一株Coniella属真菌的分离培养鉴定及抑菌活性实验

从赤芍(Paeonia lactiflora Pall)植株根部分离到一株内生真菌(编号Gen7).该菌菌丝无色,具隔膜,分生孢子梗短或无,分生孢子椭圆形初为无色,后为棕色;根据形态学特征鉴定为Coniella属.基于ITS的BLAST检索表明该菌株与Coniella fragariae相似度高达99.6%以上,鉴定为草莓垫壳孢Coniella fragariae(Oudem.)B.Sutton,该菌属于半知菌门,球壳孢目spharropsidales,球壳孢科Sphaeropsidacea垫壳孢属Coniella,为内蒙古新记录种,以黄瓜尖镰孢菌Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum J.H.Owen、灰葡萄孢菌Botrytis cinerea Pers和茄科劳尔氏菌Ralstonia solanacearum(Smith)Yabuuchi et al.为材料,研究其抑菌活性,发现Coniella fragariae(Oudem.)B.Sutton对3种指示菌有不同程度的抑制作用,平均抑菌率分别达48.2%、43.1%和24.7%,该研究结果为内生真菌分离培养鉴定提供研究提供方法,并为潜在生防菌的开发利用提供理论依据.

附球属真菌DT-014对杂草的致病性及生物学特性研究

以青海省西宁市大通县鹞子沟自然发病的大刺儿菜叶片中分离出的附球属真菌DT-014为研究对象,通过发酵喷雾法接种测定其对4种盆栽杂草猪秧秧(Galium spurium L.)、藜(Chenopodium album L.)、冬葵(Malva verticillate L. var.crispa)、密花香薷(Elsholtzia densa Benth.)的致病性和5种作物蚕豆(Vicia faba L.)、豌豆(Pisum sativum L.)、青稞(Hordeum vulgare L.)、小麦(Triticum aestivum L.)、油菜(Brassica napus L.)的安全性,并通过单因素试验,以菌落直径和其孢子悬浮液OD600值为测量标准,探究菌株DT-014的最适生长培养基、碳源、氮源、固态发酵基质。结果表明,DT-014对藜(C.album)和猪秧秧(G.spurium)致病力较强,其次为密花香薷(E.densa),对冬葵(M.crispa)致病力最低。DT-014对于小麦(T.aestivum)、蚕豆(P.sativum)、青稞(H.vulgare)、豌豆(P.sativum)相对安全,对油菜(B.napus)有轻微影响。DT-014的最适培养基为蛋白胨培养基,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为酵母膏,最适固态发酵基质为大豆粉。

拉萨大型真菌物种多样性调查及两个铦囊蘑属中国新纪录种

该研究对拉萨地区的大型真菌物种资源进行了多样性调查,共采集获得大型真菌标本209份,鉴定出157个种,其中包括担子菌门155种,子囊菌门2种。统计发现其中种类数量最多的是担子菌门的球盖菇科和丝盖伞科,其中食、药用菌6种,毒蘑菇4种。与中国生物多样性红色名录进行了比对,本次调查得到无危物种(LC)有34种,数据不清(DD)有27种,其他均为没有报道的种类。同时研究还发现了铦囊蘑属两个中国新纪录种,Melanoleuca ammophila沙地铦囊蘑(本文新拟)和Melanoleuca galbuserae加氏铦囊蘑(文章新拟),对其进行形态学和分子系统学分析研究的结果展示了拉萨地区大型真菌有丰富的物种多样性和挖掘空间。

六种海桑属红树植物根际真菌特征及其影响因子

真菌多样性是植物根际生态系统的重要构成与植物健康稳定的重要指标。海桑属是红树林的先锋物种,采用真菌ITS1区高通量测序方法,分析了六种海桑属红树根际真菌的组成和多样性,结合土壤理化性质探讨影响不同植物根际真菌群落组成差异的因素。结果显示,根际真菌隶属于7门、96科、155属,子囊菌门作为优势菌门在海桑属不同红树中相对丰度无显著差异,都超过27%,但次优势的担子菌门丰度含量有差异;属水平上,优势菌属的丰度含量不同,曲霉属在卵叶海桑的丰度最高(29.57%),在海南海桑最低(3.47%)。六种红树植物根际存在特有的代表类群,如无瓣海桑的马拉色菌(9.31%)和毛腐菌属(10.05%),海南海桑中的Talaromyces(19.61%)和Acremonium(13.58%)。比较多样性指数Simpson和Shannon,发现拟海桑是六种植物中丰度最高的,卵叶海桑最低。RDA分析发现子囊菌门与全磷含量呈显著负相关,担子菌门与速效钾呈明显正相关。六种海桑属红树植物根际核心物种分析表明,优势真菌类群曲霉属和一些低丰度的真菌类群,通过降解有机质参与碳循环,对根际土壤生态系统的稳定起重要作用。六种海桑属红树林植物根际真菌组成丰富,各有特征性类群。本研究探明海桑属红树植物根际真菌的群落多样性规律,为该物种资源保护与合理利用、种群恢复工作提供理论基础和依据。

红树林来源曲霉属和木霉属内生真菌次生代谢产物及活性研究进展

红树林内生真菌因其高盐、高温、强光照、缺氧的生存环境而进化出独特的代谢途径,进而产生了一大批种类丰富、结构新颖、活性显著的次生代谢产物,使红树林来源的内生真菌次级代谢产物成为近年来的研究热点。在红树林内生真菌领域中,曲霉和木霉属真菌是研究较多的两个属。本文对2018年1月—2022年10月红树林来源曲霉属内生真菌和2015年1月—2022年10月红树林来源木霉属内生真菌新次级代谢产物的化学结构及其生物活性研究进行综述,按聚酮类、生物碱类、萜类、肽类与氨基酸类化合物等分别进行总结,并提出目前研究中存在的问题,为后续红树林内生真菌的研究提供借鉴和指导。

杜鹃属植物内生真菌的分离及对赤拟谷盗和马铃薯腐烂茎线虫的防治作用

本文以千里香杜鹃、头花杜鹃、烈香杜鹃、陇蜀杜鹃4种杜鹃属植物为材料,通过组织分离法分离其内生真菌,测定内生真菌粗提物的抗虫活性,筛选出具有良好抗虫活性的菌株,并对这些菌株进行形态学及分子生物学鉴定,以此初步筛选出对赤拟谷盗和马铃薯腐烂茎线虫具有较好抗虫活性的内生真菌菌株。结果表明:从4种杜鹃属植物中分离得到22株内生真菌菌株,共发酵产生44种粗提物,其中LS-Y-2菌丝体粗提物对赤拟谷盗具有一定触杀活性(LD_(50)=69.31μg/adult);LS-Y-2菌液粗提物、TH-Z-1菌液粗提物和LS-Y-4菌丝体粗提物对马铃薯腐烂茎线虫具有较好杀虫活性,其LC_(50)分别为0.06、0.07、0.18 mg/m L;LS-Y-2菌液粗提物和LS-Y-4菌液粗提物在质量浓度为2 mg/mL时,对赤拟谷盗的拒食率为84.28%和73.12%。通过形态学和分子生物学鉴定发现,LS-Y-2和LS-Y-4属于链格孢属真菌、TH-Z-1属于栓菌属真菌。综上,链格孢属真菌LS-Y-2、LS-Y-4和栓菌属真菌TH-Z-1对赤拟谷盗和马铃薯腐烂茎线虫具有一定防治作用。

三种宽瓣亚属植物生境土壤真菌群落特征

以杏黄兜兰、文山兜兰、同色兜兰为研究对象,调查生境信息,采用ITS高通量测序对生境土壤真菌群落结构、真菌功能群注释及多样性进行分析,并揭示环境因子的影响.结果显示,3种兜兰生境土壤样品共获得1105个可操纵分类单元(OTU),包含322种真菌,隶属10门29纲70目151科256属,3种兜兰生境土壤真菌群落中出现48个共有OTU,同色兜兰含489个特有OTU,文山兜兰有221个,杏黄兜兰202个,3种兜兰生境土壤真菌群落在门、纲、科、属水平均存在不同优势类群,FUNGuild真菌功能群注释可知,3种兜兰生境土壤真菌功能群均以腐生真菌、外生菌根为主,同色兜兰生境土壤真菌功能类群更加复杂;3种兜兰之间土壤真菌的ACE指数与Chao1指数无明显差异,而同色兜兰Simpson指数与Shannon指数显著高于杏黄兜兰,且极显著高于文山兜兰.Beta多样性发现3种兜兰生境土壤真菌群落组成与结构差异明显(P=0.001),且分类水平越高,差异越大;冗余分析揭示了经纬度与植被类型是对3种兜兰生境土壤群落变化影响最大的因子,所选环境因子共揭示真菌群落变化的44.08%.mental检验显示土壤pH值显著影响3种兜兰生境土壤真菌的alpha多样性.Spearman相关性分析证实多种真菌优势类群与土壤理化因子的显著相关.以上研究表明,杏黄兜兰、文山兜兰、同色兜兰的土壤真菌群落存在不同的结构特征、真菌功能群,真菌多样性存在显著差异.环境因子导致了3种兜兰生境土壤真菌群落结构变化,而土壤理化性质影响了真菌群落优势类群的分布.

虫草属真菌多糖的分离提取、理化性质及生物活性研究进展

虫草属真菌具有丰富的药理及营养价值,多糖是其重要的生物活性成分之一。系统地梳理虫草属真菌多糖的分离提取、理化性质及生物活性等相关研究。以往研究表明,虫草属真菌多糖结构复杂,平均分子量为10^(3)~10^(5)Da,在不同溶液中表现出不同构象,生物活性包括免疫活性、抗氧化活性、抗肿瘤活性、抗炎活性等。此外,虫草属真菌多糖对肝脏、肠道和肾脏具有保护作用。总之,虫草属真菌多糖具有潜在的药用价值,有望用于多种疾病的治疗。

海洋本草软珊瑚共附生曲霉属真菌EGF7-0-1和EGF15-0-3共培养中甾体类成分研究Ⅱ

文章模拟微生物自然生长环境,对两株海洋本草软珊瑚曲霉属真菌Aspergillus sp.EGF7-0-1和Aspergillus sp.EGF15-0-3进行共培养,以期发现新颖骨架成分。采用硅胶、反相色谱、羟丙基葡聚糖凝胶和高效液相色谱等方法对其次生代谢产物进行分离、纯化;采用高分辨质谱、核磁共振、旋光及物理常数对照等方法对所分离得到的化合物进行结构鉴定;采用全球天然产物分子网络(Global Natural Products Social Molecular Networking,GNPS)方法对次生代谢产物进行分析。从两株软珊瑚来源的曲霉属真菌大米共培养中分离得到10个甾体类化合物:Chaxine(1)、Herbarulide(2)、dankasterones A(3)、25-hydroxyergosta-4,6,8(14),22-tetraen3-one(4)、Ganodermasides D(5)、Ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one(6)、Ergosta-4,7,22-trien-3-one(7)、Isocyathisterol(8)、Stigmasta-4,22-dien-3-one(9)和β-sitostenone(10)。化合物1~3均为高度氧化重排的甾体类化合物。化合物4、5、7和9首次从曲霉属真菌中分离得到。GNPS分析表明与菌株EGF7-0-1和EGF15-0-3单培养相比,两株真菌共培养能诱导出更为丰富的甾体类化合物。

紫花苜蓿根际土壤真菌和不同部位内生真菌的菌群组成及多样性分析

采用ITS扩增子测序技术分析紫花苜蓿根、茎、叶内生真菌及根际土壤真菌的群落组成、内生真菌核心属、Alpha和Beta多样性及真菌群落相关性,结果表明紫花苜蓿根、茎、叶内生真菌和根际土壤真菌分属于13门、176科、348属、498种,不同部位真菌群落组成和多样性有一定差异。其中,根际土壤真菌类群最丰富,Alpha多样性分析表明,其ACE指数、Chao指数和Shannon指数显著高于植株各组织,Simpson指数则显著低于各组织部位,优势真菌属为赤霉菌属(Gibberella)、亚隔孢壳科未分类属(unclassified_f_Didymellaceae)、被孢霉属(Mortierella)、白僵菌属(Beauveria)和Lectera;Beta多样性分析表明,紫花苜蓿根际土壤真菌与不同部位内生真菌群落组成差异显著。属水平上,根系的优势内生真菌属为亚隔孢壳科未分类属、枝孢属(Cladosporium)、线黑粉酵母属(Filobasidium)、Titaea及双足囊菌科未分类属(unclassified_f_Dipodascaceae);茎的优势内生真菌属为线黑粉酵母属、亚隔孢壳科未分类属、壳二孢属(Ascochyta)、维希尼克氏酵母(Vishniacozyma)和枝孢属;叶的优势内生真菌为亚隔孢壳科未分类属、壳二孢属、线黑粉酵母属、Apiotrichum和枝孢属。紫花苜蓿根、茎、叶内生真菌核心菌属以亚隔孢壳科未分类属、线黑粉酵母属、枝孢属、壳二孢属、Apiotrichum及维希尼克氏酵母为主。部分真菌可由根际土壤进入根系定殖然后向上迁移,不同部位内生真菌及根际土壤真菌菌属间具有显著的相互作用,以正相关关系为主导,占66.56%。

产苦马豆素的疯草内生真菌研究进展

含苦马豆素(Swainsonine, SW)的棘豆属(Oxytropis DC.)和黄芪属(Astragalus L.)植物称为疯草,其共生着一种疯草内生真菌(Alternaria Section Undifilum oxytropis)。疯草中的SW由其内生真菌产生,而非由宿主植物产生。SW是一种吲哚里西啶类生物碱,牲畜食用疯草后引起中毒,严重者死亡,对我国畜牧业危害巨大。本文对棘豆属疯草的分类与分布,疯草内生真菌的分类、分布、传播方式及形态学差异,不同真菌中SW的合成相关酶及合成途径的研究进展进行综述,讨论了SW合成途径及其关键酶的作用,旨在为疯草内生真菌的研究、利用及SW合成途径的明晰提供参考。

1株海洋真菌Penicillium sp.的次级代谢产物及抗细菌活性研究

目的研究1株海洋真菌Penicillium sp.LW23的次级代谢产物及其抗细菌活性。方法采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析及半制备高效液相色谱等方法,对该菌株发酵产物进行分离纯化;通过核磁共振波谱(NMR)和质谱(MS)等方法并比对相关文献,鉴定化合物结构;采用微量肉汤稀释法评价其体外抗菌活性。结果从菌株发酵的乙酸乙酯粗提物中分离鉴定了6个化合物,分别为methyl penicyrone(1)、penicyrone(2)、verrucosidin(3)、deoxyverrucosidin(4)、peniquinone A(5)和penipratynolene(6)。结论海洋真菌Penicilliumsp.LW23能产生具有抗细菌活性的化合物。化合物3和4对幽门螺杆菌Helicobacter pylori G27和三重耐药菌H.pylori BHKS159具有中等抑菌活性;化合物5对野油菜黄单孢菌、青枯雷尔菌、枯草芽胞杆菌和耻垢分枝杆菌均具有一定程度的抑菌活性。

枝顶孢属真菌在植物病虫害防治中的研究进展

利用内生真菌来控制植物病虫害现已成为生物防治的研究热点之一。枝顶孢属真菌世界性分布,其具有丰富的遗传多样性和生态多样性,为内生菌的优势菌种。为全面了解枝顶孢属真菌对植物病虫害的生防效果和作用机制,从枝顶孢属真菌的分布范围、生物活性、作用机理等角度加以概括和总结,从而为将枝顶孢属真菌开发成绿色生防制剂提供理论依据。

贵州光枝勾儿茶内生真菌Diaporthe sp.代谢产物分离鉴定及其抑菌活性研究

为探究黔产苗药光枝勾儿茶中1株具有抗菌活性的内生真菌Diaporthe sp.QX4G6代谢产物的化学成分,并从中筛选抑菌活性化合物,经对菌株Diaporthe sp.QX4G6扩大培养后,利用多种分离方法对代谢产物进行分离纯化,结合光谱技术与文献报道鉴定其结构;以微量肉汤二倍稀释法和平板涂布法分别测定单体化合物对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌活性。结果表明,从Diaporthe sp.QX4G6菌株代谢产物中分离纯化得到4个单体化合物,经核磁共振和质谱分析,分别鉴定为邻苯二甲酸二丁酯(化合物1)、1-[(12E,16E)-12,16-二十碳二烯酰基]-2-[(E,E)-7,10-十八碳二烯酰基]-3-硬脂酰基甘油化合物(2)、3-(4-甲苯氧基)-丙酸(化合物3)、酪醇(化合物4)。抑菌试验结果显示,化合物1—3对大肠杆菌和沙门氏菌均表现出一定的抑制活性,相同条件下对沙门氏菌的抑制作用较强;其中化合物3的抑菌活性最强,对2株细菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为7.81μg/mL和3.91μg/mL,最小杀菌浓度(MBC)分别为15.63μg/mL和7.81μg/mL。综上,4个化合物均为首次从茎点霉属(Diaporthe sp.)内生真菌代谢产物中分离得到,其中3个化合物在体外对大肠杆菌和沙门氏菌具有一定的抑菌作用,为进一步开发利用光枝勾儿茶内生真菌代谢产物提供科学依据。

镰刀菌真菌毒素的分类与研究

镰刀菌是甘蔗梢腐病的病原菌,它所产生的真菌毒素导致的病害,是当今世界上的一大生产防治难题。其中,玉米赤霉烯酮(Zearalenone),单端孢霉烯族毒素(Trichothecenes)、伏马菌素(Fumonisin)是当前研究中最受关注、影响极为广泛的三种镰刀菌毒素。本文阐述了甘蔗梢腐病病原镰刀菌所产毒素的主要种类、危害及相关研究,并探讨了未来可能的研究方向,为甘蔗真菌性病害研究提供相应的参考与借鉴。

贵州省威宁县生态功能区大型真菌多样性调查及鉴定研究

通过对威宁县生态功能区大型真菌进行收集,利用形态学结合分子生物学对其进行鉴定,对各科属出现频度、优势属以及食药用经济价值分析。结果表明,该生态功能区共采集到大型真菌标本185个,成功鉴定172个,隶属2门、10纲、10目、28科、47属、101种;出现频度最高的科为多孔菌科(Polyporaceae)、出现频度最高的属为乳牛肝菌属(Suillus);优势属为乳牛肝菌属(Suillus)、鹅膏属(Amanita)、红菇属(Russula)、蜡蘑属(Laccaria)、裸脚伞属(Gymnopus)、乳菇属(Lactarius)、丝盖伞属(Inocybe)、伞菌属(Agaricus)、漏斗伞属(Infundibulicybe)、口蘑属(Tricholoma),占总数的65.14%;可食用大型真菌17.14%,可药用真菌5.72%,食药兼用4.00%,有毒真菌45.14%和食药不明真菌28.09%;被评估为无危等级的有淡黄多汁乳菇(Lactifluus luteolus)和乳酪状红金钱菌(Rhodocollybia butyracea)等12种、数据不足等级的有橙黄蜡蘑(Laccaria aurantia)和棕红乳菇(Lactarius badiosanguineus)等5种。贵州省新记录种9种、中国新记录种2种以及中国特有种1种。贵州省威宁县生态功能区内含有丰富的大型真菌资源,本研究为该地大型真菌资源的利用和保护提供理论基础和数据支持。

两种醉鱼草属植物根内真菌多样性和功能特征

为了解醉鱼草属Buddleja广布物种的根内真菌多样性异同和功能特征,对密蒙花Buddleja officinalis和白背枫B.asiatica的根内真菌进行了高通量测序和相关生物信息学分析。结果表明,从密蒙花和白背枫根内分别获得429和267个真菌扩增子序列变异(amplicon sequence variants,ASVs)特征序列,但两者在α-多样性指数上无显著性差异;通过物种注释发现,子囊菌门Ascomycota和担子菌门Basidiomycota物种均为两种植物根内真菌的主要成分,但白背枫根系中担子菌门物种(主要为伞菌纲Agaricomycetes)明显占优势,可见它们在物种组成上有明显差别;通过生态功能注释发现,密蒙花和白背枫根内分别有87个真菌和94个真菌ASVs被注释到生态功能,且共生(Symbiotroph)、腐生(Saprotroph)和寄生(Pathotroph)真菌均能在两种植物的根内被探测到,但类群存在异同;共生菌方面,在两种植物根内均检测到外生菌根真菌类的蜡壳耳科Sebacinaceae真菌,而丛枝菌根真菌类的多孢囊霉目Diversisporales仅见于密蒙花根内,丛枝菌根真菌类的球囊霉科Glomeraceae物种仅见于白背枫根内等。上述研究结果表明,密蒙花和白背枫在根内真菌多样性上无显著差异,但其根系对真菌的偏好性可能不同。

拟金钱菌属的4个中国新记录种

【目的】对采集于江西省官山国家级自然保护区的9份拟金钱菌属Collybiopsis标本进行物种鉴定。【方法】依据宏观形态和显微结构比较,结合ITS和LSU基因序列系统发育进行分析与鉴定。【结果】9份拟金钱菌属标本分属于7个种,即韩国拟金钱菌(Collybiopsis. Koreana)、富尔瓦拟金钱菌(C. fulva)、梅尼胡内拟金钱菌(C.menehune)、东方缺裸拟金钱菌(C. orientisubnuda)、安杜拉塔拟金钱菌(C. undulata)、茂盛拟金钱菌(C. luxurians)和多纹拟金钱菌(C. polygramma)。【结论】参考中国截至目前已报道的拟金钱菌属物种,确定韩国拟金钱菌、富尔瓦拟金钱菌、梅尼胡内拟金钱菌和东方缺裸拟金钱菌为我国新记录种,其余3种为江西省新记录种。

植物源真菌病原体多主棒孢菌引起人类感染的病例分析

多主棒孢菌(Corynespora cassiicola)是一种常见的植物病原菌,该真菌在自然界分布广泛,绝大多数为寄生菌,多存在于热带和亚热带地区的植物茎秆、枝条、叶片上或表层土壤中,主要引起黄瓜、豇豆、香蕉等植物叶斑病和落叶病,在人体中的感染比较少见,2010年至今共报道15例人类感染病例,其中皮肤和软组织感染9例、眼部感染5例、颅内感染1例。该文对C.cassiicola引起的人类感染病例进行综述分析,为相关疾病的诊断和救治提供参考。

海洋真菌Talaromyces sp.1116的次生代谢产物研究

现有研究利用多种色谱层析技术从一株来源于南海海洋的篮状菌属真菌1116的发酵粗提物中分离纯化获得了4个芳香族化合物,包括2个异香豆素类衍生物和2个多羟基蒽酮类化合物。通过核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代波谱分析方法,鉴定其结构分别为penicixanthones G(1),penicixanthones A(2),sclerotinin A(3),6-methoxymellein(4)。由此,菌株1116经18S rDNA序列分析比对被鉴定为篮状菌属真菌。基于此,文章旨在对Talaromyces sp.1116中的这4个化合物进行分离与鉴定。