脾气虚大鼠心肌细胞线粒体Lon蛋白酶和ClpXP复合物表达的研究

目的:通过研究心肌细胞线粒体L o n蛋白酶和C l p X P复合物的表达,围绕线粒体未折叠蛋白反应(UPRmt)探讨脾病及心的可能机制。方法:16只雄性SD大鼠随机分为正常组和脾气虚证模型组(模型组);鼠尾动脉无创测压法测定血压;心脏彩超检查心脏功能;透射电镜观察心肌细胞线粒体形态;ELISA法检测三磷酸腺苷(ATP)和MDA水平,Western Blot法检测心肌细胞线粒体Lon蛋白酶和ClpXP复合物的表达。结果:与正常组比较,模型组心率、收缩压、舒张压、左室射血分数和左室短轴缩短率均下降(P<0.01),线粒体内可见致密颗粒,ATP水平下降(P<0.01),MDA含量升高(P<0.01),Lon蛋白酶和ClpX表达均升高(P<0.05,P<0.01),但ClpP表达变化不明显。结论:脾病及心的现代医学机制可能与心肌细胞UPRmt未充分启动所导致的线粒体蛋白失稳态有关。

脾气虚大鼠肝脏细胞线粒体蛋白质控的研究

目的:观察肝细胞线粒体结构和功能及其蛋白质控,探讨肝耐受脾气虚的可能机制。方法:16只SPF级雄性SD大鼠根据随机数字表法平均分成两组,即8只正常组(对照组)和8只脾气虚组(模型组)。透射电镜观察肝细胞线粒体结构,比色法和JC-1法分别检测肝组织ATP和肝细胞线粒体膜电位(membrane membrane potential,MMP),Western blot法检测肝细胞线粒体热休克蛋白(hot shock protein,HSP)70、Lon蛋白酶(Lon protease,LonP)以及酪蛋白裂解酶(caseinolytic protease,Clp)XP复合物等表达。结果:两组线粒体大量分布于细胞核附近,形态相似,均呈卵圆形,边缘清楚,内部致密,未见到明显异常变化。与正常组相比,模型组ATP和MMP水平均下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。与正常组相比,模型组HSP70、ClpX、ClpP表达均上升,LonP表达下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:肝耐受脾气虚的机制与肝细胞线粒体蛋白质控机制增强有关。