GC-MS分析山茱萸挥发油的化学成分

用水蒸汽蒸馏法收集山茱萸挥发性成分,其浓缩的乙酸乙酯溶液用GC-MS法分离并分析鉴定了各组成及质量分数。共分离得到52个峰,鉴定了其中的45种,占总峰面积的93.16%。主要挥发性成分及面积归一化法含量为邻苯二甲酸二异丁酯(25.12%)、邻苯二甲酸二丁酯(18.85%)、乙酸(5.45%)、糠醛(4.64%)、1-二十二碳烯(3.07%)、E-5-二十碳烯(3.02%)、2.4-二苯基-4-甲基-2(E)-戊烯(2.53%)、邻苯二甲酸二甲酯(2.48%)、环二十四烷(2.18%)、1-十八碳烯(2.15%)、反-氧化芳樟醇(1.95%)等。

山茱萸中马钱苷在大鼠体内的药物动力学研究

目的:建立测定大鼠血浆中马钱苷浓度的方法,研究并比较了口服马钱苷单体和山茱萸提取液后马钱苷在大鼠体内的药物动力学过程,考察了马钱苷单体口服后的绝对生物利用度。方法:利用 HPLC 法,色谱柱为反相 C_(18)柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(32∶68),流速为1 mL·min^(-1),检测波长236 nm。结果:线性范围15.25～7625 ng·mL^(-1),日内与日间 RSD<15%,回收率93.5%～109.3%。灌胃给药后马钱苷单体消除 t_(1/2)为93.6 min,绝对生物利用度为13.2%;山茱萸提取液中马钱苷消除 t_(1/2)为99.4 min,相对马钱苷单体口服给药的生物利用度为19.4%。结论:马钱苷单体口服生物利用度较低。本文方法灵敏度高,操作方便,适合于马钱苷的药动学研究。

超临界CO_2流体萃取山茱萸中熊果酸的研究

目的研究超临界CO2萃取山茱萸中熊果酸的工艺条件。方法探讨萃取压力、萃取温度、萃取时间、CO2流量、夹带剂类型及用量对熊果酸收率的影响,确定了超临界CO2萃取山茱萸中熊果酸的适宜条件,并将超临界CO2萃取法与传统的有机溶剂提取法进行了比较。结果超临界萃取最优条件:萃取压力35.0M Pa,萃取温度318K,选择无水乙醇为夹带剂,夹带剂体积分数为4%,萃取时间3 h,CO2流量为8 kg/h。结论超临界CO2萃取法提取熊果酸比传统提取方法收率高,安全有效。

山茱萸不同栽培品种的RAPD分析

目的分析山茱萸不同栽培品种之间的遗传关系,为山茱萸品种选育提供依据。方法采用改良后的CTAB法从山茱萸叶片中提取总DNA,进行RAPD分析;采用SPSS10.0软件计算DICE遗传相似性系数,Be-tween-groupslinkage方法聚类,构建亲缘关系树系图。结果共筛选出22个10个碱基随机引物用于PCR扩增,12个样品获得了133条带,其中多态性条带75条,占56.39%。聚类分析结果表明纺锤形果型自成一类,短梨形果型与短圆柱形果型聚为一类,其余几种较长大的果型聚为一类,反映了栽培过程中人为选择的后果。结论实验结果与山茱萸栽培品种的生物特性和区域分布基本一致;RAPD分析可作为对山茱萸品种选育的辅助手段。

超声波法提取山茱萸中熊果酸的工艺研究

采用L9(34)正交试验,考察超声功率(A)、时间(B)、溶媒用量(C)和频率(D)4个因素对熊果酸提取的影响.得出超声波法提取山茱萸中熊果酸的最佳工艺参数:用15倍量无水乙醇浸泡24 h在输入功率40%下超声10 m in.

正交设计优化山茱萸ISSR-PCR反应体系研究

利用正交试验设计法，从引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、Mg^2＋浓度和dNTP浓度4种因素3个水平，对山茱萸ISSR—PCR反应体系进行优化分析，并在此基础上对模板DNA浓度、PCR反应过程中的退火温度进行梯度检测．结果表明，20弘LISSR—PCR反应体系中各因素的最佳浓度分别为：1×PC Rbuffer、150μmol／LdNTP、1．0μmaol／L引物、2．5mmol／L Mg^2＋和2．0U TaqDNA聚合酶，最佳模板DNA浓度为20-80ng，引物UBC835的最佳退火温度为57．2℃．

超声波辅助提取山茱萸多糖的实验研究

在单因素实验基础上,采用正交设计和方差分析,研究超声时间、提取温度、料液比对山茱萸多糖提取得率的影响,以山茱萸多糖提取得率作为评价指标,筛选出最佳提取条件为:超声波预处理40 min,提取温度80℃,料液比1∶30。在此条件下,山茱萸多糖平均提取得率为5.29%;超声法提取与传统热水醇沉法比较,山茱萸多糖提取得率无显著性差异,但耗能较少,提取效率更高。超声波辅助提取法可作为山茱萸多糖提取的一种有效方法。

膜技术制备山茱萸皂苷的研究

以山茱萸皂苷转移率和除杂率为评价指标，进行微滤和超滤实验，对操作压差、温度和膜的孔径进行优选。结果表明：使用60％乙醇为溶剂，选择孔径0．45μm的陶瓷膜，在溶液温度50℃、过滤压差0．15～0．2 MPa条件下，能达到较好去除提取液中的大分子胶体或细小固体微粒悬浮物的效果；选择截留相对分子质量为10 KD的超滤膜，在溶液温度40℃、操作压力0．4～0．6 MPa条件下，脱除蛋白，部分色素等杂质的效果较好。膜分离技术能有效分离、纯化山茱萸皂苷，工艺简单、效率高。

高效液相色谱法测定山茱萸中齐墩果酸的含量

目的：建立山茱萸中齐墩果酸含量测定的方法。方法：高效液相色谱法，SHIM-PACK VP-ODS（250mm×4．6mm）色谱柱，甲醇-0．05mol／L乙酸铵溶液（84：16）为流动相，检测波长：210nm，柱温：30℃，流速：1mL／min。结果：在0．010～0．320mg／mL范围内呈良好线性关系，回归方程为Y=1．3052×10^7×C＋2745．1552，r=0．9999，n=7，平均回收率为101．6％，RSD为1．45％。结论：HPLC法可使熊果酸和齐墩果酸达到基线分离，简便准确，可用于药材质量监控。

山茱萸多糖大孔树脂脱色技术的优化

以脱色率、多糖保留率和细胞抑制率3个指标,从D301、D303、D315、D900树脂筛选出脱色效果较好的树脂;采用MTT法检测,脱色后的山茱萸粗多糖抗HL-60细胞活性提高;对D303树脂,通过单因素和正交试验对其进行优化,确定最优工艺条件是时间7 h、温度50℃、样品浓度15 mg/m L,脱色率和多糖保留率分别为79.71%、81.12%。大孔树脂脱色工艺的研究,为山茱萸药物的研发提供了一定实验基础。

山茱萸多糖提取中蛋白质去除方法的研究

目的:比较Sevag法、酶法、酶法-Sevag法,选择最优的脱蛋白方法,为山茱萸多糖的分离纯化、结构鉴定提供实验基础。方法:以多糖损失率、蛋白质脱除率和蛋白质含量为评价指标,选用Sevag法、酶法和酶-Sevag法分别对山茱萸粗多糖进行脱蛋白。对酶法进行正交试验,筛选最优的工艺。结果:Sevag法、酶法、酶-Sevag法的蛋白脱除率分别为84.50%、78.55%、81.24%,多糖损失率分别为61.30%、28.54%、10.13%;酶法最优工艺条件是酶量4.0%、时间2 h、温度60℃、pH值6.8。结论:酶-Sevag法是山茱萸粗多糖脱蛋白最有效方法。

《药用植物学》授课实例与体会

以《药用植物学》中被子植物门山茱萸科植物山茱萸为例,以完成教学大纲要求为基本原则,结合多年教学实践和感受,从说课、教法、学法和课件制作等方面进行探讨。实践证明,此举不仅有助于教师教学水平的提高,还能调动学生的主动性,提高教学质量。

山茱萸叶挥发性成分的SHS-GC-MS分段分析

分析山茱萸叶中的挥发性成分及其变化规律。采用静态顶空进样技术,在不同温度段下,采集山茱萸叶中的挥发性成分,并结合GC-MS对其进行定性分析。山茱萸叶在不同温度下分别鉴定出了80种、93种和85种成分。结果显示,山茱萸叶中的挥发性成分主要由醇类、萜烯类、酯类、醛酮类、酚酸类、烃类、呋喃类及其他类成分组成;且主要为醇类及醛酮类成分,其中,醇类成分质量分数分别为17.532%,23.482%,29.583%,醛酮类成分质量分数分别为56.197%,51.846%,35.189%;低温条件下质量分数较高的特殊成分有(1R)-(+)-α-蒎烯(8.870%)、4-甲基环己醇(5.105%);中温条件下质量分数较高的特殊成分是己基过氧化氢(2.098%);高温条件下质量分数较高的特殊成分有3-糠醛(2.286%)、正己醇(2.585%),β-月桂烯(2.439%)和1-氯十一烷(3.610%)。该研究采用静态顶空进样技术对3个温度段下山茱萸叶中的挥发性成分分析表明,不同温度下其挥发性成分及其含量存在一定的差异。该研究结果为进一步开发和利用山茱萸叶奠定了基础。

胶束电动毛细管色谱法测定山茱萸中莫罗苷和番木鳖苷的含量

目的:建立胶束电动毛细管色谱法测定山茱萸中莫罗苷和番木鳖苷含量。方法:探讨了运行缓冲液中硼酸浓度、胶束(SDS)浓度、有机改性剂(乙腈)比例和 pH 对两组分迁移时间的影响。采用胶束电动毛细管色谱内标法定量。用未涂层石英玻璃毛细管(60 cm×75 m,有效长度45 cm),检测波长240 nm,重力进样(10 cm×5 s),运行电压14 kV,温度20℃,运行缓冲液为0.2 mol·L^(-1)硼酸-0.02 mol·L^(-1)SDS-5%乙腈(0.1 mol·L^(-1)氢氧化钠溶液调节 pH 至10.5)。进样前以0.5 mol·L^(-1)氢氧化钠溶液和运行缓冲液各冲洗3 min。结果:莫罗苷和番木鳖苷分别在16.9～339μg-mL^(-1)(r=0.9994)和20.3～406μg·mL^(-1)(r=0.9998)的范围内呈良好线性相关;莫罗苷和番木鳖苷的平均回收率分别为98.2%(RSD=2.4%)和96.7%(RSD=3.3%)。结论:该方法简便快速、准确,重复性好,为山茱萸药材的质量控制提供了一种新的方法。

山茱萸保健酒发酵工艺初步研究及有效成分马钱苷含量测定

采用高效液相色谱法建立了山茱萸有效成分马钱苷的含量测定方法。试验条件为Phenomsil C18BDS色谱柱;柱温为35℃;马钱苷检测波长为236 nm;流动相为乙腈-水(14:86);流速为1.0 mL/min。经方法学考察表明该测定方法精密度高,稳定性好。对山茱萸保健酒发酵工艺进行初步研究,添加不同量葡萄酒活性干酵母进行发酵,通过发酵曲线和发酵液的酒精度、营养及有效成分分析,结合风味感官评定,确定了最佳葡萄酒活性干酵母添加量为0.5 g/L。

正交试验优选加压酒制山茱萸炮制工艺

目的优选加压酒制山茱萸炮制工艺。方法以山茱萸中马钱苷、莫诺苷、熊果酸、齐墩果酸的质量分数为评价指标,采用正交设计法考察加酒量、闷润时间、蒸制时间和蒸制温度对炮制工艺的影响,确定最佳山茱萸加压酒制工艺。结果最佳炮制工艺参数:加酒量为药材量的25%,闷制时间为30 min,蒸制时间为60 min,蒸制温度为115℃。山茱萸炮制品外观色泽为紫黑色有光泽,炮制品的质量稳定。结论结合山茱萸炮制品的质量及外观色泽,优选的加压炮制工艺能够节约时间,保证质量,是一种能够适用于山茱萸企业规模化生产的炮制方法。

醇提山茱萸皂甙的体外抗氧化活性研究

以山茱萸为原料,从中提取、纯化总皂甙。采用超氧阴离子自由基、过氧化氢自由基、羟基自由基、烷基自由基引发的亚油酸氧化体系及DPPH(二苯代苦味酰肼自由基)自由基对醇提山茱萸皂甙的体外抗氧化活性进行研究,并同VC进行比较。结果表明,醇提山茱萸皂甙对这几种自由基均有不同程度的清除作用,其中对超氧阴离子自由基、烷基自由基的清除能力较好,且在一定浓度范围内清除能力远远高于VC;对DPPH自由基的清除能力略高于VC,对羟基自由基的清除能力与VC相当,对过氧化氢自由基清除能力低于VC。因此山茱萸皂甙是一种较好的天然抗氧化剂。