共轭三烯酸抑制肝癌细胞体外增殖和凋亡诱导的作用

目的:探讨共轭三烯酸抑制肝癌细胞体外增殖的作用机制.方法:采用细胞增殖试验(MTT法)、克隆形成试验、Brdu掺入实验(20g/L,12h)研究共轭三烯酸对人正常肝细胞L-02,人肝癌细胞系SMMC-7721和鼠肝癌细胞系Hepa1-6的体外增殖抑制作用;Hoechst33342荧光染色,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布.结果:共轭三烯酸处理后,肿瘤细胞增殖活性降低(SMMC-7721:1.5±2.6vs1.9±12.3,P<0.05;Hepa1-6:1.0±1.5vs1.2±9.7,P<0.05),克隆形成下降(SMMC-7721:149.3±3.1vs191.7±5.8,P<0.05;Hepa1-6:32.7±3.1vs61.3±4.2,P<0.05),Brdu标记指数降低(SMMC-7721:42.3%±1.5%vs63.6%±0.7%,P<0.05;Hepa1-6:59.5%±0.7%vs79.6%±1.6%,P<0.05),凋亡细胞增多(SMMC-7721:48.9%±0.7%vs9.9%±0.4%,P<0.05;Hepa1-6:65.1%±1.1%vs15.9%±0.7%,P<0.05);凋亡指数升高(SMMC-7721:16.3%±0.7%vs3.3%±0.4%,P<0.05;Hepa1-6:21.7%±1.1%vs5.3%±0.4%,P<0.05),G0/G1期细胞数增加(SMMC-7721:48.4%±1.8%vs38.0%±2.1%,P<0.01;Hepa1-6:53.4%±2.1%vs41.1%±0.7%,P<0.01),S期细胞数减少(SMMC-7721:32.2%±2.9%vs37.2%±1.9%,P<0.05;Hepa1-6:28.3%±0.9%vs39.9%±0.9%,P<0.01).结论:共轭三烯酸对肿瘤细胞的增殖有显著抑制作用,其作用机制可能为抑制肿瘤细胞DNA合成,诱导肿瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞.

TCLA诱导大鼠脑胶质瘤细胞增殖抑制及凋亡的研究

目的探讨共轭三烯酸(TCLA)对大鼠脑胶质瘤细胞体外增殖抑制、凋亡作用及其作用机制。方法采用细胞增殖实验(MTT法)、克隆形成实验、BrdU掺入实验检测TCLA对大鼠脑胶质瘤细胞系C6的体外增殖抑制作用;Hoechst33342染色、流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;RT-PCR检测调亡相关基因腺苷二磷酸核糖转移酶1(ADPRTL1)、细胞色素P4501A1(CYP1A1),过氧化物酶增殖体激活受体-γ(PPAR-γ)的表达。结果MTT法发现,TCLA可显著抑制C6细胞株增殖(40μmol/L,72h,细胞存活率56.71%±0.98%),并存在量-效、时-效关系;克隆形成下降,40μmol/L的TCLA可完全抑制克隆形成;实验组BrdU标记率63.1%±1.0%,较对照组(95.6%±1.4%)明显降低(P<0.05);Hoechst33342荧光染色示,实验组凋亡率10.0%±0.3%,较对照组(1.6%±0.6%)明显升高(P<0.05);流式细胞术分析结果示,TCLA使C6细胞凋亡指数升高,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,与对照组的差异均有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,实验组ADPRTL1、CYP1A1、PPAR-γmRNA表达均较对照组增强,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论TCLA对大鼠脑胶质瘤细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用。其作用机制可能与抑制肿瘤细胞DNA合成、细胞周期阻滞、上调凋亡相关基因(ADPRTL1、CYP1A1、PPAR-γ)表达有关。

共轭三烯酸对乳腺癌细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的:探讨共轭三烯酸(TCLA)对乳腺癌细胞的增殖抑制、凋亡作用及其作用机制。方法:用TCLA处理人正常肝细胞(L02)及乳腺癌细胞(MCF-7),用细胞增殖试验(MTT法)、克隆形成试验、EdU掺入试验研究TCLA对人正常肝细胞和乳腺癌细胞的增殖抑制作用;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测TCLA对细胞周期的影响;RT-PCR检测凋亡相关基因PPAR-γ、P53、CASPASE-3 mRNA表达。结果:用TCLA处理后,肿瘤细胞增殖活性降低(P<0.05),半效抑制浓度(IC_(50))为50μmol,呈时问-剂量-效应关系;克隆形成下降(P<0.05)亦呈时间-剂量-效应关系;EdU标记指数降低(P<0.05),AO/EB染色凋亡细胞增多(P<0.05),细胞周期分布改变,凋亡指数显著增加(P<0.01),S期细胞显著减少(P<0.05);RT-PCR检测RTPCR检测凋亡相关基因PPAR-γ(P<0.05)、P53(P<0.05)、CASPASE-3(P<0.01)mRNA表达均比对照组显著增加。结论:TCLA对乳腺癌细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,其作用机理可能与抑制DNA合成、细胞周期阻滞、上调凋亡相关基因PPARγ、P53、CASPASE-3表达有关。