化疗,获得第2次完全缓解(CR2)后桥接异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)。吉妥单抗联合化疗后,患者骨髓形态达CR2,流式细胞术检测CD33抗原由高表达(>99.5%)转为阴性表达。随访至2020年4月,无复发生存时间为22个月,总生存时间接近27个月。结论抗CD33单抗辅助治疗CD33高表达的MPAL效果确切,预后良好,但仅为个例。个体化联合给药方案等问题仍需进一步积累经验及临床试验。

急性髓系白血病伴IgA-κ型M蛋白血症1例并文献复习

急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）为原始粒细胞异常克隆增殖所致,易出现感染、发热、出血和贫血等;M蛋白血症为单克隆免疫球蛋白血症,具有恶病倾向;二者合并报道罕见。我们收治1例AML合并IgA-κ型M蛋白血症患者,现报告如下,并复习相关文献。