5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣的疗效及其对患者病灶HPVDNA载量的影响

目的观察5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)对尖锐湿疣患者的治疗效果,并检测病灶局部人乳头瘤病毒(HPV)6/11型DNA载量的变化。方法将2011年3月至2014年3月于我院皮肤性病科门诊接受治疗的100例尖锐湿疣采用随机数表法将患者随机分为观察组和对照组各50例,观察组给予5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗,对照组给予传统电离子手术治疗。观察两组患者治疗后的HPV 6/11型DNA载量、病毒转阴、近期疗效、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平、复发及不良反应情况,并进行对比分析。结果治疗3个月后,观察组病毒载量为(0.2±0.6)×106copies/ml,明显低于对照组的(1.3±2.2)×106copies/ml,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组的HPV DNA阴转率为89.7%,对照组为68.4%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗有效率为90.0%,明显高于对照组的56.0%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后3个月,观察组TNF-α水平高于对照组,而IL-6水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组的复发率及不良反应发生率分别为8.0%、16.0%,明显低于对照组的30.0%、46.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ALA-PDT能有效降低尖锐湿疣患者病灶局部HPV病毒载量,其复发率及不良反应发生率较传统治疗方法低。

尖锐湿疣及湿疣样病变中HPV6／11DNA原位杂交的观察

对４８例生殖道尖锐湿疣（ＣＡ）及湿疣样病变常规石蜡包埋组织切片进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６／１１型ＤＮＡ原位分子杂交及病理组织学观察，在１２例ＣＡ中９例（７５％）和湿疣样病变中１例（２．７％）检出ＨＰＶ６／１１ＤＮＡ，阳性细胞位于鳞状上皮中表层的凹空细胞及其周围细胞核内。在ＣＡ与湿疣样病变的鉴别诊断中，ＨＰＶ６／１１ＤＮＡ原位杂交检测具有重要的价值。

宫颈癌组织HPV16DNA相关序列检测与临床分析

用Southern blot核酸杂交技术检测宫颈组织HPV 16 DNA相关序列。山东省儿6例宫颈癌病人的癌组织HPV 16 DNA相关序列阳性率为50.9％,36例无宫颈疾病妇女的宫颈组织阳性率为5.6％,宫颈癌与HPV 16感染有很强的联系,OR=17.60,x^2=23.47,P<0.001.HPV 16 DNA相关序列阳性率与宫颈癌病人的年龄、肿瘤的组织类型、临床类型及临床分期均无统计学联系(P均大于0.25).本文首次从山东省宫颈癌病人癌组织中检测到HPV 33 DNA4例及HPV31 DNA 1例。

HPV核酸探针斑点杂交技术在诊断尖锐湿疣中的应用

目的 :评估人类乳头状瘤病毒 (HPV)核酸斑点杂交技术在诊断尖锐湿疣中的价值。方法 :采用地高辛标记的HPV分型核酸探针斑点杂交技术 ,对 5 0例外阴、阴道尖锐湿疣和 2 6例保存的尖锐湿疣病理石蜡标本进行HPVDNA检测。结果 :5 0例临床标本阳性率为 84.0 % ,2 6例病理标本阳性率为 84.6 % ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :斑点杂交技术结合组织病理学检查对尖锐湿疣有诊断价值。

卡介菌多糖核酸对尖锐湿疣病人外周血CD8^+T细胞细胞因子表达影响

目的:研究卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)对尖锐湿疣(CA)病人外周血CD8q+T细胞内白细胞介素类(IL-2、IL-4、IL-12)和干扰素γ(IFN-γ)表达的影响。方法:60例CA病人分为2组,均采用CO_2激光去除疣体。BCG-PSN组40例,激光术后开始加用BCG-PSN 1.0mg,im,qod,连续18次,36d为一个疗程。病例对照组20例,激光术后未再用任何药物治疗。另设正常对照组20例。采用流式细胞仪测定3组外周血CD8+T细胞IL-2、IL-4、IL-12、IFN-γ的水平。结果:治疗前CA病人外周血IL-2、IL-12和IFN-γ阳性CD8+T细胞百分率显著低于正常对照组,Tcl/Tc2亦显著低于正常对照组(P<0.01)。治疗后BCG-PSN组外周血IL-2、IL-12和IFN-γ阳性CD8+T细胞百分率显著升高(P<0.01),病例对照组无显著变化(P>0.05),2组变化差异非常显著(P<0.01)。BCG-PSN组治愈率82％,显著高于病例对照组(45％,P<0.01);复发率18％,低于病例对照组(55％,P<0.01)。结论:CA病人存在Tcl/Tc2失调,BCG-PSN可通过上调CA病人外周血CD8+T细胞IL-2、IL-12、IFN-γ的表达,纠正机体细胞因子失调而提高CA病人临床疗效、减少其复发。

女阴及子宫肿瘤人乳头瘤病毒16/18感染的检测

1目的 探讨女阴及子宫肿瘤组织人乳头瘤病毒 (HPV) 16 / 18DNA感染及其意义。2方法 应用原位杂交技术对 3个传代的细胞系、96例宫颈标本、75例子宫内膜标本及 33例女阴尖锐湿疣标本 HPV 16 / 18DNA进行了检测。3结果 尖锐湿疣组织 HPV16 / 18DNA感染阳性表达 3例 (9.1% ) ,正常宫颈 2例 (2 0 .0 % )、子宫颈上皮肉瘤变 (CIN ) 5例 (2 7.8% )、CIN 9例 (39.1% )、宫颈鳞癌 2 7例 (6 0 .0 % ) ,4组之间比较差异有极显著性 (χ2 =7.92 3,P<0 .0 1)。2 7例正常子宫内膜组织 HPV16 / 18DNA表达均为阴性 ,48例子宫内膜癌 3例呈阳性 (6 .2 % ) ,其中 1例为腺鳞癌 ,1例为透明细胞癌。4结论 生殖道上皮中存在多种 HPV亚型混合感染 ,子宫内膜癌组织中可见HPV16 / 18感染。

核酸原位杂交技术在尖锐湿疣病理诊断中的意义

应用地高辛标记的HPV6B／11、16／18型DNA探针对30例尖锐湿疣、10例疑似尖锐湿疣及25例假性湿疣进行HPVDNA原位杂交分析。结果显示，30例尖锐湿疣患者HPV6B／11均阳性，4例HPV16／18阳性；10例疑似尖锐湿疣中，1例HPV6B／11阳性，另1例HPV16／18阳性；25例假性湿疣HPV6B／11，16／18均阴性。表明HPVDNA原位杂交技术在尖锐湿疣的诊断中，特别是在病变不典型的尖锐湿疣的诊断中具有重要意义。

人乳头瘤病毒DNA的原位杂交检测

①目的探讨原位杂交检测人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）对尖锐湿疣的病因诊断意义及原位杂交的方法学。②方法用地高辛标记原位杂交技术，对４５例临床疑为尖锐湿疣的组织进行了ＨＰＶ６Ｂ／１１ＤＮＡ检测。为减轻非特异性背景染色并获得最大杂交敏感性，对消化酶、变性及杂交温度和时间、洗涤液、显色剂等原位杂交方法进行了研究。③结果３２例病理诊断为尖锐湿疣者均呈阳性，４例病理疑诊为尖锐湿疣者呈阴性，９例病理诊断为假性湿疣者均为阴性。

女性外阴尖锐湿疣及湿疣样病变组织中人类乳头瘤病毒 DNA 的检测

用生物素和^(32)P-人类乳头瘤病毒 HPV11、HPV16和 HPV18型 DNA 探针,以斑点和 SouthernBlot 杂交方法检测了49例北京地区女性外阴尖锐湿疣和湿疣样病变组织中 HPV DNA。在24例尖锐湿疣组织中,HPV DNA 阳性者为18例(75%);其中 HPV11 DNA 阳性者16例,占阳性例数的88.9%;HPV16 DNA 阳性者2例,占阳性例数的11.1%;没有发现 HPV18 DNA 阳性者.25例湿疣样病变组织中,8例含有 HPV DNA(32%),全为 HPV11型。本文对湿疣样病变与 HPV 感染的关系,外阴部尖锐湿疣的分型及诊断标准进行了初步探讨。

PCR 和探针杂交技术检测口腔粘膜疾病中人乳头瘤病毒的核酸

联合应用ＰＣＲ和核酸杂交的方法对１５份口腔粘膜疾病患者样品进行了分析。用ＰＣＲ技术测ＨＰＶ－１６为３份阳性，ＨＰＶ－１８为７份阳性；然后用探针杂交检测ＰＣＲ产物其ＨＰＶ－１６，３份阳性，ＨＰＶ－１８，１０份阳性。以上结果表明ＨＰＶ与口腔粘膜疾病有一定的关系；用ＰＣＲ扩增法和探针杂交法联合检测可提高检测率。

高危型人乳头瘤病毒基因分型聚合酶链式反应检测技术在宫颈癌筛查中的应用分析

目的探讨以聚合酶链式反应(PCR)为基础的高危型人乳头瘤病毒(HPV)分型检测在宫颈癌筛查中的应用和诊断价值。方法选取2016年6月至2019年6月西安航天医院收治的疑似宫颈病变病人628例,分别采取高危型HPV分型PCR技术(HR-HPVDNAPCR),液基薄层细胞学检查(TCT)以及病理组织活检诊断,以病理活检作为诊断宫颈病变的“金标准”,分析高危型HPV感染与宫颈病变的关系以及高危型HPV分型检测技术在宫颈癌筛查中的应用价值。结果HR-HPVDNAPCR技术的灵敏度为91.76%,特异度为91.29%,阳性预测值为9356%,阴性预测值为88.93%,符合率为91.56%,均显著优于TCT检测方法(P<0.001)。同时,对13种HPV亚型分析发现,16、18亚型与宫颈癌及癌前病变密切相关(P<0.05),33、52及58型次之(P<0.05)。而且,HPV的感染率随着年龄的增长而增长,>39~49岁病人HPV感染率为58.15%、>49~59岁病人为64.29%、>59岁病人为75.41%,均显著高于20~29岁的年轻病人的46.40%(P<0.05)。结论高危型HPV持续感染是宫颈癌及癌前病变发生的关键因素,以PCR为基础的高危型HPV分型检测在宫颈癌筛查中具有较高的应用价值。

人乳头状瘤病毒原位杂交在尖锐湿疣诊断中的应用

作者用地高辛配基标记人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ６．１１）探针，原位杂交方法，对１５０例临床诊断尖锐湿疣（ＣＡ）的活检标本进行病毒学检测，并与病理形态学诊断结果进行比较性研究．结果：病理形态诊断符合ＣＡ者５６例（３７．３％），其中ＨＰＶ阳性者４０例（７１．４％），ＨＰＶ阴性１６例（２８．６％）；无典型ＣＡ病理形态改变者９４例（６２．８％），其中亦有１２例ＨＰＶ呈阳性反应（１２．８％），余８２例阴性（８７．２％）．结果提示：ＣＡ患者中，部分病例缺乏特异性临床表现及病理形态改变，原位杂交技术为ＣＡ的重要辅助诊断方法．

5434例女性泌尿生殖道HPV感染情况及HPV亚型分析

目的了解泰顺地区女性易感人群人乳头瘤病毒(HPV)感染率和HPV亚型分型情况。方法收集2017年1月至2017年12月于泰顺县人民医院体检及就诊的女性患者泌尿生殖道标本,共5434例。采用PCR反向点杂交法进行HPV分型检测,并对结果进行分析。结果5434例标本中HPV阳性1895例,HPV阳性1309人次。高危型HPV检出1127例,占59.4%;低危型HPV检出356例,占18.8%。入选患者中单一感染935例,占71.4%;多重感染374例,占28.6%。高危型中检出最多的是HPV52型,共210例,占11.1%;其次是HPV58型137例,占7.2%;HPV16型124例,占6.5%;HPV18型62例,占3.3%。HPV52阳性患者集中于41~50岁,HPV53阳性患者集中于31~40岁,HPV16、HPV18阳性患者集中于20~40岁及>60岁。随着患者年龄的增长各HPV亚型的阳性率也在增长,且各年龄段患者均以高危型HPV感染为主(62.36%)。结论泰顺地区女性患者HPV亚型及患者年龄分布情况与我国南方女性HPV感染情况相符,HPV感染率随患者年龄增加而增高。高危型HPV检测对子宫颈癌等相关疾病的筛查及预防具有较高的应用价值。

宫颈脱落细胞病变中HPV L1蛋白的表达及临床意义

目的探讨HPV L1蛋白在宫颈脱落细胞病变中的表达情况及其临床意义。方法以非同位素标记核酸分子杂交技术和免疫组织/细胞化学技术为基础,在同时采用核酸和免疫水平双重检测传染病病原体人乳头瘤病毒壳蛋白抗体(HPV L1)的方法对124例妇科宫颈脱落细胞TCT标本进行HPV L1蛋白检测。结果 HPV L1蛋白的总阳性率为44.35%(55/124)。其中轻度炎症的阳性率为66.67%(26/39);中度炎症的阳性率为41.94%(13/31);重度炎症的阳性率为37.50%(6/16);低级别上皮内瘤变的阳性率为30.43%(7/23);高级别上皮内瘤变的阳性率为20.00%(3/15)。HPV L1蛋白在轻度炎症的阳性表达率高于中度炎症和重度炎症,明显高于低级别上皮内瘤变和高级别上皮内瘤变,差异具有统计学意义(χ2=13.65,P<0.05)。结论 HPV L1蛋白的阳性表达与宫颈脱落细胞病变的类型密切相关,随着宫颈脱落细胞病变的加深,HPV L1蛋白的阳性率逐渐减弱,HPV L1蛋白的丢失可能是宫颈病变进展的一个早期事件,HPV L1蛋白的阳性表达与宫颈病变的生物学行为密接相关,可作为宫颈病变治疗预后的可靠理论依据。

人乳头瘤病毒全基因组基因分型国家参考品在评价人乳头瘤病毒核酸检测试剂中的应用

目的:使用人乳头瘤病毒全基因组基因分型国家参考品对人乳头瘤病毒核酸(分型)检测试剂盒进行评价。方法:采用建立的人乳头瘤病毒全基因组基因分型国家参考品,以参考盘包含的20种不同型别的人乳头瘤病毒全基因组重组质粒DNA和5份阴性参考品为样本,按照各个试剂盒要求进行检测。结果:检测人乳头瘤病毒全基因组基因分型国家参考品,试剂A、C、D检测结果全部符合,试剂B在特异性检测试验时HPV 31、59型有交叉,试剂E在特异性检测时HPV 6、26、66、67、82型有交叉。结论:包含20种不同型别的人乳头瘤病毒全基因组基因分型国家参考品能可靠评价人乳头瘤病毒核酸(分型)检测试剂盒。

运用导流杂交基因芯片技术在重庆地区人乳头瘤病毒感染分型检测的研究

目的探讨运用导流杂交基因芯片技术（HybriMax）在临床人乳头瘤病毒（HPV）感染分型检测中的运用，调查重庆地区宫颈病变患者HPV病毒分型情况进行。方法采用导流杂交基因芯片技术，对473例宫颈病变患者以病理学诊断为金标准对宫颈病变进行分组后，进行生殖道HPV感染分型检测。结果17种HPV亚型被检出，总检出率为63．0％（284／473），检出率较高的亚型为HPV16（23．7％、112／473）、HPV58（12．7％、60／473）、HPV53（7．4％、35／473）。HPV感染率随宫颈病变SPI、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ的变化而升高（x^2=77．06、P〈0．01）。结论重庆地区最常见的HPV型别是HPV16、58型。导流杂交基因芯片技术能够同时检测HR—HPV和LR—HPV，可判断多型感染；用于临床诊断和普查均为理想方法。