复方五仁醇胶囊含药血清指纹图谱与保肝作用的谱效关系

目的:阐明复方五仁醇胶囊保肝作用的药效物质基础.方法:将大鼠灌胃给药分别制备复方五仁醇胶囊及五味子、三七、柴胡、叶下珠4味药的阴性制剂和单味制剂含药血清,对获得的9组含药血清按已经建立的指纹图谱条件进行HPLC测定,同时考察它们对CCL4诱导的损伤肝细胞的增值(MTT法)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)泄漏的影响,最后进行谱效关系分析.结果:指纹图谱显示,单味五味子及三七、柴胡、叶下珠阴性制剂含药血清中均检测到大鼠灌服全方制剂后血液中产生的13个药源性成分,而五味子阴性制剂及单味三七、柴胡、叶下珠含药血清中均未检测到药源性成分;药效结果显示,全方、单味五味子及三七、柴胡、叶下珠阴性制剂含药血清对肝细胞损伤均具有明显的保护作用,而单味三七、柴胡、叶下珠含药血清及五味子阴性制剂含药血清作用不明显,且单味五味子与全方制剂含药血清组之间药效无显著差异.谱效之间具有很好的相关性.结论:复方五仁醇胶囊保肝作用的药效物质基础主要来自君药五味子所含有的木脂素类成分.

复方五仁醇胶囊血清药化学研究

目的对复方五仁醇胶囊进行血清药化学研究,以便与该制剂血清药理学研究结果进行谱效关系分析,阐明其药效物质基础。方法以已经建立的高效液相色谱指纹图谱分析方法,比较复方五仁醇胶囊含药血清色谱图和空白血清色谱图,分辨该制剂给药后血清中产生的药源性成分,进一步比较全方制剂及各缺味、单味制剂给药后的血清色谱图,分析血中药源性成分的来源,并通过对照品比对对部分成分进行鉴定。结果ig给药后血清中产生药源性成分13个,13个成分全部来自君药五味子,其中8个为制剂原形成分,包括五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素,其余5个为代谢产物。结论复方五仁醇胶囊体内直接作用物质很可能出自血清中的13个药源性成分,结合血清药理学对其作进一步研究有助于阐明该制剂药效物质基础。

大鼠灌胃复方五仁醇胶囊后血清和血浆中五味子醇甲和五味子乙素的比较

目的 比较复方五仁醇胶囊主要入血成分在大鼠血清和血浆中的量.方法 灌胃给药制备大鼠含药血清和含药血浆,HPLC法测定五味子醇甲和五味子乙素.Lichrosphere C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,Phenomenex Description C18保护柱（4.0 mm×3.0 mm）,甲醇-水梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长254 nm.结果 五味子醇甲、五味子乙索分别在0.051 2～0.614 4和0.039 8～0.477 6μg线性关系良好,低、中、高3个水平五味子醇甲、五味子乙素的平均相对回收率分别为96.72%、101.06%、102.05%和99.03%、100.18%、100.28%.血清和血浆中五味子醇甲平均质量浓度分别为11.063 2、12.883 7μg/mL,五味子乙素平均质量浓度分别为7.490 9、12.590 8μg/mL.结论 复方五仁醇胶囊主要入血成分血浆中的量高于血清.

复方五仁醇胶囊含药血清指纹图谱研究

目的建立复方五仁醇胶囊含药血清指纹图谱,分辨该制剂给药后血中产生的共性的药源性成分,并对这些成分的来源作初步分析,为该制剂血清药化学研究奠定基础。方法大鼠分组灌胃给药制备10批含药血清,高效液相色谱法建立其指纹图谱,并与相同条件下测定的体外制剂和对照品的图谱比对,对其共有峰归属进行分析。结果标出10批含药血清色谱图除血清固有成分外的共有峰13个,其中8个为制剂原形成分,5个为代谢产物,鉴定出3个成分。结论本研究建立的方法准确、可靠,可用于复方五仁醇胶囊血清药化学研究。

一测多评法测定复方五仁醇胶囊中6种木脂素类成分

目的建立一测多评法同时测定复方五仁醇胶囊(五味子、三七、柴胡、叶下珠)中6个木脂素类成分的量。方法以五味子醇甲为内参物,建立五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素与内参物的相对校正因子。同时采用外标法测定,比较计算值与实测值的差异。结果在两个实验室的两种HPLC系统(Waters、Shimadzu)和两种色谱柱[Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm)和Lichrosphere C18(4.6 mm×250 mm,5μm)]对10批制剂中6个成分的相对校正因子测定的RSD均小于5%。结论所建立的方法表明具有良好的重现性。可用于复方五仁醇胶囊质量评价。

复方五仁醇胶囊含药血清中木脂素类成分的UPLC-MS/MS分析

目的:分析复方五仁醇胶囊大鼠灌胃后消化吸收进入血液的木脂素类成分,以便与该制剂血清药理学研究相结合,阐明其药效物质基础。方法:采用UPLC-MS/MS方法,比较复方五仁醇胶囊含药血清、体外制剂、空白血清及对照品提取离子流色谱图(EIC),并通过质谱图相关离子峰分析,确认进入血液的木脂素类成分。结果:发现制剂中存在的五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素5个木脂素类成分进入血液。结论:这5个木脂素类成分很可能是复方五仁醇胶囊体内直接作用物质的重要组成部分,结合血清药理学作进一步研究有助于阐明该制剂药效物质基础。

复方五仁醇胶囊入血成分鉴定及含量测定

目的:鉴定复方五仁醇胶囊入血成分并进行含量测定,为该制剂血清药理学研究结果验证积累数据。方法:灌胃给药制备含药血清,高效液相法测定含药血清的色谱图,与体外制剂及对照品色谱图进行比较,分析、鉴定入血成分,并对鉴定出的主要成分进行含量测定。结果:灌胃给药后血清中产生了13个与药物因素有关的成分,其中8个为制剂原形成分,包括五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素,其余5个为制剂成分的代谢产物。血清中五味子醇甲、五味子乙素的平均含量分别为11.0632,7.4909mg·L-1。结论:五味子醇甲、五味子乙素在血清中含量较高,可能为复方五仁醇胶囊重要的药效成分。

复方五仁醇胶囊中5种成分的含量测定及其含量变化的相关性分析

目的:筛选复方五仁醇胶囊合适的质量控制指标。方法:高效液相色谱法测定10批制剂中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素5种木脂素类成分的含量,对各成分的含量变化进行相关性分析,筛选含量较高且又能在一定程度上反映其他成分含量的指标成分。结果:10批制剂中5种木脂素类成分的含量存在较大差异,但各成分的含量变化之间具有很好的群体相关性,五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素含量与五味子醇甲含量的相关系数分别为0.970 8,0.914 4,0.984 9,与五味子乙素含量的相关系数分别为0.981 5,0.979 7,0.893 2。结论:制剂中五味子醇甲、五味子乙素的含量在一定程度上能间接反映其他3种成分的含量,可以作为该制剂质量控制指标。

复方五仁醇胶囊保肝作用的血清药理学研究

目的:建立复方五仁醇胶囊血清药理学研究方法。方法:建立CCl4诱导的原代培养大鼠肝细胞损伤模型,大鼠为含药血清供体,以含药血清对损伤肝细胞增殖(MTT法)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)泄漏的影响两个指标,结合含药血清中五味子乙素的含量测定,分别采用单因素考察、多因素的正交试验,优选含药血清的制备方法,并确定体系中血清添加量。结果:每天以成人等效剂量10倍的甲醇提取物间隔8h分两次给正常大鼠灌胃给药,连续3天,末次给药后2h采血制备含药血清比较合理,体系中加入10%该条件下制备的含药血清能明显提高损伤肝细胞的增殖能力、降低细胞ALT泄漏。结论:适宜条件下制备的复方五仁醇胶囊含药血清对肝细胞损伤具有明显的保护作用,血清药理学研究方法可以用于该制剂的药效评价。

复方五仁醇胶囊HPLC指纹图谱研究

目的:建立复方五仁醇胶囊HPLC指纹图谱分析方法。方法:采用Lichrosphere C18色谱柱,水-乙腈梯度洗脱,流速1.0 m.lmin-1,柱温30℃,检测波长210 nm。结果:对10个批号的样品进行了测定,标出26个共有峰,并通过对照品比对鉴定出其中6个成分。结论:该法准确、可靠,可用于复方五仁醇胶囊的质量控制。

复方五仁醇胶囊保肝作用的实验与临床研究

目的考察复方五仁醇胶囊对损伤肝细胞的保护作用及对慢性肝炎的治疗效果。方法以SD大鼠为供体制备复方五仁醇胶囊含药血清,CC l4诱导大鼠原代培养肝细胞损伤模型,采用血清药理学方法考察含药血清对损伤肝细胞增值(MTT法)和培养上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的影响;将446例慢性乙型肝炎患者随机分成治疗组和对照组,以临床症状、体征、肝功能为主要指标,考察复方五仁醇胶囊的治疗效果。结果与模型组比较,含药血清组MTT值明显升高,上清液中ALT均显著下降,体系中加入10%含药血清效果最佳;治疗组、对照组临床症状、体征及肝功能指标均明显得到改善,复方五仁醇胶囊的疗效优于阳性对照药护肝片。结论复方五仁醇胶囊对肝细胞损伤具有明显保护作用,对慢性肝炎有较好治疗作用。

复方五仁醇胶囊的指纹图谱质量控制标准研究

目的完善复方五仁醇胶囊的质量控制标准。方法以高效液相色谱(HPLC)指纹图谱为基础,建立包括共有峰数、相似度及峰面积比值在内的复方五仁醇胶囊指纹图谱质量控制标准,并对3批样品进行了检测。结果3批样品检测结果均符合研究建立的质量控制标准。结论该标准灵敏、快速、简便、准确,可用于复方五仁醇胶囊的质量控制。

HPLC-DAD法同时测定复方五仁醇胶囊中12个木脂素类成分

目的:建立同时测定复方五仁醇胶囊中12个木脂素类成分的含量测定方法。方法:采用HPLC法,Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;柱温为30℃;流动相为甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱,体积流量为1 m L/min;检测波长为217 nm。结果:12个木脂素成分分别在0.104~3.12、0.0054~0.162、0.0042~0.126、0.0212~0.636、0.028~0.84、0.0045~1.35、0.01246~0.3738、0.0227~0.681、0.00327~0.0981、0.0208~0.624、0.0536~1.608和0.00448~0.1344μg进样量与峰面积积分值线性关系良好(r≥0.9998)。结论:所建立的一测多评方法准确、灵敏度高、重复性好,可用于复方五仁醇胶囊质量评价。

复方五仁醇胶囊含药血清药源性成分分析

目的:分析大鼠服复方五仁醇胶囊后血清中的药源性成分。方法:以已经建立的高效液相色谱指纹图谱分析方法,比较复方五仁醇胶囊含药血清色谱图和空白血清色谱图,分辨该制剂给药后血清中产生的药源性成分,并通过对照品比对部分成分进行鉴定。结果:灌胃给药后血清中产生药源性成分13个,其中8个为制剂原形成分,包括五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素,其余5个为代谢产物。结论:复方五仁醇胶囊体内直接作用物质很可能出自血清中的13个药源性成分,结合血清药理学对其作进一步研究有助于阐明该制剂药效物质基础。

复方五仁醇胶囊抗氧化及抑制肝细胞凋亡的血清药理学研究

目的:研究复方五仁醇胶囊保肝作用的机理。方法:大鼠灌胃给予复方五仁醇胶囊制备含药血清,CCl4诱导原代培养大鼠肝细胞损伤模型,测定含药血清作用后细胞培养液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物岐化酶(SOD)活性,Annexin Ⅴ-FITC/PI双染色流式细胞仪定量检测细胞凋亡率。结果:与模型对照组比较,含药血清组MDA含量显著降低(P<0.01)、SOD活力显著增强(P<0.01),细胞早期凋亡率、晚期凋亡及坏死率显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论:复方五仁醇胶囊具有抗氧化和抑制肝细胞凋亡作用。

复方五仁醇软胶囊稳定性研究

目的:考察复方五仁醇软胶囊18个月的稳定性。方法:采用薄层色谱法和HPLC法,五味子醇甲采用色谱柱ODS-C18,流动相甲醇-水(65∶35),检测波长250 nm,流速1.0 mL/min;芍药苷采用色谱柱ODS-C18,流动相乙腈-水(15∶85),检测波长230 nm,流速1.0 mL/min。结果:五味子醇甲在0.04 mg/mL^0.64 mg/mL范围内线性良好,r=0.999 8,平均回收率为98.76%(n=6),RSD=1.18%;芍药苷在0.05 mg/mL^0.80 mg/mL范围内线性良好,r=0.999 9,平均回收率为97.93%(n=5),RSD=1.68%。结论:复方五仁醇软胶囊在按市售的包装及贮藏条件下,18个月质量基本稳定;充分验证复方五仁醇软胶囊的质量标准具有可测性。

HPLC法测定复方五仁醇软胶囊中芍药苷的含量

目的测定复方五仁醇软胶囊中芍药苷的含量。方法采用色谱柱ODS-C18,流动相:乙腈-水(15∶85),检测波长230nm,流速1.0ml/min。结果芍药苷在0.05～0.80mg.ml-1范围内线性良好,r=0.9999,平均回收率为97.93%(n=5),RSD为1.68%。结论本方法重现性好、简便易行,可作为复方五仁醇软胶囊中芍药苷含量的质控方法。

复方五仁醇胶囊主要含量质量控制的研究

目的：建立复方五仁醇胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及Rb1的FuP—HPLC含量测定方法。方法：Liehrosphere C18（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱，乙腈-水梯度洗脱，流速1．0ml／min，柱温30℃，检测波长203nm。结果：三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及Rb1分别在0．216-1．080μg（r=0．9995）、0．820-4．100μg（r=0．9999）和0．816-4．080μg（r=0．9995）范围内线性关系良好，平均回收率分别为97．38％、96．41％和96．91％。结论：该法简便、准确、分离效果好、专属性强，可用于复方五仁醇胶囊的质量控制。

HPLC法同时测定复方五仁醇软胶囊中绿原酸、芍药苷、五味子醇甲、五味子乙素

目的建立HPLC双波长法一次进样同时测定复方五仁醇软胶囊中绿原酸、芍药苷、五味子醇甲、五味子乙素4种主要有效成分含量的方法。方法采用Lichrospher C18色谱柱，流动相为乙腈-0．2％磷酸水，梯度洗脱，双波长检测（λ1=230nm、λ2=327nm），柱温35℃，体积流量1．0mL／min。结果绿原酸在316～19．75μg／mL（r=0．9991）、芍药苷在208～13μg／mL（r=1．000O）、五味子醇甲在656～41μg／mL（r=0．9998）、五味子乙素在484-30．25μg／mL（r=1．0000）范围内均成良好的线性。平均回收率分别为97．14％、98．41％、98．79％、102．16％，RSD分别为2．24％、2．85％、1．51％、0．68％（n=6）。结论本检测方法准确可靠、重复性好。可用于评价复方五仁醇软胶囊的质量。

反相高效液相色谱法测定复方五仁醇胶囊中2组分的含量

目的：建立以反相高效液相色谱法测定复方五仁醇胶囊中五味子醇甲和五味子乙素含量的方法。方法：色谱柱为Lichrosphere C18，流动相为水-甲醇（梯度洗脱），流速为1．0mL·min^-1，柱温为30℃。检测波长为254nm。结果：五味子醇甲、五味子乙素进样量分别在0．1824～1．641μg（r=1．0003）、0．1896～1．7064μg（r=0．9999）范围内与峰面积积分值线性关系良好；平均加样回收率分别为98．32％（RSD=1．02％）、97．22％（RSD=0．94％）。结论：本方法简便、准确、专属性强。可用于本品的质量控制。