基于气相色谱-质谱联用技术的复方蜘蛛香药味配伍前后挥发性成分比较研究

目的:研究复方蜘蛛香药味配伍前后挥发性成分及相对含量的变化。方法:提取挥发油并采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对复方蜘蛛香药味配伍前后挥发性成分进行分析,进而运用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)研究复方蜘蛛香药味配伍前后差异性化学成分。结果:蜘蛛香、木香、草果、蜘蛛香-木香、蜘蛛香-草果、木香-草果、复方蜘蛛香分别鉴定出23、17、19、22、29、25、35种成分。去重后共得到42种成分,包括烯类、醇类、醛类、酯类、酮类、芳烃类及其他类成分。复方蜘蛛香三味药配伍后新增(+)-柠檬烯、4-蒈烯2种成分,减少2-茨醇、α-香柠檬烯、β-紫罗酮、α-姜黄烯4种成分,水芹烯、邻伞花烃、罗勒烯、γ-萜品烯、芳樟醇5种成分含量增加,香叶醇、4-萜烯醇、(Z)-柠檬醛、茴香脑、乙酸香叶酯等28种成分含量降低;蜘蛛香-木香配伍后新增香橙烯1种成分,减少芳樟醇、异戊酸异戊酯、2-茨醇、4-萜烯醇、(Z)-柠檬醛、香叶醇、茴香脑7种成分,广藿香醇含量增加,乙酸香叶酯、塞瑟尔烯、α-布藜烯、β-榄香烯、环葵烯等20种成分含量降低;蜘蛛香-草果配伍后新增β-月桂烯1种成分,减少2-茨醇、β-榄香烯、α-香柠檬烯、α-古芸烯、石竹素5种成分,茴香脑、芳樟醇2种成分含量增加,乙酸香叶酯、β-丁香烯、α-布藜烯、1,8-桉叶素、香叶醇等26种成分含量降低;木香-草果配伍后新增茚满-4-甲醛1种成分,减少反-2-癸烯醛、α-香柠檬烯、蛇麻烯、α-姜黄烯4种成分,邻伞花烃、芳樟醇、γ-摩勒烯3种成分含量增加,乙酸香叶酯、环葵烯、β-榄香烯、β-紫罗酮、1,8-桉叶素等21种成分含量降低。结论:复方蜘蛛香药味配伍前后挥发性成分种类和含量发生变化,可为深入研究复方蜘蛛香挥发油药理作用和制剂提供依据。

基于质量源于设计理念的复方蜘蛛香醇提工艺研究

目的:运用质量源于设计(quality by design,QbD)理念,优化复方蜘蛛香醇提工艺。方法:以复方蜘蛛香为模型药,木香烃内酯(costunolide,CL)、去氢木香内酯(dehydrocostus lactone,DCL)、橙皮苷(hesperidin,HSP)和出膏率为关键质量属性(critical quality attributes,CQAs),采用危害及可操作性分析法对复方蜘蛛香醇提工艺进行风险评估,采用单因素实验设计确定各因素的高低水平,Plackett-Burman实验设计筛选出关键工艺参数(critical process parameters,CPPs),采用Box-Behnken优化醇提工艺,建立多个指标重叠的设计空间,选取较优操作空间进行工艺验证。结果:筛选的关键工艺参数为料液比、乙醇体积分数和提取次数,为方便实验操作,最终选择的提取工艺为:料液比1∶10,乙醇体积分数60%,提取次数2次,在该工艺条件下,复方蜘蛛香提取液能够达到木香烃内酯≥18.0 mg·g^(-1),去氢木香内酯≥15.0 mg·g^(-1),橙皮苷≥2.5 mg·g^(-1),出膏率≥30.0%。结论:通过QbD理念开发的复方蜘蛛香醇提工艺有助于提高产品质量,为其制剂的工艺开发及质量控制提供实验基础。

D-最优混料设计制备复方蜘蛛香凝胶贴膏及初步药效学考察

目的以剂型改造为出发点优选复方蜘蛛香凝胶贴膏(Compound Zhizhuxiang Gel Plaster,CZGP)处方,考察单一促渗剂与二元复合促渗剂的促渗作用,并初步考察CZGP与原处方香果健消片(Xiangguo Jianxiao Tablets,XJT)的镇痛作用。方法以初黏力、持黏力、剥离强度和感官评分为评价指标,采用D-最优混料设计优化凝胶贴膏处方;选择3种常用透皮促渗剂氮酮、丙二醇、薄荷醇,以木香烃内酯、去氢木香内酯、橙皮苷为指标,通过干加热透皮系统评价单一促渗剂和二元复合促渗剂的促渗作用,筛选最优促渗剂;通过小鼠(幼鼠)醋酸扭体实验初步评价CZGP与XJT的镇痛作用。结果CZGP的最佳处方为酒石酸1.000 g、PVP K906.000 g、NP70011.000 g、甘羟铝0.800 g、甘油35.000 g、水21.200 g;不同的一元促渗剂及二元促渗剂中,以3%丙二醇促渗作用最好,木香烃内酯、去氢木香内酯、橙皮苷的渗透速率分别为45.744、49.903、14.898μg/(cm^(2)·h),增渗倍数分别为1.523、1.602、2.636;CZGP对小鼠(幼鼠)醋酸扭体具有镇痛作用,且镇痛率高于XJT。结论CZGP具有良好的体外经皮渗透性及镇痛作用,为中药复方口服制剂改造为经皮给药制剂提供思路。

复方蜘蛛香挥发油GC-MS指纹图谱的建立及多组分定量分析

目的建立复方蜘蛛香挥发油GC-MS指纹图谱及其10个指标成分的定量分析方法,为其质量控制及评价提供参考。方法提取15批复方蜘蛛香挥发油,采用GC-MS技术建立指纹图谱,使用中南大学“中药指纹图谱计算软件”计算相似度,并对共有峰进行归属。采用聚类分析(cluster analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)对指纹图谱进行评价。利用GC法测定挥发油中10个指标成分的含量。结果15批挥发油得量在4.4~6.8 mL;GC-MS指纹图谱有31个共有峰,其中峰1、11归属于蜘蛛香挥发油;峰31归属于木香挥发油;峰6~9、15、21归属于草果挥发油;峰2~5、10、18为蜘蛛香、草果挥发油共有;峰23、25、27、29、30为蜘蛛香、木香挥发油共有;峰12~14、16、17、19、20、22、24、26、28为蜘蛛香、木香、草果3者挥发油共有;15批样品指纹图谱与中位数法生成的指纹图谱共有模式的相似度在0.798~0.998;聚类分析可以将样品分为2类,其中S1、S2、S5、S6、S11、S14、S15为第1类;S3、S4、S7~S10、S12、S13为第2类;PCA及OPLS-DA可将样品分为4类,其中S1、S2、S5、S6为第1类,S3、S4、S7~S9为第2类,S10、S12、S13为第3类,S11、S14、S15为第4类。异戊酸(峰1)、α-蒎烯(峰2)、β-蒎烯(峰3)、1,8-桉叶素(峰7)、α-松油醇(峰13)、香叶醇(峰15)、β-榄香烯(峰23)、β-丁香烯(峰25)、反式-橙花叔醇(峰28)、石竹素(峰29)的质量浓度在19.49~43.24、2.90~13.15、7.47~17.19、182.94~248.19、12.83~20.48、21.82~57.63、1.54~2.83、3.07~6.50、12.06~19.02、2.94~5.43 mg/mL。结论建立的复方蜘蛛香挥发油指纹图谱及定量分析方法分离度好、准确性高,可为复方蜘蛛香挥发油质量控制及评价提供参考。