CRISPR/CAS9敲除PD-1的肿瘤浸润T淋巴细胞回输对小鼠结肠癌的治疗作用

目的:探讨应用成簇规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas9)技术敲除程序性死亡分子-1(PD-1)的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)回输对结肠癌小鼠的治疗作用。方法:皮下注射CT26构建小鼠结肠癌模型,从3只模型小鼠肿瘤组织中提取TIL,并提取外周血淋巴细胞;对TIL进行PD-1基因敲除;回输实验分为对照组(Control)、输注淋巴细胞组(Lym)、输注荷瘤小鼠TIL组(TIL)、慢病毒空载对照组(pVSV-G-PX458-NC)组、PX458-PD-1-sgRNA1组(PD-1-sgRNA1),每组10只;测量各组小鼠肿瘤组织质量及肿瘤抑制率;TUNEL法检测各组小鼠肿瘤组织细胞凋亡;ELISA检测各组小鼠肿瘤组织TNF-α和IFN-γ含量;免疫组化检测肿瘤组织CD4+T、CD8+T细胞表达;免疫荧光法检测肿瘤组织细胞增殖核抗原-67(Ki-67)和血管内皮生长因子(VEGF)表达;Western blot检测肿瘤组织PD-1及其主要配体PD-L1表达。结果:PD-1-sgRNA1能明显抑制小鼠肿瘤细胞体内生长,抑制肿瘤组织Ki-67和VEGF表达及PD-1、PD-L1表达,提高肿瘤组织细胞凋亡率、TNF-α、IFN-γ含量、CD4+T、CD8+T细胞表达(均P<0.05)。结论:CRISPR/CAS9敲除PD-1的TIL回输能明显抑制结肠癌小鼠肿瘤组织Ki-67和VEGF表达,增加CD4+T、CD8+T细胞,诱导肿瘤细胞凋亡,发挥抑制肿瘤生长作用。

异莲心碱通过PI3K/Akt/mTOR信号通路影响结肠癌SW480细胞增殖、凋亡和自噬

目的:探讨异莲心碱(Iso)通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对结肠癌SW480细胞增殖、凋亡和自噬的影响。方法:用10、20和40μmol/L的Iso处理结肠癌SW480细胞,CCK-8法、流式细胞术和WB法分别检测Iso对细胞增殖活力、凋亡和自噬相关蛋白LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62表达的影响。然后,用20μmol/L的Iso和25μmol/L的PI3K激活剂740 Y-P分别处理SW480细胞,将细胞分为对照组、740 Y-P组、Iso组和Iso+740 Y-P组,流式细胞术、WB法检测Iso和740 Y-P对各组细胞凋亡及细胞中LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62、PI3K、p-PI3K、mTOR和p-mTOR蛋白表达的影响。结果:10、20和40μmol/L的Iso处理后,SW480细胞增殖活力均显著下降(均P<0.05),细胞凋亡率均显著升高(均P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达均显著上调(均P<0.05),p26蛋白表达显著下调(P<0.05)。Iso和740 Y-P处理后,与对照组相比,740 Y-P组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达均显著下降(均P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著升高(均P<0.05);Iso组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达升高(均P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著下降(均P<0.05);与740 Y-P组相比,Iso+740 Y-P组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达升高(P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著下降(均P<0.05);与Iso组相比,Iso+740 Y-P组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达下降(均P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著升高(均P<0.05)。结论:Iso通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制结肠癌SW480细胞增殖并诱导细胞凋亡和自噬。

术前血小板分布宽度联合系统性炎症指数对结肠癌术后复发转移的预测价值

目的研究术前血小板分布宽度(Platelet volume distribution width,PDW)联合系统性炎症指数(Systemic inflammation response index,SIRI)对结肠癌术后复发转移的预测价值。方法以2020年1月-2021年6月江苏大学附属医院胃肠外科就诊并接受根治性切除手术治疗的194例结肠癌患者为结肠癌组,选择同期在本院体检中心招募的100例健康体检者为对照组。术前检测并记录PDW和SIRI,收集患者的一般资料包括:性别、年龄、身高、体重、家族肿瘤史、是否吸烟、酗酒、体质指数(Body mass index,BMI)、肿瘤最大径、TNM分期(Tumor node metastasis,TNM)和分化程度。对患者随访2年,记录结肠癌复发转移情况。采用ROC曲线确定相关变量的临界最佳值,通过AUC(ROC曲线下面积)评价其预后的准确性。结果与对照组比较,结肠癌组PDW和SIRI均显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。术后发生复发转移患者术前PDW与SIRI高于术后未发生复发转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期和中低分化程度术后复发转移患者的PDW高于Ⅰ~Ⅱ期患者和高分化程度患者,差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤最大径≥5 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期和中低分化程度术后复发转移患者的PDW高于肿瘤最大径<5 cm、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期和高分化程度的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。PDW、SIRI及两者联合预测结肠癌术后复发转移的曲线下面积(Area under curve,AUC)分别为0.761(95%CI:0.691~0.831),0.836(95%CI:0.775~0.897)和0.918(95%CI:0.876~0.960)。术后复发转移患者的PDW与SIRI呈显著正相关关系(r=0.574,P=0.003)。结论PDW、SIRI与结肠癌患者临床病理特征和术后复发转移有关,两者联合预测术后复发转移的效能较好,可为临床应用提供一定参考价值。

薏苡仁油联合5-FU对结肠癌HCT-116细胞株增殖、凋亡的影响

目的:分析薏苡仁油联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对结肠癌HCT-116细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazdium,MTT)法测定不同浓度薏苡仁油、5-FU以及薏苡仁油+5-FU对人结肠癌HCT-116细胞株的生长抑制效应;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测生存蛋白(Survivin)mRNA表达水平。结果:薏苡仁油、5-FU、5-FU+薏苡仁油均对人结肠癌HCT-116细胞增殖产生一定抑制作用,且薏苡仁油浓度越高,作用时间越长,细胞增殖抑制率越高,3组比较差异有统计学意义(P<0.05);与薏苡仁油组及5-FU组相比,5-FU+薏苡仁油组细胞增殖抑制率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。薏苡仁油组、5-FU组、5-FU+薏苡仁油组的细胞凋亡率均高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);薏苡仁油浓度越高,细胞凋亡率也越高,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU+薏苡仁油组细胞凋亡率高于5-FU组及薏苡仁油组,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,不同浓度薏苡仁油组Survivin mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU组Survivin mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU+薏苡仁油组Survivin mRNA表达较5-FU组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:薏苡仁油能抑制结肠癌HCT-116细胞增殖,诱导细胞凋亡,与5-FU联合应用能发挥药物协同作用,其作用机制可能与调控Survivin mRNA表达有关。

γ-突触核蛋白通过调控自噬对结肠癌细胞起保护作用

目的:研究γ-突触核蛋白(γ-synuclein)对内质网应激诱导的结肠癌细胞自噬和凋亡的影响及其细胞保护作用。方法:针对稳定表达γ-synuclein siRNA的人结肠癌HCT116细胞和空载体HCT116细胞,通过基因表达谱芯片分析γ-synuclein下游差异基因,找到可能的自噬及凋亡相关分子。用毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)模拟内质网应激,采用Western blot检测γ-synuclein蛋白、自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、beclin-1、自噬相关蛋白5(autophagy-related protein 5,ATG5)和ATG7]及凋亡相关蛋白{多腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]、pro-caspase-3和pro-caspase-9}的表达,CCK-8法检测细胞活力,荧光显微镜观察吖啶橙染色的酸性囊泡细胞器和绿色荧光蛋白标记的LC3,检测人结肠癌HCT116和SW480细胞自噬、凋亡及活力的变化。分别采用γ-synuclein siRNA、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)抑制剂PD98059、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)抑制剂SP600125和JNK激活剂anisomycin预处理,Western blot检测γ-synuclein及ERK和JNK信号通路相关蛋白表达,检测伴随的HCT116细胞自噬和凋亡的变化,研究γ-synuclein通过调控相关信号通路对细胞自噬的影响及其细胞保护作用。结果:TG模拟内质网应激诱导的结肠癌细胞自噬主要发生在早期(0~24 h),细胞凋亡主要发生在晚期(36~48 h)。内质网应激上调γ-synuclein的表达,并伴有自噬的增强。γ-synuclein早期(0~24 h)通过激活ERK和JNK通路促进自噬,晚期(36~48 h)通过抑制JNK通路抑制凋亡,从而起到保护细胞的作用。γ-synuclein可能在内质网应激诱导的细胞自噬和凋亡之间的过渡发挥一定的作用。结论:在内质网应激环境下,γ-synuclein通过调控ERK和JNK信号通路来促进自噬、抑制凋亡,发挥针对结肠癌细胞的保护作用,这为抗肿瘤治疗提供了一个潜在的思路。

腹腔镜扩大结肠癌根治术与单纯中横结肠癌根治术解剖学及临床意义

目的探索中横结肠癌解剖学及生物学特性的关联,研究术式选择的差异与预后关系,确定最佳手术方式。方法利用解剖学和影像学数据,研究大体标本、三维血管重建图,回顾性分析中横结肠癌患者不同腹腔镜手术方式的临床效果和生存情况。结果(1)解剖并观察大体标本,发现一、二级血管结扎可确保结肠吻合口的血液供应;(2)术前三维血管重建与术中血管探查符合率大于90%;(3)横结肠切除组与扩大结肠切除组相比,术中出血量、手术时间、术后并发症、总生存率无统计学差异,两组淋巴结清扫数目有统计学差异。结论腹腔镜下单纯横结肠切除较扩大结肠癌根治术有降低术后并发症风险趋势,两者预后无统计学差异,横结肠切除是中横结肠癌最佳手术方式。

右美托咪定对老年腹腔镜结肠癌根治术患者免疫保护及血微循环转移影响的临床观察

目的探讨右美托咪定对老年腹腔镜结肠癌根治术患者免疫保护及血微循环转移的影响。方法选取2021年6月至2023年6月在上海市第七人民医院78例行腹腔镜结肠癌根治术患者为研究对象,随机分为2组,其中试验组(n=39)于麻醉诱导前采用右美托咪定复合喷他佐辛,对照组(n=39)采用等速率等量生理盐水以及喷他佐辛。比较两组围麻醉期指标,分别于麻醉诱导前(T_(0))、手术结束即刻(T_(1))、术后30 min(T_(2))、术后6 h(T_(3))比较患者血流动力学指标变化,于麻醉诱导前(T_(0))、术后6 h(T_(3))、24 h(T_(4))、48 h(T_(5))对患者免疫功能及血微循环转移进行评估,并比较两组术后不良反应发生率。结果试验组呛咳评分为(2.02±0.36)分、对照组呛咳评分为(2.61±0.49)分;试验组躁动评分为(1.66±0.21)分、对照组躁动评分为(2.07±0.35)分;差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者T_(0)时刻HR、SpO2及MAP比较差异无统计学意义P>0.05),T_(2)时刻实验组HR显著低于对照组(76.38±7.33 vs.95.64±9.32),差异具有统计学意义(P<0.05);T_(1)、T_(2)时刻试验组MAP显著低于对照组(73.84±7.94 vs.106.85±10.37,80.37±8.39 vs.102.84±9.38),差异具有统计学意义(P<0.05)。T_(3)~T_(5)时间点,两组CD3^(+)、CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)均低于T_(0),试验组各指标均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。T_(0)时刻,两组CK19、CK20阳性率比较无差异(P>0.05);T_(3)~T_(5),试验组CK19、CK20阳性率均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。对照组、试验组不良反应发生率分别为15.4%和10.4%。结论右美托咪定可优化老年腹腔镜结肠癌根治术围麻醉期指标,有效减轻免疫抑制,降低血微循环转移风险,且安全性良好,值得临床进一步应用。

达芬奇机器人辅助右半结肠癌根治术的学习曲线分析

目的:分析达芬奇机器人辅助右半结肠癌根治术的学习曲线。方法:选择2016年3月至2022年6月在郑州大学第一附属医院接受达芬奇机器人辅助右半结肠癌根治术的70例患者。手术由同一组具备丰富结直肠手术经验的团队连续开展。采用累积和分析法拟合该手术的学习曲线。结果:拟合的学习曲线方程为Y=-0.003 X^(3)-0.003 X^(2)+12.849 X-130.951,R^(2)=0.771,P<0.05。第41例时曲线达到峰值,据此将学习曲线分为学习提高与稳定掌握两个阶段。与学习提高阶段相比,稳定掌握阶段手术时间缩短(P=0.005),术中出血量减少(P=0.048),术后并发症减少(P=0.039)。结论:41例为有丰富结直肠手术经验的临床医师稳定掌握达芬奇机器人辅助右半结肠癌根治术所需最小手术例数。

中药有效成分防治结肠癌机制研究进展

结肠癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,其常规治疗手段在为患者提供生存益处的同时,副作用和局限性也不容忽视。中药因其多靶点、多途径、毒副作用较小的抗肿瘤优势备受国内外学者关注。不少中药及从中提取的以黄酮类、酚类、生物碱为代表的中药有效成分在抗肿瘤方面发挥了有效作用,其机制与抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡、调控自噬、抑制肿瘤细胞侵袭和转移、抑制肿瘤血管生成等有关。本文就近年来中药有效成分抑制结肠癌机制研究进行梳理,以期为中药应用于结肠癌的临床治疗提供参考。

新斯的明上巨虚穴位注射治疗老年结肠癌术后肠麻痹疗效观察

目的 探讨新斯的明上巨虚穴位注射治疗老年结肠癌术后肠麻痹(POI)的临床疗效。方法 选取河北省沧州市中心医院2020年10月至2022年10月收治的老年结肠癌术后POI患者60例,按随机数字表法分为对照组和研究组,各30例。对照组患者予新斯的明肌肉注射治疗,研究组患者予新斯的明上巨虚穴位注射治疗,两组患者均治疗3 d。结果 研究组总有效率为96.67%,显著高于对照的73.33%(P <0.05)。研究组患者的肠鸣音恢复、首次排便、首次排气、进食、住院的时间均显著低于对照组(P <0.05)。术后1 d,两组患者白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平均较术前显著升高(P <0.05);术后3 d,两组患者腹痛、腹胀评分及IL-6,TNF-α的表达水平均较术前显著降低(P <0.05),且研究组均显著低于对照组(P <0.05)。两组患者均未发生不良反应。结论 新斯的明上巨虚穴位注射治疗老年结肠癌术后POI的临床疗效良好,可缓解患者的临床症状,降低炎性因子表达水平,改善肠胃道功能,且安全性好。

术前夜间血压与结肠癌患者腹腔镜微创全结肠系膜切除术后发生并发症的关系

目的探讨术前夜间血压和结肠癌患者腹腔镜微创全结肠系膜切除术后发生并发症的关系。方法选择2017年3月-2023年3月于该院行腹腔镜微创全结肠系膜切除术的174例结肠癌患者。将术前夜间血压下降率≥0%的患者作为下降组,例数为92例;将术前夜间血压下降率<0%的患者作为上升组,例数为82例。分别收集患者在入室时、手术开始即刻、手术开始至30 min后、手术开始至60 min后、手术开始至120 min后和手术完成时的平均动脉压(MAP)。记录患者住院期间术后并发症发生情况;采用多因素Logistic回归模型,分析结肠癌患者行腹腔镜微创全结肠系膜切除术后发生并发症的独立危险因素。结果术前,下降组糖尿病发生率与左心室质量指数明显低于上升组(P<0.05);术前24 h动态血压参数中,两组患者术前夜间舒张压与夜间收缩压比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者术中MAP各时间点比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者手术开始后各时间点MAP明显低于入室时(P<0.05);下降组术后住院时急性肾损伤的发生率为10.87%,明显低于升高组的31.71%(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,术前夜间血压上升为结肠癌患者行腹腔镜微创全结肠系膜切除术后发生急性肾损伤的独立危险因素(P<0.05)。结论术前夜间血压上升为结肠癌患者行腹腔镜微创全结肠系膜切除术后发生急性肾损伤的独立危险因素。

西黄胶囊联合西妥昔单抗通过Nrf2/HO-1信号通路调控结直肠癌细胞凋亡、迁移以及侵袭的作用机制研究

目的研究西黄胶囊联合西妥昔单抗通过Nrf2/HO-1信号通路对结直肠癌细胞凋亡、迁移以及侵袭的调控作用。方法使用细胞计数试剂盒(CCK8)确定西黄胶囊和西妥昔单抗对结直肠癌HCT-116细胞活力的影响。使用流式细胞术、划痕法和侵袭小室法检测西黄胶囊联合西妥昔单抗对结直肠癌HCT-116细胞凋亡、迁移以及侵袭的影响。使用蛋白质印迹技术检测西黄胶囊联合西妥昔单抗对结直肠癌HCT-116细胞B细胞淋巴瘤2(BCL2)、BCL2关联X蛋白(BAX)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、锌指蛋白232(ZNF320)、血管内皮生长因子A(VEGA)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、核因子E2相关因子2(NRF2)和血红素氧合酶1(HO-1)表达的影响。结果CCK8实验结果显示,西黄胶囊和西妥昔单抗对HCT-116细胞活力最佳抑制时间是72 h,IC 50分别为5.28%和170.20 mg/L。与对照组相比,西黄胶囊和西妥昔单抗增加HCT-116细胞的凋亡(P<0.05)、抑制HCT-116细胞迁移以及侵袭(P<0.05)。与单独使用西黄胶囊或西妥昔单抗相比,西黄胶囊联合西妥昔单抗对HCT-116细胞的促凋亡效果和对迁移以及侵袭的抑制效果更加明显(P<0.05)。蛋白质印迹技术结果显示,与对照组比较,西黄胶囊和西妥昔单抗促进HCT-116细胞的BAX表达(P<0.05),抑制BCL2、MMP2、MMP9、ZNF320、VEGA、GSK3B、NRF2、HO-1的表达(P<0.05)。此外,与单独使用西黄胶囊或西妥昔单抗相比,西黄胶囊联合西妥昔单抗的效果更加明显(P<0.05)。结论西黄胶囊联合西妥昔单抗可能通过抑制Nrf2/HO-1信号通路抑制结直肠癌HCT-116细胞的活力、迁移以及侵袭,促进细胞凋亡,且西黄胶囊联合西妥昔单抗的干预效果优于单独使用西黄胶囊或西妥昔单抗。

高糖培养条件下lncRNA CCAT2调控心肌细胞损伤和凋亡的机制研究

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录本2(CCAT2)在高糖培养条件下心肌细胞中的表达变化及通过Wnt/β-catenin信号通路调控心肌细胞损伤和凋亡的机制。方法 体外培养人心肌细胞AC16,将细胞分为4组,对照组、高糖组、高糖+干扰RNA阴性对照组、高糖+干扰RNA组(干扰RNA的靶标为lncRNA CCAT2)。采用CCK8法及流式细胞术检测细胞增殖和凋亡率;实时荧光定量PCR(qPCR)检测lncRNA CCAT2、β-catenin、转录因子7类似物2(TCF7L2)、Caspase-3、c-Myc、细胞周期蛋白(Cyclin)D1基因的表达;Western blot检测β-catenin、TCF7L2、CyclinD1蛋白表达;检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性。结果 高糖培养条件下的AC16心肌细胞lncRNA CCAT2的基因表达显著高于对照组(P<0.05),同时β-catenin、TCF7L2、Caspase-3、c-Myc、CyclinD1基因表达显著上调(P<0.05),细胞增殖受到抑制(P<0.05),凋亡率增加(P<0.05),细胞培养液中LDH和AST活性显著升高(P<0.05),细胞中SOD活性显著降低(P<0.05)。高糖培养条件下,RNA干扰lncRNA CCAT2表达后,细胞增殖增加(P<0.05),细胞凋亡率显著下降(P<0.05),β-catenin、TCF7L2、Caspase-3、c-Myc、CyclinD1基因的表达下调(P<0.05),β-catenin(细胞核)、TCF7L2、CyclinD1蛋白表达显著下调(P<0.05),β-catenin(细胞质)蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论 高糖条件下,lncRNA CCAT2可通过Wnt/β-catenin信号通路调控心肌细胞损伤和凋亡。

长链非编码RNA DLEU2通过miR-30a-5p/CD61对人结肠癌SW1116细胞生长和增殖的影响

目的探讨长链非编码核糖核酸淋巴细胞白血病缺失基因2(LncRNA DLEU2)通过靶向微小核糖核酸(miR)-30a-5p/整合素β3(CD61)对人结肠癌SW1116细胞生长和增殖的影响。方法取人结肠癌细胞株SW1116培养并随机分为si-NC组、si-LncRNA DLEU2组、模拟物阴性对照(miR-NC)组、miR-30a-5p mimics组、miR-30a-5p抑制剂阴性对照(NC inhibitor)+si-LncRNA DLEU2组及miR-30a-5p inhibitor+si-LncRNA DLEU2组,同时设置未转染细胞为空白组;转染48 h后,采用荧光显微镜检测细胞转染效率,四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别检测细胞LncRNA DLEU2和miR-30a-5p表达、CD61、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、c-Myc mRNA和蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR检测LncRNA DLEU2与miR-30a-5p的靶向关系、miR-30a-5p与CD61的靶向关系;制作雄性胸腺BALB/c裸鼠异种移植瘤模型评估LncRNA DLEU2对肿瘤生长的影响。结果si-NC组、si-LncRNA DLEU2组、miR-NC组、miR-30a-5p mimics组、NC inhibitor+si-LncRNA DLEU2组、miR-30a-5p inhibitor+si-LncRNA DLEU2组转染效率均>85%;与空白组及si-NC组比较,si-LncRNA DLEU2组、NC inhibitor+si-LncRNA DLEU2组增殖抑制率上升(P<0.05),DLEU2表达下降(P<0.05),miR-30a-5p表达增加(P<0.05),CD61、CyclinD1、c-Myc mRNA和蛋白表达减少(P<0.05);与NC inhibitor+si-LncRNA DLEU2组比较,miR-30a-5p inhibitor+si-LncRNA DLEU2组细胞增殖抑制率下降(P<0.05),miR-30a-5p表达下降,CD61、CyclinD1、c-Myc mRNA和蛋白表达上升(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-30a-5p mimics组miR-30a-5p表达、增殖抑制率增加(P<0.05),CD61、CyclinD1、c-Myc mRNA和蛋白表达下降(P<0.05);LncRNA DLEU2可直接靶向调控miR-30a-5p、miR-30a-5p可直接靶向调控CD61,抑制LncRNA DLEU2表达可降低BALB/c裸鼠移植瘤生长(P<0.05)。结论沉默LncRNA DLEU2可抑制人结肠癌细胞株SW1116生长和增殖,其机制可能与靶向miR-30a-5p抑制CD61表达,抑制CyclinD1、c-Myc表达相关。

结直肠癌组织中lncRNA CCAT2和NDRG1的表达及意义

目的探讨结直肠癌(CRC)患者组织中长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录物2(CCAT2)、N-myc下游调节基因(NDRG)1的表达及与临床病理特征及预后的关系。方法选取2018年2月至2020年2月在南通市中医院行CRC根治性手术治疗的96例CRC患者作为研究对象。采用实时荧光定量PCR检测组织中lncRNA CCAT2、NDRG1 mRNA表达,采用免疫组织化学检测组织中NDRG1蛋白表达,采用Kaplan-Meier曲线分析不同lncRNA CCAT2、NDRG1 mRNA表达组患者的预后差异,采用多因素Cox回归分析CRC预后影响因素。结果与癌旁组织比较,癌组织中lncRNA CCAT2表达较高,NDRG1 mRNA表达及蛋白阳性率较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移比较,TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移的CRC患者癌组织中lncRNA CCAT2表达较高,NDRG1 mRNA表达较低(P<0.05)。lncRNA CCAT2高表达组3年累积生存率低于lncRNA CCAT2低表达组,而NDRG1 mRNA高表达组3年累积生存率高于NDRG1 mRNA低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。TNM分期、淋巴结转移,lncRNA CCAT2、NDRG1 mRNA是CRC预后影响因素(P<0.05)。结论CRC组织中lncRNA CCAT2表达升高,NDRG1表达降低,二者均参与CRC肿瘤的进展,可作为评估CRC患者生存预后的新指标。

基于三维质量结构模型的个体化营养支持在结肠癌根治术患者围手术期的应用

目的探讨基于三维质量结构模型的个体化营养支持用于结肠癌根治术患者围手术期的临床效果。方法选取2023年1月至10月于新疆医科大学附属肿瘤医院就诊的400例结肠癌患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为两组,各200例。所有患者接受结肠癌根治术治疗,围手术期接受常规护理,在此基础上对照组接受个体化营养支持,观察组接受基于三维质量结构模型的个体化营养支持。两组患者均护理至出院。记录患者干预前后营养状况[前白蛋白(PA)、白蛋白(Alb)水平],比较两组术后恢复情况及并发症发生情况。结果干预前,两组PA、Alb水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);干预后,两组PA、Alb水平高于干预前,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组首次排气时间、首次下床活动时间、住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组并发症总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论基于三维质量结构模型的个体化营养支持能够确保结肠癌根治术患者术后康复的营养状态,为身体恢复创造更好的营养条件,避免术后营养状态的持续下降,促进患者术后康复。

TNF-α通过CXCL10/CXCR3信号通路促进结肠癌细胞上皮间质化的相关分子机制

目的 探讨TNF-α通过调控结肠癌SW480细胞CXCL10/CXCR3轴的表达影响上皮间质化(EMT)及其分子机制。方法 培养人结肠癌SW480细胞,分别通过TNF-α、siRNA-CXCR3处理细胞,将细胞分为对照组(NC组)、TNF-α刺激组(TNF-α组)及TNF-α刺激+siRNA-CXCR3沉默组(TNF-α+si-CXCR3组)。通过Real-time PCR检测各组细胞CXCL10、CXCR3及上皮间质化相关基因的mRNA表达量;Western Blot检测各组细胞CXCL10/CXCR3通路蛋白及上皮间质化相关蛋白表达量的影响;免疫组化检测细胞中上EMT上皮标志物上皮细胞钙粘蛋白(E-cad)与EMT间质标志物波形蛋白(Vimentin)的变化情况;划痕实验检测各组细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。结果 TNF-ɑ组细胞中通路基因CXCL10、CXCR3的m RNA水平高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞中CXCR3水平低于TNF-α组,差异有统计学意义(P<0.05);TNF-ɑ组细胞中CXCL10、CXCR3、Vimentin与Fibronectin的蛋白表达量高于NC组,E-cad的蛋白表达量低于NC组,差异有统计学意义;TNF-α+si-CXCR3组细胞CXCR3、Vimentin与Fibronectin的蛋白表达量低于TNF-ɑ组,E-cad的蛋白水平高于TNF-ɑ组;TNF-ɑ组中Vimentin的表达量高于NC组,E-cad的表达量低于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+siCXCR3组中Vimentin的表达量低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05),E-cad的表达量高于TNF-ɑ组;TNF-ɑ组迁移能力高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞迁移能力低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05)。TNF-ɑ组细胞的侵袭能力高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞侵袭能力低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α能够诱导结肠癌SW480细胞发生上皮间质化,并促进其迁移、侵袭水平,这一过程可能与激活CXCL10/CXCR3信号通路有关。

结肠癌患者外周血环状RNA表达谱的分析

目的研究结肠癌患者外周血环状RNA(circRNA)表达谱。方法采取随机数字表法选取南方医院赣州医院2020年3月至2022年1月收治的10例已确诊结肠癌患者进行研究,记作观察组。另随机选取同期检查各指标正常的健康体检人员10例作为对照组。分别采集所有受试者的外周血标本,借助Solexa高通量测序对两组患者外周血中的circ RNA实施筛查。并以R软件包对有关数据实施归一化和后续数据处理。采用生物信息学方法对外周血circ RNA表达谱基因实体分析(GO)和基因组百科全书(KEGG)和京都基因富集分析。结果初步分析发现,观察组与对照组外周血circ RNA表达存在明显差异的circ RNA共1894个,其中表达升高1125个,表达降低769个,对所有差异表达circRNA实施聚类分析。选择表达变化趋势符合主流趋势且根据统计学意义的研究对象,为此选择circRNA对象中,共涉及146个circRNA,选择网络基因属性评分前10的进行处理,从中选择8个与结肠癌发生存在密切关系的基因进行调控研究,即circ-0000007、circ-0001111、circ-0006977、circ-0079656、circ-0023608、circ-0024508、circ-0026694、circ-0029903。选择合适的筛选方式对mRNA生物学作用展开探讨,进行KEGG分析和GO分析。筛选和分析8个与结肠癌发生存在密切关系的circRNA,进行功能密集和通路富集筛选,结果发现:在经过通路富集筛选分析后,在结肠癌患者核糖加工以及代谢方面circRNA8都会出现介导反应,在细胞分丝和转录周期G1/S时circ-0079656和HINFP基因会对转录结果产生调控作用,因此选择circRNA作为目标基因。结论结肠癌患者多个外周血circRNA存在明显差异表达,且均可能接到了结肠癌的发生、发展过程,其中circ-0079656在结肠癌患者外周血中呈异常低表达,可能通过直接调控HINFP基因进而影响细胞G1/S期转录过程,介导了结肠癌的发生、发展过程。

临床药师对结肠癌患者化疗联合西妥昔单抗治疗后致带状疱疹的药学监护

目的探讨临床药师在结肠癌患者化疗联合西妥昔单抗治疗后致带状疱疹治疗过程中的作用,以期为此类患者的药学监护提供参考。方法临床药师参与1例结肠癌患者化疗联合西妥昔单抗治疗后伴发带状疱疹的治疗过程。该患者确诊结肠癌采用化疗联合西妥昔单抗靶向治疗2周期后出现带状疱疹。医师予静脉滴注阿昔洛韦500 mg抗病毒治疗、肌肉注射腺苷钴胺1.5 mg营养神经、外用涂抹炉甘石洗剂适量。临床药师查阅相关文献资料,明确带状疱疹诊疗规范,协助临床医师优化抗病毒药物和带状疱疹后神经痛药物选择及临床应用,并对患者进行药学监护。结果临床医师采纳药师建议;患者经对症治疗后明显好转,继续行抗肿瘤治疗。结论在结肠癌患者化疗联合西妥昔单抗治疗后伴发带状疱疹治疗过程中,临床药师协助医师完善治疗方案,对患者进行安全合理用药教育和药学监护,对保证治疗有效性、实现药师专业价值具有重要意义。

血清MIP-3α、CCR3对结肠癌患者根治术后复发转移的预测价值

目的探究血清巨噬细胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)、CC趋化因子受体3(CCR3)对结肠癌患者根治术后复发转移的预测价值。方法选取2018年6月—2021年5月西安市中心医院普外科收治的结肠癌患者198例为结肠癌组,患者均接受结肠癌根治术。术后随访3年根据患者复发转移情况分为复发转移亚组(n=65)与未复发转移亚组(n=133)。另选取医院同期健康体检者192例为健康对照组。采用酶联免疫吸附法测定血清MIP-3α、CCR3水平;多因素Logistic回归分析结肠癌患者根治术后复发转移的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线评价血清MIP-3α、CCR3水平对结肠癌患者根治术后复发转移的预测价值。结果结肠癌组血清MIP-3α、CCR3水平均高于健康对照组(t/P=22.813/<0.001,15.164/<0.001);复发转移亚组血清MIP-3α、CCR3水平均高于未复发转移亚组(t/P=11.813/<0.001,12.545/<0.001);随访3年,198例结肠癌患者复发转移发生率为32.83%(65/198)。复发转移亚组患者TNM分期T3~T4期、低分化程度、术前癌胚抗原(CEA)>10μg/L的比例均大于未复发转移亚组(χ^(2)/P=4.694/0.030,14.253/<0.001,5.602/0.018);TNM分期T3~T4期、低分化程度、术前CEA>10μg/L、MIP-3α高、CCR3高均为结肠癌患者根治术后复发转移的独立危险因素[OR(95%CI)=1.869(1.008~3.465),1.998(1.097~3.640),1.887(1.090~3.267),2.335(1.194~4.565),2.318(1.200~4.478)];血清MIP-3α、CCR3水平及二者联合预测结肠癌患者根治术后复发转移的曲线下面积(AUC)分别为0.808、0.795、0.899,二者联合的AUC大于血清MIP-3α、CCR3水平单独预测的AUC(Z/P=2.989/0.003、2.575/0.010)。结论结肠癌患者血清MIP-3α、CCR3水平升高,对结肠癌患者术后复发转移具有一定辅助预测价值,可能作为潜在的肿瘤标志物。