油茶CoPIF3基因的克隆及表达分析

本研究以油茶品种‘华硕’为材料,通过RT-PCR克隆得到光敏色素互作因子中的一条PIF3基因,命名为CoPIF3。CoPIF3基因序列全长1884 bp,编码627个氨基酸。CoPIF3蛋白分子量为67.881 kDa,属于bHLH蛋白家族,该基因与茶树的PIF3亲缘关系较近,被定位在细胞核中,并成功在E.coli Rosetta(DE3)菌株中表达。实时荧光定量表明:CoPIF3基因在叶芽及老茎中的表达量显著高于其他部位;在自交授粉下,CoPIF3基因在子房中24 h的表达量最低,在花柱中表达量在授粉后上调至24 h时最高;在异交授粉下,CoPIF3基因在子房和花柱中的表达量分别在24 h和48 h时达到峰值,随后均下调。研究表明CoPIF3可能参与了油茶自交授粉后花粉管的生长,进而参与了油茶自交不亲和反应。本研究为油茶自交不亲和机制的解析提供参考。