复方黄芪合剂对早期DN模型鼠Col-Ⅳ及MMP-2/TIMP-2的影响

为研究复方黄芪合剂 (主药 :黄芪、牛蒡子 )治疗DN的疗效与机理 ,4 5只大鼠以STZ诱导造成糖尿病模型 ,3d后分为 3组 ,B组给予复方黄芪合剂 ( 5g·kg- 1·d- 1)、C组给予洛汀新 ( 4mg·kg- 1·d- 1)药液灌胃 ,D组予等量生理盐水灌胃 (模型组 ) ,另一组大鼠为对照组 (A组 ) ,不作任何处理。 6周后比较各组大鼠的有关指标。结果 :B、C组大鼠的Ccr、Ualb、肾脏基质阳性面积比、Col Ⅳ、MMP 2、TIMP 2诸项指标均高于D组 ,其中GLU、HbAlc、Ccr三项指标B组优于C组。提示 :降低肾脏Col Ⅳ、MMP 2 /TIMP 2的表达 。

人血清白蛋白对HK-2细胞col-Ⅳ、TIMP-1、MMP-9mRNA表达水平的影响

目的探讨人血清白蛋白对体外培养的HK-2细胞Ⅳ型胶原(Ⅳcollagen,col-Ⅳ)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA表达水平的影响。方法 HK-2细胞随机分为4组。A组细胞(空白对照组),未添加刺激物;B组、C组和D组细胞分别与5 mg.mL-1人血清白蛋白培养12、24、48 h。在0、12、24、48 h应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测col-Ⅳ、TIMP-1和MMP-9 mRNA的相对表达量。结果人血清白蛋白刺激HK-2细胞可上调col-Ⅳ、TIMP-1 mRNA的表达,且随着刺激时间延长,表达水平逐渐增高。B、C、D 3组HK-2细胞col-Ⅳ、TIMP-1mRNA表达水平均明显高于A组(均P<0.01)。人血清白蛋白刺激HK-2细胞,MMP-9 mRNA的表达随着刺激时间的延长,表达水平先增高后下降。B、C 2组HK-2细胞MMP-9 mRNA表达水平均明显高于A组(均P<0.01),D组HK-2细胞MMP-9 mRNA表达水平低于A组(P<0.05)。相关性分析结果显示,TIMP-1 mRNA表达与col-ⅣmRNA表达呈正相关(r=0.987,P<0.05),MMP-9 mRNA表达与col-ⅣmRNA表达无关(r=0.146,P>0.05)。结论人血清白蛋白刺激HK-2细胞可能通过促进col-Ⅳ的合成及上调TIMP-1、下调MMP-9使细胞外基质积聚,参与肾间质纤维化。

健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织t-PA、PAI-1、Col Ⅳ的影响

目的观察健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠t-PA、PAI-1、ColⅣ的影响,探讨其保护神经细胞可能作用机制。方法将72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、健脾补土方小剂量组、健脾补土方中剂量组、健脾补土方大剂量组,每组12只。采用线栓法制备MCAO模型,治疗7 d后处死,并在大鼠处死前进行神经功能缺损评分,应用酶联免疫吸附(ELISA)法测定中组织型纤溶酶原激活物(tPA)及组织型纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的变化,运用免疫组化法测定胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ)的含量变化。结果与模型组相比,健脾补土小、中、大剂量组神经功能缺损症状评分减少(P<0.05);健脾补土方小、中、大剂量组t-PA表达明显降低(P<0.05或P<0.01);健脾补土方小、中、大剂量组PAI-1表达明显升高(P<0.05或P<0.01);健脾补土方小、中剂量组Col IV表达明显升高(P<0.05)。结论健脾补土法组方能改善脑缺血/再灌注损伤大鼠神经缺损,可能与其下调t-PA及上调PAI-1的表达,从而减少细胞外基质(ECM)的降解,上调ColⅣ的表达有关。

慢性肾炎血瘀证血尿Col-Ⅳ LN的改变及丹参注射液的作用初探

目的:观察肾功能正常的慢性肾炎血瘀证患者的血、尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)及层粘蛋白(LN)含量的变化与中医本虚证、血瘀证症状积分的关系及临床应用价值;观察复方丹参注射液治疗前后的血、尿Col-Ⅳ及LN含量的变化,探讨复方丹参注射液治疗肾脏纤维化的疗效及可能机制。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定67例肾功能正常的慢性肾炎血瘀症患者和20例健康人的血、尿Col-Ⅳ与LN含量,观察以上指标与中医本虚证及血瘀证症状积分的关系;67例慢性肾炎患者随机分为35例复方丹参治疗组和32例对照组,对照组给以潘生丁、雷公藤多苷等常规处理,伴肾病综合征者加用激素,血压高者加用降压药,治疗组给予以上对照组治疗+复方丹参注射液50mL静脉滴注。比较治疗前后两组的血、尿Col-Ⅳ及LN含量的变化。结果:与健康人相比,慢性肾炎组患者血、尿Col-Ⅳ及LN水平均明显增高(P<0.05);各本虚证型血、尿Col-Ⅳ及尿LN较健康者均明显增高(P<0.01),气阴两虚与健康者相比,血LN明显增高(P<0.01),气阴两虚与肺肾气虚比较,血Col-Ⅳ及血、尿LN均明显增高(P<0.05),脾肾阳虚与肝肾阴虚比较,尿Col-Ⅳ明显下降(P<0.01);各血瘀证组与健康人组比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均明显增高(P<0.05,P<0.01),而各血瘀证组间两两比较,各指标均无显著差异,Spearm an相关分析结果显示,血、尿Col-Ⅳ与LN水平与血瘀证积分均无线性相关关系;治疗组治疗前后血Col-Ⅳ、LN及尿Col-Ⅳ、LN均明显下降(P<0.05)。治疗组与对照组治疗前后血Col-Ⅳ、LN及尿Col-Ⅳ、LN差值比较有显著差异(P<0.05)。Spearm an相关分析:治疗前后血Col-Ⅳ与血LN二者水平的改变呈显著正相关(P<0.01)。结论:肾脏纤维化可能是慢性肾炎血瘀证的内在物质基础,肾脏纤维化是肾脏局部的血瘀状态,即所谓的微型癥积。外在的血瘀证症状积分难于体现肾脏局部的瘀血严重程度。复方丹参注射液对于减轻慢性肾炎的纤维化程度,延缓纤维化进展可能有一定的益处,其抗肾脏纤维化作用可能是通过多个途径而实现的。对延缓肾脏纤维化的治疗提供了又一药物选择。

1,25(OH)_(2)D_(3)对miR-130b转染的高糖条件下HMC细胞TGF-β1/Smad3及Col-Ⅳ表达的影响

目的观察高糖环境下1,25(OH)_(2)D_(3)对miR-130b转染肾小球系膜细胞TGF-β1/Smad3、Col-IV表达水平的变化,探索1,25(OH)_(2)D_(3)是否可通过miR-130b改善糖尿病肾病肾脏纤维化的过程。方法HMC细胞传代培养,miR-130b mimics及miR-130b inhibitor经LipofectamineTM 2000转染肾小球系膜细胞,依据分组加入1,25(OH)_(2)D_(3)1.0×10^(-8) mol/L,37℃、5%CO_(2)饱和湿度条件下继续培养48 h,共分为6组:①空白对照组;②细胞+无水乙醇组(A组);③细胞+miR-130b mimics+无水乙醇组(B组);④细胞+miR-130b mimics+1,25(OH)_(2)D_(3)组(C组);⑤细胞+miR-130b inhibitor+无水乙醇组(D组);⑥细胞+miR-130b inhibitor+1,25(OH)_(2)D_(3)组(E组)。以实时荧光定量PCR检测细胞miR-130b及TGF-β1、Smad3、Col-IVmRNA的表达水平,以Western blot方法检测细胞TGF-β1、Smad3、Col-IV蛋白的表达水平。采用多组间比较的单因素方差分析及组内两两比较采用LSD、Dunnett s T3法比较各组数据。结果空白对照组与A组细胞miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平,差异无统计学意义(P>0.05),与A组相比,B组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显升高(P<0.05),D组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低(P<0.05)。经1,25(OH)_(2)D_(3)治疗发现,与B组相比,C组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低(P<0.05),与D组相比,E组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低(P<0.05)。结论1,25(OH)_(2)D_(3)可降低miR-130b转染肾小球系膜细胞miR-130b及纤维化相关因子TGF-β1、Smad3、Col-IV的表达水平,1,25(OH)_(2)D_(3)可能通过miR-130b改善糖尿病肾病肾脏纤维化的过程。

怡肾汤对5/6肾切除大鼠残肾组织形态与Col-Ⅳ及MMP-2的干预作用

目的:研究怡肾汤在改善肾功能和减轻肾小球硬化中的作用。方法:将72只SD大鼠随机取8只为正常对照组,其余分为模型组(n=32)及怡肾汤治疗组(n=32)。模型组和治疗组大鼠行5/6肾切除术。术后,模型组大鼠予以自由饮食、生理盐水灌胃1ml·100g-1·d-1;怡肾汤治疗组大鼠予以怡肾汤灌胃(0.3ml·100g-1·d-1),1次/d。于术后第5、6、7、8周4个时间点分别分批处死大鼠,用PAS染色观察大鼠残肾肾组织形态学改变,计算肾小球硬化指数(GSI);用免疫组织化学方法分别检测肾组织中Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达。结果:(1)细胞形态学观察示:模型组中肾小球内细胞数目增多明显,基质增多,有新月体形成;系膜区增宽染色深,毛细血管开放不良甚至闭塞,肾小囊囊壁增厚。治疗组细胞增生明显轻于模型组,毛细血管开放较好,肾小管结构基本正常。治疗组和模型组大鼠肾小球呈不同程度硬化表现,治疗组GSI显著低于模型组(P<0.05)。(2)免疫组化发现:与正常组和治疗组比较,模型组肾组织中Ⅳ型胶原表达强烈,肾小球硬化严重;怡肾汤治疗组大鼠Ⅳ型胶原表达减少而MMP-2表达强于模型组。结论:Ⅳ型胶原在5/6肾切除大鼠肾组织中有较高的表达。怡肾汤可减轻肾组织中炎性细胞浸润和细胞增生,降低Ⅳ型胶原的表达、增加MMP-2的表达,延缓肾小球硬化进程和肾功能恶化的速度。

慢性肾小球肾炎血、尿Ⅳ型胶原及尿黏蛋白的改变与肾脏病理关系初探

目的:观察肾功能正常的慢性肾炎患者的血、尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)及层黏蛋白(LN)含量的变化与肾脏病理改变的关系及临床应用价值。方法:(1)采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定67例肾功能正常的慢性肾炎患者和20例健康人的血、尿Col-Ⅳ与LN含量。(2)慢性肾炎患者均接受肾活检病理检查。观察以上指标与肾脏病理改变的关系。结果:(1)与健康人相比,慢性肾炎组患者血、尿Col-Ⅳ及LN水平均明显增高(P<0.05)。(2)系膜细胞增生Ⅲ级组、Ⅳ级组与健康人组比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均明显增高(P<0.05)。系膜细胞增生程度与血Col-Ⅳ水平关系最密切(P<0.05)。(3)各系膜基质增生组与健康组比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均显著增高(P<0.05)。系膜基质增生程度与尿Col-Ⅳ水平关系最为密切(P<0.05)。(4)肾小球球性硬化10%～25%组与健康人比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均明显增高(P<0.05)。硬化率与血LN关系最密切(P<0.05)。(5)间质纤维化程度与尿Col-Ⅳ水平关系最密切(P<0.01)。(6)小管萎缩≤10%者较健康者,尿Col-Ⅳ、LN均显著增高(P<0.01)。小管萎缩>5%者较健康者,血Col-Ⅳ明显增高(P<0.01)。小管萎缩>10%者尿Col-Ⅳ则明显降低(P<0.05)。(7)血Col-Ⅳ水平与血LN水平正相关(P<0.01)。尿Col-Ⅳ水平与尿LN水平正相关(P<0.01)。但血、尿Col-Ⅳ水平之间及血、尿LN水平之间均无线性相关关系。结论:(1)肾功能正常的慢性肾炎患者血、尿Col-Ⅳ与LN水平显著高于健康人群。(2)血与尿Col-Ⅳ、LN水平的变化可在一定程度上反映肾脏病理的改变,与系膜细胞基质的增生程度、间质纤维化、肾小球球性硬化有一定的关系。但血Col-Ⅳ、LN水平主要反映了Col-Ⅳ、LN代谢的活跃,与系膜细胞增生关系更为密切;而尿Col-Ⅳ、LN水平则与基质增生、间质纤维化关系更为密切。它们之间均存在着相关关系。因此监测血与尿Col-Ⅳ、LN的动态变化,综合判断,对于监测肾脏纤维化倾向有一定价值。

乳腺癌中Ⅳ型胶原的表达及临床意义

目的研究Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)在乳腺癌中的表达及临床意义。方法用免疫组化方法检测108例乳腺癌及8例良性肿瘤组织中ColⅣ的表达情况,分析ColⅣ与乳腺癌患者临床资料间的关系及预后价值。结果8例良性肿瘤ColⅣ表达完整呈闭和线状。108例乳腺癌中,ColⅣ表达完整,局部断裂、碎片状或缺如分别为32例,11例,65例。ColⅣ不完整或缺如与差预后,腋窝淋巴结受累、肿瘤大小、TNM分期呈正相关。结论乳腺癌ColⅣ完整表达或局部断裂者比碎片缺如者生存期长(5年生存期)。因此,Ⅳ型胶原可作为肿瘤侵袭能力的参考指标。

COL4A1基因多态性与中国女性骨密度关系分析

目的 研究COL 4 A 1基因多态性与中国农村女性骨密度关系.方法 采用双能X线吸收仪对343名女性研究对象进行腰椎及股骨扫描,应用PCR-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测COL4 A 1基因（谷酰氨酸Q 1334 H组氨酸）多态位点基因型,用广义线性模型分析此位点多态性与腰椎2～4及股骨骨密度关系.结果 在调整环境危险因素后,均未显示COL 4 A 1基因H 1334 H基因型与股骨颈、腰椎2～4骨密度相关（P=0.409、0.705）.结论 在中国农村女性人群中COL 4 A 1基因Q 1334 H多态性与股骨颈、腰椎2～4骨密度无显著相关性.

益气活血方对慢性肾炎患者血、尿Ⅳ型胶原和层粘蛋白的影响

目的:观察中药益气活血方对慢性肾炎患者血、尿Ⅳ型胶原和层粘蛋白的影响。方法:将入选120例患者随机分为治疗组和对照组,每组各60例,健康人群组30例来自医院体检中心和医院职工。治疗组和对照组组均给予控制血脂、血压、尿蛋白以及抗凝等常规治疗,治疗组加用益气活血中药(黄芪、丹参、山药、茯苓、桃仁、蜈蚣、白术、川牛膝);观察2组治疗前后的血、尿Ⅳ型胶原和层粘蛋白变化。结果:健康组与治疗组、对照组治疗前比较有着显著差异(P<0.05),治疗组与对照组治疗前比较无差别(P>0.05),治疗组治疗前后比较检测的4项指标均有统计学意义,其中血IV胶原(P<0.05)、血层粘连蛋白(P<0.01)、尿IV胶原(P<0.05)、尿层粘连蛋白(P<0.05);对照组治疗前后比较检测的4项指标均有统计学意义,其中IV胶原(P<0.05)、血层粘连蛋白(P<0.05)、尿IV胶原(P<0.05)、尿层粘连蛋白(P<0.05),治疗组与对照组治疗后比较仅有尿层粘连蛋白统计学意义(P<0.05)。结论:中药益气活血在治疗慢性肾炎过程中发挥重要作用,中西结合治疗有着明显的优势。

降糖三黄片对早期糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1/Smad1信号通路的影响

目的:观察降糖三黄片对早期糖尿病肾病大鼠肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad1、Co1-Ⅳ的影响,探讨其对肾脏的保护作用。方法:将80只SD大鼠随机分为正常组11只、造模组69只。腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病肾病大鼠模型。造模成功的大鼠随机进一步分为模型组、厄贝沙坦组(给药量0.027 g·kg-1·d-1)、降糖三黄片组(给药量0.675 g·kg-1·d-1),给药8周后处死。于治疗前、模后4周、8周各组大鼠测血糖、称体重;造模成功后、实验结束前收集24 h尿液测定尿微量白蛋白。实验结束后摘取肾脏,去包膜称重;分别用免疫组化染色法及荧光定量RT-PCR法检测smad1、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ);用双抗体夹心法(ELASA)检测肾组织TGF-β1。结果:造模后各组大鼠体重明显减轻,降糖三黄片、厄贝沙坦与模型组比较,肾重/体重指数下降(P<0.01)。降糖三黄片、厄贝沙坦与模型组比较尿微量白蛋白水平下降(P<0.05)。降糖三黄片与模型组、厄贝沙坦组相比,能较好地降低血糖(P<0.01);降糖三黄片、厄贝沙坦均能明显抑制糖尿病肾病大鼠肾组织中TGF-β1的表达(P<0.01)。免疫组化染色表明厄贝沙坦组和降糖三黄片组比模型组smad1、Col-Ⅳ阳性表达程度显著减弱。免疫组化图像染色指数及荧光定量RT-PCR法结果提示降糖三黄片能降低smad1、Col-Ⅳ水平(P<0.05),且与厄贝沙坦作用相近。结论:降糖三黄片可通过抑制肾组织TGF-β1/smad1通路的表达,降低Col-Ⅳ的沉积,使肾脏的异常结构得到改善,延缓肾小球硬化。

肾络通对大鼠系膜细胞外基质分泌及转化生长因子β_1表达的影响

目的探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质不同成分的抑制作用及对转化生长因子β1(TGFβ1)表达的调节作用。方法以体外培养大鼠肾小球系膜细胞及血清药理学方法为基础,采用酶联免疫吸附试验检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量;采用逆转录多聚酶链反应(RTPCR)检测TGFβ1mRNA的表达。结果细胞外基质FN,ColⅣ的含量与TGFβ1mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对二者均有抑制作用。结论肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制TGF-β1的分泌与表达,从而进一步明确了其防治多种肾小球疾病,延缓肾小球硬化的作用机制。

黄芪总苷对糖尿病小鼠肾脏保护作用的研究

目的:研究黄芪总苷(AST)对糖尿病小鼠肾脏的保护作用及其可能的作用机制。方法:链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病小鼠模型。随机分为模型组、4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶组,AST低、中、高三个剂量组。五组动物分别在给药后4周、6周,检测空腹血糖浓度(FBG)及糖化血清蛋白含量(GSP),称量体质量,计算肾脏指数,观察肾脏病理改变,TUNEL法检测肾小球细胞凋亡,RT-PCR法检测肾脏转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、IV型胶原蛋白(Col IV)mRNA表达情况。结果:AST能显著降低STZ诱导的糖尿病小鼠FBG、GSP,且呈现时间、剂量依赖性(P<0.01)。给药后6周,各用药组小鼠体质量上升,肾脏指数下降,肾小球PAS阳性分值下降,肾小球细胞凋亡率降低(P<0.01)。与模型组比较,AST中剂量组小鼠肾脏ColⅣ、TGF-β_1mRNA表达水平明显下降(P<0.05)。结论:AST对糖尿病小鼠有肾脏保护作用,其机制可能与其促进肾脏ColⅣ、TGF-β1mRNA表达有关。

肾络通对大鼠系膜细胞外基质分泌及转化生长因子β_1表达的影响

目的探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质(ECM)不同成分的抑制作用及对转化生长因子β1(TGFβ1)表达的调节作用。方法以体外培养大鼠肾小球系膜细胞(MCs)及血清药理学方法为基础,采用酶联免疫吸附试验(ELAIS)检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量;采用逆转录多聚酶链反应(RT PCR)检测TGFβ1mRNA的表达。结果细胞外基质FN、ColⅣ的含量与TGFβ1mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对二者均有抑制作用。结论肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制TGFβ1的分泌与表达,从而进一步明确其防治多种肾小球疾病,延缓肾小球硬化的作用机制。

抗纤灵冲剂调控基因与蛋白表达干预肾间质纤维化的机制研究

目的从MMP-9调节COL4α3基因及Ⅳ型胶原蛋白表达的角度,研究抗纤灵冲剂干预肾间质纤维化的机制。方法72只SD大鼠,成功制备单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)模型后,再随机分为模型组、抗纤灵组、氯沙坦组。另24只大鼠,制备假手术模型。药物干预后处死,留取左侧肾组织。应用免疫组化法测定MMP-9、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)蛋白在肾间质的阳性表达;采用PCR Array法,检测肾组织COL4α3基因的表达。结果UUO假手术组大鼠MMP-9表达极微;在模型组大鼠其阳性表达显著增加;与模型组比较,抗纤灵组4个时间点MMP-9的阳性表达均明显增加;氯沙坦组各时间点MMP-9阳性表达均较模型组增加,但无统计学差异。14d、28d时MMP-9阳性表达抗纤灵组显著高于氯沙坦组。各时间点模型组COL4α3基因水平分别较假手术组上调10.37倍、10.27倍及14.34倍。各时间点抗纤灵组COL4α3的基因表达水平,分别较模型组下调1.5倍、1.52倍和1.48倍。假手术组大鼠Col-Ⅳ只有极少量表达;模型组大鼠肾小球基底膜及肾间质表达显著增加,与假手术组相比有统计学意义;与模型组相比较,抗纤灵组及氯沙坦组各时间点阳性表达均显著减少;与氯沙坦组比较,7 d,14 d,28 d时间点Col-Ⅳ蛋白阳性表达,抗纤灵组均显著减低;21d阳性表达也明显低于氯沙坦组。结论抗纤灵冲剂干预肾间质纤维化的可能机制是通过MMP-9下调COL4α3基因及Col-Ⅳ蛋白在肾间质的表达。

灯盏花素对肾损害模型小鼠肾脏TGF-β_1、Col-Ⅳ表达的影响

目的:研究灯盏花素对肾损害模型小鼠肾功能和转化生长因子(TGF)-β1、Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)表达的影响。方法:腹腔注射顺铂8mg/kg以复制小鼠肾损害模型。实验分为对照(5%羧甲基纤维素钠)、模型(5%羧甲基纤维素钠)与灯盏花素高、低剂量(50、25mg/kg)组。灌胃给药,每天1次,连续7d。给药结束后HE染色观察大鼠肾组织改变,进行肾脏指数、尿蛋白(Upr)/尿肌酐(Ucr)比值、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG-U)等肾功能指标测定;免疫组化法检测肾组织TGF-β1、Col-Ⅳ的表达。结果:病理切片显示高、低剂量灯盏花素可显著改善顺铂致肾损害小鼠的肾组织结构。与模型组比较,灯盏花素高、低剂量组小鼠肾脏指数、Upr/Ucr比值与NAG-U活性均显著下降(P<0.01或P<0.05),Col-Ⅳ表达显著增强(P<0.05);灯盏花素高剂量组小鼠肾组织TGF-β1表达显著下降(P<0.05)。结论:灯盏花素对顺铂致肾损害小鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与下调肾组织TGF-β1及上调Col-Ⅳ的表达有关。

益气解毒化瘀小复方及其单味药对大鼠肾小球系膜细胞MMP3、TIMP1表达及细胞外基质产生的影响

目的:探讨益气解毒化瘀小复方及其单味药对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肾小球系膜细胞MMP3(GMCs),TIMP1表达及细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响。方法:常规培养大鼠肾小球系膜细胞,RT-PCR法检测各组对大鼠肾小球系膜细胞MMP3、TIMP1的表达,双抗体ELISA夹心法检测各组对细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响。结果:小复方组降低系膜细胞MMP3、TIMP1表达最为明显,小复方组降低细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响最为明显,与各单味药,西药对照组比较,有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论:益气解毒化瘀小复方可有效地抑制肾小球系膜细胞增殖,有效地促进系膜细胞凋亡,并优于单味药,从而达到抗肾小球硬化,保护肾脏的目的。

庆大霉素肾损伤大鼠肾小管上皮细胞基质成分的变化观察

庆大霉囊（ＧＭ）引起的肾损害，光镜检查主要表现为近端肾小管上皮细胞（ＴＥＣ）肿胀，细胞质空泡变性，较少出现肾小管坏死，但ＴＥＣ粘附性发生变化．表现为ＴＥＣ沿肾小管基膜（ＴＢＭ）剥脱。为此，我们采用免疫组化方法检测大鼠ＧＭ肾损害时，ＴＥＣ基质成分的变化．并探讨人参皂甙（ＧＳ）的预防作用。实验大鼠设ＧＭ肾损害组、正常组和ＧＳ预防组。结果表明，ＧＭ肾损害时，ＴＥＣ分泌层粘蛋白、纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原增多，而且与肾损害程度有关。ＧＳ能减轻ＴＥＣ的基质分泌。

人脐血间充质干细胞静注对UUO大鼠肾间质纤维化程度的影响

目的观察人脐血间充质干细胞(UC-MSCs)静注对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化程度的影响。方法将24只大鼠随机分为假手术组、模型组、UC-MSCs组,每组8只。模型组和UC-MSCs组结扎单侧输尿管造成梗阻性肾病模型,UC-MSCs组术后当天即尾静脉注射1×106/mL的UC-MSCs悬液。术后14 d处死各组大鼠,取梗阻侧肾做组织学检查,观察肾间质纤维化的程度;采用免疫组化法检测梗阻侧肾组织中人类白细胞抗原-1(HLA-1)阳性细胞数目和胶原-Ⅳ(COL-Ⅳ)水平。结果假手术组肾组织结构正常。模型组肾小管间质增宽,有较多的炎性细胞浸润和纤维组织增生,肾小管弥漫性扩张,并可见肾小管上皮细胞肿胀、变性、坏死、脱落,小管基底膜不同程度断裂、增厚。UC-MSCs组肾间质纤维化程度明显减轻,肾小管灶状上皮细胞空泡变性,偶见蛋白管型,间质水肿程度减轻。肾间质损伤程度评分假手术组(0.2±0.1)分、模型组(2.1±0.2)分、UC-MSCs组(0.8±0.2)分,两两比较P均<0.05。COL-Ⅳ表达量假手术组0.29±0.06、模型组13.16±8.01、UC-MSCs组7.36±1.07,两两比较P均<0.05。结论 UC-MSCs尾静脉注射可减少肾间质COL-Ⅳ沉积,减轻了肾间质纤维化。

健脾益肾活血中药干预治疗糖尿病肾病大鼠的实验研究

目的探讨健脾益肾活血中药对2型糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的机理。方法采用链脲佐菌素+高脂饲料诱导糖尿病肾病(DN)大鼠动物模型,造模成功后分为4组:正常对照组、模型组、贝那普利组和中西药结合治疗组。贝那普利组给予贝那普利10 mg/kg灌胃,中药组加予中药煎剂,连续给药20周后观察大鼠一般状态,检测血清和尿液中BUN、Cr、TC、TG、24 h尿蛋白、HbAlc和FINS水平,并取肾组织染色后行病理检验,观察其组织学改变,测定肾组织内TGF-β1、Col-Ⅳ的表达。结果中西药结合治疗组实验大鼠一般状态较模型组改善较为明显,贝那普利组和中西药结合治疗组BUN、Cr、TC、TG、24 h尿蛋白、HbAlc和FINS均有所下降,其中中西药结合治疗组指标下降更明显(P<0.05,P<0.01),模型组肾脏形态学病理检测结果观察有明显病变,中西药结合治疗组和贝那普利组有不同程度改善,中西药结合治疗组的TGF-β1、Col-Ⅳ的表达下降明显,与模型组有极显著差异(P<0.01)。结论健脾益肾活血中药可改善2型糖尿病肾病大鼠肾脏损害,延缓肾功能损害进程,对DN大鼠肾功能具有保护作用。