TF/Ⅶa活化PAR2后经钙信号促进SW620细胞的增殖和迁移

目的探讨钙信号参与凝血因子Ⅶa依赖组织因子(TF)激活蛋白酶活化受体2(PAR2),从而促进结肠癌SW620细胞增殖、迁移的可能机制。方法Ⅶa(10 nmol/L)及PAR2激动剂(PAR2-AP,100μmol/L)作用负载fluo-4/AM的SW620细胞,激光共聚焦显微镜测定细胞内钙离子荧光强度的变化;钙抑制剂EGTA(1 mmol/L)和毒胡萝卜内酯(thapsigargin,TG,1μmol/L)预处理细胞后,Ⅶa(10 nmol/L)、PAR2-AP(100μmol/L)再分别处理细胞,western blot检测p-ERK1/2、t-ERK1/2蛋白的表达;MTT法及流式细胞术检测SW620细胞的增殖情况、transwell法检测细胞迁移的变化。结果Ⅶa(10 nmol/L)和PAR2-AP(100μmol/L)处理SW620细胞后,胞内钙离子荧光强度瞬时升高后降低,分别在60、30 s达到峰值;EGTA和TG预处理细胞,能明显降低Ⅶa、PAR2-AP对p-ERK1/2蛋白的活化作用(P<0.05),抑制其对细胞增殖和迁移的促进作用。结论 TF/Ⅶa激活PAR2后,经钙信号通路活化下游ERK1/2信号,促进SW620细胞的增殖和迁移。

桑椹汁对结肠癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响

为证实桑椹的抗肿瘤功能,以不同浓度桑椹汁处理结肠癌细胞株SW620,应用MTT法对比绘制生长曲线,调查SW620细胞的增殖情况,通过荧光定量PCR、SDS-PAGE检测SW620细胞凋亡相关基因p53的转录及蛋白质表达变化,分析桑椹汁对SW620细胞增殖、凋亡的影响机制。结果显示,桑椹汁对SW620细胞增殖的抑制作用随着桑椹汁浓度的升高而明显增强,以花青素质量浓度为6.267 3×10-3mg/mL的桑椹汁处理24 h后SW620细胞发生了以下变化:细胞的生长明显受到抑制,细胞脱落、变形与贴壁性下降,出现凋亡现象;细胞基因组DNA发生较明显的降解;荧光定量PCR检测细胞中p53基因的转录水平较对照组增加约6.5倍,SDS-PAGE检测p53蛋白的表达量也明显高于对照组。研究结果表明,桑椹汁对结肠癌细胞株SW620的增殖有抑制作用,其抑制机制可能是通过其活性物质诱导SW620细胞中p53基因上调表达导致细胞凋亡。