α_1-抗胰蛋白酶的分离纯化

为建立从Cohn′s组分IV沉淀中分离纯化α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)的技术路线,以Cohn′s组分IV为原料,利用还原剂1,4-二硫苏糖醇(DTT)、气相二氧化硅等处理,再经压滤、离子交换层析和疏水层析提取α1-AT。用SDS-PAGE及合成基质法检测α1-AT的纯度以及生物活性。结果可见,Cohn组分IV沉淀中α1-AT占蛋白总量的11%～13%,经该工艺提取的α1-抗胰蛋白酶纯度为97.6%,疏水层析后α1-AT的收获率为21%,比活为每毫克总蛋白中含0.54mg功能活性α1-AT。可见用此方法从Cohn组分IV沉淀中可制备高纯度的α1-AT。