双酶法提取大豆蛋白工艺优化

大豆蛋白营养价值较高,但传统的碱溶酸沉提取工艺会降低蛋白品质。为获得高品质大豆蛋白并提高蛋白提取率,采用双酶法分步水解工艺对大豆粗蛋白进行提取。通过构建单因素实验与正交实验,系统地研究了不同因素对蛋白提取率的影响。研究结果显示,最优的纤维素酶酶解工艺为酶解pH值4.8、酶解温度50℃、酶解时间2.0 h以及酶添加量0.4%;最优的碱性蛋白酶酶解工艺为酶解pH值9.0、酶解温度60℃、酶解时间5.0 h以及酶添加量0.8%。在双酶最佳提取条件下,大豆粗蛋白提取率可达93.10%。

芽孢杆菌074碱性纤维素酶的研究——Ⅰ.菌种的分离、筛选及发酵条件

从碱性土样中,分离到产碱性纤维素酶的细菌134株。经摇瓶初筛、复筛后,得到一株芽孢杆菌074,在pH9条件下能产生具有较高活性的纤维素酶。该菌株的最适生长pH为中性,最适生长温度为32℃。NaC1对酶的产生影响较大。羧甲基纤维素钠(CMC-Na)对酶的产生有一定促进作用,但不是唯一碳源。用最佳培养基和培养条件,48小时酶活性最高可达6u/ml。

产碱性纤维素酶海洋细菌的筛选、鉴定及酶学性质研究

用CMC平板筛选方法，从青岛近海海域海水中分离出一株产碱性纤维素酶的海洋菌株QM11，经16S rDNA鉴定，该菌株为Cytophaga fucicola。对该菌的生物学特性研究表明，其最适生长温度为27℃，生长温度范围为4-48℃，为耐冷菌；在pH7．0～8．0、含3．0％NaCl的培养基条件下，最适宜菌株生长和产酶；QM11所产碱性纤维素酶最适反应温度为40℃，最适反应pH为9．0，在碱性条件下具有较高的酶活性和较好的稳定性。Mn^2＋、Fe^3＋对酶反应具有促进作用，Cu^2＋、Pb^2＋对酶反应具有抑制作用。

碱性纤维素酶及其应用的研究进展

碱性纤维素酶在碱性条件下具有内切β1,4葡萄糖苷酶活力,在加酶洗涤剂等行业具有重要的应用价值。目前已发现由芽孢杆菌和链霉菌产生的多种碱性纤维素酶,其中大部分的基因已被克隆、测序和表达,其催化反应特性、反应机理和应用也得到了较深入的研究。从碱性纤维素酶的产生菌、酶反应特性和反应机理、碱性纤维素酶的基因克隆和表达,以及碱性纤维素酶的应用等几个方面,介绍了有关碱性纤维素酶的最新研究进展。

产碱性纤维素酶兼性厌氧菌株的筛选和酶学性质的初步研究

用CMC平板筛选方法,从造纸厂碱性土壤中获得产碱性纤维素酶兼性厌氧菌株LZ-5,革兰氏阴性,经鉴定为弧菌属(Vibriosp.)中的一个种。液体摇瓶培养产生碱性纤维素酶活力高达5.8U/mL。酶学性质初步研究显示,LZ-5产生的纤维素酶最适反应温度为40℃,最适反应pH值为9.0,在碱性条件下具有较高的酶活性和较好的稳定性。经传代培养证实该菌株遗传性能稳定。

海洋酵母菌胞外酶及其基因的最新研究进展

综述海洋酵母菌所产多种胞外酶的生产、纯酶性质及基因克隆工作的最新研究进展。从实验室建立的500多株海洋酵母菌种资源库中筛选出了数十株可以产生多种不同活性胞外酶的海洋酵母菌,它们分别属于耶鲁维亚酵母菌(Yarrowia)、类酵母(Aureobasidium)、毕赤氏酵母菌(Pichia)、梅奇酵母菌(Metschnikowia)和隐球酵母菌(Cryptococcus)等不同种属。所产生的胞外酶主要包括纤维素酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、淀粉酶(包括生淀粉酶)、菊糖酶、脂酶、植酸酶和嗜杀因子等。深入进行了各种胞外酶的生产,纯化及纯酶的性质研究,并对部分菌株的胞外酶基因进行了克隆、测序和表达,这些研究有助于对海洋酵母胞外酶的理论研究和生产应用价值的了解和对于海洋酵母菌资源、生理和遗传的进一步深入研究。

耐碱性真菌纤维素酶生产菌的筛选及酶学性质的初步研究

从造纸厂碱性土样中分离到 2 4株能够产生纤维素酶的真菌 ,经过摇瓶复筛 ,选出一株耐碱性纤维素酶产生菌S60 7。经过鉴定 ,该菌株为黑色葡萄状穗霉 (Stachy botrysatra)。通过对其粗酶液的性质进行测定 ,该菌所产纤维素酶粗酶液中的FPA、CMCase和β-葡萄糖苷酶的最适pH分别为 6.0 ,6.0和 6.5 ,其中内切酶在pH 9.0时仍能保持最高酶活力的 5 0 %以上 。

碱性β-聚糖酶产生菌选育及产酶条件优化

从碱性土样中分离到数十株产碱性β聚糖酶类的细菌，经摇瓶反复筛选后，得到一株碱性β聚糖酶产量较高的耐碱性细菌．经初步鉴定，属短小芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｐｕｍｉｌｕｓ）．其纤维素酶作用的最适ｐＨ为７．６，最适θ为６０℃，木聚糖酶的作用最适ｐＨ为９．０，最适θ为５５℃．该菌的最适生长ｐＨ为８．０，最适产酶θ为２８～３２℃．木聚糖与山梨糖分别是木聚糖酶和纤维素酶的良好诱导物．以麸皮为碳源，产酶的最适浓度为５％．添加尿素和（ＮＨ４）２ＳＯ４为氮源可提高纤维素酶酶活２倍，木聚糖酶酶活１倍．发酵周期为６０ｈ，纤维素酶酶活最高可达１．２１ＩＵｍＬ－１，木聚糖酶酶活可达４３ＩＵｍＬ－１．

产碱性纤维素酶菌株的选育和酶合成基本特性

芽孢杆菌x－6菌株经甲基磺酸乙酯（EMS）和紫外线（UV）复会诱变，从其万古霉素（Vm）抗性突变体中选育获得一突变株EV23，所产生的碱性核甲基纤维素酶（CMCase）酶活力由原来的0．84u／ml提高到3.53u／ml。EV23菌株所产该酶基本为组成性地合成纤维素酶，酶合成明显表现出抗降解物阻遏的特点，以葡萄糖为碳源培养，4％浓度时酶合成水平最高。酶合成效率受菌体生长速率影响较大。在高浓度易代谢基质和三羧酸循环中间物存在下，酶合成将受到一定程度的阻遏。酶合成还与能量代谢有关，探讨了外源ATP、cAMP对酶合成的影响。

一株碱性纤维素酶产生菌的分离、鉴定及酶谱分析

目的:从土样中分离株碱性纤维素酶高产菌株。方法:利用CMC平板初筛,然后利用摇瓶复筛,筛选酶活力高的菌株,对分离出的一株高产菌株进行了鉴定并对其所产酶进行了酶谱分析。结果:获得一株碱性纤维素酶高产菌株H12,酶活力达到1.96U/ml。结论:该菌株呈长杆状、革兰氏染色为阳性、产芽孢;16S rDNA基因序列为1 419bp,与短小芽孢杆菌16S rDNA基因序列具有最高的同源性,基于16S rDNA基因序列的同源性分析以及系统发育分析等方面的多相分类研究,鉴定菌株H12为为短小芽孢杆菌;碱性纤维素酶的酶谱分析只有一条水解条带,酶分子量在75kD左右。

产耐碱性纤维素酶丝状真菌的筛选及鉴定

经过初筛和复筛从碱性土样中分离出的 12株丝状真菌中获得 1株能够产耐碱性纤维素酶的丝状真菌SDU3.87,经形态学初步鉴定为哈茨木霉 (Trichodermaharzianum) .生长条件的测定显示该菌生长pH范围较宽 ,在中性偏碱时生长最好 ,在pH 8.0～ 10 .0的碱性条件下长势良好 .粗酶液的性质测定表明 ,该菌所产纤维素酶的pH稳定性较好 ,内切酶活在pH 7.0最高 ,在pH 9.5时仍能保持最高酶活力的 4 0 %以上 .

哈茨木霉SDU3.87耐碱性纤维素酶液体发酵条件的研究

从碱性土样中分离出的1株哈茨木霉(T.harzianum),液体发酵条件的实验表明,产酶最适的培养基初始pH为7.5,培养温度为28℃,摇床转速为160rmin;最适的单一碳源为麸皮,添加量为质量分数3.0%～5.0%;添加质量分数0.5%左右的复合氮源有利于产酶的提高;诱导物纤维素CF-11和微晶纤维素的最适添加量分别为质量分数2.0%和1.0%;添加吐温80有利于产酶的提高,添加量质量分数0.2%;用300mL三角瓶液体摇床发酵时装样量80mL左右为宜;发酵周期5～6d.获得的粗酶液的内切酶活最高为1.85UmL,FPA为0.96UmL,水杨素酶活为0.81UmL.

漂白硫酸盐思茅松浆酶促打浆的研究

采用酸性、中性及碱性纤维素酶对漂白硫酸盐思茅松浆的酶促打浆进行研究,探讨了各种酶在不同反应体系下对漂白硫酸盐思茅松浆打浆性能和物理性能的影响。结果表明,碱性纤维素酶预处理对纸浆的打浆度提高不明显,因此该酶不适合用于酶促打浆;用适量酸性和中性纤维素酶预处理后,纸浆物理性能有所降低,但打浆度得到明显提高,可降低打浆能耗,因此酸性和中性纤维素酶适用于酶促打浆。最后选择酸性和中性纤维素酶作为研究对象,考察了温度和pH值对酶促打浆的影响。结果表明,中性和酸性纤维素酶处理的最佳温度均为45-50℃、最佳pH值范围分别为4.8-5.8和2.8-5.8。

ATCC碱性纤维素酶产生菌产酶特性的重新确定

研究美国典型培养物保藏中心(ATCC)提供的菌株ATCC21833(HorikoshiK定名为芽孢杆菌Bacillussp.N4)的纤维素酶合成基因后,发现该基因与HorikoshiK定名的N4基因并不具有同源性.为此重新研究了该菌株的产酶特征和所产生碱性纤维素酶的部分酶学特性.结果表明,羧甲基纤维素为最适宜的碳源,在以羧甲基纤维素、蛋白胨和酵母抽提物为主要组分的培养基中进行培养,碱性纤维素酶的活性可以达到0.64U/mL,所产生的碱性纤维素的最适pH值为10.0,最适反应温度为40℃.其产酶特性和酶学性质和N4菌株有较大差异.

一株产碱性纤维素酶放线菌的分离及酶学特性

目的为了弥补目前学术界在产碱性纤维素酶放线菌研究方面的薄弱环节。方法通过实验从采集的土样中,分离获得6株不同菌株,利用CMC透明圈、刚果红染色及酶活测定从中筛选出1株酶活较高的放线菌菌株H,经鉴定,该菌株为间孢囊菌属的一个种（Intrasporangium sp.）;通过液体振荡培养法,对该菌株的发酵条件进行研究,并对该菌株酶系组成及特性进行探讨。结果该菌株为好氧型兼性嗜碱菌,当接种量为6%,pH为8,在28℃条件下振荡培养5 d时生长良好。结论此菌株可产生碱性纤维素酶（CMC酶）,且该酶大部分属内切β-1,4葡聚糖酶,其初始酶活力为2.912 IU/mL。酶反应温度为40℃时,酶活力可达到6-10 IU/mL;当pH为6-11,温度为10-60℃时,酶活力可保持在60%以上,能较好地满足日常洗涤的环境要求。

高碱性纤维素酶产生菌的筛选及鉴定

从化纤厂土样中分离得到菌株AC-4,碱性纤维素酶活力达0.602 IU/mL。通过分析菌株形态学特性、培养特征及16S rDNA序列,确定该菌株为短小芽孢杆菌。对该菌所产碱性纤维素酶的酶学性质进行测定,确定其最适作用pH为9.5,最适作用温度为50℃。

碱性纤维素酶的产生条件和一般性质

从我国内蒙古地区天然碱湖样品中分离的200余株嗜碱细菌中筛选到一株产生碱性纤维素酶的菌株N6-27，初步鉴定为芽孢杆菌（Bacillussp）。产酶的最适碳源为核甲基纤维素钠（CMC），氮源为复合蛋白陈，Ma2CO3浓度为0.2％，酶反应的最适温度和pH分别为55℃和8.5，在50℃以下及pH6．0－11.0范围内稳定，主要作用废物为CMC，对滤纸、纤维素粉和结晶纤维素（Avicel）几乎不作用。

洗涤剂用碱性纤维素酶的研究(I)——产酶菌种的选育及发酵条件

从土壤中分离获得碱性纤维素酶产生菌嗜碱芽孢杆菌ＳＨＹ８－１，经紫外线（ＵＶ）、亚硝基胍（ＮＴＧ）、甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）诱变及反复的自然分离和压力选择，获得高产变异株ＳＨＹ８－５７２５，产酶量由０．８９８ｕ／ｍｌ提高到１５～２０ｕ／ｍｌ，对影响产酶的各因素进行了分析测试。

红麻秸秆高效预处理方法的选择

利用地球上储量最大的可再生的植物纤维质转化制备燃料乙醇,对于减少温室效应,缓解能源紧张,提高环境质量具有重大意义。红麻是一种传统的速生高产的纤维作物,为提高红麻纤维质的糖转化率,采用H2O、H2SO4、NaOH溶液(121℃,60min)或白腐真菌P.sajor-caju固态培养的方法,对红麻秸秆进行预处理,比较了后续的纤维素酶催化红麻秸秆水解的纤维素转化率。结果表明,NaOH预处理样品的纤维素转化率达到82.24%,说明碱性预处理比较适合于红麻秸秆。微生物法预处理能有效去除红麻秸秆的木质素,提高样品的纤维素转化率,但耗时较长,糖分有所损失,可作为辅助预处理方法。

嗜碱芽孢杆菌N6-27碱性纤维素酶的纯化及性质

The alkaline cellulase produced by alkalophilic Bacillus sp. N6-27 was purified to electrophoresis homogeneity by (NH4)2SO4 fractionation, Sepharose CL-4B hydrophobic interaction chromatography, Bio-gel P-150 chromatography. The molecular weight and pI determined by SDS-PAGE and by PAGE-IEF were 94000 and 4.2,respectively. The optimum temperature and PH for the enzymatic catalysis were 55℃ and 8.5, respectively. The enzyme activity was stable under 50℃ and in the PH range of 6-11. The substrate was carboxymethylcellulose (CMC). The enzyme activity was strongly inhibited by Fe2 +, Cu2+ and Hg2+.