CO_2激光碳化尖锐湿疣残存HPV DNA活性的实验研究

对20例尖锐湿疣(CA)患者,局部皮损经CO2激光治疗后,碳末DNA进行PCR扩增,并与正常角质形成细胞(KC)培养,观察KC增殖情况,观察其是否具有活性。结果发现:碳末DNAPCR扩增,40%阳性,碳末DNA对KC有明显抑制作用。从而推断碳末DNA仍有活性,可能是引起该病复发的原因之一。

反向点杂交法快速检测HPV基因型的临床应用

应用反向点杂交法（ＲＤＢ）的原理，针对ＨＰＶ６Ｂ，１１，１６，１８，３１，３３和３５设计了７条序列作为未标记的特异性寡核苷酸（ＳＳＯ）探针，分别固定在尼龙膜条上，形成７个点，再与经ＰＣＲ扩增的样品ＤＮＡ序列杂交，即可在一个膜条上分辨出这７型ＨＰＶ中的任一型．此法快速简便，特异性高，不存在假阳性；且因ＰＣＲ灵敏度高，亦不易出现假阴性．用ＰＣＲＲＤＢ法检测保存的宫颈癌组织石蜡包埋标本３２例，结果：ＨＰＶ１６阳性２２例（６８８％），ＨＰＶ１８阳性５例（１５６％），ＨＰＶ１６／１８双重感染２例（６３％），阴性仅３例（９３％）．

PCR在检测女阴尖锐湿疣HPV．DNA的应用

我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对２８例女性生殖道尖锐湿疣标本中ＨＰＶ６和１１型进行检测。结果表明：１７例具有典型组织学特征（空化细胞）和８例组织学特征非典型标本中均检出ＨＰＶ６和（或）１１型病毒。３例原病理诊断为假性湿疣标本中有１例也检出ＨＰＶ６型病毒。本文结果证明ＰＣＲ是诊断尖锐湿疣快速，简便，高敏感和特异性强的方法。病因不明的假性尖锐湿疣的发生与ＨＰＶ感染也有一定的关系。

性病门诊患者HPV-DNA荧光定量检测结果分析

目的分析性病门诊患者HPV-DNA荧光定量检测结果。方法采用荧光定量聚合酶链反应技术（FQ-PCR）对102例性病门诊患者进行HPV-DNA分型检测。结果 102例患者中HPV6/11型阳性率为27.66%,HPV16/18型阳性率为9.09%,分型结果以HPV6/11型为主,而HPV6/11型感染主要集中在20~40岁,其中20~30岁阳性率最高;HPV16/18型感染年龄均在40岁以上,其中以41~50岁较高,男、女HPV阳性率分别为7.89%和23.44%,差异有显著性。结论 HPV6/11型是HPV感染的主要型别,荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）可作为尖锐湿疣诊断的指标,应加强对性病门诊患者的HPV检测。

一例尖锐湿疣皮损内含HPV11型和HPV31型混合感染的实验研究

目的探讨尖锐湿疣(CA)患者临床特征和其皮损内HPV型别的关系。方法收集临床尖锐湿疣(CA)患者的临床资料和疣组织,以通用引物PCR,型特异性引物PCR和测序分析的方法确定尖锐湿疣皮损内HPV型别。结果发现了一例巨大尖锐湿疣皮损内含HPV11型和HPV31型混合感染。结论尖锐湿疣皮损内可能含不同型别HPV的混合感染。

应用PCR技术检测尖锐湿疣患者HPV感染

取尖锐湿疣的３０例患者外阴湿疣标本和宫颈分泌物及同期非尖锐湿疣患者宫颈分泌物，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测其中ＨＰＶ６１１ＤＮＡ和ＨＰＶ１６１８ＤＮＡ。结果表明，尖锐湿疣患者宫颈人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）检出率显著高于非尖锐湿疣患者，以ＨＰＶ６１１为主，ＨＰＶ１６１８在二者之间无差别。提示外阴尖锐湿疣主要由ＨＰＶ６１１感染引起，应用ＰＣＲ技术检测湿疣组织中ＨＰＶＤＮＡ可为疾病诊断提供客观依据。

用PCR检测新疆部分女性尖锐湿疣与宫颈上皮内瘤变组织HPV的初探

应用多重引物人乳头瘤病毒(HPV)6b、11、16、18型聚合酶键反应(PCR)技术检测74例新疆南疆、北疆部分地区女性下生殖道尖锐湿疣(CA)与宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中人乳头瘤病毒DNA(HPV DNA).其中在南疆检测出CA17例,CIN Ⅲ级20例,在北疆检测出CA22例,CINⅠ～Ⅲ级2例,CINⅢ级13例.结果:总HPV DNA检出率分别为94.1%、90.0%、90.9%、86.7%.CIN与CA患者的HPVDNA检出率在地区性方面无显著性差异(P>0.05).在南、北疆患者CA组织中HPV6b、11、16、18型检出率分别为89.7%、12.8%、5.1%.CIN组织中HPV6b、11型检出率为0%,HPV16、18型检出率分别为65.7%、20%.提示CA与HPV6b、11型感染有关,CIN则与HPV16、18型密切相关.并且在南、北疆CA与CIN患者所感染的HPV亚型无地理分布差异(P>0.05).CIN组织中,HPV16、18型检出率较国内外报道高,值得重视;CA组织中,检出HPV高危型(HPV16、18型)7例,其中1例伴宫颈不典型增生Ⅰ～Ⅱ级,这些病例应继续密切随访.

应用间接法原位PCR技术检测尖锐湿疣组织中HPV感染

应用间接原位ＰＣＲ技术，对３２例经ＨＰＶ６ｂ、１１型探针原位杂交检测呈阴性结果的尖锐湿疣组织进行了再次检测。在光镜下诊断为尖锐湿疣的１０例中，有４例为阳性，阳性率为４０％，符合尖锐湿疣的２２例中，有８例为阳性，阳性率为３６．４％，总的再次检出率为３７．５％（１２／３２）。结果提示：间接法原位ＰＣＲ能够克服原位杂交方法的假阴性，明显提高检出率，并具有结果可靠，特异性强的特点。

细辛抗人乳头瘤病毒的作用研究

目的 :筛选细辛抗人乳头瘤病毒 (HPV)的有效部位。方法 :用系统溶媒 (石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、蒸馏水 )对细辛依次进行提取 ,应用荧光定量聚合酶链反应技术 (FQ PCR)对各提取物进行体外抗病毒药效学试验 ,检测离体尖锐湿疣皮损中HPV DNA的扩增情况。结果 :HPV DNA经细辛水提物作用后 ,其PCR扩增检测为阴性 ,最低有效浓度为 0 4 g/ml,而细辛其它提取部位PCR扩增检测为阳性。结论

复方杠柳液外用治疗尖锐湿疣临床观察及对离体人乳头瘤病毒DNA的影响

目的观察中药复方杠柳液治疗尖锐湿疣(condylomaacuminatum ,CA)的临床疗效,并从分子水平探讨其作用机理。方法将81例尖锐湿疣患者,随机分为复方杠柳液(30例)、杠柳浆(2 1例)、尤脱欣(30例) 3组,评定各组疗效及不良反应发生率。采用聚合酶链反应技术(polymerasechainreaction ,PCR) ,检测2例离体尖锐湿疣疣体中人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)DNA经复方杠柳液及其君药杠柳浆作用后的变化。结果复方杠柳液、杠柳浆、尤脱欣3组的痊愈率分别为56. 67%、42 . 86%、63 .33% ;总有效率分别为83 .33%、71. 43%、86. 67% ,3组疗效比较差异无显著性。复方杠柳液、杠柳浆、尤脱欣3组的不良反应发生率分别为6. 67%、4 .76%、86. 67% ,差异有显著性(P <0 . 0 1) ;复发率分别为14 .3%、12 . 5%、47. 1%。两份不同及相同浓度疣体匀浆混悬液经复方杠柳液、杠柳浆作用后PCR均阴性,未经药物处理的生理盐水组PCR均阳性。结论复方杠柳液、杠柳浆、尤脱欣3组最终疗效相近,复方杠柳液及杠柳浆组不良反应少、复发率低。该药对离体CA组织中的HPV- DNA可能有破坏作用。

疣毒净霜剂的研制及其体外药效学

目的 :研制治疗尖锐湿疣的疣毒净霜剂 ,并进行其抗人乳头瘤病毒 (HPV)的体外药效研究。方法 :以鸦胆子、紫草、莪术、细辛等为主药 ,制备水包油型霜剂。将霜剂作用于离体尖锐湿疣皮损组织中的HPV ,应用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)技术 ,通过定量检测HPV DNA的扩增情况 ,研究其抗病毒作用。结果 :经疣毒净霜剂作用后 ,DNA扩增受到抑制 ,检测结果为阴性 ;而对照组的DNA数则达每 1mL 1× 1 0 7拷贝 ,扩增没有受到抑制 ,结果为阳性。结论 :疣毒净霜剂制备工艺简单、稳定性好 ,具有明显的抗人乳头瘤病毒作用。

尖锐湿疣患者病损部位高危型人乳头瘤病毒的检测及其临床意义

目的了解尖锐湿疣(CA)患者高危型(16、18型)人乳头瘤病毒(HPV)的感染情况及其临床意义。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对41例CA患者(扁平形16例,乳头形/菜花状25例)病损部位进行HPV16、18型DNA检测,又根据其发病次数分为初发和复发2组,分别有29例和12例,观察高危型HPV的感染率、病毒DNA含量及各组间的差异。结果CA患者高危型HPV的感染率为43.90%,与对照组(3.85%)比较差异有显著性(P<0.01)。扁平形和乳头形/菜花状CA患者高危型HPV的阳性率分别为18.75%和60.00%,2组比较也有明显差异(P<0.01);2组间病毒DNA含量比较差异无显著性(P>0.05)。初发和复发者HPV16、18型感染率及其DNA含量检测结果差异均无显著性(P>0.05)。25例乳头形/菜花状CA患者的疣体组织阳性率为36%,其表面分泌物的阳性率为52%。结论CA患者高危型HPV的感染率显著高于普通人群。乳头形/菜花状CA中高危型HPV感染率较扁平形明显升高。CA的复发与否可能与高危型HPV的感染无必然联系。同时检测疣体组织和分泌物的高危型HPV可提高检出率。

柴胡对人乳头瘤病毒杀灭作用的实验研究

目的筛选柴胡抗人乳头瘤病毒(HPV)的有效成分。方法用溶媒(石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、蒸馏水)对柴胡分别进行提取,应用荧光定量聚合酶链反应技术(FQ-PCR)对各提取物进行体外抗病毒药效学实验,检测离体尖锐湿疣皮损中HPV-DNA的扩增情况。结果HPV-DNA经柴胡水提物作用后,其PCR扩增检测为阴性,最低有效浓度为0.2g/mL,而用其他有机溶剂提取部分PCR扩增检测为阳性。结论柴胡的水提成分有抗人乳头瘤病毒作用。

中药紫草对离体人乳头瘤病毒DNA作用的实验研究

目的:筛选紫草抗人乳头瘤病毒(HPV)的有效部份。方法:用系统溶媒(石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、蒸馏水)对紫草依次进行提取,应用荧光定量聚合酶链反应技术(FQ-PCR)对各提取物进行体外抗病毒药效学试验,检测离体尖锐湿疣皮损中HPV-DNA的扩增情况。结果:HPV-DNA经紫草水提物作用后,其PCR扩增检测为阴性,最低有效浓度为0.2 g/mL,而紫草其它提取部份PCR扩增检测为阳性。结论:紫草的水提部份对人乳头瘤毒有破坏作用。

用分子生物学技术检测人乳头瘤病毒并分型

应用PCR技术,取227例患者下生殖道赘生物分泌物或活组织进行HPV DNA检测。211例可疑HPV感染者,HPV阳性者121例(57.35％)174例次,其中48例次(27.59％)为18型,31例次(17.82％)为16型,95例次(54.60％)为11/6b型。另16例中宫颈癌7例,HPV18型者6例次,11/6b型3例次;外阴癌2例均为18型;卵巢癌2例均为18型;宫颈不典型增生1例为11/6b型。余4例HPV阴性均为与感染无关的盆腔疾病。

新鲜与石蜡包埋CA组织中的病毒检测

目的：对尖锐湿疣（ＣＡ）中的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）及人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）进行检测。方法：采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）。结果：新鲜湿疣中ＨＰＶ阳性率为８０．８％，其中ＨＰＶ１１／６ｂ（＋）者１９例，ＨＰＶ１６（＋）者２例。石蜡包埋组织中ＨＰＶ阳性率为５８．３％。５例ＨＰＶ强阳性的湿疣组织ＨＣＭＶ检测全部阴性。结论：新鲜组织的ＨＰＶ检出率高于石蜡包埋组织；部分湿疣由ＨＰＶ１６感染所致，应注意其恶变倾向；本文结果不支持ＣＡ中ＨＰＶ与ＨＣＭＶ复合感染的可能。

尖锐湿疣患者人乳头状瘤病毒感染检测

目的:了解尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)患者的人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染情况。方法:应用荧光定量PCR技术对68例CA患者和160例CA亚临床患者进行HPV6型、11型、16型和18型检测。结果:男性患者和女性患者的HPV阳性率分别为78.99%和77.78%,差异无统计学意义(P>0.05);CA患者疣体组织和亚临床患者皮损标本的检出率分别为95.59%和71.25%,差异有统计学意义(P<0.01);179例HPV阳性病例中,感染HPV6型、11型占76.54%,感染HPV16型、18型占8.94%,HPV6型、11型、16型和18型混合感染占14.52%。结论:CA患者HPV感染无性别差异,且疣体组织的检出率高于其他皮损标本,HPV感染以低危型的6型和11型为主。

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒检测的临床意义

目的探讨尖锐湿疣(CA)患者人乳头瘤病毒(HPV)定量测定与HPV分型的关系。方法用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对133例CA患者疣体组织进行HPV分型及HPV DNA定量检测。结果 133例CA患者经二氧化碳激光治疗后治愈93例,复发40例。133例标本中检出HPV DNA阳性131例(98.50%),110例(82.71%)基因型为HPV6/11,12例(9.02%)为HPV16/18,9例(6.77%)为HPV6/11合并HPV16/18。133例标本中检出HPV DNA阳性131例,阳性率为98.50%。HPV16/18和HPV6/11合并HPV16/18型阳性率均低于HPV6/11型,差异均有统计学意义(P<0.01)。HPV病毒载量不同患者的复发率并无明显差异(P>0.05)。HPV16/18和HPV6/11合并HPV16/18型复发率均高于HPV6/11型(P<0.05或P<0.01)。结论 CA检测HPVDNA能区分高危型HPV和低危型HPV感染,可对CA复发及癌变进行预测。

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒检测的临床意义

目的探讨尖锐湿疣（CA）患者人乳头瘤病毒（HPV）DNA定量测定及HPV分型。方法用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）对133例CA患者疣体组织进行HPV分型和HPV DNA定量检测。结果133例CA患者经二氧化碳激光治疗后有93例治愈,40例复发。HPV亚型分析显示,133例标本中检出HPV DNA阳性131例（98.50%）,110例（82.71%）基因型为HPV6/11,12例（9.02%）为HPV16/18,9例（6.77%）为HPV6/11合并HPV16/18。对131例HPV DNA阳性患者治疗前病毒载量进行分组比较,病毒载量为10^3-10^5拷贝/mL的患者50例,有11例患者复发;病毒载量10^5-10^7拷贝/mL的患者39例,有14例患者复发;病毒载量为〉107拷贝/mL的患者42例,有15例患者复发。HPV6/11有23例复发,HPV16/18有10例复发,HPV6/11合并HPV16/18有7例复发。结论CA检测HPV DNA能区分高危型HPV和低危型HPV感染,可对CA复发及癌变进行预测。

咪喹莫特抑制尖锐湿疣患者外周血TLR4的表达

目的研究咪喹莫特对尖锐湿疣患者外周血ToL1样受体(TLR)4表达的影响。方法利用荧光定量聚合酶链反应法,测定16例尖锐湿疣患者治疗前后外周血及16例正常对照者外周血中TLR4mRNA的定量表达。结果尖锐湿疣患者外周血中TLR4mRNA的表达高于正常对照者外周血的表达水平(t=10.82,P<0.001)。尖锐湿疣患者经过咪喹莫特治疗8周后,皮损消退,外周血中TLR4mRNA的表达水平低于患者治疗前的表达水平(t=10.74,P<0.001),但与正常对照者的表达水平差异无统计学意义(t=1.05,P=0.300 8)。结论TLR4的表达增高与尖锐湿疣的发病有关。咪喹莫特抑制尖锐湿疣外周血TLR4mRNA的过度表达,可能是咪喹莫特治疗尖锐湿疣的作用机制之一。