凋亡相关分子PF18-3在ConA诱导活化后胸腺细胞凋亡中的表达特性分析

对抗体PF18-3识别分子(PF18-3分子)在胸腺细胞活化后凋亡过程中的表达特性进行了观察分析,结果表明:经ConA活化后胸腺细胞经历活化后凋亡,表现为DNA梯状片段产生的时相后移,活化后期细胞TUNEL染色阳性。经FACS门技术分析确认,PF18-3分子在亚二倍体高含量的凋亡胸腺细胞亚群特异表达。与凋亡相关的Fas和膜磷脂易位表达的动态比较提示,PF18-3分子与前两类分子不同,可能为新型胸腺细胞凋亡相关分子。

ConA活化的灭活自身T细胞免疫增强小鼠肿瘤免疫的研究

本研究发现用ConA活化的灭活自身T细胞皮下免疫C57BL/6J小鼠后,能够明显抑制小鼠淋巴瘤细胞株(EL-4)在体内生长,小鼠生存时间延长。对其作用机制研究发现,Th1型细胞因子分泌增加,而外周血调节性T细胞(Treg)数量减少,对效应性T细胞的抑制功能减弱。进一步分析Treg减少的研究表明:免疫后小鼠血清中抗CD25抗体增多,血清过继转移实验证实正常小鼠接受了免疫小鼠血清后其体内的CD4+CD25+Treg减少。因此,本研究提示用ConA活化的灭活自身T细胞免疫可以通过上调Th1细胞活性、降低Treg数量和功能而增强抗肿瘤的免疫反应,达到抑制肿瘤的生长效应。

VitD3对Th细胞极化的调节作用研究

目的研究VitD3对Th细胞分化的影响及可能的机制。方法无菌分离BALB/c小鼠细胞脾细胞,2.5μg/ml的ConA 加入刺激脾细胞,在不同时间段加入不同剂量的VitD3,72h后收集细胞,3H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖活性,RT-PCR方法检测参与Th细胞分化的细胞因子的mRNA表达水平。结果VitD3呈剂量依赖抑制ConA诱导的淋巴细胞的活化,10-5mol/L的VitD3对ConA诱导的淋巴细胞活化的抑抑制作用最强;该抑制作用与作用时间的长短呈相关性,ConA活化淋巴细胞24h后加入VitD3对淋巴细胞活化的抑制作用最显著,并且淋巴细胞的活化程度越低,VitD3对其抑制作用越强。VitD3可增强经ConA活化的淋巴细胞Th2型细胞因子(IL-4、IL-6)mRNA的表达水平,而Th1型细胞因子(IFN-γ、TNF-α)的mRNA的表达水平显著性下降(P<0.05)。结论VitD3可抑制ConA刺激的淋巴细胞增殖活性,但亦可增强Th2细胞的分化。

吗啡依赖小鼠免疫功能的变化

以饮用吗啡药水法建立小鼠依赖模型,探讨其免疫机能的改变。发现,与对照组比较,依赖小鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)吞噬中性红能力下降,LPS 10μg·ml^(-1)诱生的IL-1及TNF活性降低。吗啡亦抑制Con A/LPS刺激的胸腺细胞和脾细胞参入[~3H]TdR,使DNFB所致迟发型过敏反应下降。若脾细胞单独或与Con A 3μg·ml^(-1)共同培养24h,成瘾小鼠产生IL-2的能力皆明显弱于对照。但Con A活化3d的脾母细胞对重组IL-2的反应性以及产生抗SRBC的空斑形成细胞数和抗体的水平,在二组之间均未见差异。

巨噬细胞对内皮细胞系同源盒B2基因和血管内皮生长因子受体mRNA及整合素ανβ3表达的影响

目的 体外观察巨噬细胞(M)对血管内皮细胞同源盒(HOX)B2基因mRNA和血管内皮生长因子(VEGF)受体KDRmRNA及整合素ανβ3表达的影响。 方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞系ECV304,分为(1)ECV304组; (2)ECV304 +伴刀豆球蛋白A(conA,终浓度25mg/L)组; (3)ECV304+人M系U937组:ECV304细胞中加入1×105 /mlU937细胞; (4)ECV304+U937+conA组:ECV304中加入1×105 /mlU937细胞及终浓度25mg/L的conA.反应48h后,用免疫荧光技术检测各组ECV304细胞整合素ανβ3的表达情况,并用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)技术检测细胞KDRmRNA和HOXB2基因mRNA的表达水平。 结果 ECV304组细胞的整合素ανβ3、KDRmRNA及HOXB2基因mRNA的表达水平分别为6. 7±1. 5、0. 633±0. 012、0. 674±0. 004。ECV304+U937+conA组细胞上述指标较ECV304组均明显上调(P<0. 01 ),分别为10. 2±1. 7、0. 879±0 003、0. 947±0 003。其余两组细胞上述指标与ECV304组比较,差异均无统计学意义(P>0. 05).结论 被conA活化的M通过影响内皮细胞的KDRmRNA、HOXB2mRNA基因及整合素ανβ3的表达,来促进内皮细胞增殖、迁移及与基质黏附,从而调节血管生成。