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C_OCl_2预处理对C_2C_(12)细胞氧化损伤后增殖和Nrf2表达的影响 被引量:4
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作者 刘永 李俊平 罗冬梅 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期238-241,共4页
目的:采用COCl2模拟低氧对小鼠骨骼肌卫星细胞(C2C12)进行预处理,探索其对受H2O2损伤C2C12细胞的增殖和Nrf2表达的影响。方法:体外培养C2C12细胞,利用COCl2模拟化学低氧状态。实验分为对照组、H2O2组和COCl2预处理组(3 h、6 h、12 h、24... 目的:采用COCl2模拟低氧对小鼠骨骼肌卫星细胞(C2C12)进行预处理,探索其对受H2O2损伤C2C12细胞的增殖和Nrf2表达的影响。方法:体外培养C2C12细胞,利用COCl2模拟化学低氧状态。实验分为对照组、H2O2组和COCl2预处理组(3 h、6 h、12 h、24 h)。采用MTT法检测C2C12细胞活性,DCF法测定细胞内活性氧(ROS)含量,Western blot法检测细胞核内Nrf2蛋白含量。结果:(1)COCl2预处理6 h、12 h、24 h组细胞活性吸光度均值与H2O2组比较显著增加,具有统计学意义(P<0.05)。(2)COCl2预处理各组细胞ROS含量均较H2O2组显著下降(P<0.05)。(3)对照组细胞核内Nrf2蛋白含量极少,H2O2组细胞核内Nrf2含量较对照组显著增加(P<0.05),COCl2预处理各组细胞核内Nrf2蛋白含量均较H2O2组显著增加(P<0.05)。结论:COCl2预处理可以保护C2C12细胞免受氧化应激损伤,Nrf2激活可能参与了细胞的抗氧化过程。 展开更多
关键词 C2C12 低氧 ROS NRF2 coc12
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CoCl_2对酸胁迫下多花黑麦草种子萌发及幼苗抗性的影响 被引量:12
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作者 回振龙 马兰 李朝周 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期753-758,共6页
本研究以多花黑麦草(Lolium multiflorum)为试验材料,采用不同浓度CoCl2溶液浸种的处理方法,就CoCl2对酸胁迫下多花黑麦草种子萌发、幼苗生长及抗逆性的影响进行了探讨。酸胁迫过程中多花黑麦草种子的发芽势、发芽率、发芽指数、活力指... 本研究以多花黑麦草(Lolium multiflorum)为试验材料,采用不同浓度CoCl2溶液浸种的处理方法,就CoCl2对酸胁迫下多花黑麦草种子萌发、幼苗生长及抗逆性的影响进行了探讨。酸胁迫过程中多花黑麦草种子的发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、叶绿素含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性随着处理液酸度的增强显著下降,根长抑制指数、丙二醛(MDA)含量、O2-.产生速率和H2O2含量明显增大,过氧化物酶(POD)活性先增加后下降,细胞膜稳定指数(MSI)下降。0.1mmol·L-1 CoCl2明显促进酸胁迫下多花黑麦草种子萌发,提高幼苗叶绿素含量、芽长、地上部干质量和SOD活性,降低MDA含量和POD活性。从整体上看,0.1mmol·L-1 CoCl2对多花黑麦草种子萌发及幼苗生长有促进作用,并提高了多花黑麦草的抗酸胁迫能力。 展开更多
关键词 酸胁迫 CoCl2 萌发 多花黑麦草 抗性
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黄芩苷对CoCl_2诱导的SHSY-5y细胞损伤的保护作用及其对自由基的影响 被引量:3
3
作者 闵冬雨 贾连群 +5 位作者 宋囡 魏新智 王清华 关乐 李莹 杨关林 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第9期2079-2081,I0001,共4页
目的:探讨黄芩苷对氯化钴(CoCl_2)诱导的SHSY-5y细胞损伤的保护作用及其相关作用机制。方法:采用体外培养细胞的方法,建立SHSY-5y细胞CoCl_2损伤模型。分设正常组、CoCl_2损伤组、黄芩苷组(10-8,10-7,10-6,10-5mol/L)。采用MTT法检测细... 目的:探讨黄芩苷对氯化钴(CoCl_2)诱导的SHSY-5y细胞损伤的保护作用及其相关作用机制。方法:采用体外培养细胞的方法,建立SHSY-5y细胞CoCl_2损伤模型。分设正常组、CoCl_2损伤组、黄芩苷组(10-8,10-7,10-6,10-5mol/L)。采用MTT法检测细胞活力,光镜观察各组细胞的形态,采用ELISA法检测各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、氧自由基(ROS)的变化。结果:同CoCl_2组比较,黄芩苷能明显减轻CoCl_2引起的SHSY-5y细胞的损伤,降低MDA、ROS的含量,减少LDH的外漏,并升高SOD的活性。结论:黄芩苷对CoCl_2诱导的SHSY-5y细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与黄芩苷抗氧化作用相关,继而减少了细胞的损伤。 展开更多
关键词 黄芩苷 SHSY-5y细胞 CoCl2 氧化应激
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HIF-2α基因沉默对人肝癌细胞株HepG2增殖能力的影响 被引量:3
4
作者 李伟伟 耿晓松 +2 位作者 王宏伟 侯丽娟 宋新文 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2017年第8期921-925,共5页
目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factors-2α,HIF-2α)表达水平对人肝癌细胞株HepG2增殖能力的影响。方法用氯化钴(CoCl_2)诱导细胞模拟缺氧微环境,并根据CoCl_2浓度不同分为50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/... 目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factors-2α,HIF-2α)表达水平对人肝癌细胞株HepG2增殖能力的影响。方法用氯化钴(CoCl_2)诱导细胞模拟缺氧微环境,并根据CoCl_2浓度不同分为50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L组,选择CoCl_2浓度为200μmol/L模拟肿瘤内缺氧微环境。采用siRNA干扰沉默HepG2细胞中HIF-2α的表达,分别应用RT-PCR、Western blotting方法检测HIF-2αmRNA和蛋白的表达,MTT方法检测HepG2细胞增殖,绘制细胞生长曲线,流式细胞技术观察细胞周期的改变。结果建立细胞缺氧模型,作为低氧组;采用浓度为50 nmol/L的HIF-2αsiRNA转染缺氧环境下的HepG2细胞,作为低氧+HIF-2αsiRNA组,结果显示:低氧组、低氧+Control siRNA组的HIF-2αmRNA和蛋白表达显著高于常氧组和低氧+HIF-2αsiRNA组(P<0.05);细胞生长曲线结果显示:低氧组、低氧+Control siRNA组的光密度值显著高于常氧组和低氧+HIF-2αsiRNA组(P<0.05);细胞周期结果显示:低氧组、低氧+Control siRNA组HepG2细胞在DNA合成前期(G0/G1期)细胞比率显著低于常氧组和低氧+HIF-2αsiRNA组,合成期(S)及合成后期(G2/M)细胞比率显著高于常氧组和低氧+HIF-2αsiRNA组(P<0.05)。结论缺氧微环境通过促进人肝癌细胞株HepG2细胞中HIF-2α的表达进一步促进HepG2细胞增殖,而针对HIF-2α的靶向siRNA能有效抑制肝癌HepG2细胞中HIF-2α的表达,从而抑制HepG2细胞的增殖。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子-2Α 氯化钴 RNA干扰 肝癌 细胞增殖
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刺五加皂苷对化学诱导缺氧PC12细胞中缺氧诱导因子-1α表达的影响及机制 被引量:5
5
作者 季秋虹 顾永健 朱俐 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第5期716-719,共4页
目的探讨缺氧诱导因子(HIF)-1α在刺五加皂苷(ASS)对神经元缺氧保护中的作用及可能的调控机制。方法建立神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞分化和氯化钴诱导化学缺氧的神经元缺氧模型。采用Western blot和RT-PCR方法分别检测ASS对缺氧PC12... 目的探讨缺氧诱导因子(HIF)-1α在刺五加皂苷(ASS)对神经元缺氧保护中的作用及可能的调控机制。方法建立神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞分化和氯化钴诱导化学缺氧的神经元缺氧模型。采用Western blot和RT-PCR方法分别检测ASS对缺氧PC12细胞中HIF-1α mRNA的基因转录、蛋白表达及ERK1/2磷酸化的影响。结果正常培养的PC12细胞几乎没有HIF-1α mRNA的转录和表达,氯化钴的处理可显著增加HIF-1α mRNA的转录和表达,ASS可进一步增加缺氧PC12细胞中HIF-1α mRNA的转录和表达;ASS和NGF的预处理还可以增加磷酸化ERK1/2的表达。以上变化均有统计学意义(均P<0.05)。ASS的上述作用与NGF作用的差异无统计学意义(P>0.05)。结论ASS对氯化钴诱导化学缺氧的PC12细胞具有明显的保护作用,其作用可能与促进HIF-1α mRNA的转录和通过激活ERK1/2途径进而抑制HIF-1α降解从而增加其含量有关。 展开更多
关键词 刺五加皂苷 缺氧诱导因子 氯化钴 PC12细胞
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二氯化钴对NaCl胁迫下甘草幼苗叶片活性氧水平及抗氧化酶活性的影响 被引量:2
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作者 李真 孙业民 李朝周 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1149-1153,共5页
[目的]研究二氯化钴(CoCl2)对NaCl胁迫下甘草幼苗叶片活性氧水平、抗氧化酶活性及脂质过氧化程度的影响.[方法]抗氧化相关酶的活性测定.[结果]在80 mmol/L NaCl胁迫下,随胁迫时间延长甘草幼苗叶片抗氧化酶活性、活性氧水平发生显著变... [目的]研究二氯化钴(CoCl2)对NaCl胁迫下甘草幼苗叶片活性氧水平、抗氧化酶活性及脂质过氧化程度的影响.[方法]抗氧化相关酶的活性测定.[结果]在80 mmol/L NaCl胁迫下,随胁迫时间延长甘草幼苗叶片抗氧化酶活性、活性氧水平发生显著变化且脂质过氧化程度逐步加重.在NaCl胁迫前期,幼苗叶片细胞内除过氧化物酶外,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及抗坏血酸过氧化物酶活性显著升高,而活性氧水平和脂质过氧化程度无显著变化.随着胁迫时间的延长,即当80 mmol/L NaCl胁迫延长至30- 35 d时,活性氧水平与脂质过氧化程度的显著提高;在80 mmol/L NaCl溶液中加入40 μmol/L CoCl2,在胁迫的整个过程中相对提高抗氧化酶的活性,在胁迫延长至30- 35 d时显著抑制脂质过氧化水平的上升.[结论]40 μmol/L CoCl2可以相对提高80 mmol/L NaCl胁迫后期(30-35 d)甘草幼苗叶片抗氧化酶的活性,并显著抑制活性氧的产生和脂质过氧化的程度. 展开更多
关键词 二氯化钴 NaCl盐胁迫 甘草 活性氧 抗氧化酶 CoCl2
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缺氧对视网膜色素上皮细胞基质细胞衍生因子-1和整合素连接激酶表达的影响 被引量:1
7
作者 王业青 李霞 +2 位作者 吕勇 王健 张晓梅 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1013-1017,共5页
背景缺氧是诱导新生血管形成的主要因素,近年来越来越多的研究证实基质细胞衍生因子-1(SDF-1)和整合素连接激酶(ILK)在新生血管性疾病中发挥着重要作用,而缺氧对视网膜色素上皮(RPE)细胞SDF-1和ILK表达的影响尚未阐明。目的探... 背景缺氧是诱导新生血管形成的主要因素,近年来越来越多的研究证实基质细胞衍生因子-1(SDF-1)和整合素连接激酶(ILK)在新生血管性疾病中发挥着重要作用,而缺氧对视网膜色素上皮(RPE)细胞SDF-1和ILK表达的影响尚未阐明。目的探讨缺氧对体外培养RPE细胞中SDF-1和ILK表达的影响。方法从4周龄SPF级健康C57BL/6小鼠眼球中获取RPE组织并进行消化和培养,将达到80%融合的细胞进行传代。取第3代细胞制作细胞爬片后用细胞角蛋白18(CKl8)抗体进行免疫组织化学检测和鉴定,以5×104个/ml密度将RPE细胞接种于含胎牛血清的DMEM/F12培养液的培养瓶中,无血清饥饿培养24h后常氧组在常规培养基中进行培养,缺氧组在CoCl2浓度为200μmol/L的含胎牛血清的DMEM/F12培养液中进行培养,2个组根据培养时间的不同再亚分为1、3、6、12、24、48、72h组。采用逆转录PCR(RT-PCR)检测RPE细胞中SDF-1mRNA和ILKmRNA的表达,采用Westernblot检测RPE细胞中SDF-1蛋白和ILK蛋白的表达,均以目的基因A值/β-actinA值表示。结果培养的RPE细胞呈不规则多边形,细胞质内布满黑色素颗粒,90%以上的细胞对CK18呈阳性反应。随着CoCl2培养时间的延长,SDF-1mRNA和ILKmRNA的表达量逐渐增加,总体比较差异均有统计学意义(SDF-1 mRNA:F=281.875,P=0.000;ILKmRNA:F=187.566,P=0.000),12h达高峰,之后略有降低,但仍高于常氧组,缺氧1h组SDF-1mRNA及蛋白表达无明显变化;缺氧培养3、6、12、24、48、72h组SDF-1mRNA和ILKmRNA的表达量均明显高于常氧培养组,差异均有统计学意义(P〈0.01)。随着CoCl2培养时间的延长,SDF-1蛋白和ILK蛋白的表达量逐渐增加,差异均有统计学意义(SDF-1:F=44.719,P=0.000;ILK:F=144.481,P=0.000)。缺氧1h组SDF-1及ILK蛋白表达无明显变化;缺氧3、6、12、24、48、72h组SDF-1蛋白、ILK蛋白表达明显升高,与常氧组比较差异均有统计学意义(P〈O.01)。结论SDF-1和ILK参与了RPE细胞的缺氧反应,并且在缺血缺氧性视网膜病变的发生发展过程中可能发挥一定的作用。 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子-1 整合素连接激酶 视网膜色素上皮细胞 CoCl2 缺氧
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SGK-1在缺氧诱导小鼠垂体瘤细胞AtT-20增殖、凋亡中的表达及作用探讨 被引量:1
8
作者 韦睿 吴杰 +1 位作者 曾伟 张玮 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第18期16-19,共4页
目的观察血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK-1)在缺氧诱导小鼠垂体瘤细胞AtT-20增殖、凋亡中的表达,并探讨其在这一过程中的作用。方法将AtT-20细胞随机分为观察组和对照组,观察组分别加入50、100、200μmol/L CoCl_2(模拟缺氧),对照... 目的观察血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK-1)在缺氧诱导小鼠垂体瘤细胞AtT-20增殖、凋亡中的表达,并探讨其在这一过程中的作用。方法将AtT-20细胞随机分为观察组和对照组,观察组分别加入50、100、200μmol/L CoCl_2(模拟缺氧),对照组不处理,采用MTT法检测24、48、72、96 h时细胞增殖的A570值;将200μmol/L CoCl_2加入AtT-20细胞,培养0、24、48、72、96 h时采用流式细胞术测算细胞凋亡率,分别采用半定量PCR法和Western blot法检测SGK-1 mRNA及蛋白。将AtT-20细胞随机分为4组,A、B组转染干扰质粒SGK-1 siRNA,C、D组转染对照质粒si Con,转染24 h后A、C组加入200μmol/L CoCl_2,B、D组不处理,分别采用MTT法和流式细胞术检测24、48、72、96 h时细胞增殖的A570值及细胞凋亡率。结果缺氧处理72 h后,观察组随着CoCl_2浓度增加及作用时间延长,AtT-20细胞增殖的A570值逐渐降低,与对照组比较差异有统计学意义(P均<0.05)。与0 h时比较,处理24、48 h时细胞凋亡率无明显变化,处理72、96 h时细胞凋亡率增加(P均<0.05);与0 h时比较,处理24、48时AtT-20细胞SGK-1 mRNA及蛋白表达量均增加(P均<0.05),72 h后其表达量无显著变化(P均>0.05)。A组缺氧后各时点细胞增殖的A570值均低于其余各组,C组缺氧后72、96 h细胞增殖的A570值高于A组而低于B、C组(P均<0.05)。A组缺氧后各时点细胞凋亡率均高于其余各组,C组缺氧后72 h细胞凋亡率低于A组而高于B、C组(P均<0.05)。结论缺氧可抑制AtT-20细胞增殖、促进其凋亡,该过程中SGK-1表达增加可保护细胞免受缺氧导致的损伤。 展开更多
关键词 脑缺氧 垂体瘤细胞 血清和糖皮质激素调节蛋白激酶 氯化钴 基因干扰 细胞凋亡 细胞增殖
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血小板生成素通过PI3K/AKT通路防止CoCl_2诱导内皮细胞凋亡 被引量:11
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作者 王君妍 叶洁瑜 +1 位作者 梁恩瑜 杨默 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期528-534,共7页
目的:研究血小板生成素(TPO)对化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl_2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的作用及其机制。方法:实验分为4组,体外培养的未经处理的HUVEC为对照组,CoCl_2与HUVEC共培养的为CoCl_2组,在加入CoCl_2前用TPO预处理HU... 目的:研究血小板生成素(TPO)对化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl_2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的作用及其机制。方法:实验分为4组,体外培养的未经处理的HUVEC为对照组,CoCl_2与HUVEC共培养的为CoCl_2组,在加入CoCl_2前用TPO预处理HUVEC为TPO+CoCl_2组,TPO单独处理HUVEC为TPO组。使用CCK-8法检测各组细胞的细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率、凋亡蛋白酶Caspase-3的表达以及线粒体膜电位的变化。Western blot检测TPO对AKT通路磷酸化水平表达的影响。结果:CoCl_2可以明显抑制HUVEC的生长,细胞存活率随着CoCl_2的浓度的升高逐渐下降(r=-0.997);与对照组相比较,CoCl_2组的细胞凋亡率明显升高(P<0.001),而TPO+CoCl_2组的细胞凋亡率较前者明显下降(P<0.001),提示TPO对HUVEC有保护作用。TPO还能减少细胞凋亡蛋白酶Caspase-3的表达和抑制细胞线粒体膜电位的降低,以及刺激HUVEC PI3K/AKT通路的活化。结论:TPO具有防止化学性缺氧所致的细胞凋亡作用,其机制可能是通过活化PI3K/AKT通路,从而减少细胞凋亡蛋白酶Caspase-3的活化表达和稳定线粒体膜电位来发挥细胞保护作用。 展开更多
关键词 血小板生成素 氯化钴 内皮细胞凋亡
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脯氨酰羟化酶抑制剂对PC12细胞SDF-1α表达的影响
10
作者 吴滢 王郁 赵延欣 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2017年第1期7-11,17,共6页
目的研究脯氨酰羟化酶抑制剂对基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1 alpha,SDF-1α)表达的影响及可能的机制。方法体外培养PC12细胞,予以不同浓度氯化钴(CoCl_2)、去铁胺(DFO)、二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)处理。CCK-8... 目的研究脯氨酰羟化酶抑制剂对基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1 alpha,SDF-1α)表达的影响及可能的机制。方法体外培养PC12细胞,予以不同浓度氯化钴(CoCl_2)、去铁胺(DFO)、二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)处理。CCK-8法检测细胞活性,RT-PCR检测药物诱导后细胞内SDF-1αmRNA的表达,Western印迹法和ELISA法分别检测低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)、SDF-1α蛋白表达。结果 CCK-8法结果显示,低浓度CoCl_2能够促进PC12细胞的增殖能力,但随着浓度增高,DFO、CoCl_2、DMOG均能使细胞增殖能力降低。RT-PCR结果显示,DFO、CoCl_2、DMOG各组细胞内SDF-1αmRNA表达减少。Western印迹法结果显示,CoCl_2、DFO和DMOG组HIF-1α表达量较对照组显著增高。ELISA法结果显示,CoCl_2、DFO、DM OG组SDF-1α水平均显著下降。结论脯氨酰羟化酶抑制剂CoCl_2、DFO和DMOG均可上调HIF-1α的表达,下调SDF-1α的表达。 展开更多
关键词 脯氨酰羟化酶抑制剂 低氧诱导因子-1Α 基质细胞衍生因子-1Α 去铁胺 氯化钴 二甲基乙二酰基甘氨酸
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Solvothermal synthesis of nanosized CoSb_3 skutterudite
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作者 谢健 赵新兵 +2 位作者 糜建立 曹高劭 涂江平 《Journal of Zhejiang University Science》 EI CSCD 2004年第12期1504-1508,共5页
Nanostructures enhance phonon scattering and improve the figure of merit of thermoelectric materials. Nanosized CoSb3 skutterudite was synthesized by solvothermal methods using CoCl2 and SbCl3 as the precursors. A ... Nanostructures enhance phonon scattering and improve the figure of merit of thermoelectric materials. Nanosized CoSb3 skutterudite was synthesized by solvothermal methods using CoCl2 and SbCl3 as the precursors. A 'two-step' model was suggested for the formation of CoSb3 based on the X-ray diffraction analysis. The first step is the formation of cobalt diantimonide in the earlier stage during the synthesis process. Diantimonide was then combined with antimony atoms to form the skutterudite structured triantimonide, CoSb3, in the later stage of the synthesis process as the second step. The synthesized CoSb3 powders consist of irregular particles with sizes of about 20 nm and sheets of about 80nm. 展开更多
关键词 SKUTTERUDITE Solvothermal synthesis Nanosized materials
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