火把花根片治疗2型糖尿病肾病研究进展

火把花根片(colquhounia root tablet, CRT)治疗2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)蛋白尿和肾脏损伤临床疗效良好,其治疗2型糖尿病肾病的药理机制有减轻炎症损伤、抗肾小球纤维化、足细胞保护作用、抗氧化应激、保护肾小管上皮细胞、改善脂质代谢等。但火把花根片相关临床研究仍存在以下不足之处:(1)CRT治疗T2DKD的量效关系和药理毒理机制尚未完全阐明,多项研究样本量不足,研究中存在各种偏倚因素,导致循证医学证据级别不高。未来需要大样本高质量的随机对照临床试验来验证CRT在T2DKD患者中的疗效和安全性。(2)CRT的毒副作用以消化道反应最常见,还有一定肝肾损害及生殖毒性,虽然未见严重不良事件,但仍制约了CRT的广泛临床使用。如何能够实现CRT减毒增效或个体化的临床应用,也将成为T2DKD研究领域的重要课题。

火把花根片治疗肾病综合征继发脂质代谢紊乱的临床观察

目的 :探讨火把花根片对肾病综合征继发脂质代谢紊乱的作用。方法 :96例肾病综合征患者随机分成两组 ,治疗组 6 0例以火把花根片治疗 ,对照组 36例以激素或细胞毒性药物治疗 ,6个月后观察两组的疗效及血脂、肾功能等相关指标的变化情况。结果 :治疗组总有效率为 88 33% ,对照组总有效率为6 9 4 4%。治疗组明显优于对照组 (P <0 0 5 ) ;治疗组在改善血脂代谢及肾功能等方面也明显优于对照组(P <0 0 5 )。结论 :火把花根片能明显改善肾病综合征继发的脂质代谢紊乱 ,可改善肾功能 ,消除蛋白尿 ,升高血浆白蛋白。

火把花根片联合免疫抑制方案治疗慢性移植肾肾病临床观察

目的观察火把花根片联合免疫抑制方案治疗慢性移植肾肾病(chronic allograft nephropathy,CAN)患者的疗效。方法选择符合尿蛋白≥1.0 g/24 h及血肌酐(SCr)≥150(μmol/L)的CAN患者33例,分成治疗组(15例)与对照组(18例),对照组接受免疫抑制改良方案,治疗组接受火把花根片联合免疫抑制改良方案,疗程均为6个月。观察两组临床疗效,检测24 h尿蛋白、SCr及肌酐清除率(CCr)。结果治疗组有效率为60%(9/15例),显著高于对照组的22%(4/18例,P<0.05);治疗3个月、6个月24 h尿蛋白亦显著低于对照组(P<0.05);12个月随访结束时,治疗组SCr及CCr水平保持稳定,对照组SCr水平显著升高及CCr水平显著降低(P<0.05);两组治疗6个月及随访结束时SCr及CCr比较差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组与对照组发生血清肌酐翻倍患者分别为2例、7例,进入终末期肾病患者分别为1例、4例。结论与单用免疫抑制改良方案治疗比较,火把花根片联合免疫抑制改良方案治疗CAN患者能更有效减少尿蛋白排泄,短期随访结果显示其有更好的移植肾功能保护作用。

火把花根片与厄贝沙坦片治疗糖尿病肾病的效果比较

目的比较火把花根片与厄贝沙坦片治疗糖尿病肾病的疗效。方法收集糖尿病肾病临床期患者80例,随机分为对照组、治疗组各40例。在基础治疗的基础上,两组分别给予厄贝沙坦片和火把花根片,治疗3个月,观察两组治疗前后尿微量白蛋白/肌酐(尿ACR)、24 h尿蛋白定量(UTP)、肝肾功能、血脂、血常规变化。结果治疗后,两组尿ACR、UTP均明显下降(P<0.01),而治疗组比对照组下降更显著(P<0.05);两组TC、LDL-c均较治疗前显著下降(P<0.05),但两组间无统计学差异(P>0.05)。治疗后,治疗组总有效率显著高于对照组(P<0.01);两组不良反应无统计学差异(P>0.05)。结论火把花根片较厄贝沙坦片明显降低糖尿病病肾病患者尿蛋白水平,治疗效果更优。

火把花根片抑制大鼠急性肺损伤黏附分子表达

目的:探讨火把花根片对大鼠急性肺损伤(ALI)黏附分子表达的影响。方法:经尾静脉注射油酸建立ALI模型并分为ALI组、火把花根+ALI组和对照组。用流式细胞术和免疫组化SP法测定外周血中性粒细胞(PMN)和单核细胞黏附分子CD11a、CD11b和CD18的表达及肺组织ICAM-1活性,检测肺湿/干重比(W/D)、肺通透指数(LPI)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)数和活化PMN比值。结果:ALI组PMN和单核细胞表面的CD11a、CD11b、CD18和肺组织ICAM-1表达水平高于对照组(P<0.01),火把花根+ALI组上述指标显著低于ALI组(P<0.01)。肺W/D比、LPI、BALF中WBC计数和活化PMN比值显著低于ALI组(P<0.01)。结论:PMN和单核细胞黏附分子CD11a、CD11b、CD18和肺组织ICAM-1的表达上调,参与ALI的病理发展过程。火把花根片对ALI具有拮抗作用。

以泼尼松为主联合治疗多发性肌炎和皮肌炎32例

目的 :比较泼尼松联合疗法和单用治疗多发性肌炎 (PM)和皮肌炎 (DM)的疗效。方法 :PM和DM患者67例分为对照组 (单用糖皮质激素 ) 3 5例 ,给予泼尼松 1mg·kg 1 ·d 1 ,qd。治疗组 3 2例 ,给予泼尼松 1mg·kg 1 ·d 1 ,qd ,加甲氨蝶呤片 7.5～ 10 .0mg ,po,每周 1次 ;加火把花根片 3片 ,tid。疗程 4周。主要观察指标有肌力变化 ,皮疹 ,血清ALT、AST、LDH、CK的水平及药物副作用发生率。结果∶治疗后两组患者的肌力均有不同程度改善 ,肌力改善幅度≥ 2级患者在对照组中占 5 4.3 % ,在治疗组中占 62 .5 % ,二者差异无显著性 (P >0 .0 5 )。两组患者在治疗后血清ALT、AST、LDH、CK水平均比治疗前有明显下降 ,差异有极显著性 (P <0 .0 1)。治疗组患者的血清ALT、AST、LDH、CK下降的幅度明显大于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :与单用糖皮质激素的疗法相比 ,联合治疗方法能够使血清肌酶更快地下降 ,对PM和DM有更好的近期疗效。

火把花根片对急性肺损伤的保护作用研究

目的:探讨中药火把花根片对油酸诱导大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法:36只Wistar大鼠被随机分为3组,采用尾静脉注射油酸建立ALI模型。火把花根组于注射油酸前用火把花根溶液连续灌胃10d,每日2次;正常对照组尾静脉注射0.04 ml/kg生理盐水。各组均于注射油酸后即刻(0)、0.5、1、2、3和4 h后取血测定中性粒细胞(PMN)表面黏附分子CD11a、CD11b、CD18阳性表达率和中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性;术毕活杀动物,观察肺组织湿/干重比(W/D)、肺通透指数(LPI)和肺损伤评分(LIS)变化以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中活化PMN百分比,并进行肺组织病理学光镜观察。结果:与正常对照组比较,ALI组外周血PMN黏附分子CD11a、CD11b、CD18阳性表达率、血清NE活性以及肺组织W/D、LPI、LIS和BALF中PMN百分比均显著升高;与ALI组比较,火把花根组肺W/D、LPI、LIS及BALF中PMN百分比均明显降低,损伤0.5 h以后各时间点PMN表面CD11a、CD11b、CD18表达和NE活性均显著降低(P均<0.01)。光镜下观察火把花根组肺组织损伤程度较ALI组明显减轻。结论:火把花根片对油酸诱导ALI有一定保护作用,其作用机制可能与抑制PMN表面CD11a、CD11b和CD18表达及NE释放有关。

泼尼松和火把花根片联合中药治疗白塞氏病的初步临床观察

目的初步评价泼尼松和火把花根片联合中药治疗白塞氏病的临床疗效。方法收集2012年6月至2014年12月在深圳市眼科医院确诊的白塞氏患者42例（79只眼）,随机分为2组。中西结合组22例（41只眼）,以口服激素泼尼松片＋火把花根片为主,辅以辨证使用中药汤剂及局部眼药治疗;西药组20例（38只眼）,以泼尼松＋环磷酰胺片＋局部眼药治疗;总平均用药时间8~12个月。观察患者视力、眼部体征、全身并发症（口腔溃疡、皮肤多形性结节、生殖器溃疡等）以及荧光素眼底血管造影（FFA）、黄斑区光学相干断层扫描（OCT）检查结果的变化。结果治疗后,中西结合治疗组显效18只眼（43.9%）,好转17只眼（41.5%）,无效6只眼（14.6%）,总有效率84.5%,西药组显效8只眼（21.1%）,好转17只眼（44.7%）,无效13只眼（34.2%）,总有效率65.8%。中西医结合组的疗效好于西药组（Mann-Whitney U检验,Z=-2.497,P=0.013）。结论泼尼松片和火把花根片联合中药的治疗方案治疗白塞氏病有效。

火把花根片在小鼠骨髓移植模型中减轻急性移植物抗宿主病的实验研究

目的探讨火把花根片在小鼠骨髓移植模型中减轻急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的效果及可能的作用机制。方法建立小鼠异基因骨髓移植GVHD模型,预处理为放疗8．0Gy,分为：对照组(n=10)异基因骨髓细胞(2×10~6)加脾T淋巴细胞(2×10~6)移植组；火把花根片组(n=20)异基因骨髓细胞(2×10~6)加脾T淋巴细胞(2×10~6)移植加火把花根片预防组。比较受鼠生存时间和GVHD发生情况,受鼠外周血象中白细胞、血球压积等恢复情况和骨髓细胞中嵌合体H-2D^b阳性细胞百分比以评价造血重建。在移植后不同时间点分别采用流式细胞仪检测受鼠的脾细胞中CD4^+和CD8^+以及CD25和CD69的表达。结果移植后对照组受鼠均于25天内死于GVHD,火把花根片组GVHD的发生率为20%(4/20),与对照组小鼠相比,存活率和时间明显增高和延长(P＜0．01)；存活的火把花根片组小鼠(n=4)40天时骨髓细胞中的H-2D^b阳性细胞百分比达(93．38±4．32)%。移植后10天开始,火把花根片组小鼠CD4^+和CD8^+T细胞比例明显低于对照组(P＜0．05),CD4^+CD25^+T细胞、CD4^+CD69^+T细胞、CD8^+CD25^+T细胞和CD8^+CD69^+细胞比例明显低于对照组(P＜0．05)。结论火把花根片能明显减轻骨髓移植模型中aGVHD的发生率,其作用机制可能在于抑制aGVHD发生过程中T细胞的免疫反应。

火把花根对TNF-α诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤及紧密连接蛋白Claudin-4和ZO-1表达的影响

目的探究火把花根(CRT)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞(ACEⅡ)损伤的保护作用及对细胞间紧密连接蛋白表达的影响。方法体外培养大鼠ACEⅡ。将细胞分为6组:对照组(完全培养基)、TNF-α组(TNF-α10μg/L)、地塞米松组(Dex组,Dex 1×10^(-6) mol/L+TNF-α10μg/L)、CRT高剂量组(CRT 1000 mg/L+TNF-α10μg/L)、CRT中剂量组(CRT 500 mg/L+TNF-α10μg/L)、CRT低剂量组(CRT 250 mg/L+TNF-α10μg/L)。处理细胞48 h后,透射电镜观察细胞超微结构的改变,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞的增殖变化,流式双染法测定细胞凋亡,免疫荧光法测定细胞封闭蛋白4(Claudin-4)、带状闭锁蛋白-1(ZO-1)的定位分布及荧光强度改变,荧光定量聚合酶链反应(PCR)及免疫印迹法测定Claudin-4、ZO-1基因和蛋白表达水平的变化。结果透射电镜下可见TNF-α组细胞明显损伤,细胞器结构损伤严重;CRT各剂量组及Dex组细胞损伤明显减轻。与对照组比较,TNF-α组细胞的增殖明显受到抑制(45.96%±1.40%比5.17%±0.57%,P<0.05),凋亡率增加(19.60%±3.75%比2.87%±0.40%,P<0.05)。CRT各剂量组及Dex组细胞的增殖抑制率及凋亡率低于TNF-α组(抑制率:33.08%±2.11%、28.23%±2.31%、33.76%±0.81%、38.09%±1.65%比45.96%±1.40%;凋亡率:15.17%±1.80%、8.23%±2.24%、12.67%±1.99%、12.33%±2.64%比19.60%±3.75%,均P<0.05)。共聚焦显微镜下可见TNF-α组细胞Claudin-4荧光密度降低,ZO-1线性荧光断裂、消失;CRT各剂量组及Dex组Claudin-4的荧光密度接近对照组,ZO-1荧光结构恢复网格状排列。TNF-α组细胞的Claudin-4、ZO-1的基因和蛋白表达水平均明显低于对照组〔Claudin-4 mRNA(2-ΔΔCt):0.026±0.006比1.000±0.000,Claudin-4蛋白(Claudin-4/β-actin):0.447±0.127比0.757±0.131;ZO-1 mRNA(2-ΔΔCt):0.183±0.090比1.000±0.000,ZO-1蛋白(ZO-1/β-actin):0.423±0.040比0.697±0.127,均P<0.05〕;CRT各剂量组及Dex组Claudin-4、ZO-1的基因和蛋白表达明显高于TNF-α组〔Claudin-4 mRNA(2-ΔΔCt):0.059±0.009、0.080±0.006、0.059±0.010、0.061±0.011比0.026±0.006,Claudin-4蛋白(Claudin-4/β-actin):0.780±0.046、1.327±0.055、0.710±0.053、0.670±0.087比0.447±0.127,ZO-1 mRNA(2-ΔΔCt):1.125±0.103、0.856±0.058、0.793±0.147、4.059±0.520比0.183±0.090,ZO-1蛋白(ZO-1/β-actin):0.637±0.068、0.663±0.057、0.617±0.050、0.813±0.090比0.423±0.040,均P<0.05〕。结论CRT保护TNF-α诱导的肺上皮屏障损伤,通过抑制TNF-α诱导的细胞凋亡,减弱细胞增殖抑制作用,修复细胞结构,保护ACEⅡ,并通过上调Claudin-4、ZO-1的表达,恢复紧密连接蛋白的定位,修复并加固紧密连接,降低细胞旁通透性。

火把花根片对面部激素依赖性皮炎的治疗效果

目的:探讨火把花根片对面部激素依赖性皮炎的治疗效果。方法:收治面部激素依赖性皮炎患者84例,平分为两组,对照组口服阿司咪唑以及外用氧化锌护肤,试验组在对照组用药的基础上加口服火把花根片,比较两组患者皮炎的改善情况。结果:试验组患者治疗的总有效率明显高于对照组,效果明显优于对照组,治疗的显效时间短于对照组,且服药后出现不良反应的情况明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:火把花根片治疗面部激素依赖性皮炎具有效果好、安全性高的特点。

不同剂量火把花根片降低蛋白的尿疗效分析

目的探讨分析不同剂量火把花根片降低尿蛋白疗效及副作用。方法对浙江省台州市中心医院肾内科使用了血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂等3月以上疗效不佳的患者给予口服火把花根片,比较治疗前及治疗后4周~20周尿蛋白下降情况以及肝肾功能、血常规变化。结果火把花根片治疗4周、8周、20周后随意尿蛋白/尿肌酐、尿微量白蛋白明显下降;火把花根片治疗后4周、8周、20周随意尿蛋白/尿肌酐下降总有效率分别为33.3%、75.6%、81.5%,显效率为0%、15.4%、40.0%;尿微量白蛋白下降总有效率为35.9%、75.6%、80.0%,显效率为0%、19.2%、38.5%;大剂量火把花根片组20周显效率及总有效率均较小剂量组高;肾功能损伤的发生率20.5%,肝酶升高的发生率15.4%。结论火把花根片对降低尿蛋白有一定的疗效,火把花根片剂量与降低尿蛋白呈正相关,副作用轻微。

中药火把花根对油酸致急性肺损伤大鼠气道紧密连接蛋白表达的影响

【摘要】目的观察中药火把花根对急性肺损伤（ALI）大鼠支气管上皮紧密连接蛋白claudin-2和ZO-1表达的影响，探讨火把花根对ALI的保护机制。方法将24只健康成年清洁级雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、ALI组、火把花根预处理组，每组8只。经尾静脉注射油酸0．04mL／kg复制大鼠ALI模型，对照组注射等量生理盐水（NS）；火把花根预处理组于制模前10d连续灌胃药物600mg·kg^-1·d^-1（2mL），对照组和ALI组灌胃等量NS。制模后4h取腹主动脉血、收集支气管肺泡灌洗液（BALF），测定血浆及BALF中蛋白含量，计算肺通透性指数（LPI）；处死大鼠取肺组织，测定肺湿／干质量（W／D）比值，苏木素-伊红（HE）染色后光镜下观察肺组织病理学变化，并进行肺损伤评分（LIS）；应用免疫组化法观察支气管黏膜上皮claudin-2和ZO-1的阳性表达及定位；应用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测支气管黏膜上皮claudin-2和ZO-1的蛋白表达。结果镜下显示：与对照组比较，ALI组大鼠肺组织损伤明显，细胞水肿，细胞间连接结构紊乱，LIS、W／D及LPI均显著升高[LIS（分）：3．81±0．42比0．40±0．08，W／D：7．68±0．64比4．44±0．39，LPI：0．89±0．15比0．38±0．05，均P〈0．01]；claudin-2和ZO-1主要表达在支气管上皮细胞，且ALI组表达强度较对照组明显减弱；WesternBlot显示，ALI组claudin-2和ZO-1的蛋白表达较对照组显著下调[claudin-2蛋白（灰度值）：0．43±0．31比2．16±1．33，ZO-1蛋白（灰度值）：1．25±0．41比2．82±0．76，均P〈0．01]。与ALI组比较，火把花根预处理可明显改善ALI大鼠肺损伤程度[LIS（分）：1．22±0．39比3．81±0．42，W／D：4．62±0．84比7．68±0．64，LPI：0．46±0．07比0．89±0．15，均P〈0．01]，且elaudin-2和ZO-1的蛋白表达均明显上调[elaudin-2蛋白（灰度值）：2．98±0．91比0．43±0．31，ZO-1蛋白（灰度值）：2．35±0．51比1．25±0．41，均P〈0．01]。结论火把花根可能通过上调支气管上皮细胞紧密连接蛋白claudin-2及ZO-1的表达，以减轻ALI时气道上皮损伤，从而起到肺脏的保护性作用。

火把花根片关键药效物质的“效益-风险”体外评价及其网络调控机制研究

雷公藤属中药品种火把花根片对类风湿关节炎、糖尿病肾病和膜性肾病均具有良好的临床疗效,然而,肝脏损伤、恶心呕吐等副反应限制了其广泛应用。该研究旨在通过体外药效与毒性评价,整合生物分子网络分析,明确火把花根片及其潜在活性成分针对类风湿关节炎、糖尿病肾病和膜性肾病的效益与风险,并初步探究其“异病同治”的作用机制。首先,采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱分析火把花根片入血成分,并考察火把花根片及其所含雷公藤甲素、雷公藤红素对人正常肝细胞L02、人类风湿成纤维样滑膜细胞MH7A、人肾小管上皮细胞HK-2和小鼠足细胞MPC-5活性的影响;采用酶联免疫吸附法考察各组炎症诱导性MH7A细胞和HK-2细胞模型中炎性因子的水平;采用蛋白免疫印迹法检测药物对MPC-5细胞模型中nephrin和podocin蛋白异常表达的干预作用,并开展免疫荧光检测考察对MPC-5细胞骨架蛋白表达水平的调节。接着,通过TCMIP v2.0数据库获得火把花根片入血成分候选靶点,利用GEO数据库收集3类疾病靶点,基于STRING数据库构建“疾病基因-药物靶标”互作网络,进行通路富集分析。最后,利用AutoDock Vina分子对接方法探究雷公藤甲素和雷公藤红素与关键通路中相应靶标的结合能力。结果表明,3种药物均可降低MH7A及HK-2细胞上清炎性因子浓度,增加MPC-5细胞标志性蛋白含量,其中,雷公藤甲素对于L02肝细胞毒性最强,雷公藤红素次之,火把花根片毒性最小。“疾病基因-药物靶标”关联网络挖掘结果表明,火把花根片可能通过调节PI3K/HIF1α/NOS2信号通路,干预3类疾病。分子对接结果显示其关键药效物质与PI3K、HIF1α、NOS2蛋白均具有较高亲和力。综上,该研究结果表明,火把花根片对于类风湿关节炎、糖尿病肾病、膜性肾病的疗效与雷公藤甲素及雷公藤红素相似,但细胞毒性均小于二者,即效益较高,而风险更小。此外,生物分子网络分析初步表明PI3K/HIF1α/NOS2信号通路可能是其“异病同治”的关键环节。