蛇床子和白芷中香豆素类化合物抑制磷酸二酯酶5活性的研究

目的研究香豆素类化合物的PDE5抑制活性。方法用体积分数为95％乙醇和氯仿分别提取蛇床子及白芷中总香豆素类化合物,并通过柱色谱和HPLC进行分离,结构鉴定后进行PDE5抑制活性研究。结果分离得到8个化合物,结构修饰4 个化合物,并测得其PDE5抑制活性数据。结论蛇床子素具有较强的PDE5抑制剂。

利用主客体分子包结现象选择分离蛇床子有效成分的方法

利用１，１，６－四苯基－２，４－已二炔－１，６－二醇（Ｉ）的包结能力，可简单而迅速地从蛇床子中选择分离出有效成分欧前胡素（２）和花椒毒素（３），收率分别为０．０５４％（２）和０．００２％（３）。本文用ＵＶ，ＩＲ，１ＨＮＭＲ和１３ＣＮＭＲ验证了２和３的化学结构，并用ＨＰＬＣ检验了２和３的纯度。Ｘ－射线衍射晶体结构分析表明主体分子Ｉ与组分２靠氢键形成包结物，它们的摩尔比为１：２，氢键长为２．８６１２Ａ。包结物晶体属单斜晶系，空间群为已Ｐ２１／Ｃ，晶胞参数：ａ＝１５．４６８（５）Ａ，ｂ＝８．５９５（３）Ａ，ｃ＝１８．６６３（７）Ａ，β＝９３．６４（５）°，Ｚ＝４和Ｒ＝０．０８８。

蛇床子中蛇床子素提取效率与几种溶剂关系

用毛细管气相色谱测定蛇床子中蛇床子素含量的方法，测定了蒸馏水、95％乙醇、无水乙醇、丙酮、氯仿等溶剂对蛇床子中蛇床子素的提取效率。结果表明：氯仿、丙酮提取率较高；在相同温度下，无水乙醇、95％乙醇的提取率依次减弱，蒸馏水的提取率最低。

蛇床子挥发油化学成分的初步研究

蛇床子为伞形科蛇床属植物蛇床Cnidium monnieri(L.)Cusson的果实,资源比较丰富,江苏为其正品主产地。蛇床子能祛湿、杀虫、壮阳。其醇提物化学成分及其药理作用均有报道。

蛇床子香豆素的薄层分离-直接进样-质谱鉴定

用丙酮提取,石油醚冷冻结晶,从蛇床子中得到混合香豆素。经薄层分离 ,直接进样和质谱分析 ,鉴定出8种香豆素化合物:Ⅰ.蛇床子素(osthol) ,Ⅱ.佛手内酯(bergapten) ,Ⅲ.欧芹属素乙(imperatorin) ,Ⅳ.花椒毒素(xanthotoxin) ,Ⅴ.异回芹内酯(isopimpinellin) ,Ⅵ.别异英波托林(alloisoimperatorin) ,Ⅶ.6 -甲氧基 -8 -甲基香豆精(6_methoxy_8_methylcoumarin) ,Ⅷ.花椒毒酚(xanthotoxol)。其中Ⅵ、Ⅶ首次于蛇床子中发现。

蛇床子挥发油对双氯芬酸钠经皮渗透的影响

目的 对蛇床子挥发油的促透作用进行探讨。方法 采用离体兔皮用蛇床子挥发油预处理作透皮吸收试验。结果 用 0 .5 %、1%、2 %的蛇床子挥发油预处理兔皮后 ,双氯芬酸钠的渗透系数分别为 0 .0 75 7± 0 .0 12 5、0 .10 46± 0 .0 492、0 .0 997± 0 .0 332mg/ (h·cm2 ) ,都显著高于阴性对照组 0 .0 2 78± 0 .0 0 78mg/ (h·cm2 ) (P <0 .0 1)和 1%的月桂氮酮组 0 .0 488± 0 .0 11mg/ (h·cm2 )(P <0 .0 1) ,但 0 .5 %、1%、2 %的蛇床子挥发油三者之间的促透作用无显著性差异。结论 蛇床子挥发没具有较好的促皮渗透作用。

蛇床子提取液对离体蟾蜍坐骨神经动作电位的影响

目的:研究蛇床子提取液对蟾蜍离体坐骨神经动作电位传导阻滞作用。方法:观察3种浓度蛇床子提取液(1g·ml-1、0.5g·ml-1、0.2g·ml-1)对蟾蜍离体坐骨神经复合动作电位的振幅和传导速度的影响。结果:3种浓度的蛇床子提取液均可使坐骨神经复合动作电位的振幅变小(P<0.01),传导速度变慢(P<0.01)并最终使坐骨神经动作电位消失。结论:蛇床子提取液能阻滞神经动作电位的传导。

蛇床子中喔斯脑、欧芹属素乙的提取分离及鉴定

从蛇床果实的乙醇提取物中经柱层析、薄板层析、高效液相层析证明有八种成分,已测定其中喔斯脑(Qsthol,欧芹酚—7—甲醚)及欧芹属素乙(imperatonin)为主要成分,并分离得到单体,其它六种化合物因含量少,未进一步进行分离。

苦参碱、氧化苦参碱与蛇床子提取物联合抗菌作用研究

目的:探讨苦参碱、氧化苦参碱和蛇床子提取物单独以及联合使用时对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念球菌的抑制作用。方法:以苦参碱、氧化苦参碱和蛇床子提取物为研究对象,通过纸片扩散法测试其单独使用及联合使用时对上述菌种的抑菌圈直径。结果:苦参碱、氧化苦参碱单独使用时对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念球菌均没有抑菌效果,蛇床子提取物对金黄色葡萄球菌有微弱的抑制作用,而苦参碱、氧化苦参碱与蛇床子提取物联用对金黄色葡萄球菌和白色念球菌均有很好的抑制作用。结论:本实验中苦参碱和氧化苦参碱与蛇床子提取物联合使用对测试菌种产生增效作用。

中药蛇床子中黄酮类成分的研究

介绍了优选蛇床子总黄酮的最佳提取工艺。采用L9(33)正交试验,考察乙醇浓度、提取温度及提取时间,以总黄酮含量为评价指标,并采用分光光度法测定吸光度。并对黄酮类成分进行验证,得出蛇床子总黄酮的最佳提取工艺为80%的乙醇提取2次,每次30min,提取温度65℃。优选得到的工艺稳定可行。

蛇床子三螺旋转录因子基因的克隆与表达分析

研究的目的是克隆中药蛇床子[Cnidium monnieri(L.)Cuss.]三螺旋转录因子(Trihelix transcription factor,ttf)基因,诱导、鉴定其蛋白体外表达,并利用生物信息学方法分析该蛋白的结构和性质。主要采用RT-PCR方法扩增目的基因,连接到p MDTM19(Simple)-T克隆载体中,核酸序列鉴定正确后再将目的基因克隆到p ET-22b(+)表达载体上,将获得的重组质粒转化到大肠杆菌E.coli BL21细胞中,以不同浓度的诱导剂诱导其表达,进一步利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹方法检测目的蛋白的表达情况,并利用各种生物学软件对目的蛋白进行生物信息学分析。结果获得了ttf,构建了该基因的克隆和表达重组质粒,该基因在大肠杆菌BL21中能够被诱导表达,Western Blot结果表明,在预计的分子质量21 ku位置得到了目的蛋白;生物信息学分析表明,目的蛋白为可溶性蛋白,可能定位于细胞核和线粒体中;部分区域极有可能形成卷曲螺旋。研究首次成功体外克隆并在原核生物中表达了蛇床子三螺旋转录因子,并对其进行了系统的生物信息学分析,为进一步研究其结构和功能奠定了基础。

蛇床子RPS13蛋白的体外表达及生物信息学分析

核糖体蛋白S13(Ribosomal protein S13,RPS13)属于核糖体蛋白家族,在核糖体中的生物学功能主要是维持核糖体大小亚基之间的动态连接。从蛇床子[Cnidium monnieri(L.)Cuss.]的根、茎、叶组织中提取总RNA,通过RT-PCR扩增蛇床子核糖体蛋白s13(rps13)的开放阅读框(ORF),成功获得了一段453 bp的基因,该基因片段编码151个氨基酸的蛋白;将获得的目的基因rps13 ORF连接到表达载体p ET22b(+)中,并进一步转化到大肠杆菌表达菌中诱导目的基因体外表达;通过对蛋白结构进行分析表明蛇床子RPS13含有6个α螺旋;对蛇床子RPS13进行系统进化分析表明该蛋白在进化上具有高度保守性,与植物类胡萝卜的RPS13亲缘关系最近。蛇床子RPS13蛋白在体外的成功表达以及对其进行系统的生物信息学分析为进一步深入研究该蛋白的结构和功能奠定了理论基础。

近红外光谱技术在中药蛇床子分类中的应用

将近红外光谱分析技术应用于不同类别和产地的 4 2种中药蛇床子的类别分析 ,取得了较好的结果 ,为植物中药的类别分析提供了一种新的思路 .

至宝三鞭酒的薄层色谱鉴别及马钱苷的含量测定

目的:建立有效控制至宝三鞭酒质量的薄层色谱鉴别及含量测定。方法:用薄层色谱法(TLC)鉴别处方中的当归、蛇床子、何首乌、补骨脂、白芍、山茱萸、枸杞子、白术。用高效液相色谱法(HPLC)测定至宝三鞭酒中马钱苷的含量:色谱柱:Hypersi柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:四氢呋喃-乙晴-甲醇-0.05%磷酸溶液(1:8:4:48);检测波长:236nm;进样量:对照品进样10μL,样品进样20μL。结果:在薄层色谱上可检出当归、蛇床子2种药材的特征斑点并且无阴性干扰,可收入质量标准中。HPLC法测定中,在此色谱条件下,马钱苷在进样量为0.0185-0.7380μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999,n=6)。平均加样回收率为99.6%,RSD为1.55%(n=9)。结论:TLC法鉴别至宝三鞭酒中当归、蛇床子准确,重现性好,可用于至宝三鞭酒的质量控制。HPLC法可控制至宝三鞭酒中马钱苷的含量,准确度高,重现性好,操作简便。