酪酸梭菌-糯米复合发酵液对鼠伤寒沙门菌的抑制作用及其对鼠伤寒沙门菌感染小鼠肠道分泌型免疫球蛋白A的影响

目的探讨酪酸梭菌-糯米复合发酵液对鼠伤寒沙门菌的抑制作用及其对小鼠肠道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的影响。方法将酪酸梭菌(1.5×10^(10) CFU·L^(-1))和体积分数5%的无菌糯米粉放入到100 mL胰蛋白胨大豆肉汤,于37℃条件下培养48 h,配制酪酸梭菌-糯米复合发酵液,采用显微镜平板菌落计数方法检测酪酸梭菌-糯米复合发酵液和酪酸梭菌悬液中酪酸梭菌,琼脂打孔体外抑菌圈法检测酪酸梭菌-糯米复合发酵液及其稀释液(1:2、1:4、1:8、1:16)对鼠伤寒沙门菌的抑制作用,显微镜平板菌落计数方法检测酪酸梭菌悬液、无细胞发酵液、酪酸梭菌-糯米复合发酵液、糯米发酵液、磷酸盐缓冲液(PBS)、四环素对鼠伤寒沙门菌的抑制作用。应用200μL鼠伤寒沙门菌悬液(1×10^(12) CFU·L^(-1))对60只雄性6周龄ICR小鼠进行灌胃,每日1次,连续灌胃7 d构建鼠伤寒沙门菌感染小鼠模型,将鼠伤寒沙门菌感染小鼠随机分为糯米发酵液组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组、PBS阴性对照组、四环素阳性对照组,每组10只,分别给予酪酸梭菌悬液、无细胞发酵液、酪酸梭菌-糯米复合发酵液、糯米发酵液、PBS、体积分数0.2%四环素各200μL灌胃,每日1次,连续灌胃21 d,应用显微镜平板菌落计数方法检测小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌株数,酶联免疫吸附测定法检测肠道内sIgA表达水平,监测小鼠食物摄取量和体质量,计算体质量增加率。结果培养24 h后,酪酸梭菌-糯米复合发酵液中酪酸梭菌菌落数显著多于酪酸梭菌悬液(P<0.05)。酪酸梭菌-糯米复合发酵液对鼠伤寒沙门菌的抑制作用呈剂量-效应关系(P<0.05)。体外抑菌试验结果显示,酪酸梭菌悬液、无细胞发酵液、酪酸梭菌-糯米复合发酵液、四环素均对鼠伤寒沙门菌具有抑制作用,PBS和糯米发酵液对鼠伤寒沙门菌无抑菌作用。体内抑菌试验结果显示,PBS阴性对照组和糯米发酵液组第0、7、14、21、28天小鼠体内鼠伤寒沙门菌呈增高趋势(P<0.05);四环素阳性对照组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数均出现先增高后降低趋势(P<0.05),且酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数第28天与第0天比较差异无统计学意义(P>0.05)。第0、7、14天,6组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数比较差异无统计学意义(P>0.05);第21天,四环素阳性对照组和酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于PBS阴性对照组、糯米发酵液组、酪酸梭菌悬液组和无细胞发酵液组(P<0.05)。第28天,四环素阳性对照组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于PBS阴性对照组和糯米发酵液组,四环素阳性对照组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于酪酸梭菌悬液组和无细胞发酵液组,酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于四环素阳性对照组(P<0.05)。酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠肠道内sIgA水平显著高于四环素阳性对照组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组和PBS阴性对照组,四环素阳性对照组小鼠肠道内sIgA水平显著高于酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组和PBS阴性对照组,酪酸梭菌悬液组小鼠肠道内sIgA水平显著高于无细胞发酵液组、糯米发酵液组和PBS阴性对照组,无细胞发酵液组小鼠肠道内sIgA水平显著高于糯米发酵液组和PBS阴性对照组(P<0.05)。四环素阳性对照组和糯米发酵液组小鼠的食物摄取量高于酪酸梭菌悬液组、PBS阴性对照组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组(P<0.05);酪酸梭菌悬液组和酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠的体质量增加量高于PBS阴性对照组、四环素阳性对照组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组(P<0.05),四环素阳性对照组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组小鼠的体质量增加量高于PBS阴性对照组(P<0.05);四环素阳性对照组、糯米发酵液组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠的体质量增加率高于PBS阴性对照组,酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠的体质量增加率高于四环素阳性对照组、糯米发酵液组(P<0.05)。结论酪酸梭菌-糯米复合发酵液可显著抑制鼠伤寒沙门菌生长,提高机体免疫力,这为多重耐药鼠伤寒沙门菌感染膳食干预策略的制定提供了新的思路和依据。

酪酸梭菌活菌片对胆囊结石腹腔镜术后腹泻患者营养状况、Th1/Th2细胞及预后的影响

背景单纯胆囊结石腹腔镜术后腹泻明显,传统止泻药物作用有限,酪酸梭菌活菌片可通过纠正免疫紊乱、维持肠道菌群平衡等途径防治腹泻,但其在胆囊结石腹腔镜术后腹泻患者中应用缺乏循证支持.目的探讨酪酸梭菌活菌片对胆囊结石腹腔镜术后腹泻患者营养状况、Th1/Th2细胞及预后的影响.方法前瞻性选取2017-08/2021-08临海市中医院200例胆囊结石腹腔镜术后腹泻患者,随机数字表法分组,各100例.对照组采取盐酸罗哌丁胺胶囊,实验组基于对照组采取酪酸梭菌活菌片,均治疗4 wk.统计两组预后及治疗前后症状评分、排便次数、Th1/Th2细胞及其因子[干扰素(interferon-gamma,INF-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)]、肠道菌群(肠球菌、双歧杆菌、大肠埃希菌)、肠屏障功能指标[肠脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein,IFABP)、二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)、尿乳果糖/甘露醇(lactulose/mannitol,L/M)]、营养状况[白蛋白(albumin,ALB)、转铁蛋白(transferrin,TEN)、前白蛋白(prealbumin,PA)].结果治疗4 wk后实验组大便性状、腹部不适评分低于对照组,排便次数少于对照组(P<0.05);治疗4 wk后实验组IFABP、DAO、L/M、INF-γ、Th1/Th2比值低于对照组,IL-4高于对照组(P<0.05);治疗4 wk后实验组肠球菌、大肠埃希菌低于对照组,双歧杆菌高于对照组(P<0.05);治疗4 wk后两组TFN、PA、ALB高于治疗前(P<0.05);治疗后12 wk进行随访,两组疾病复发率比较,差异无统计学意义.结论酪酸梭菌活菌片有助于缓解胆囊结石腹腔镜术后腹泻患者临床症状,降低Th1/Th2细胞表达,改善营养状况,机制可能与其调节肠道微生态平衡有关.

蒙脱石散联合酪酸梭菌二联活菌散剂对急性腹泻伴发热患儿肠道菌群平衡、肠屏障功能及免疫功能的影响

目的观察蒙脱石散联合益生菌治疗急性腹泻伴发热患儿的临床疗效,及对肠道菌群平衡、肠屏障功能及免疫功能的影响。方法选取2021年10月—2023年10月齐齐哈尔市中医医院接诊的急性腹泻伴发热患儿118例,通过计算机产生随机数字表法均等分为联合组(蒙脱石散联合益生菌治疗)、单用组(蒙脱石散治疗)各59例。单用组在常规治疗的基础上给予蒙脱石散治疗,1岁以下每日1袋,≥1、≤2岁每日1~2袋,>2岁每日2~3袋,温水摇匀后冲服,首次剂量加倍。联合组在单用组的基础上加用酪酸梭菌二联活菌散剂,每次1袋,每天2次,凉开水摇匀后冲服。两组均治疗7 d。比较两组恢复速度、治疗效果;比较两组治疗前后肠道菌群平衡、肠屏障功能及免疫功能。结果联合组退热、大便性状改善、止泻、肠鸣音恢复时间均短于单用组(P<0.05、0.001);联合组治疗总有效率高于单用组(88.14%vs 72.88%,P<0.05)。两组治疗前双歧杆菌(B)、乳酸杆菌(E)、肠杆菌数量及B/E比值比较,差异无统计学意义;治疗后联合组肠杆菌数量低于单用组(P<0.05),B和E的数量及B/E值均高于单用组(P<0.05、0.001)。两组治疗前二胺氧化酶(DAO)、脂多糖结合蛋白(LBP)、D-乳酸比较,差异无统计学意义;治疗后联合组DAO、LBP、D-乳酸均低于单用组(P<0.001)。两组治疗前外周血CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞占比、CD4^(+)/CD8^(+)比较,差异无统计学意义;治疗后联合组外周血CD4^(+)T淋巴细胞占比、CD4^(+)/CD8^(+)均高于单用组(P<0.001),CD8^(+)T淋巴细胞占比均低于单用组(P<0.001);两组均无明显不良反应。结论蒙脱石散联合益生菌可促进急性腹泻伴发热患儿恢复,改善治疗效果,促进肠道菌群平衡,增强肠屏障功能及免疫功能,且安全性高。