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化学镀CoWP薄膜的制备及磁性研究 被引量:2
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作者 陈强 王新庆 葛洪良 《电镀与涂饰》 CAS CSCD 2007年第3期20-23,共4页
利用化学镀的方法制备了CoWP磁性薄膜。研究了施镀时间对化学镀CoWP薄膜矫顽力和饱和磁化强度的影响,并利用场发射扫描电子显微镜(FSEM)、X射线衍射(XRD)和振动样品磁强计(VSM)研究了CoWP磁性薄膜的表面形貌、成分、微结构及磁... 利用化学镀的方法制备了CoWP磁性薄膜。研究了施镀时间对化学镀CoWP薄膜矫顽力和饱和磁化强度的影响,并利用场发射扫描电子显微镜(FSEM)、X射线衍射(XRD)和振动样品磁强计(VSM)研究了CoWP磁性薄膜的表面形貌、成分、微结构及磁学性能。结果表明,化学镀CoWP薄膜主要为hop结构co相,晶粒大小为2~3μm;随着施镀时间的增加,CoWP薄膜的饱和磁化强度也随之增大,最高达到122emu/g;CoWP薄膜的矫顽力都在250Oe以下。通过计算Kelly-Hankel(δM)曲线,证实了CoWP磁性薄膜中存在交换耦合作用,产生了剩磁增强效应。 展开更多
关键词 cowp薄膜 化学镀 FSEM XRD VSM 磁性 hcp结构 饱和磁化强度 交换耦合
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Magnetic performance and corrosion resistance of electroless plating CoWP film 被引量:6
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作者 Jiang, Li Pan, Shanshan +5 位作者 Lu, Jianbiao Ke, Xin He, Wenhao Yu, Yundan Wei, Guoying Ge, Hongliang 《Rare Metals》 SCIE EI CAS CSCD 2012年第3期264-271,共8页
The CoWP film with good magnetic performance and corrosion resistance was electrolessly plated from alkaline solution. The technical parameters of the electroless plating system were optimized. When the pH value of el... The CoWP film with good magnetic performance and corrosion resistance was electrolessly plated from alkaline solution. The technical parameters of the electroless plating system were optimized. When the pH value of electroless plating solution was 11.0 and the reducing agent (NaH2PO2) content was 0.4 mol L 1, the target chemical reactions proceeded in the electroless plating solution smoothly with negligible interference and side effects. CoWP film prepared under optimal deposition condition contained more hexagonal close-packed (hcp) cobalt (ε-Co) of [110] and crystallographic orientation of Co [002]. VSM analysis reveals that the saturation magnetization of the CoWP film is 100~220 Am2 kg 1 and coercivity is (2.87~4.38)×104 A·cm 1. The corrosion behavior of CoWP film in 3.5% NaCl aqueous solution was studied by electrochemical experiments. The results prove that the corrosion resistance of the CoWP film deposited under the optimal depo-sition condition exhibites relatively lower corrosion current of (3.054~3.162)×10 6 A·cm 2. The surface morphology analysis indicates that the film is smooth and composed of regular-shaped crystallites. 展开更多
关键词 cowp film CORROSION MAGNETIC MICROSTRUCTURE
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安氏隐孢子虫COWP部分编码基因的表达及免疫原性 被引量:2
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作者 任文陟 郑君 +4 位作者 宫鹏涛 李建华 李明英 刘颖丽 张西臣 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1326-1329,共4页
依据NCBI中安氏隐孢子虫囊壁蛋白(COWP)编码基因设计特异性引物,提取安氏隐孢子虫长春株总RNA,RT-PCR扩增目的基因AF,构建重组原核表达载体pET28a-AF,通过大肠杆菌BL21诱导表达,产物经SDS-PAGE以及Western blotting鉴定。然后纯化重组蛋... 依据NCBI中安氏隐孢子虫囊壁蛋白(COWP)编码基因设计特异性引物,提取安氏隐孢子虫长春株总RNA,RT-PCR扩增目的基因AF,构建重组原核表达载体pET28a-AF,通过大肠杆菌BL21诱导表达,产物经SDS-PAGE以及Western blotting鉴定。然后纯化重组蛋白,通过免疫BALB/c小鼠进行体液免疫和细胞免疫水平的检测。结果显示,重组原核表达质粒pET28a-AF构建成功,Western blotting显示重组蛋白约为18 000,可被安氏隐孢子虫免疫小鼠的多克隆抗体和HRP标记的抗组氨酸抗体识别。重组蛋白免疫BALB/c小鼠的抗体水平差异显著(P<0.05),与对照组相比,CD4+的值差异极显著(P<0.01),而CD8+的值差异显著(P<0.05)。结果表明,成功克隆并表达了重组安氏隐孢子虫囊壁蛋白,纯化的重组蛋白具有一定的免疫原性。 展开更多
关键词 安氏隐孢子虫 cowp 克隆 原核表达 免疫原性
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隐孢子虫重组蛋白包被抗原的筛选及ELISA方法的建立及初步应用 被引量:2
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作者 李军 唐林生 +7 位作者 彭昊 陶立 潘艳 陈泽祥 许力干 谢永平 杨威 黄维义 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期286-290,共5页
为建立检测牛隐孢子虫抗体的间接ELISA方法,本研究将重组表达的隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)、热休克蛋白70(HSP70)蛋白及COWP-HSP70串联蛋白分别作为包被抗原,进行反应条件的优化,建立了3种间接ELISA检测方法。建立的这3种方法均具有... 为建立检测牛隐孢子虫抗体的间接ELISA方法,本研究将重组表达的隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)、热休克蛋白70(HSP70)蛋白及COWP-HSP70串联蛋白分别作为包被抗原,进行反应条件的优化,建立了3种间接ELISA检测方法。建立的这3种方法均具有较高的特异性和敏感性。与伊氏锥虫,球虫和弓形虫阳性血清均无交叉反应,最低检出血清稀释倍数分别为1∶1 600、1∶3 200和1∶3 200。经过筛选,确定COWP-HSP70串联蛋白为包被抗原的间接ELISA方法为最佳检测方法。以该方法进行的重复性试验结果显示,其批内和批间变异系数分别为3.9%~8.2%和4.7%~8.3%。采用建立的ELISA方法与传统的粪检法分别对174份临床样品进行检测,隐孢子虫感染的检出率分别为9.2%和12.07%,两者符合率为97.13%。本研究建立的以COWPHSP70串联蛋白为包被抗原的牛隐孢子虫间接ELISA检测方法适用于临床牛隐孢子虫感染的检测。 展开更多
关键词 隐孢子虫 卵囊壁蛋白 热休克蛋白70 酶联免疫吸附试验
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安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白的原核表达及其免疫原性研究 被引量:1
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作者 彭昊 唐林生 +6 位作者 李军 黄维义 陶立 陈泽祥 谢永平 许力干 杨威 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1870-1875,共6页
【目的】验证安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)的免疫原性,为建立安氏隐孢子虫病免疫学诊断方法奠定基础。【方法】根据Gen Bank已公布的安氏隐孢子虫COWP同源基因序列(DQ060431)设计引物,克隆COWP基因并构建原核表达载体,经IPTG诱导表达后... 【目的】验证安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)的免疫原性,为建立安氏隐孢子虫病免疫学诊断方法奠定基础。【方法】根据Gen Bank已公布的安氏隐孢子虫COWP同源基因序列(DQ060431)设计引物,克隆COWP基因并构建原核表达载体,经IPTG诱导表达后,采用蛋白印迹法检测其免疫原性。【结果】扩增获得的COWP基因片段为549bp,其序列与Gen Bank已公布COWP同源基因序列(DQ060431)的同源性达100%,将其插入p ET-32a载体可构建p ET-32a-COWP表达载体。重组菌在30℃下经0.5 mmol/L IPTG诱导5 h后,其表达形式以可溶性表达为主;NTA-Ni亲和层析柱层析时用200 mmol/L咪唑洗脱液洗脱,即能得到纯化的重组蛋白,重组蛋白分子量约40 k Da。以抗His标签鼠单克隆抗体或鼠抗安氏隐孢子虫高免血清为一抗进行Western blotting检测,均能获得预期的目的条带。【结论】重组COWP蛋白具有良好的免疫原性,可作为安氏隐孢子虫病免疫学诊断的候选抗原。 展开更多
关键词 安氏隐孢子虫 卵囊壁蛋白 原核表达 免疫原性
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奶牛安氏隐孢子虫巢氏PCR检测方法的建立及应用 被引量:2
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作者 张园园 张百慧 +4 位作者 李简 刘书婷 韩莹 王燕春 蔡亚南 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第12期28-32,共5页
为了建立敏感、稳定、重复性好的奶牛安氏隐孢子虫的巢氏PCR检测方法,本试验根据GenBank中安氏隐孢子虫18S rRNA和囊壁蛋白(COWP)基因序列设计2对引物,并通过程序优化建立了安氏隐孢子虫巢氏PCR检测方法。结果显示,18S rRNA和COWP巢氏PC... 为了建立敏感、稳定、重复性好的奶牛安氏隐孢子虫的巢氏PCR检测方法,本试验根据GenBank中安氏隐孢子虫18S rRNA和囊壁蛋白(COWP)基因序列设计2对引物,并通过程序优化建立了安氏隐孢子虫巢氏PCR检测方法。结果显示,18S rRNA和COWP巢氏PCR分别扩增出407 bp和430 bp的安氏隐孢子虫特异性基因片段,与预期相符,且扩增出的基因片段与已知基因序列(KX926454)同源性为100%;将阳性样本倍比稀释后进行18S rRNA和COWP巢氏PCR,最低检测量分别为24.3 pg/μL和243 pg/μL,扩增结果与目的片段大小一致,重复性良好,与大肠埃希菌、牛艾美尔球虫、弓形虫均无交叉反应;从华中地区采集的563份样品中,18S rRNA巢氏PCR检测出安氏隐孢子虫阳性185份,而COWP巢氏PCR仅检测出其中的148份;基于18S rRNA巢氏PCR,安氏隐孢子虫阳性率在秋季最高(36.71%),在冬季最低(16.25%),具有显著的统计学差异(P<0.01)。因此,本试验所建立的18S rRNA巢氏PCR和COWP巢氏PCR可为奶牛场安氏隐孢子虫的检测和防控提供有力的技术支持。 展开更多
关键词 安氏隐孢子虫 巢氏PCR 18S rRNA 囊壁蛋白 检测 应用
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安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白基因与热休克蛋白70基因的重组联合表达 被引量:1
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作者 李军 唐林生 +7 位作者 彭昊 陶立 潘艳 陈泽祥 许力干 谢永平 杨威 黄维义 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1217-1222,共6页
利用双酶切方法将安氏隐孢子虫热休克蛋白70(HSP70)基因部分编码区连接到含有安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白基因(COWP)的表达质粒pET-32a-COWP上,构建了表达质粒pET-32a-COWP-HSP70。将鉴定正确的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,30℃,经1.... 利用双酶切方法将安氏隐孢子虫热休克蛋白70(HSP70)基因部分编码区连接到含有安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白基因(COWP)的表达质粒pET-32a-COWP上,构建了表达质粒pET-32a-COWP-HSP70。将鉴定正确的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,30℃,经1.5mmol/L IPTG诱导表达6h,表达产物主要以可溶的形式表达。使用小鼠抗安氏隐孢子虫超免疫血清为第一抗体进行Western-blot检测,结果有明显的目的条带出现,说明重组蛋白能被抗安氏隐孢子虫抗体识别。 展开更多
关键词 安氏隐孢子虫 卵囊壁蛋白基因 热休克蛋白70基因 表达
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