我国葡萄白腐病菌分类地位的重新确定研究

葡萄白腐病是重要的葡萄病害之一，造成产量损失极大。本文通过对白腐病菌光学与超微结构观察，明确了我国白腐病菌为白腐垫壳孢（ Ｃｏｎｉｅｌｌａ ｄｉｐｌｏｄｉｅｌｌａ （Ｓｐｅｇ．） Ｐｅｔｒａｋ ＆ Ｓｙｄｏｗ） ， 而不是白腐盾壳霉（ Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ ｄｉｐｌｏｄｉｅｌｌａ （Ｓｐｅｇ．） Ｓａｃｃ ．） 。该菌分生孢子器内基部具垫状结构，产孢方式内壁芽生瓶梗式，分生孢子光滑。

胶东地区葡萄白腐病菌对吡唑醚菌酯的敏感性及与其他4种药剂的敏感性比较

采用菌丝生长速率法测定了山东省胶东地区52株葡萄白腐病菌Coniella diplodiella对吡唑醚菌酯的敏感性,检测了水杨肟酸(SHAM)对葡萄白腐病菌菌丝生长及其对吡唑醚菌酯敏感性的影响,并通过室内毒力测定及田间防效试验比较了吡唑醚菌酯与其他4种不同作用机制药剂的毒力。结果显示:添加SHAM (20μg/mL)能够显著提高葡萄白腐病菌对吡唑醚菌酯的敏感性(F=5.501 7,P=0.038 8),与吡唑醚菌酯单独作用相比,添加SHAM后吡唑醚菌酯对葡萄白腐病菌的毒力提高了1.17倍。供试葡萄白腐病菌对吡唑醚菌酯整体仍表现为敏感,EC50值在0.176~6.012μg/mL之间,平均值为(2.826±1.670)μg/mL,其敏感性频率分布呈连续单峰曲线,且符合正态分布,因此可将该EC50平均值(2.826±1.670)μg/mL作为山东省胶东地区葡萄白腐病菌对吡唑醚菌酯的相对敏感基线。戊唑醇、福美双、代森锰锌及多菌灵对葡萄白腐病菌的EC50值分别在0.364~16.873、5.236~25.562、15.912~84.778和1.819~568.690μg/mL之间,葡萄白腐病菌对吡唑醚菌酯的敏感性与对戊唑醇的相当,显著高于对福美双、代森锰锌和多菌灵的敏感性。研究结果可为田间防控葡萄白腐病的药剂选择及合理轮换使用提供理论依据。

葡萄白腐病菌生物学特性研究

对葡萄白腐病菌生物学特性研究结果表明:该病菌生长的最适温度为25～30℃;具有较宽的酸碱度适应范围,最适pH值为3～5;PDA是病原菌培养的较好培养基;在营养方面,不同碳源对病菌生长快慢顺序是:单糖>双糖>多糖,葡萄糖是较佳的碳源;不同氮源影响病菌生长速度的顺序是:无机氮>有机氮,最适氮源为NH4Cl。碳源比氮源更适合该病菌分生孢子萌发,碳源中葡萄糖、氮源中NH4Cl和KNO3溶液最适合分生孢子萌发,适宜孢子萌发的温度范围为15～30℃,最适温度为25℃左右。适宜孢子萌发的pH范围为pH值4～6,最适pH值为5。光暗交替有利于分生孢子萌发。

辽宁省葡萄白腐病的田间发生规律及药剂防治

通过对葡萄白腐病田间发生规律研究,认为葡萄白腐病发生与生育期、温度、湿度和降雨量有密切关系。多因子模拟表明,该病害多因子Logistic模型可以较好地反映葡萄白腐病流行动态随气象因子变化情况。沈阳地区该病害防治时间为6月初;时间指数增长期为葡萄出芽到7月初,逻辑斯蒂时期为7月初到9月中旬;衰退期9月中旬以后。在发病前期合理使用2 5%甲硫.腈菌可湿性粉剂、多菌灵等药剂,可有效控制葡萄白腐病发生。

沈阳地区葡萄白腐病流行动态预测模型分析

通过对葡萄白腐病[Coniella diplodiella(Speg.)Petrak&Sydow]流行动态模型研究,初步明确葡萄白腐病主要影响因素为时间、积温和降雨,葡萄白腐病果粒发病率(x)与葡萄生长时间(t)、有效积温(T)、累积降雨量(R)关系可用LOGISTIC模型和GROWTH模型模拟;在普通果园内,葡萄出芽后69～81d(7月中下旬);或有效积温5473～6493℃,或累积降雨量324.1～351.7mm,是防治葡萄白腐病的最佳时期。

几种杀菌剂和拮抗菌对葡萄白腐病的室内防治试验

葡萄白腐病是国内葡萄生产上危害严重的病害之一,为了该病害的防治,采用平皿抑菌试验的方法测定了7种常用杀菌剂和7株拮抗菌对葡萄白腐病菌的抑制作用,并采用室内离体果穗人工接种的方法测定它们在离体果实上的药效。结果发现:7种杀菌剂和2株拮抗菌对葡萄白腐病均表现一定程度的防病效果,其中,杀菌剂百菌清和多菌灵对葡萄白腐病菌抑菌活性较强,拮抗菌解淀粉芽孢杆菌BJ-6和放线菌F2的发酵液也具有较强的抑菌活性。

辽宁地区葡萄白腐病菌遗传多样性分析

为了明确辽宁省不同地区葡萄白腐病菌遗传分化情况,对采自辽宁省沈阳、朝阳、锦州、营口、大连、辽阳等主要葡萄产区的病样进行分离鉴定,对病原菌形态学进行观察及r DNA-ITS序列分析,测得的序列与GenBank中已知序列进行比对,并利用MEGA5.05进行聚类分析。结果表明:分离得到的42株白腐病菌菌落形态基本一致,菌丝平伏,有隔膜,分生孢子器呈球形或扁球形,暗褐色,球内含有大量分生孢子,有孔口;分生孢子单孢,卵圆形,最初无色,后变为暗褐色。病菌rDNA-ITS序列与已知序列的相似度达99%以上,42个菌株的ITS序列同源性极高,不同地区葡萄白腐病菌区域性特征不明显。

葡萄白腐病拮抗链霉菌G4的筛选、鉴定及发酵条件的优化

从长春市葡萄园采集的9份土样中分离出放线菌菌株70株,采用平板对峙法初筛到了对葡萄白腐病菌(Coplodiella diplodiella)有较好拮抗作用的放线菌菌株7株,采用琼脂扩散法复筛出拮抗作用最好的菌株G4。对G4菌株的发酵液进行了抗菌谱测定,结果表明发酵液对番茄叶霉病菌(Fulvia fulva)、禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)等其他8种植物病原真菌都有拮抗作用,对葡萄白腐病菌的拮抗作用最好,抑菌圈直径达26.5mm。通过对菌株G4的形态特征、培养特征、生理生化反应和16S rDNA鉴定该菌株为淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae)。通过发酵条件优化,确定了菌株G4的最佳发酵条件:玉米粉60 g/L,葡萄糖30 g/L,大豆粉60 g/L,硝酸钾5 g/L,磷酸二氢钾1 g/L,碳酸钙3 g/L,氯化钠1 g/L,pH为自然,种龄22 h,装瓶量40mL/250mL,接种量4%,发酵温度28℃,转速200 r/min,发酵时间48 h。

紫外线、He-Ne激光对葡萄白腐病菌拮抗菌PT2的复合诱变效应

采用紫外线、He-Ne激光及两者复合诱变的方法,分别处理对葡萄白腐病有拮抗作用的枯草芽胞杆菌PT2,以提高其抑菌效果。结果表明,紫外线和He-Ne激光单独作用,所筛菌株UV10与HN14抑菌效果提高率分别为15.0%与21.7%。而经过对复合诱变条件确定,在紫外线照射90 s后,再用15 mW的He-Ne激光辐照10 min,筛选出最佳正变菌株F15,抑菌效果提高30.9%,明显高于单因素诱变,经25代传代试验证明其拮抗能力可以进行稳定遗传。

^(60)Co-γ辐照对葡萄3种病原真菌的抑制效果

【目的】探究不同剂量的^(60)Co-γ辐照对葡萄枝条、果实病害的防治效果,为葡萄高效安全生产和提高防霉保鲜效果提供科学依据。【方法】以葡萄灰霉病菌、白腐病菌和溃疡病菌为靶标菌,选用剂量分别为40、100、600、1000、2000 Gy的^(60)Co-γ射线进行辐照处理,就不同剂量的^(60)Co-γ辐照对3种病原真菌孢子萌发和菌丝生长的影响情况进行试验与观测分析;并在巨峰葡萄1年生嫩枝上经刺伤接种葡萄灰霉病菌、白腐病菌和溃疡病菌,然后分别用剂量为40、100、600 Gy的^(60)Co-γ射线对发病的嫩枝进行辐照处理,统计嫩枝成活率和嫩枝上的病斑扩展面积;再在巨峰葡萄果实上经刺伤接种葡萄灰霉病菌和白腐病菌,然后用剂量分别为100、600、1000 Gy的^(60)Co-γ射线对发病的葡萄果实进行辐照处理,统计葡萄果实的发病率。【结果】^(60)Co-γ辐照对葡萄3种病原真菌的孢子和菌丝都有明显的抑制甚至致死作用,且当辐照剂量大于600 Gy时才始有明显的抑制效果;不同剂量的^(60)Co-γ辐照处理对葡萄3种病菌在嫩枝上病斑的扩展都有一定的抑制作用,而且随着辐照剂量的增大,病斑的扩展面积显著减小,经600 Gy剂量的^(60)Co-γ辐照后其病斑扩展的面积最小,说明辐照的抑制效果最好,该剂量的辐照处理对3种病菌在葡萄嫩枝上病斑的抑制率均在75%以上,且该剂量的辐照处理不影响葡萄嫩枝的扦插成活;^(60)Co-γ辐照葡萄果实的适宜剂量为600 Gy,以此剂量辐照葡萄果实可使灰霉病和白腐病在其贮藏期的发病时间推迟4~6 d。【结论】^(60)Co-γ辐照葡萄嫩枝和果实的适宜剂量均为600 Gy,剂量为600 Gy的辐照能有效抑制葡萄灰霉病、白腐病和溃疡病的发生及其病斑的扩展,还可减少农药的使用量。

杀菌剂对葡萄白腐病、黑痘病病原菌的室内毒力测定

本试验采用菌丝生长速率法,选用13种化学农药和7种生防制剂对葡萄白腐病和葡萄黑痘病病原菌进行了室内毒力测定。结果表明:化学药剂5%氟硅唑·20%咪鲜胺SL和25%丙环唑EC对葡萄白腐病和葡萄黑痘病病原菌的抑制作用最强,EC90值分别为0.0002μg/mL、0.02μg/mL;生防制剂1000亿个/g枯草芽孢杆菌WP、10%多抗霉素B WP、0.5%大黄素甲醚AS和88%水合霉素SP对白腐病菌和黑痘病菌的抑菌率与试验所用的大多数化学农药之间无极显著性差异。本试验筛选的生防制剂可为今后防治葡萄病害的进一步研究提供理论参考。

近年来葡萄白腐病重发原因及其防治对策

对福建省上杭县近年来葡萄白腐病重发原因进行了全面调查分析,提出了防治对策。选用4种农药进行了防效试验,结果表明:福星EC、50%丙环唑ME 7500倍液喷雾防效佳,连续喷药3次,第3次药后20 d防效均达100%。

葡萄白腐病菌对抑霉唑的敏感基线及其与不同杀菌剂的交互抗性

为明确山东省胶东地区葡萄白腐病菌Coniella diplodiella对抑霉唑的敏感性及抑霉唑与常规杀菌剂之间的交互抗性,采用菌丝生长速率法测定葡萄白腐病菌对抑霉唑等杀菌剂的敏感性,并通过分析抑霉唑与戊唑醇、吡唑醚菌酯、福美双、多菌灵、代森锰锌毒力的相关性,判断抑霉唑与各药剂之间是否存在交互抗性。结果表明,供试69株葡萄白腐病菌菌株对抑霉唑的EC50在0.13~55.53μg/mL之间,最高值与最低值相差427.15倍;其频数分布图呈多峰曲线,第一主峰内EC50平均值为6.34μg/mL,可作为胶东地区葡萄白腐病菌对抑霉唑的敏感基线。与敏感基线相比,田间已出现抑霉唑低抗菌株,占检测总株数的8.70%,未检测到中、高抗菌株。选择3个抗性菌株连续继代培养10代后,其对抑霉唑的敏感性明显提高,说明其抗药性不能稳定遗传。抑霉唑EC50对数值与戊唑醇、吡唑醚菌酯、福美双、多菌灵、代森锰锌的EC50对数值之间的相关系数分别为0.799、-0.143、-0.089、-0.268和0.159,说明抑霉唑与戊唑醇存在一定的交互抗性,但与其他4种药剂之间不存在交互抗性。表明抑霉唑可用于胶东地区田间葡萄白腐病的有效防控。