从Cohn法组份Ⅳ中分离纯化人血浆蛋白C

目的探索建立1种串联离子交换层析和固相化金属螯合亲和层析从Cohn法组份Ⅳ分离纯化蛋白C的方法 ,降低纯化蛋白C的成本,并实现血浆的综合利用。方法 4℃条件下,将Cohn法组份Ⅳ用PBS缓冲液抽提5h,离心(6500g)40min,上清液依次用0.45μm和0.22μm的滤膜过滤后,超滤透析;再通过串联离子交换层析和固相化金属螯合亲和层析,对蛋白C进行纯化。通过SDS-PAGE鉴定蛋白C的纯度;用考马斯亮蓝法通过紫外分光光度计测定总蛋白含量;通过WHO指定的发色底物法和凝固法(一期法)测定蛋白C活性。结果纯化的蛋白C在SDS-PAGE图谱上呈现1条62kD左右的蛋白带;经过离子交换层析,蛋白C的活性回收率为(48.19±9.22)%,纯化倍数为(3.75±0.56)倍;固相化金属螯合亲和层析后,蛋白C活性回收率为(59.61±5.59)%,纯化倍数为(36.79±3.72)倍;蛋白C总活性回收率为(28.77±9.45)%,纯化倍数为(136.64±6.82)倍,比活性为(11.70±0.89)IU/mg。结论串联离子交换层析和固相化金属螯合亲和层析可以从Cohn法组份Ⅳ中获得比活性较高的蛋白C浓缩物。

关于Diophantine方程(a^n-1)(b^n-1)=x^2的Cohn猜想（英文）

设a和b是两个不相等的正整数.针对Cohn猜想,即方程(a^n-1)(b^n-1)=x2没有正整数解(x,n),其中n>4.利用初等数论方法和指数Diophantine方程的性质,得到了如果a和b具有相反的奇偶性,那么方程没有满足n>4和2|n的正整数解(x,n).

Schur-Cohn多项式的鲁棒稳定半径

研究离散线性时不变系统的特征多项式的鲁棒稳定性 ,给出用求多项式最小值的方法来估计Schur_Cohn多项式的鲁棒稳定半径 ,在一定条件下估计为最优估计 .最后 ,给出若干算例 .

斯促尔—科恩(Schur-Cohn)判据在二维数字滤波器中的应用

详细论证了复系数斯促—科恩判据 ,给出了计算δi 的数列表 。

从Cohn氏法组分Ⅲ沉淀纯化人凝血因子Ⅶ

目的探索从Cohn氏法组分Ⅲ(组分Ⅲ)沉淀中纯化人凝血因子Ⅶ(FⅦ)的方法并对纯化产物进行鉴定。方法将组分Ⅲ沉淀溶解,经柠檬酸钡吸附、洗脱、硫酸铵沉淀、2次DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤纯化人FⅦ。结果从400g组分Ⅲ沉淀中最终得到10.1mg纯化的FⅦ,活性为1775.8U/mg,FⅦ被浓缩了近6000倍,总活性回收率为17.6%,SDS-PAGE电泳鉴定只有1条主条带。结论组分Ⅲ沉淀中有很高FⅧ活性;建立了从组分Ⅲ沉淀中纯化人FⅦ的方法。

基于标量波函数法和Cohn模型的电大开孔金属腔体屏蔽效能的快速算法

针对屏蔽体中存在电大开孔的实际情况,给出了计算平面波照射下金属腔体屏蔽效能的快速算法。首先根据标量波函数法并基于Cohn模型推导出平面波通过电大开孔耦合到金属腔体中的电磁场,从而利用屏蔽效能的基本公式计算出目标点的屏蔽效能。其次利用该快速算法分析电大开孔位置不变的情况下目标点在不同坐标点时屏蔽效能的变化规律。该算法的计算结果与全波仿真软件CST仿真结果有着很好的一致性,证实了该快速算法的有效性,为有电大开孔金属腔体的屏蔽问题提供了一种可靠有效的参考。

从Cohn氏组分Ⅳ沉淀中回收白蛋白的低温工艺

目的:探索低温环境下从Cohn氏组分Ⅳ沉淀中回收白蛋白的生产工艺条件。方法:在低温乙醇法的基础上进行改进,控制温度、乙醇浓度、酸碱度,提取组分Ⅳ沉淀中残留的白蛋白,选择合适的生产条件。结果:控制适当的工艺参数,回收的产品为浅黄绿色澄清液体,纯度>97%,吸收度<0.1,多聚体含量<5%,PKA<30IU/mL,仅与抗人的血清产生沉淀线,主要沉淀线为白蛋白;安全试验、无菌试验、热原质试验、热稳定性试验均符合要求。每千克组分Ⅳ沉淀回收的白蛋白在50g左右。结论:在低温环境下能有效地回收组分Ⅳ沉淀中的白蛋白,回收产品质量符合要求。

细薄膜壳绦虫[Hymenolepis gracilis(Zeder,1803)Cohn,1902]的发育史研究(多节绦虫亚纲:膜壳科)

细薄膜壳绦虫广布世界各地,常见寄生鸭和鹅。印度、日本、意大利、苏联及波兰等均有报告。国内林宇光(1959)首次描述本虫。国外报告多种剑水蚤、介虫等甲壳类可充当其中间宿主(Blanchard,1891;Mrazek,1891;Daday,1900;Linder,1921;Joyeux,1930等)。但国内有关本虫的生活史研究至今尚未见报告。作者进行本项研究,目的是观察研究本虫幼虫在中间宿主体内的发育规律,了解我省鸭。

伊贝母根际有益微生物对栽培产量的影响

本文利用PBY培养基从药用植物伊贝母根际土壤中分离纯化出一株微生物菌种,通过个体形态、培养特征和主要理化特性等试验,依据伯杰细菌鉴定手册将菌种鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis Cohn。制备其液体菌剂,在贝母的不同生长发育期灌根和喷叶后,进行伊贝母产量的测定,结果表明,使用该菌剂后,可以提高16.8%的贝母产量。

α_1-抗胰蛋白酶制剂的制备及其病毒灭活

目的 从Ｃｏｈｎ ＦⅣ中提纯α１－抗胰蛋白酶（α１－Ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ α１－ＡＴ，制备较高纯度α１－ＡＴ制剂。方法 对Ｃｏｈｎ ＦⅣ抽提液经沉淀、超滤、离子交换及凝胶过滤，提纯 α１－ＡＴ用巴氏法（液态，６０℃，１０ｈ加热）作病毒灭活， 并考察其效果。用免疫单扩散、双向交叉免疫电泳、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及合成基质法检测α１－ＡＴ蛋白及生物活性。用区带 扫描法测定α１－ＡＴ制剂的纯度。结果３批试制的α１－ＡＴ制剂的纯度为９１．３±１．５２％，比活０．４９±０．０８μ／ｍｇ，比活性 比抽提液提高了２７．４倍。巴氏法处理可使ＶＳＶ、Ｓｉｎｄｂｉｓ、Ｐｏｌｉｏ Ｉ型疫苗病毒分别降低１０．０±０．３，１０．０±０．３１及７．１１ ±０．３ｌｇＴＣＩＤ５０／ｍｌ，但仍能检出Ｐｏｌｉｏ型疫苗病毒。结论 可从 Ｃｏｈｎ ＦⅣ中制得较高纯度的 α１－ＡＴ制剂，巴氏法能对 α１－ＡＴ制剂作有效的病毒灭活处理。

枯草芽孢杆菌的培养条件及对水质的净化作用

研究了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis Cohn,1872)(菌株编号:LB-B3)的培养条件及其在净化对虾养殖池水样方面的效果。实验分别设置了9个不同的pH值梯度(pH 2～10)和6个不同接种量梯度(0.3%、0.5%、1%、3%、5%和7%),以吸光值(OD)为生长指标,进行了枯草芽孢杆菌培养条件的优化实验;同时又设置了5个不同接种浓度(0 CFU/mL、5.2×104CFU/mL、1.04×105CFU/mL、1.56×105CFU/mL和2.08×105CFU/mL)接种待处理水样,测定了96 h内化学耗氧量、亚硝酸氮、氨态氮和溶氧等4个水质指标的变化情况。结果表明:pH=7.0、接种量为7.0%时,OD值最大;枯草芽孢杆菌能显著净化水质,但使用后会暂时性增加耗氧。

亲和凝胶分离纯化人α1-抗胰蛋白酶的研究

目的探索通过免疫亲和层析从Cohn法组份Ⅳ分离纯化人α1-抗胰蛋白酶浓缩物的方法。方法 24℃下,将Cohn氏法组份Ⅳ用Tris缓冲液抽提0.5 h后,离心4 750 g×15 min,上清液加入亲水型气相二氧化硅脱脂后,离心6 000 g×15 min,再用1.2μm的滤膜过滤;通过GE公司新型的Alpha-1 Antitrypsin Select免疫亲和凝胶层析柱,对α1-抗胰蛋白酶进行纯化。用考马斯亮蓝法通过紫外分光光度计测定总蛋白含量;用SDS-PAGE鉴定α1-抗胰蛋白酶的纯度,并用Western Blot和串联质谱分析鉴定纯化的蛋白;通过发色底物法测定α1-抗胰蛋白酶活性。结果纯化的α1-抗胰蛋白酶在非还原性SDS-PAGE图谱上呈现1条54 kD左右的蛋白带和1条约140 kD的多聚体蛋白带,经过还原性SDS-PAGE多聚体条带解聚,Western Blot也可以反应相关变化;在经过前处理和亲和层析后,α1-抗胰蛋白酶活性回收率为(60.35±1.39)%,α1-抗胰蛋白酶总活性回收率为(41.88±6.98)%,纯化倍数为(71.68±1.32)倍,比活性大约(1.00～1.05)PU/mg。结论 GE公司Alpha-1 Antitrypsin Select免疫亲和层析亲和层析可以从Cohn氏法组份Ⅳ中特异性捕获α1-抗胰蛋白酶浓缩物。

米曲霉植酸酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

根据已发表的植酸酶基因phyA序列(GI:4815609和GI:22901877)设计引物,以米曲霉(AsperillusoryaeCohn,编号:ACCC30155)的总DNA为模板,利用PCR扩增得到目的片段。将此片段克隆到表达载体pPIC9K的EcoRⅠ酶切位点构建重组质粒,通过电转化方式将重组质粒转化毕赤酵母(Pichiapastoris)。检测结果表明,植酸酶基因在毕赤酵母中得到了表达。

人巨细胞病毒免疫球蛋白的研制及其临床应用

制备人源性高效价人巨细胞病毒 (HCMV)特异免疫球蛋白 (IgG)。采用ELISA从检定合格的血浆中筛选出滴度≥ 1∶5 0 0 0的血浆 ,合并后按低温乙醇法制备HCMV IgG ,再次检定后应用于临床。结果显示 ,按人免疫球蛋白标准检定 ,所制备的HCMV IgG全部合格 ,HCMV IgG滴度为 1∶15 0 0 0 0。临床应用结果表明 ,2批高效价HCMV IgG均可明显降低先天性HCMV感染率。

人血白蛋白热原去除工艺的实验

在热原不合格的白蛋白制品中，加入血浆蛋白Ｃｏｈｎ分部ＩＶ－１、ＩＶ－４组份进行热变性沉淀去除热原。经处理后，热原检测（兔法）表明，４批平均降温０．４７℃回收率为７２．５％，白蛋白５７％５０ｈ的热稳定性试验合格。其它常规检测项目均符合生物制品规程要求。

人血白蛋白的两种低温乙醇工艺的比较

以正常人新鲜冰冻血浆作原料，采用低温乙醇Ｃｏｈｎ５法相６法进行对照性中量试生产。结果表明，Ｃｏｈｎ６法所得白蛋白半制品的３批收率平均为２．４４±０．１ｇ／１００ｍｌ血浆，纯度平均为９８．６±０．６％，分别比Ｃｏｈｎ５法提高０．１２ｇ／１００ｍｌ血浆和１％；就分离白蛋白而言，Ｃｏｈｎ６法较Ｃｏｈｎ５法更为理想。

耳针联合肉毒素注射治疗面肌痉挛临床观察

目的观察耳针联合肉毒素注射治疗面肌痉挛的效果。方法选取面肌痉挛患者120例,根据随机数字表法将其分为观察组和对照组,每组60例。两组患者均予以肉毒素注射治疗,在此基础上观察组患者予以耳针法治疗。治疗后评估两组患者的治疗有效率、起效时间、疗效控制时间、不良反应发生率以及患者满意度。结果观察组总有效率(95.0%)明显高于对照组(80.0%),差异具有统计学意义(P<0.05);观察组起效时间明显短于对照组,疗效控制时间明显长于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);两组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05),但观察组患者满意度(91.7%)明显高于对照组(76.7%),且比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论耳针联合肉毒素治疗面肌痉挛更为有效,起效更快,且患者满意度亦更高。

应用经典热乙醇法从组分IV沉淀中制备白蛋白

将Cohn氏 6法低温乙醇分离人血浆中的组分IV(FIV)沉淀 ,溶解于注射用水中 ,加入 95 %乙醇后使乙醇浓度为 9% ,经加温、过滤及超滤制得白蛋白。每公斤FIV沉淀可制得白蛋白 5 7 8g。

高效价人巨细胞病毒免疫球蛋白的研制

目的 制备人源性高效价人巨细胞病毒免疫球蛋白(HCMV＿IgG)。方法 用ELISA方法从检验合格的献血员血浆中筛选HCMV＿IgG滴度≥1∶5000的血浆,采用低温乙醇法制备HCMV＿IgG。结果 按《中国生物制品规程2000版》肌肉注射人血球蛋白检定标准,各项检定均合格,且HCMV＿IgG滴度为1∶150000。结论 成功地制备出高效价HCMV＿IgG。