Caveolin-1在结肠癌组织中的表达及其与肿瘤分期和分级的关系

目的探讨Caveolin-1在正常结肠黏膜上皮、慢性结肠炎、结肠腺瘤和结肠癌组织中的表达特点及其与结肠癌分期、分级之间的关系。方法采用免疫组化方法检测20例正常结肠黏膜上皮、17例慢性结肠炎、11例结肠腺瘤和55例结肠癌组织中Caveolin-1的表达;RT-PCR方法检测不同结肠癌组织中Caveolin-1的表达;比较结肠癌中Caveolin-1表达结果和肿瘤分期、分级之间的关系。结果免疫组化结果显示Caveolin-1在结肠癌组织中表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR和免疫组化结果都显示结肠癌Dukes分期与其Cave-olin-1表达与否无相关性(P>0.05);而其病理分级与Caveolin-1表达与否相关(P<0.05),肿瘤分级越高,分化越差,Caveolin-1表达越低。结论Caveolin-1在结肠癌上皮细胞中的表达水平呈特异性降低,这与肿瘤分期无关,随肿瘤分级上升而降低。

结肠癌患者癌组织ZEB1、血清CCSA-2的表达意义及预后转归的危险因素分析

目的探讨结肠癌患者癌组织锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)、血清直肠癌特异性抗原-2(CCSA-2)的表达意义及预后转归的危险因素。方法回顾性选取2020年1月至2022年12月武威市人民医院收治的86例结肠癌患者作为观察组,另选取同期收治的86例结肠良性肿瘤患者作为对照组。取所有患者肿瘤组织进行免疫组织化学检验,检测组织中ZEB1表达水平,并应用酶联免疫吸附试验法检测血清CCSA-2表达水平,分析两组组织中ZEB1、血清CCSA-2表达水平。对比不同TNM分期结肠癌患者组织中ZEB1、血清CCSA-2表达水平。采用Spearman相关性分析法分析ZEB1、CCSA-2与结肠癌的临床分期的相关性。建立受试者操作特征(ROC)曲线分析ZEB1、CCSA-2对结肠癌的诊断价值。最后对所有患者进行复查随访,采用多因素Logistics回归模型分析结肠癌预后转归的独立危险因素。结果观察组CCSA-2水平为(97.74±7.47)ng/mL,高于对照组[(51.35±6.32)ng/mL],ZEB1阳性率为82.56%,高于对照组(48.84%),差异均有统计学意义(P<0.05)。TNMⅣ期患者CCSA-2水平为(116.25±9.35)ng/mL,高于TNMⅢ期、Ⅱ期和Ⅰ期患者[(88.36±5.36)、(79.65±8.47)、(72.53±6.34)ng/mL],ZEB1阳性率为100.00%,高于TNMⅢ期、Ⅱ期和Ⅰ期患者(91.67%、80.65%、65.00%),差异均有统计学意义(P<0.05)。ZEB1、CCSA-2与结肠癌临床分期呈正相关(P<0.05)。ROC曲线结果显示,ZEB1、CCSA-2对结肠癌的诊断价值,CCSA-2的诊断曲线下面积(AUC)为0.507,ZEB1的AUC为0.526,两者联合的AUC为0.682,敏感度、特异度为78.78%、89.37%,明显高于单一指标;预后良好组与预后不良组患者TNM分期、淋巴结转移、组织分化程度、ZEB1阳性率及CCSA-2表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);TNM分期、淋巴结转移、组织分化程度、ZEB1阳性表达及CCSA-2升高为结肠癌预后独立影响因素(P<0.05)。结论组织ZEB1、血清CCSA-2对结肠癌患者具有重要检测价值,可考虑用于辅助诊断结肠癌的发生,判定结肠癌的发展程度,且可对其预后水平进行预测。

MACC1、HGF和C-met蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及其意义

目的探讨结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)、肝细胞生长因子(HGF)和C-met蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学和Western blot技术检测20例正常卵巢组织、19例卵巢良性上皮性肿瘤组织和52例卵巢上皮性癌组织中MACC1、HGF和C-met蛋白的表达情况,分析三者与卵巢癌临床病理指标的关系及三者在卵巢癌组织中表达的相关性。结果 MACC1、HGF和C-met蛋白在卵巢上皮性癌组织中的阳性率分别为73.1%、63.5%和78.8%,相对表达量分别为0.72±0.05、0.64±0.04和0.79±0.04,均显著高于正常卵巢和良性肿瘤组织(P<0.05)。在卵巢上皮性癌中,MACC1、HGF和C-met异常高表达与临床分期、组织分化和淋巴结转移相关,临床分期越晚、组织分化越差、伴随淋巴结转移的癌组织中MACC1、HGF和C-met蛋白表达越高(P<0.05)。卵巢上皮性癌中MACC1蛋白的表达与HGF和C-met蛋白的表达呈正相关(r=0.350,P=0.011;r=0.429,P=0.002),HGF蛋白与C-met蛋白表达呈正相关(r=0.487,P=0.000)。结论 MACC1具有作为晚期卵巢癌分子标志物的潜在价值,MACC1、HGF和C-met异常可能协同参与卵巢上皮性癌的恶性进展。

RNA干扰靶向抑制自噬调控基因Beclin 1对结肠癌细胞株HCT116自噬活性及增殖/凋亡的影响

目的应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制自噬调控基因Beclin 1的表达,检测Beclin 1表达对mTOR、ULK1、LC3-B的表达以及对HCT116细胞株增殖与凋亡的影响。方法设计4条针对Beclin 1基因的干扰RNA表达载体及阴性对照载体分别瞬时转染HCT116细胞。采用RT-PCR及Western blot法筛选出1条抑制率最高的Beclin 1干扰序列后,瞬时转染HCT116细胞,检测mTOR、ULK1及LC3-B的mRNA及蛋白表达,CCK-8实验检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果 (1)转染细胞后,BECN1-1245组mRNA及蛋白抑制率最高,达80%。(2)RT-PCR结果显示,BECN1-1245组转染细胞48 h后,与阴性对照组相比,ULK1与LC3-B mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(P≤0.05),mTOR在两组中的表达无差异(P>0.05),Western blot法检测结果与之相同。(3)CCK-8细胞增殖实验显示,BECN1-1245组转染24、48、72 h后,细胞生存率较阴性对照组明显降低(P≤0.05)。(4)流式细胞仪检测结果显示,BECN1-1245组转染48 h后,与阴性对照组细胞相比,细胞凋亡率明显升高(P≤0.05)。结论 Beclin 1在HCT116细胞自噬中发挥重要的调控作用,抑制Beclin 1的表达,可抑制细胞的自噬活性,并能抑制细胞增殖,促进其凋亡,推测Beclin 1基因可作为结肠癌治疗的新靶点。

去甲斑蝥素阻断αvβ6-ERK-ETS1信号通路抑制结肠癌细胞上皮-间质转化实验研究

目的:探讨去甲斑蝥素抑制结肠癌细胞上皮-间质转化的分子机制,为中药抗癌机制的研究奠定基础。方法:将HT-29结肠癌细胞经NCTD处理后,光镜下观察细胞形态学变化;流式细胞术检测处理前后细胞表面上皮表型及间质表型标志物的变化情况;Western Blotting分析常见调控细胞EMT过程信号传导通路中关键分子及其磷酸化状态的变化;转录因子活化技术观察核因子磷酸化状态的变化。结果:显微镜下观察发现,经NCTD处理后,结肠癌细胞EMT过程受到抑制;流式细胞术证实肿瘤细胞整合素αvβ6表达降低,同时上皮表型标志物表达升高,间质表型标志分子表达减少;Western Blotting分析常见调控细胞EMT过程信号传导通路中仅有ERK及p-ERK表达水平降低,其他关键蛋白无明显变化;转录因子活化技术发现利用si RNA技术干扰整合素αvβ6后,ERK下游的核转录因子中仅有ETS-1磷酸化水平改变,Western Blotting分析证实经NCTD处理后出现与干扰αvβ6表达造成的一致性改变。结论:去甲斑蝥素通过阻断αvβ6-ERK-ETS1信号通路抑制结肠癌细胞上皮-间质转化过程,从而发挥抗癌作用。

miR-26a靶向HMGA1基因对结肠癌细胞生长、侵袭和迁移的影响

目的:探讨miR-26a靶向高迁移率族蛋白1 (HMGA1)基因对结肠癌细胞生长、侵袭和迁移的影响,阐明HMGA1基因是否为miR-26a的靶基因。方法:将miR-NC (对照)、miR-26amimics (模拟物)和miR-26ainhibitor (抑制物)转染人结肠癌SW480细胞作为miR-NC组、miR-26amimics组和miR-26ainhibitor组。RT-PCR和Western blotting法分别检测各组SW480细胞中HMGA1mRNA和蛋白表达水平。采用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测各组SW480细胞中双荧光素酶活性,以此确定HMGA1是否为miR-26a的靶基因。采用CCK8实验检测各组细胞增殖活力,Transwell小室法检测各组细胞侵袭数和迁移数。结果:HMGA1基因是miR-26a的靶基因。与miR-NC组比较,转染24、48和72h时miR-26amimics组SW480细胞增殖活力明显降低(P<0.01),而miR-26ainhibitor组细胞增殖活力明显升高(P<0.01)。与miR-NC组比较,各时间点miR-26amimics组和miR-26amimics+pcDNA3.1-HMGA1组细胞增殖活力、细胞侵袭数和细胞迁移数均降低(P<0.01),而miR-NC+pcDNA3.1-HMGA1组细胞增殖活力、细胞侵袭数和细胞迁移数均升高(P<0.01);与miR-26amimics组比较,各时间点miR-26amimics+pcDNA3.1-HMGA1组细胞增殖活力、细胞侵袭数和细胞迁移数均升高(P<0.01);与miR-NC+pcDNA3.1-HMGA1组比较,各时间点miR-26a+pcDNA3.1-HMGA1组细胞增殖活力、细胞侵袭数和细胞迁移数均降低(P<0.01)。结论:HMGA1是miR-26a的靶基因。上调miR-26a表达可抑制人结肠癌SW480细胞增殖,下调miR-26a表达可促进人结肠癌SW480细胞增殖。

Bcl-2和Bag-1在结肠癌组织中的表达及其意义

目的探讨Bcl-2、Bag-1在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌临床病理学特征及预后的关系。方法利用免疫组织化学染色方法检测55例结肠癌组织、33例癌旁结肠组织及15例正常结肠组织中Bcl-2、Bag-1蛋白的表达情况,结合临床病理特征及预后对其进行分析。结果 Bcl-2、Bag-1在结肠癌组织中的表达阳性率(80.2%和72.7%)均显著高于癌旁结肠组织(60.6%和48.5%)及正常结肠组织(均为0),差异有统计学意义(P<0.05)。Bcl-2及Bag-1的表达与肿瘤有无淋巴结转移、肿瘤分化程度及临床分期有关(P<0.05);而与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤浸润深度、癌胚抗原(CEA)等无关。Bcl-2、Bag-1的表达呈高度一致性(P<0.01)。Bcl-2阳性结肠癌患者及Bag-1阳性结肠癌患者的5年、10年累积生存率均显著低于阴性者(P<0.05)。结论 Bcl-2、Bag-1与结肠癌的生物学行为密切相关,并可作为结肠癌患者预后的预测因素。

FAP-1在人结肠癌组织中的表达

[目的]探讨Fas相关磷酸酯酶(FAP-1)在结肠癌抵抗Fas介导的凋亡中的作用。[方法]通过免疫组化方法检测结肠癌组织中FAP-1、Fas受体(Fas-R)的表达及癌旁肿瘤浸润淋巴细胞Fas配基(Fas-L)的表达,通过TUNEL染色原位检测肿瘤细胞凋亡。[结果]56例结肠癌组织中,肿瘤细胞FAP-1阳性率为71％(40/56),FAP-1表达与组织分化程度及病理分期无关,P均>0.05。56例结肠癌组织中肿瘤细胞Fas-R免疫组化染色均阳性,且肿瘤组织中均可见到Fas-L免疫组化染色阳性的癌旁肿瘤浸润淋巴细胞浸润。FAP-1阴性的结肠癌组织中肿瘤细胞凋亡百分比较FAP-1阳性组高,(6.0±1.6)郴(4.0±1.2),P<0.05。FAP-1阴性的结肠癌组织中,肿瘤细胞凋亡与Fas-L阳性的肿瘤浸润淋巴细胞数目呈正相关,r=0.785,P<0.01;FAP-1阳性组未见此现象。[结论]结肠癌抵抗Fas介导的细胞凋亡与结肠癌细胞表达FAP-1有关。

MACC1及c-Met在前列腺癌组织中的表达

目的探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)及肝细胞生长因子受体(c-Met)在前列腺癌中的表达及其与前列腺癌发展、浸润和转移的关系。方法采用枸椽酸-微波-SP免疫组织化学染色法检测67例前列腺癌组织及30例前列腺增生(BPH)组织中MACC1和c-Met的表达情况,并结合临床病理因素进行相关分析。结果 MACC1及c-Met表达水平在前列腺癌组织中不同Gleason分级、病理分级、前列腺特异性抗原(PSA)水平及根治术后是否发生骨转移方面差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而不同年龄,是否吸烟的表达水平差异无统计学意义;且Ⅲ期和Ⅳ期前列腺癌中MACCl的高表达率明显高于BPH(P<0.05),c-Met蛋白高表达率仅在Ⅳ期前列腺癌高于BPH(P<0.05)。前列腺癌中MACC1与c-Met的表达呈正相关(P<0.01)。Kaplan-Meier生存曲线表明前列腺癌组织中MACC1及c-Met高表达较低表达无骨转移生存时间短且生存率低。结论 MACC1和c-Met的异常高表达可能与前列腺癌的发展及浸润密切相关,且预示骨转移的发生,可能成为多种恶性肿瘤判断预后、诱导转移的预测指标。

Tiam1表达与大肠癌外周血微转移的关系

目的 探讨Tiam1与大肠癌外周血微转移的关系。方法 采用实时荧光定量逆转录PCR方法检测51例大肠癌患者外周血微转移标志物CK20mRNA的表达以及Tiam1在大肠癌组织及距肿瘤边缘5—10cm的正常粘膜组织中的表达，应用SPSS11．5统计软件分析Tiam1 mRNA表达水平与大肠癌临床表现及病理特征的相关性。结果 51例中18例（35．29％）检测到外周血微转移。Tiam1 mRNA在有外周血微转移的大肠癌组织及无外周血微转移的大肠癌组织中表达分别为（72．11±2．38）×10^-4、（15．78±5．01）×10^-4，差异有统计学意义（P〈0．05）。大肠癌Tiaml mRNA的表达量与患者的性别、年龄、原发部位、肿瘤直径、外周血CEA值无相关关系（P〉0．05），但与肿瘤外周血微转移、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期相关（P〈0．05）。结论 Tiam1与大肠癌外周血微转移、组织分化、淋巴结转移密切相关，检测Tiam1 mRNA含量有助于判断大肠癌的侵袭和转移，尤其是外周血微转移。

Syndecan-1对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

背景:Syndecan-1是表达于上皮细胞表面的一种硫酸乙酰肝素蛋白聚糖,在多种肿瘤细胞中的表达下降,与肿瘤的多种生物学行为密切相关,但其在细胞水平上对结直肠癌发展的作用目前尚无深入的研究。目的:评估Syndecan-1对人结肠癌细胞株增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨可能的分子机制。方法:分别将Syndecan-1高表达质粒和Syndecan-1 siRNA转染人结肠癌细胞株SW620和SW480,分别以转染空载质粒或无关序列作为阴性对照。采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验分别检测细胞迁移、侵袭能力,蛋白质印迹法检测上皮细胞间质转化主要分子标记物E-cadherin的蛋白表达。结果:与阴性对照组相比,转染Syndecan-1高表达质粒的SW620细胞生长速度、迁移细胞数和侵袭细胞数均明显降低,同时E-cadherin表达升高;转染Syndecan-1 siRNA的SW480细胞生长速度、迁移细胞数和侵袭细胞数均明显升高,同时E-cadherin表达降低。结论:Syndecan-1能抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与上皮细胞间质转化有关。

NF-κB、Notch-1和Ki-67在结肠癌中的表达及其意义

目的探索核因子κB(NF-κB)、Notch-1和Ki-67在结肠癌组织中的表达及其临床意义。方法收集泸州医学院附属医院病理科2008年12月至2010年1月存档结肠蜡块120例,其中结肠腺瘤20例;结肠癌90例,包括高分化腺癌45例,中分化腺癌33例,低分化腺癌12例;结肠正常黏膜组织10例。采用免疫组织化学的方法检测NF-κB、Notch-1和Ki-67的表达。结果 (1)在结肠正常黏膜-腺瘤-癌序列中,NF-κB的阳性率呈递增趋势,其在结肠癌组中的表达率高于正常黏膜组(P<0.05);Notch-1的阳性率呈递增趋势,其在结肠癌组中的表达率高于正常黏膜组(P<0.05);Ki-67的阳性率呈递增趋势,其在结肠癌组中的阳性表达率高于结肠腺瘤组及正常黏膜组(P<0.05)。(2)NF-κB的表达与结肠癌大小、不同侵袭深度,有、无淋巴结转移及分化程度有关(P<0.05);Notch-1的阳性表达率与结肠癌大小、分化程度显著相关(P<0.05);Ki-67的阳性表达率与结肠癌的组织分化程度及有、无淋巴结转移有关(P<0.05)。秩和检验显示NF-κB、Notch-1、Ki-67在结肠癌不同分化程度中的表达率不同,分化越低,阳性率越高(P<0.05)。(3)NF-κB、Notch-1、Ki-67在结肠癌组织中的表达呈正相关(P<0.01)。结论 NF-κB、Notch-1、Ki-67与结肠癌的发生、发展有关;Notch信号通路和NF-κB信号通路可能相互影响共同参与结肠癌的发生、发展。

干扰素诱导跨膜蛋白1协同干扰素抑制结肠癌细胞增殖

目的：研究干扰素诱导跨膜蛋白1(interferon induced transmembrane protein 1,IFITM1)协同干扰素对结肠癌细胞株SW480增殖的影响。方法：将IFITM1基因亚克隆到真核表达载体pEGFP-C3,IFITM1/pEGFP-C3重组质粒转染结肠癌细胞株SW480,G418 500mg/L筛选阳性克隆细胞。激光共聚焦显微镜及RT-PCR检测IFITM1的表达。实验设pEGFP- C3/SW 480组、IFITM1/SW 480组、IFITM1/anti-IFITM1/SW 480、空白组,除空白组外,每组加入IFN_(-α) 1000 U/mL。MTT检测细胞的增殖性。结果：IFITM1/pEGFP-C3重组质粒转染SW480细胞后,激光共聚焦显微镜观察到绿色荧光融合蛋白位于细胞膜周围,RT-PCR在IFITM1/SW 480细胞中检测到IFITM1 mRNA表达,SW 480细胞及pEGFP-C3/SW480细胞中未见IFITM1 mRNA表达。MTT分析细胞增殖示pEGFP-C3/SW 480组、IFITM1/SW 480组、IFITM1/anti-IFITM1/SW 480组的D_(570mm)处值分别0.745±0.0267、0.346±0.0316、0.696±0.0613,空白组的D_(570mm)值是0.835±0.0362,IFITM1/SW 480细胞增殖比pEGFP-C3/SW 480细胞及IFITM1/anti-IFITM1/SW 480细胞低(P＜0.05)。而pEGFP-C3/SW 480细胞的增殖与IFITM1/anti-IFITM1/SW 480细胞增殖相比无显著差异(P＞0.05)。结论：IFITM1可协同IFN-α抑制SW 480细胞体外增殖。

miR-106b靶向调控TGF-β/Smad通路对结肠癌细胞侵袭和迁移的促进作用

目的:探讨miR-106b靶向转化生长因子β受体1(TGF-βR1)对结肠癌细胞侵袭和迁移的影响,阐明miR-106b与TGF-βR1基因的靶向关系及其可能作用机制。方法:选取30例结肠癌患者癌组织和癌旁正常结肠组织、结肠癌SW-480细胞及正常结肠上皮NCM460细胞为研究对象;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各种组织和细胞中miR-106b表达水平及细胞中TGF-βR1 mRNA表达水平。将结肠癌SW-480细胞分为空质粒组(转染miR-NC空质粒)、miR-106b组(转染miR-106b-mimics)、pGL3-TGF-βR1组(转染pGL3-TGF-βR1)和miR-106b-mimics+pGL3-TGF-βR1组(同时转染miR-106b-mimics和pGL3-TGF-βR1);生物信息分析法预测miR-106b与TGF-βR1的靶向作用关系,荧光素酶报告实验检测各组SW-480细胞中荧光素酶活性。Transwell小室实验检测各组SW-480细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测各组SW-480细胞划痕愈合率,Western blotting法检测各组SW-480细胞中TGF-βR1、磷酸化Smad同源物2(p-Smad2)和磷酸化Smad同源物3(p-Smad3)蛋白表达水平。结果:结肠癌组织中miR-106b表达水平高于正常结肠组织,结肠癌SW-480细胞中miR-106b表达水平高于正常结肠上皮NCM460细胞(P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测结果提示TGF-βR1为miR-106b的靶基因。与空质粒组比较,miR-106b组SW-480细胞中TGF-βR1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),侵袭细胞数和细胞划痕愈合率明显升高(P<0.01),细胞中p-Smad2和p-Smad3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与miR-106b组比较,miR-106b-mimics+pGL3-TGF-βR1组SW-480细胞中TGF-βR1 mRNA和蛋白表达表达水平明显升高(P<0.01),侵袭细胞数和细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01),细胞中p-Smad2和p-Smad3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:miR-106b过表达可能通过抑制TGF-β/Smad通路促进结肠癌细胞的侵袭和迁移。

MACC1在肝细胞癌中的表达与临床意义

目的探讨肝细胞癌组织结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer 1,MACC1)的表达及其临床意义。方法采用免疫组化测定108例病理确诊肝细胞癌患者的肝癌组织和癌旁无瘤肝组织中的MACC1蛋白表达情况,实时荧光定量PCR检测30例肝癌组织、癌旁组织以及20例正常肝组织中MACC1 mRNA的表达,分析肝癌组织中MACC1的表达水平与临床病理因素及预后的关系。结果免疫组化结果显示,肝癌组织中MACC1蛋白表达的阳性率为49.1%(53/108),高于癌旁肝组织34.2%(37/108,P=0.011);实时荧光定量PCR结果显示,MACC1mRNA在肝癌组织中的表达高于癌旁肝组织及正常肝组织(P<0.001)。单因素方差分析表明肝癌组织中MACC1的表达与肿瘤大小、有无包膜及病理分型密切相关(P<0.05)。生存分析表明MACC1阳性患者的1年、3年和5年总体生存率分别为0.650、0.492和0.280,而MACC1阴性患者1年、3年和5年总体生存率分别0.799、0.684和0.566,差异有统计学意义(P=0.006)。结论肝癌组织中MACC1的表达与肝癌的恶性演变及患者的临床预后密切相关,MACC1有望成为判断肝癌患者临床预后的重要分子,且有可能成为肝癌分子靶向治疗的新靶点。

ACAT1基因干扰对人结肠癌细胞增殖及侵袭转移的影响

目的:利用小干扰RNA(si RNA)技术干扰酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因在人结肠癌HT29细胞中的表达,观察ACAT1基因表达下降对于人结肠癌HT29细胞增殖和侵袭迁移能力的影响,了解ACAT1在结肠癌发生发展中的作用。方法:通过脂质体Hiper Fect将ACAT1 si RNA转染至人结肠癌HT29细胞中干扰ACAT1基因的表达,利用Real time PCR检测转染前后ACAT1基因表达的变化,利用ACAT1基因干扰前后的HT29细胞,采用CFSE染色法检测HT29细胞增殖能力的变化;Transwell小室法检测HT29细胞侵袭和迁移能力的变化。结果:ACAT1 si RNA转染HT29细胞后ACAT1 m RNA的表达明显下降,ACAT1 si RNA转染后的HT29细胞与转染前比较,增殖及侵袭转移的能力均受到明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ACAT1基因干扰使HT29细胞的增殖减慢,侵袭迁移能力降低,为结肠癌治疗提供新的靶点。

D-氨基葡萄糖衍生物诱导人结肠癌SW1116细胞凋亡的形态学变化

目的:研究D-葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖诱导人结肠癌细胞SW1116凋亡时,其形态学的变化.方法:选用不同浓度的2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖与人结肠癌细胞SW1116共同孵育不同时间后,采用倒置相差显微镜,荧光显微镜、透射电子显微镜观察人结肠癌细胞SW1116的形态结构变化.结果:经2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖的不同浓度作用24～96h后,观察发现:人结肠癌细胞SW1116出现体积缩小,荧光染色增强,胞核或胞质中可见致密浓染的颗粒状黄绿色荧光染色.细胞染色质固缩,积聚在核膜边缘呈新月状,内质网疏松并与胞膜融合形成空泡,并呈一定的浓度、时间依赖性.结论:2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖在体外具有诱导人结肠癌细胞SW1116凋亡的作用.

结肠癌组织中Cofilin-1、Ezrin蛋白的表达及临床病理意义

目的探讨结肠癌组织中Cofilin-1蛋白和Ezrin蛋白的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系。方法以40例癌旁正常组织作为对照,应用免疫组织化学SP法检测60例结肠癌组织标本中Cofilin-1蛋白和Ezrin蛋白的表达。结果 60例结肠癌组织中Cofilin-1阳性表达率为76.7%,Ezrin阳性表达率为80.0%。Cofilin-1和Ezrin蛋白的表达情况与临床分期、淋巴结转移及Dukes分期有关(P<0.05)。结肠癌组织中Cofilin-1与Ezrin表达呈正相关(P<0.05)。结论联合检测Cofilin-1蛋白和Ezrin蛋白的表达有助于综合判断结肠癌的浸润、转移及预后。

SDF-1和VEGF-C在结肠癌中的表达及与淋巴结转移的关系

目的探讨结肠癌组织中基质细胞衍生因子SDF-1、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达的相互关系及其在淋巴结转移过程中的作用和可能机制。方法应用免疫组化法检测70例结肠癌组织和12例癌旁组织中SDF-1及VEGF-C的表达水平。结果结肠癌组织中SDF-1、VEGF-C阳性表达率分别为71.4%、64.3%,显著高于癌旁非癌组织的16.7%和8.3%(P<0.01)。SDF-1、VEGF-C的表达与结肠癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.01或P<0.05),与结肠癌的分化程度、远处转移无关(P>0.05)。SDF-1、VEGF-C之间表达呈正相关(r=0.608,P<0.05)。结论结肠癌组织中SDF-1、VEGF-C表达均显著增高,两者在结肠癌淋巴结转移中可能具有协同效应,共同促进结肠癌的淋巴结转移。

下调DNA结合分化抑制蛋白1基因对人结肠癌SW480细胞株体外转移和侵袭能力的影响研究

背景既往研究已经证实DNA结合分化抑制蛋白1(Id-1)表达升高在结直肠癌的发生、发展中发挥重要作用,但Id-1对结肠癌细胞侵袭行为影响及机制的研究较少。目的探讨下调Id-1基因对人结肠癌SW480细胞株增殖、转移、侵袭能力的影响及作用机制。方法 2016年1—6月,人结肠癌SW480细胞株分为3组:空白组,未进行转染;空载体组,用空载体进行转染;抑制组,采用Id-1特异小干扰RNA(siRNA)进行转染,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blotting法检测各组细胞Id-1和Ki-67基因及蛋白的表达情况,采用MTT法检测细胞增殖能力,采用细胞划痕实验、Transwell小室和Matrigel侵袭实验评价Id-1对细胞转移和侵袭能力的影响。结果 3组细胞Id-1、Ki-67 mRNA及其相应蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);抑制组细胞Id-1、Ki-67 mRNA及其相应蛋白表达水平较空白组、空载体组降低(P<0.05)。培养第1、2天,3组细胞增殖吸光度(OD值)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。培养第3~7天,3组细胞增殖OD值比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中抑制组细胞增殖OD值较空白组及空载体组降低(P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,抑制组细胞缓慢向中央迁移,缺损处修复较缓慢,空白组和空载体组细胞向划痕处的迁移速度明显加快,而空白组与空载体组间的迁移速度差异不明显。Transwell小室和Matrigel侵袭实验表明,3组迁移细胞数量和侵袭细胞数量比较,差异均有统计学意义(P<0.05);抑制组迁移细胞数量和侵袭细胞数量较空白组、空载体组减少(P<0.05)。结论下调Id-1基因能抑制人结肠癌SW480细胞株的增殖、转移和侵袭能力,其机制可能与抑制Ki-67的表达有关。