非小细胞肺癌组织LncRNA CRNDE表达及临床意义

目的:分析长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因(LncRNA CRNDE)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床病理意义。方法:2020年2月至2023年5月,来自我院的63例NSCLC患者被纳入研究。采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肿瘤组织和邻近正常组织中LncRNA CRNDE的表达。利用本研究队列和TCGA队列分析LncRNA CRNDE的临床病理意义和预后价值。结果:RT-qPCR分析显示,LncRNA CRNDE在肿瘤组织中的表达显著高于邻近的正常组织[3.04(0.56,13.04)vs.0.24(0.05,1.99),P<0.001]。在受试者工作特征曲线中,LncRNA CRNDE是有能力区分NSCLC肿瘤组织和邻近正常组织的,曲线下面积为0.713(P<0.001),特异度较高,为81.0%。肿瘤组织LncRNA CRNDE在TNMⅢ期中表达水平高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P=0.001)。TCGA数据显示,与邻近的正常组织(n=106)相比,LncRNA CRNDE在NSCLC肿瘤组织(n=1014)中呈高表达[41.00(24.00,72.00)vs.22.60(10.60,47.70),P<0.001]。LncRNA CRNDE高表达与所有患者较短的总生存(OS)时间以及肺鳞癌患者较短的OS时间和首次进展时间有关(P<0.05)。多变量生存分析结果也表明,N2/3分期(P=0.004)和LncRNA CRNDE高表达(P=0.010)与NSCLC患者较短的OS时间显著相关。结论:LncRNA CRNDE有希望作为NSCLC的潜在诊断标志物和治疗靶点。

LncRNA CRNDE调节miR⁃338⁃3p/KLF6轴对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响

目的探讨LncRNA结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)调节miR⁃338⁃3p/KLF6轴对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响。方法将人肺泡上皮细胞A549分为CK组、LPS组、LPS+si⁃NC组、LPS+si⁃CRNDE组、LPS+si⁃CRNDE+inhibitor NC组、LPS+si⁃CRNDE+miR⁃338⁃3p inhibitor组、LPS+si⁃CRNDE+oe⁃NC组、LPS+si⁃CRNDE+oe⁃KLF6组;qRT⁃PCR检测各组细胞CRNDE、miR⁃338⁃3p和KLF6表达水平;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA试剂盒检测TNF⁃α、IL⁃10和IL⁃1β水平;商品化试剂盒分析MDA、GSH⁃Px、SOD水平;Western blot检测细胞中KLF6、Cleaved⁃caspase⁃3、Bax、Bcl⁃2蛋白表达量。双荧光素酶报告基因实验验证miR⁃338⁃3p与RNDE和KLF6的关系。结果与CK组相比,LPS组和LPS+si⁃NC组A549细胞CRNDE和KLF6 mRNA表达、TNF⁃α、IL⁃1β水平、MDA含量、细胞凋亡率、caspase⁃3、Bax、KLF6蛋白表达显著升高,miR⁃338⁃3p表达、细胞活力、IL⁃10水平、SOD和GSH⁃Px活性、Bcl⁃2蛋白表达显著降低(P<0.05);与LPS+si⁃NC组相比,LPS+si⁃CRNDE组A549细胞CRNDE和KLF6 mRNA表达、TNF⁃α、IL⁃1β水平、MDA含量、细胞凋亡率、caspase⁃3、Bax、KLF6蛋白表达显著降低,miR⁃150⁃5p表达、细胞活力、IL⁃10水平、SOD和GSH⁃Px活性、Bcl⁃2蛋白表达显著升高(P<0.05);干扰miR⁃338⁃3p表达或过表达KLF6均可降低下调CRNDE表达改善LPS诱导A549细胞损伤的作用(P<0.05)。结论下调CRNDE可调控miR⁃338⁃3p/KLF6轴减轻LPS诱导的A549细胞损伤。

肾细胞癌组织中lncRNA CRNDE、miR-29a-3p表达及临床意义

目的分析肾细胞癌(RCC)组织中长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因(lncRNA CRNDE)、微小RNA-29a-3p(miR-29a-3p)表达与临床病理特征和预后的关系。方法选取2018年1月—2019年11月新疆维吾尔自治区人民医院泌尿外科收治RCC患者92例,qPCR检测RCC组织和癌旁组织中lncRNA CRNDE、miR-29a-3p表达,分析二者的相关性及与临床病理特征的关系。采用K-M法绘制不同lncRNA CRNDE、miR-29a-3p表达RCC患者生存曲线,采用多因素Cox回归分析RCC患者死亡的影响因素。结果与癌旁组织比较,RCC癌组织中lncRNA CRNDE表达升高,miR-29a-3p表达降低(t=16.050、21.147,P均<0.001)。Pearson相关性分析显示,RCC癌组织中lncRNA CRNDE与miR-29a-3p表达呈负相关(r/P=-0.739/<0.001)。RCC癌组织中lncRNA CRNDE在WHO/ISUP分级3~4级、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移中高于WHO/ISUP分级1~2级、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移者(t/P=3.041/0.003、3.183/0.002、3.598/0.001),而miR-29a-3p表达低于WHO/ISUP分级1~2级、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移(t/P=3.197/0.002、2.962/0.004、3.421/0.001)。随访3年,92例RCC患者累积生存率为81.52%(75/92)。K-M生存曲线分析显示,lncRNA CRNDE高表达组累积生存率低于lncRNA CRNDE低表达组,miR-29a-3p高表达组累积生存率高于miR-29a-3p低表达组(χ^(2)/P=4.346/0.037、5.773/0.016)。多因Cox回归分析显示,WHO/ISUP分级3~4级、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、lncRNA CRNDE高为RCC患者死亡的独立危险因素,miR-29a-3p高为独立保护因素[HR(95%CI)=4.112(1.676~10.088)、4.664(1.696~12.825)、5.806(1.881~17.919)、1.552(1.144~2.105)、0.524(0.312~0.883)]。结论RCC组织中lncRNA CRNDE高表达和miR-29a-3p低表达,与WHO/ISUP分级、TNM分期、淋巴结转移和预后有关,可能成为RCC诊治的新靶点。

急性白血病患者外周血lncRNACRNDE、miR-384表达及其临床意义

目的分析急性白血病患者外周血中长链非编码RNA(lncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)、微小RNA-384(miR-384)的相对表达量,并探讨其临床价值。方法选取2017年3月—2019年4月河北北方学院附属第二医院急性髓系白血病(AML)患者106例(AML组),以同期健康体检志愿者100名作为正常对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测AML组和正常对照组血清lncRNA CRNDE、miR-384相对表达量。采用Pearson相关分析评价AML患者血清lncRNA CRNDE与miR-384相对表达量的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线分析lncRNA CRNDE、miR-384与AML患者预后的关系。采用Cox回归分析评价影响AML患者预后的危险因素。结果AML组血清lncRNA CRNDE相对表达量明显高于正常对照组(P<0.001),miR-384相对表达量明显低于正常对照组(P<0.001)。AML患者血清lncRNA CRNDE、miR-384相对表达量均与白细胞(WBC)计数、血小板(PLT)计数、骨髓原始细胞比例、美国国立综合癌症网络(NCCN)危险分层、髓外浸润有关(P<0.05)。AML患者血清lncRNA CRNDE与miR-384相对表达量呈显著负相关(r=-0.635,P<0.001)。lncRNA CRNDE低表达(<1.72)患者总生存率、无事件生存率均显著高于lncRNA CRNDE高表达(≥1.72)患者(χ^(2)值分别为27.316、18.056,P<0.001);miR-384高表达(≥0.65)患者总生存率、无事件生存率均显著高于miR-384低表达(<0.65)患者(χ^(2)=8.454,P=0.004;χ^(2)=5.333,P=0.021)。多因素Cox回归分析结果显示,lncRNA CRNDE高表达、miR-384低表达是AML患者不良预后的危险因素(P=0.003)。结论AML患者血清lncRNA CRNDE相对表达量升高,miR-384相对表达量降低,2项指标与患者病理特征和预后密切相关,或可作为评估AML患者预后的生物标志物。

MRI增强扫描联合血清CRNDE、NRSN2在鼻咽癌分期诊断及疗效评估中的应用

目的 分析MRI增强扫描联合血清结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)、神经膜蛋白2(NRSN2)在对鼻咽癌分期诊断及疗效评估中的应用。方法 选取收治并经病理检测证实为鼻咽癌的患者110例作为研究对象,根据鼻咽癌分期分为Ⅱ期为早期组46例,Ⅲ期和Ⅳ期为中晚期组64例;所有患者进行MRI增强扫描和放化疗治疗,根据放化疗效果分为疗效良好组和疗效不佳组;采用Pearson法分析血清CRNDE、NRSN2及二者与MRI增强扫描参数的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析MRI增强扫描参数联合血清CRNDE、NRSN2水平对鼻咽癌分期的诊断价值。结果 中晚期组最大上升斜率、达峰时间、CRNDE以及NRSN2水平均显著高于早期组(P<0.05)。根据Pearson相关性分析得知,血清CRNDE、NRSN2水平呈正相关(P<0.05),二者与最大上升斜率、达峰时间均呈正相关(P<0.05)。根据ROC曲线得知,最大上升斜率诊断鼻咽癌分期的AUC为0.798,达峰时间诊断鼻咽癌分期的AUC为0.854,二者联合诊断鼻咽癌分期的AUC为0.918,二者联合的AUC优于各自单独诊断(Z_(联合vs.最大上升斜率)=2.628、Z_(联合vs.达峰时间)=2.731,P<0.05);CRNDE诊断鼻咽癌分期的AUC为0.841,NRSN2诊断鼻咽癌分期的AUC为0.864,MRI增强扫描诊断鼻咽癌分期的AUC为0.918,三者联合诊断鼻咽癌分期的AUC为0.984,三者联合的AUC优于各自单独诊断(Z_(联合vs.CRNDE)=2.510、Z_(联合vs. NRSN2)=2.685,Z_(联合vs. MRI增强扫描)=2.821,P<0.05)。疗效不佳组最大上升斜率、达峰时间、CRNDE以及NRSN2水平均显著高于疗效良好组(P<0.05)。结论 MRI增强扫描联合血清CRNDE、NRSN2在鼻咽癌分期诊断中具有较高的临床价值,还与患者放化疗疗效密切相关。

甲胎蛋白阴性肝癌患者血清外泌体circ RNA100338和CRNDE表达水平及预后预测价值研究

目的 研究甲胎蛋白阴性肝细胞癌(AFP-NHCC)患者血清外泌体环状RNA(circ RNA)100338,长链非编码RNA结直肠肿瘤差别表达(colorectal neoplasia differentially expressed,CRNDE)基因表达及临床预后价值。方法 选取自2018年1月~2019年7月期间联勤保障部队第九四二医院诊治的AFP-NHCC患者98例为研究对象,以同期健康体检的70例健康人作为对照组。实时荧光定量PCR检测血清外泌体circ RNA 100338和CRNDE水平。比较不同临床病理特征AFP-NHCC患者血清外泌体circ RNA 100338和CRNDE水平。受试者工作特征曲线(ROC)分析外泌体circ RNA 100338,CRNDE评估BCLC分期B~C期、低分化程度及肝内淋巴结转移的临界值。Kaplan-Meier生存分析(Log-Rank检验)分析血清外泌体circ RNA 100338,CRNDE对AFP-NHCC患者生存预后的影响。单因素及多因素COX回归分析影响AFP-NHCC患者预后的因素。结果 AFP-NHCC组患者血清外泌体circ RNA100338(2.78±0.67),CRNDE的相对表达量(3.05±0.70)高于对照组(0.92±0.31,1.06±0.29),差异具有统计学意义(t=21.619,22.435,均P <0.05)。AFP-NHCC组患者血清外泌体circ RNA100338与CRNDE表达呈显著正相关性(r=0.657,P <0.05)。BCLC分期B~C期(3.43±0.69,3.71±0.75)、低分化程度(3.64±0.73,4.27±0.74)及并发肝内淋巴结转移(3.96±0.79,4.39±0.76)AFP-NHCC患者血清外泌体circ RNA100338,CRNDE表达分别高于BCLC分期0~A期(1.87±0.60,2.13±0.61)、高中分化程度(2.02±0.64,1.97±0.61)及无肝内淋巴结转移(2.03±0.60,2.20±0.65)患者,差异均有统计学意义(t=11.648,11.707,13.699;11.100,16.857,15.211,均P <0.05)。外泌体circ RNA100338评估BCLC分期B~C期、低分化程度及肝内淋巴结转移的临界值分别为3.51,3.69和4.06,外泌体CRNDE评估BCLC分期B~C期、低分化程度及肝内淋巴结转移的临界值分别为3.79,4.31和4.45。circ RNA100338高表达组和低表达组患者三年总体生存率分别为52.08%(25/48)和86.00%(43/50)。circ RNA 100338高表达组患者累积生存率低于低表达组患者,差异有统计学意义(Log-Rankχ2=12.490, P <0.05)。CRNDE高表达组和低表达组患者三年总体生存率分别为51.06%(24/47)和86.27%(44/51)。CRNDE高表达组患者累积生存率低于低表达组患者,差异有统计学意义(Log-Rankχ2=15.050, P <0.05)。肿瘤BCLC分期B~C(OR=1.405,P <0.05)、低分化程度(OR=1.921,P <0.05)、有肝内淋巴结转移(OR=1.508,P <0.05),circ RNA100338高表达(OR=1.906,P <0.05)及CRNDE高表达(OR=1.733,P <0.05)是影响AFP-NHCC患者预后的独立危险因素。结论 AFP-NHCC患者血清外泌体circ RNA 100338,CRNDE表达升高,两者表达与肿瘤BCLC分期、病理分化程度及肝内淋巴结转移有关,是影响AFPNHCC患者生存预后的独立危险因素。

长链非编码RNA CRNDE对胶质瘤细胞增殖和迁移的影响

目的探讨CRNDE在胶质瘤细胞中发挥的功能和可能的作用机制。方法将CRNDE基因干扰si RNA转染人胶质瘤U87细胞系,利用CCK8和Transwell实验分别检测细胞增殖和迁移能力变化,并利用Real-time PCR研究下游基因表达情况。结果 si RNA干扰CRNDE表达的胶质瘤细胞中,细胞增殖和迁移能力明显降低,MAPK/ERK通路中关键蛋白激酶Raf1、MEK2、ERK1、ERK2基因及转录因子c-Myc、NF-κB基因的表达均有显著降低。结论 CRNDE可能通过调节MAPK/ERK通路一系列相关基因表达,增加胶质瘤细胞的增殖和迁移能力。

长链非编码RNA CRNDE通过下调miR-136-5p表达并上调MCM5表达促进U937细胞增殖并抑制其凋亡

目的 探究长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)对U937细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及其作用机制。方法 首先通过基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库分析CRNDE在急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中的表达水平;实时荧光定量PCR检测AML细胞系miR-136-5p、 CRNDE及微小染色体维持蛋白5(MCM5)的mRNA表达水平。构建敲低CRNDE的慢病毒载体并转染U937细胞,设为敲低CRNDE组(sh-CRNDE组)和阴性对照组(sh-NC组);分别转染miR-136-5p模拟物(miR-136-5p mimic)和miR-136-5p抑制物(miR-136-5p inhibitor)对U937细胞中的miR-136-5p进行过表达和敲低,设为miR-136-5p过表达组(miR-136-5p-mimic)、过表达阴性对照组(NC-mimic)、 miR-136-5p敲低组(miR-136-5p-inhibitor)和敲低阴性对照组(NC-inhibitor)。CCK-8法和细胞计数试验检测CRNDE和miR-136-5p对细胞增殖的影响,流式细胞术检测CRNDE和miR-136-5p对细胞周期和凋亡的影响。实时荧光定量PCR检测miR-136-5p、 CRNDE及MCM5的mRNA表达,Western blot法检测MCM5、 P53、 B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白A2(cyclin A2)的蛋白表达水平。结果 CRNDE在AML患者骨髓和细胞系中高表达。敲低CRNDE可以上调miR-136-5p,抑制MCM5 mRNA和蛋白表达,抑制细胞增殖,促进凋亡并使细胞周期阻滞在G1期。过表达miR-136-5p也可抑制MCM5核酸和蛋白水平表达。而敲低miR-136-5p则可以逆转以上作用。结论 CRNDE通过下调miR-136-5p和上调MCM5表达,进而促进U937细胞增殖并抑制其凋亡。

外周血LncRNA-CRNDE表达对弥漫大B细胞淋巴瘤患者疗效判断和预后评估的价值

目的探讨外周血长链非编码RNA(LncRNA)-CRNDE表达对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者疗效判断和预后评估的价值。方法选取179例DLBCL患者为DLBCL组,另选取同期64例体检健康者为对照组,qRT-PCR法测定外周血LncRNA-CRNDE表达。比较DLBCL组治疗前后外周血LncRNA-CRNDE表达,比较不同疗效DLBCL患者治疗前后外周血LncRNA-CRNDE表达。K-M法绘制DLBCL患者无进展生存率和总生存率曲线。多因素Cox回归分析DLBCL患者预后不良的影响因素。ROC曲线分析外周血LncRNA-CRNDE表达对DLBCL患者预后不良的评估价值。结果DLBCL组外周血LncRNA-CRNDE表达高于对照组(P<0.05)。治疗后DLBCL组外周血LncRNA-CRNDE表达低于治疗前(P<0.05)。有效组治疗前后外周血LncRNA-CRNDE表达低于无效组(P<0.05)。外周血LncRNA-CRNDE表达与DLBCL患者Ann Arbor分期和国际预后指数相关(P<0.05)。LncRNA-CRNDE≥3.133组5年无进展生存率和总生存率低于LncRNA-CRNDE<3.133组(P均<0.05)。Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期、国际预后指数3~5分、LncRNA-CRNDE≥3.133为DLBCL患者预后不良的独立风险因素(P均<0.05)。外周血LncRNA-CRNDE表达评估DLBCL患者预后不良的曲线下面积、灵敏度、特异度为0.815(95%CI:0.771~0.854)、80.45%、66.48%。结论DLBCL患者外周血LncRNA-CRNDE高表达,LncRNA-CRNDE高表达与DLBCL患者疗效较差和预后不良相关,可作为预后评估指标。

外泌体来源的长链非编码RNA结直肠肿瘤差别表达基因在胶质瘤中的表达

目的:通过基因芯片分析长链非编码RNA(lnc RNA)-结直肠肿瘤差别表达基因(CRNDE)在多形性胶质母细胞瘤(GBM)中的表达,比较lnc RNA CRNDE差异表达与组织之间的表达谱差异。方法:应用基因芯片技术检测lnc RNA在GBM和正常脑组织的表达谱差异,并筛选出差异表达lnc RNA CRNDE进行分析。结果 :lnc RNA芯片的数据:GBM与正常脑组织比较,lnc RNA CRNDE表达上调3倍基因1201个,lnc RNA CRNDE表达下调3倍基因1206个(P<0.05)。其中5个lnc RNA CRNDE上调30倍以上,1个lnc RNAs下调超过30倍(P<0.01)。结论 :与正常脑组织相比,GBM组织lnc RNA CRNDE表达谱发生明显变化,其在胶质瘤的发生发展中可能具有重要作用。

血清lncRNA CRNDE和miR-205-5p在冠心病中表达及其早期诊断

目的探讨血清长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因(lncRNA CRNDE)、微小RNA-205-5p(miR-205-5p)表达水平在冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)诊断中的临床价值。方法收集2018年1月-2021年12月上海中医药大学附属普陀医院收治的300例冠心病患者为冠心病组,根据患者冠状动脉造影结果将其分为单支病变组(n=106)、双支病变组(n=115)和三支病变组(n=79);同期纳入286名排除冠心病及其他系统疾病的健康体检者为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清lncRNA CRNDE、miR-205-5p水平;采用Pearson相关性分析lncRNA CRNDE、miR-205-5p与血清指标的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA CRNDE、miR-205-5p水平对冠心病的诊断价值;采用logistic回归分析冠心病发病的影响因素。结果冠心病组lncRNA CRNDE、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著低于对照组,miR-205-5p、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(t=11.272、21.722、14.667、11.439、13.571、7.147,P均<0.05)。冠心病患者血清lncRNA CRNDE水平与TC、TG、LDL-C成负相关,与HDL-C成正相关(r=-0.486、-0.492、-0.510、0.504,P均<0.05);miR-205-5p水平与TC、TG、LDL-C成正相关,与HDL-C成负相关(r=0.497、0.494、0.490、-0.509,P均<0.05)。三支病变组血清lncRNA CRNDE水平显著低于双支病变组和单支病变组,miR-205-5p水平显著高于双支病变组和单支病变组;双支病变组血清lncRNA CRNDE水平显著低于单支病变组,miR-205-5p水平显著高于单支病变组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。血清lncRNA CRNDE、miR-205-5p水平联合诊断冠心病的曲线下面积(AUC)为0.843,高于lncRNA CRNDE、miR-205-5p单独诊断的0.746、0.809,差异均有统计学意义(Z=3.674、1.717,P均<0.05)。miR-205-5p是冠心病发病的独立危险因素(P<0.05),lncRNA CRNDE是冠心病发病的保护因素(P<0.05)。结论lncRNA CRNDE、miR-205-5p可作为冠心病诊断及疾病进展的可靠评估指标。

LncRNA CRNDE靶向miR-384影响结直肠癌细胞放射敏感性的研究

目的研究长链非编码RNA(Lnc RNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)对结直肠癌细胞放射敏感性的影响及其机制。方法以结直肠癌HT-29细胞作为体外研究对象,转染CRNDE shRNA,实时定量PCR测定干扰效果。以8 Gy X射线照射转染CRNDE shRNA后的HT-29细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡水平。平板克隆实验检测放射敏感性。生物信息学软件预测CRNDE与miR-384有互补结合位点,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。将CRNDE shRNA和miR-384 inhibitor共转染至HT-29细胞中,以8 Gy剂量照射处理,MTT和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡变化。结果CRNDE shRNA能够降低HT-29细胞中CRNDE表达水平(1.00±0.08 vs.0.42±0.06,t=10.051,P<0.05)。CRNDE shRNA和放射均可以抑制HT-29细胞增殖并诱导细胞凋亡,并且二者联合具有协同作用[凋亡率:(2.27±0.13)%、(23.58±2.35)%、(26.91±2.81)%、(36.84±3.24)%,F=24.66,P<0.05;吸光度(A)值:0.45±0.06、0.30±0.02、0.28±0.03、0.20±0.02,F=106.21,P<0.05]。CRNDE shRNA转染后可以提高HT-29细胞放射敏感性,放射增敏比为1.374。CRNDE靶向负调控miR-384表达。miR-384 inhibitor能够拮抗CRNDE shRNA对放射处理的结直肠癌细胞增殖抑制和凋亡促进的作用。结论下调LncRNA CRNDE表达可增强结直肠癌细胞的放射敏感性,其作用机制与靶向负调控miR-384表达有关。

长链非编码RNA-CRNDE促进STAT3激活调控结肠癌细胞转移的机制研究

目的探讨长链非编码RNACRNDE促进肠癌转移的调控机制。方法荧光定量PCR方法检测CRNDE在结直肠癌组织与癌旁正常组织(n=40)的表达,并分析CR7VDE表达与淋巴结、肝转移的关系。对肠癌肠癌细胞SW480进行C&VDE过表达,DLD-1肠癌细胞中的CRAQE进行敲减,观察CRNDE表达变化对肠癌细胞侵袭能力以及关键信号通路的影响。结果C用VDE在70%肠癌患者癌组织中存在过表达现象,并且发生淋巴结及肝转移组织相对表达含量均比未转移癌组织表达高(PvO.05)。Transwell侵袭实验表明DLD-1细胞敲减C用VDE后其侵袭能力显著减低,而SW480过表达CRNDE后,侵袭能力增强;同时SW480细胞过表达CR/VDE后,表皮细胞表型标记E-cadherin表达减低,而间充质细胞标记Vimentin和Ncadherin表达水平增加,DLD-1细胞敲减C用VDE后,表皮细胞标记E-cadherin表达增加,而间充质细胞标记Vimentin和N-cadherin表达水平减低。此外,SW480细胞过表达CRNDE后,STAT3磷酸化水平增强;而DLD-1细胞敲减后,STAT3磷酸化水平减低;抑制STAT3磷酸化后,C用VDE增强细胞侵袭能力显著减弱。结论CRNDE可通过持续激活STAT3,诱导肠癌细胞EMT发生,增强肠癌细胞转移侵袭能力。

长链非编码RNA CRNDE检测在乳腺癌诊断中的意义

目的探讨长链非编码RNA(lncRNAs)CRNDE在乳腺癌患者血浆中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应方法检测76例乳腺癌患者组织、远端癌旁组织及血浆lncRNA CRNDE的表达情况。分析血浆中lncRNA CRNDE表达与乳腺癌的临床病理特征关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)评价血浆lncRNA CRNDE水平对乳腺癌的诊断效能。同时收集同期80例健康体检者为对照组检测其血浆中血浆lncRNA CRNDE表达情况。结果 lncRNA CRNDE在乳腺癌组织中的表达(2.73±1.66)明显高于癌旁组织(2.06±1.67),且在患者血浆中的表达水平(1.79±1.05)高于健康对照者(1.40±1.12),差异均有统计学意义(均P<0.05);血浆中lncRNA CRNDE的表达水平与患者临床病理特征无关(P>0.05);ROC曲线分析发现AUC为0.66。结论血浆中高表达的lncRNA CRNDE可作为乳腺癌诊断的一个潜在的新型生物标志物。

lncRNA CRNDE调控miR-29a-3p对LPS诱导的人脐静脉内皮细胞增殖与凋亡影响的分子机制研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:将HUVECs分为对照组(细胞正常培养)、LPS组(细胞用1.0μg·ml^(-1)的LPS诱导24 h)、si-NC+LPS组(用1.0μg·ml^(-1)LPS诱导转染siNC的细胞24 h)、si-CRNDE+LPS组(用1.0μg·ml^(-1)LPS诱导转染si-CRNDE的细胞24 h)、miR-NC+LPS组(用1.0μg·ml^(-1)LPS诱导转染miR-NC的细胞24 h)、miR-29a-3p+LPS组(用1.0μg·ml^(-1)LPS诱导转染miR-29a-3p mimics的细胞24 h)、anti-miR-NC+si-CRNDE+LPS组(用1.0μg·ml^(-1)LPS诱导共转染anti-miR-NC与si-CRNDE的细胞24 h)和anti-miR-29a-3p+si-CRNDE+LPS组(用1.0μg·ml^(-1)LPS诱导共转染anti-miR-29a-3p与si-CRNDE的细胞24 h)。实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中CRNDE和miR-29a-3p表达,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、流式细胞仪和蛋白质印迹法分别检测细胞增殖、凋亡及细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)表达。双荧光素酶报告基因实验验证CRNDE与miR-29a-3p调控关系。结果:与对照组比较,LPS组HUVECs中CRNDE表达升高(P<0.05),而miR-29a-3p表达降低(P<0.05)。与si-NC+LPS组比较,si-CRNDE+LPS组HUVECs存活率和CyclinD1表达升高(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3表达降低(P<0.05)。与miR-NC+LPS组比较,miR-29a-3p+LPS组HUVECs存活率和CyclinD1表达升高(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3表达降低(P<0.05)。CRNDE靶向负调控miR-29a-3p。与anti-miR-NC+si-CRNDE+LPS组比较,anti-miR-29a-3p+si-CRNDE+LPS组HUVECs存活率和CyclinD1表达降低(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3表达升高(P<0.05)。结论:低表达CRNDE可抑制LPS处理的内皮细胞增殖,并诱导细胞凋亡,其作用机制与负调控miR-29a-3p表达有关。

长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因靶向微小RNA-384对肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移的影响

目的观察长链非编码RNA(lncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)靶向微小RNA(miRNA,miR)-384对人肺腺癌细胞株SPC-A1细胞侵袭和迁移的影响.方法在肺癌SPC-A1细胞中转染小干扰RNA(siRNA)CRNDE,实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)测定干扰效果,噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖变化,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移,蛋白质印迹法(Westernblot)检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平,靶向关系预测软件预测CRNDE与miR-384有结合位点,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系.在SPC-A1细胞中共转染siRNACRNDE和miR-384抑制物(Inhibitors),用上述方法测定miR-384Inhibitors对siRNACRNDE影响肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移的逆转作用.两组间比较采用t检验,多组差异比较采用单因素方差分析.结果转染siRNACRNDE后的肺癌SPC-A1细胞中CRNDE表达水平降低(1.01±0.12比0.43±0.06),细胞增殖能力降低(0.37±0.05比0.24±0.02,F=10.467,P<0.05),细胞侵袭(141.25±15.23比101.02±9.84,F=9.420,P<0.05)和迁移(188.20±16.84比142.58±11.22,F=8.345,P<0.05)数目减少,细胞中MMP-9、MMP-2、Vimentin蛋白水平下降,E-cadherin蛋白水平升高.CRNDE与miR-384有互补结合位点,CRNDE靶向负调控miR-384表达.miR-384 Inhibitors可以逆转siRNACRNDE对肺癌细胞增殖(0.26±0.03比0.35±0.04,t=3.118,P<0.05)、迁移(139.84±10.57比176.51±12.45,t=5.276,P<0.05)、侵袭(99.84±10.02比134.25±11.25,t=3.890,P<0.05)能力抑制作用和MMP-9、MMP-2、E-cadherin、Vimentin蛋白表达影响.结论下调lncRNACRNDE靶向miR-384抑制肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移.

结肠癌差异表达长链非编码RNA在膀胱癌中的表达及其对膀胱癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的检测结肠癌差异表达(CRNDE)长链非编码RNA在膀胱癌组织中的表达,探讨其临床意义,并分析CRNDE在膀胱癌细胞中的生物学功能。方法采用RT-qPCR对31例膀胱癌组织和配对正常组织CRNDE表达水平进行检测,并与患者临床病理参数分析,探讨CRNDE表达水平与膀胱癌临床特征之间的关系;通过细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)、Transwell等实验,探究CRNDE对膀胱癌细胞增殖、迁移能力的影响。膀胱癌组织和正常对照组织比较采用配对t检验,多组间比较采用单因素方差分析,CRNDE表达水平和临床病理参数的比较采用卡方检验,检验水平P=0.05。结果 CRNDE在膀胱癌中表达水平显著高于配对正常组织(t=28.29,P<0.01),CRNDE表达水平在肿瘤大小、年龄、性别、组织学类型方面无显著差异。干扰T24细胞的CRNDE表达后,细胞的增殖能力减弱(F=0.33,P<0.01),迁移能力下降了64%,与对照组相比有显著差异(t=8.99,P<0.01)。结论 CRNDE表达在膀胱癌组织中显著上调,表达水平与性别、年龄、不同肿瘤大小、组织学类型无关,CRNDE的表达可能促进膀胱癌细胞的增殖、迁移。