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Connexin 43在急性冠脉综合征患者外周血单核细胞中的表达 被引量:6
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作者 朱建 杨燕 +2 位作者 胡司淦 李辉 张恒 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期471-476,共6页
目的研究急性冠脉综合征(ACS)患者外周血单核细胞(PBMCs)上缝隙连接蛋白(Cx)43的表达变化及意义。方法选取2018年1月~2018年6月期间入住我科的初诊ACS患者40例,其中不稳定型心绞痛(UAP)患者20例,急性心肌梗死(AMI)患者20例,选取20例同... 目的研究急性冠脉综合征(ACS)患者外周血单核细胞(PBMCs)上缝隙连接蛋白(Cx)43的表达变化及意义。方法选取2018年1月~2018年6月期间入住我科的初诊ACS患者40例,其中不稳定型心绞痛(UAP)患者20例,急性心肌梗死(AMI)患者20例,选取20例同期健康体检者作为对照组。采集所有受试者外周静脉血,分别提取血浆和单核细胞,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫比浊法(TIIA)检测血浆中白细胞介素(IL)-1β和高敏C-反应蛋白(hs-CRP)含量,运用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测PBMCs中Cx43 mRNA和蛋白的表达水平。结果与对照组相比,UAP组患者外周血浆中IL-1β及hs-CRP的含量均有明显升高(P<0.001),PBMCs中Cx43 mRNA和蛋白的表达量也显著增高(P<0.001);AMI组患者外周血浆中IL-1β及hs-CRP的含量较UAP组进一步升高(P<0.001及P<0.01);而AMI组患者PBMCs中Cx43 mRNA和蛋白的表达量却较UAP组和对照组均有明显降低(P<0.05)。结论 UAP和AMI患者体内存在不同程度的炎症激活,且Cx43在两者PBMCs中的表达量呈现相反的表达变化,提示Cx43可能在ACS不同类型发病中起到不同效应。 展开更多
关键词 不稳定型心绞痛 急性心肌梗死 缝隙连接蛋白43 白细胞介素-1Β 高敏C-反应蛋白
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连接蛋白Connexin 43在鼻息肉中的表达
2
作者 周定刚 喻国东 陈乾美 《中国当代医药》 2011年第24期14-16,共3页
目的:研究连接蛋白43(Connextio 43,Cx43)在正常鼻黏膜和鼻息肉中的表达,探讨鼻息肉的发病机制。方法:采用免疫组织化学染色和平均光密度检测技术,对30例鼻息肉和10例正常鼻黏膜组中Cx43的表达进行分析。结果:连接蛋白Connexin 43主要... 目的:研究连接蛋白43(Connextio 43,Cx43)在正常鼻黏膜和鼻息肉中的表达,探讨鼻息肉的发病机制。方法:采用免疫组织化学染色和平均光密度检测技术,对30例鼻息肉和10例正常鼻黏膜组中Cx43的表达进行分析。结果:连接蛋白Connexin 43主要表达于黏膜及黏膜下组织,正常鼻黏膜表达最明显(P<0.01),鼻息肉中表达相对于正常鼻黏膜中表达普遍减少。结论:连接蛋白Connexin 43在鼻黏膜和鼻息肉中均表达,且主要集中在黏膜和黏膜下组织,Cx43在鼻息肉中表达下调可能与鼻息肉的发生存在着某种密切的联系。 展开更多
关键词 缝隙连接蛋白 连接蛋白43 鼻息肉 表达
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三七总皂苷对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌ZO-1、Occludin、Cx43蛋白表达的影响 被引量:3
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作者 肖钰雪 刘宏岩 +5 位作者 史晓梅 王松 王鑫赫 谢璐璐 连春雨 郭军鹏 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第3期239-243,I0012,共6页
目的探究三七总皂苷(PNS)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及机制。方法将40只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、曲美他嗪组(对照组)、三七总皂苷组。正常组及模型组给予等体积生理盐水灌胃,曲美他嗪组给予5.4 mg·kg-1... 目的探究三七总皂苷(PNS)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及机制。方法将40只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、曲美他嗪组(对照组)、三七总皂苷组。正常组及模型组给予等体积生理盐水灌胃,曲美他嗪组给予5.4 mg·kg-1灌胃,三七总皂苷组给予50 mg·(kg·mL)-1腹腔注射。除正常组外,模型制备均采用冠状动脉左前降支结扎术。心电图检测ST段以评价造模情况;苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织损伤情况;比色法测定血清中肌酸激酶(CK)含量,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中肌钙蛋白T(cTnT)、肌红蛋白(MYO)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、紧密连接蛋白(Occludin)、缝隙连接蛋白43(Cx43)蛋白含量的表达。结果与正常组相比,模型组血清中CK、cTnT、MYO、IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著增多(P<0.01);心肌细胞排列紊乱,存在炎性浸润,细胞核散乱无序,心肌纤维扭曲断裂;心肌组织中ZO-1、Occludin、Cx43蛋白表达均显著降低(P<0.01)。与模型组相比,三七总皂苷组与曲美他嗪组血清中cTnT、MYO含量均显著降低(P<0.01),三七总皂苷组CK含量显著降低(P<0.01),曲美他嗪组CK含量降低(P<0.05);三七总皂苷组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量均显著降低(P<0.01),曲美他嗪组IL-1β、IL-6含量降低(P<0.05);三七总皂苷及曲美他嗪组心肌细胞结构完整,炎性细胞明显减少,细胞间质水肿程度降低,肌纤维排列整齐;三七总皂苷与曲美他嗪组ZO-1、Occludin、Cx43的蛋白表达均显著升高(P<0.01)。结论本实验结果表明,三七总皂苷可以降低MIRI大鼠心肌损伤标志物CK、cTnT、MYO的含量,降低血清中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量,减轻病理损伤,可以通过调控缝隙链接蛋白Cx43、紧密连接蛋白ZO-1及Occludin的蛋白表达水平来改善血管紧密连接的结构,调节血管内皮功能,保护MIRI大鼠受损心肌。 展开更多
关键词 三七总皂苷 心肌缺血再灌注损伤 缝隙连接蛋白43 紧密连接蛋白
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Basic Investigations EXPRESSION OF GAP JUNCTION PROTEIN Cx43 IN CULTURED HUMAN NORMAL AND MALIGNANT LUNG CELLS
4
作者 张志谦 林仲翔 +2 位作者 吕有勇 孟松娘 韩亚玲 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1994年第2期95-101,共7页
Gap junctional intercellular communicationexchange of small molecules and ions between contiguous cells through membranous gap junctional channelsis essential for growth control and tissue homecotasis. This work conce... Gap junctional intercellular communicationexchange of small molecules and ions between contiguous cells through membranous gap junctional channelsis essential for growth control and tissue homecotasis. This work concerns the functional expression of gap junction protein connexin 43 (Cx43) in normal human lung cells and the changes in lung carcinoma cells. By. using Northern blot hybridization analysis and Cx43 immunocytochemical methods, it was otherved that cultured normal human embryonic lung cells expressed a high level of Cx43 in both mRNA and protein levels.The Cx43 immunofluorescence was localized at cell membrane regions corresponding to the location of gap junctions. These normal lung cells were competent of intercellular communication function as detected by Lucifer yellow dye transfer. In contrast to normal celis, Cx43 mRNA and protein was not detectable in the carcinoma PG cell line. These tumor cells were defective of intercellular communication function. These results demonstrate that Cx43 is expressed in normal cultured human embryonic lung cells but not in lung tumor cells. The lack of intercellular communication in the lung tumor cell line correlates with dysfunctional intercellular communication. The suggestive role of Cx as a tumor suppersor gene is discussed. 展开更多
关键词 Gap junction protein connexin 43. Intercellular communication Normal human lung cells Human lung carcinoma.
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胃癌组织中间隙连接超微结构改变及间隙连接蛋白-43的表达及其意义 被引量:4
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作者 李春辉 潘理会 +2 位作者 徐贝贝 刘海旺 程玉 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期697-701,共5页
目的观察胃癌组织中间隙连接结构的改变,并检测Cx43蛋白及m RNA在组织中的表达,为胃癌的发病机制研究提供新的思路,同时也为药物治疗提供潜在的作用靶点。方法通过透射电子显微镜技术观察正常胃与胃癌组织中间隙连接的变化;利用Western ... 目的观察胃癌组织中间隙连接结构的改变,并检测Cx43蛋白及m RNA在组织中的表达,为胃癌的发病机制研究提供新的思路,同时也为药物治疗提供潜在的作用靶点。方法通过透射电子显微镜技术观察正常胃与胃癌组织中间隙连接的变化;利用Western blot和RT-PCR技术检测Cx43在正常胃与胃癌组织中的表达水平。结果胃癌组织超微结构中细胞间隙连接破坏,分化越差破坏越严重,在正常胃组织中Cx43蛋白及m RNA的表达高于胃癌组织中的表达(P<0.05),在胃癌组织中高-中分化者Cx43蛋白及m RNA表达高于低分化者(P<0.05),胃癌组织中TNM分期Ⅰ/ⅡCx43蛋白及m RNA表达高于Ⅲ/Ⅳ期的表达(P<0.05),胃癌组织中浸润深度未侵及浆膜层者Cx43蛋白及m RNA的表达高于侵及浆膜层者(P<0.05),胃癌组织中无淋巴结转移者Cx43蛋白及m RNA的表达高于有淋巴结转移者(P<0.05),Cx43蛋白及m RNA在不同年龄和性别组中的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论间隙连接超微结构的改变同Cx43蛋白及m RNA的异常表达与胃癌的发生、发展有关,这为胃癌的发病及靶向治疗提供了新的方向。 展开更多
关键词 胃癌 间隙连接 间隙连接蛋白-43 超微结构 蛋白
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猪缝隙连接蛋白43(GJA1)结构和功能的预测与分析 被引量:4
6
作者 戴开宇 曹越 +3 位作者 郜重丞 王海飞 包文斌 吴圣龙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第12期3305-3316,共12页
为了探究猪缝隙连接蛋白43(GJA1)的结构和相关功能,本研究对16个哺乳动物的GJA1蛋白进行多重序列比对及系统发育分析,并通过相关的生物信息学数据库和软件从理化性质、蛋白修饰位点、跨膜区、亚细胞定位、二级结构、三级结构、多态位点... 为了探究猪缝隙连接蛋白43(GJA1)的结构和相关功能,本研究对16个哺乳动物的GJA1蛋白进行多重序列比对及系统发育分析,并通过相关的生物信息学数据库和软件从理化性质、蛋白修饰位点、跨膜区、亚细胞定位、二级结构、三级结构、多态位点、功能区域和互作蛋白等方面对猪GJA1蛋白的结构和功能进行系统分析。系统发育分析结果显示,GJA1蛋白在16种哺乳动物中变异未达到饱和,物种间遗传距离小且同源性高,其中猪与马的GJA1蛋白序列最为接近,同源性达93.3%,在进化树上的分类也证实了这一结果。蛋白结构分析结果显示,猪GJA1蛋白分子质量为43.08ku,理论等电点为8.88,由20种氨基酸组成,不稳定指数为44.06,平均疏水系数为-0.240,脂溶指数为82.67,不分泌信号肽,有4个跨膜区、6个O-糖基化位点和38个磷酸化位点,最有可能位于细胞质膜和高尔基体内,其二级结构和三级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成。蛋白功能分析结果显示,在猪GJA1蛋白的CDS序列中有2个超级家族结构功能区域和6个错义突变位点,且猪GJA1蛋白还与ZO-1和Cx36等蛋白及多种蛋白激酶存在相互作用。本研究通过生物信息学分析系统地揭示了猪GJA1蛋白的结构和功能,为后续进一步研究GJA1蛋白在猪体内发挥生物学功能的遗传调控机制提供一定的理论支持。 展开更多
关键词 缝隙连接蛋白43(GJA1) 蛋白结构 蛋白功能
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幽门螺杆菌对CCAAT增强子结合蛋白α和Cx43表达的影响及其在胃癌发生中的作用 被引量:5
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作者 周莉 徐灿霞 +4 位作者 胡婷姿 刘晓明 肖静 罗玲 蒋小霞 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期700-706,共7页
目的:探讨CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT enhancer binding proteinα,C/EBPα)和间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达改变在H.pylori致胃癌中的作用。方法:扩大培养不同胃黏膜上皮细胞株(GES-1细胞、AGS细胞、SGC-7901细胞);胃镜下采集... 目的:探讨CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT enhancer binding proteinα,C/EBPα)和间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达改变在H.pylori致胃癌中的作用。方法:扩大培养不同胃黏膜上皮细胞株(GES-1细胞、AGS细胞、SGC-7901细胞);胃镜下采集H.pylori感染慢性非萎缩性胃炎患者6例、胃癌前病变和胃癌患者各12例胃黏膜组织;采用realtime PCR法检测上述细胞和组织中C/EBPα和Cx43 mRNA的表达;同时将东亚型Cag A+H.pylori与GES-1细胞共培养24和48 h为实验组,以不加H.pylori的GES-1细胞株为对照组,培养24和48 h;采用real-time PCR法和Western印迹检测C/EBPα和Cx43 m RNA和蛋白的表达。结果:C/EBPα和Cx43 m RNA在AGS细胞、SGC-7901细胞中的表达均显著低于GES-1细胞(均P<0.05),且两者在SGC-7901细胞中的表达量较AGS细胞更低(均P<0.05);C/EBPα和Cx43 m RNA在胃癌胃黏膜组织中的表达明显低于慢性非萎缩性胃炎(均P<0.05)和胃癌前病变(均P<0.05),C/EBPα与Cx43表达呈正相关(胃癌前病变:r=0.679;胃癌:r=0.792,均P<0.05);实验组24,48 h的C/EBPα和CX43表达量在转录及蛋白水平均低于对照组(均P<0.05),且48 h表达量均低于24 h(均P<0.05)。结论:H.pylori感染可下调胃黏膜上皮细胞C/EBPα和CX43的表达,这可能与胃癌发生有关。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 CCAAT增强子结合蛋白n 间隙连接蛋白43 胃癌
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心脏连接蛋白43羧基末端相互作用蛋白的酵母双杂交筛选 被引量:5
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作者 梁庆 林吉进 李玉光 《心脏杂志》 CAS 2007年第3期280-285,共6页
目的研究心脏连接蛋白43(Cx43)羧基末端与哪些心肌细胞内蛋白质存在相互作用。方法①通过PCR方法得到编码心脏Cx43羧基末端(AA235-382)的cDNA片段,并在其两端分别加上EcoRI和BamHI酶切位点,应用EcoRI/BamHI酶切PCR产物及pGBKT7空载体,... 目的研究心脏连接蛋白43(Cx43)羧基末端与哪些心肌细胞内蛋白质存在相互作用。方法①通过PCR方法得到编码心脏Cx43羧基末端(AA235-382)的cDNA片段,并在其两端分别加上EcoRI和BamHI酶切位点,应用EcoRI/BamHI酶切PCR产物及pGBKT7空载体,凝胶分离后应用T4连接酶进行连接;②通过化学转化法将pG-BKT7-Cx43-CT转化酵母菌AH109;③通过“尿素/SDS”法从被转化的酵母菌中提取蛋白质;④应用抗C-myc抗体,通过Western blot方法检测”诱饵”蛋白的表达(即Gal4-BD-C-myc-Cx43-CT融合蛋白);⑤检测”诱饵”蛋白自我激活报告基因与否后,将已被“诱饵“质粒转化的AH109与人心脏cDNA文库进行杂交,筛选阳性克隆分离阳性克隆中的cDNA,并测序。结果①诱饵载体测序结果证明pGBKT7中的“Gal4 DNA binding domain-C-myc”与Cx43的羧基末端在同一读框中;②“诱饵”质粒转化AH109酵母菌成功率100%;③从被转化的AH109中能提取到浓度满意的总蛋白;④Western blot能检测到特异性条带,其位置与Gal4-BD-C-myc-Cx43-CT的分子量相当;⑤“诱饵”蛋白不能自激活报告基因Ade2和Mel1,但可自激活His3,5mmol/L的3-AT可有效抑制“诱饵”蛋白本身自激活报告基因His3,以利于下一步的杂交筛选,筛选得到10个准阳性克隆。结论心脏连接蛋白43羧基末端能与心肌细胞中的多种蛋白质存在相互作用,这些蛋白质可能参与对间隙连接通道的功能调控。 展开更多
关键词 缝隙连接通道 连接蛋白43 心律失常 蛋白质-蛋白质相互作用
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优化心肌膜蛋白提取方法及心肌缺血时间隙连接蛋白43的表达变化(英文) 被引量:3
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作者 肖静 岳朋 +5 位作者 潘振伟 王宁 张勇 于海燕 林道红 杨宝峰 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第6期474-478,共5页
目的优化膜蛋白提取方法,以便研究心肌缺血时connexin43(间隙连接蛋白43)的表达变化。方法①差速离心法结合溶剂提取法提取心肌膜蛋白,溶解膜蛋白时比较了6组方案,通过各组方案在聚丙烯酰胺凝胶电泳中条带分布差异筛选出最佳方案,分析... 目的优化膜蛋白提取方法,以便研究心肌缺血时connexin43(间隙连接蛋白43)的表达变化。方法①差速离心法结合溶剂提取法提取心肌膜蛋白,溶解膜蛋白时比较了6组方案,通过各组方案在聚丙烯酰胺凝胶电泳中条带分布差异筛选出最佳方案,分析心肌细胞膜表面受体表达。②通过左冠脉结扎造成对照组、5min、20min、60min心肌缺血组,研究缺血时心肌connexin43表达变化。结果①最终选择RIPA含4%SDS来溶解膜蛋白,并成功检测出connexin43,βactin(管家蛋白),M受体(毒蕈碱型乙酰碱受体)等膜蛋白。②免疫印迹技术检测缺血不同时相connexin43表达变化,5min、20min、60min缺血组相对对照组分别减少20%、60%、76%。结论应用此方案能成功提取心肌膜蛋白,为进一步研究心肌缺血时connexin43的表达变化奠定了基础。 展开更多
关键词 膜蛋白 间隙连接蛋白43 免疫印迹 聚丙烯酰胺凝胶电泳 毒蕈碱型乙酰碱受体
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人胚胎心肌组织发育过程中Cx43和Bcl-2蛋白表达的研究 被引量:5
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作者 张泳 刘学红 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期201-203,共3页
目的观察连接蛋白43(Cx43)和Bcl-2蛋白在人胚胎心室肌组织中的表达,探讨其与心脏发育的关系。方法应用免疫组织化学法检测第2、3、4三个月胎龄段Cx43和Bcl-2蛋白在人胚胎心室肌组织中的表达。结果第2月胚龄时,人胚心室肌组织内可见单个... 目的观察连接蛋白43(Cx43)和Bcl-2蛋白在人胚胎心室肌组织中的表达,探讨其与心脏发育的关系。方法应用免疫组织化学法检测第2、3、4三个月胎龄段Cx43和Bcl-2蛋白在人胚胎心室肌组织中的表达。结果第2月胚龄时,人胚心室肌组织内可见单个散在分布的Bcl-2阳性细胞,随着胎龄的增加,Bcl-2阳性细胞数量逐渐增多,到第4月胎龄时,在心室肌组织内可见三五成群分布的Bcl-2阳性细胞。第2月胚龄时,Cx43蛋白呈斑点状散在分布于心室肌细胞的细胞质,随着胎龄的增加,其分布范围逐渐扩大,在心室肌细胞与心室肌细胞连接处也出现Cx43蛋白的阳性表达,到第4月胎龄时,Cx43蛋白在心室壁内逐渐形成成片弥散样分布。结论Cx43和Bcl-2蛋白参与了人胚胎早期心室肌组织细胞的生长发育。 展开更多
关键词 心肌 连接蛋白43 原癌基因蛋白质C-BCL-2 胚胎发育
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血管紧张素Ⅱ经AT_1受体和ERK1/2上调心肌细胞Cx43间隙连接 被引量:4
11
作者 王业松 马虹 +3 位作者 胡苑 曾武涛 张惠忠 陈健文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期58-62,共5页
目的:探讨血管紧张素Ⅱ对培养新生鼠心室肌细胞Cx43间隙连接的影响及其机制。方法:AngⅡ处理培养心肌细胞24h。缬沙坦、PD98059在AngⅡ刺激细胞前1h加到培养基中,对照组加等体积药物溶剂DMSO。用Westernblotting分析、代谢标记和免疫沉... 目的:探讨血管紧张素Ⅱ对培养新生鼠心室肌细胞Cx43间隙连接的影响及其机制。方法:AngⅡ处理培养心肌细胞24h。缬沙坦、PD98059在AngⅡ刺激细胞前1h加到培养基中,对照组加等体积药物溶剂DMSO。用Westernblotting分析、代谢标记和免疫沉淀测定、电镜观察心肌细胞Cx43表达、合成和间隙连接。结果:Westernblotting分析显示用10-9-10-6mol/LAngⅡ刺激细胞24h,Cx43的表达与对照组相比呈浓度依赖性增加;用AngⅡ0.1μmol/L刺激心肌细胞24h,磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)活性高于对照组(P<0.01),AT1受体拮抗剂缬沙坦(1μmol/L)能完全阻断AngⅡ增加P-ERK1/2活性;用AngⅡ0.1μmol/L刺激心肌细胞24h,Cx43表达及P-ERK1/2活性均高于对照组(P<0.01),ERK1/2激酶特异性抑制剂PD98059(1μmol/L)能阻断AngⅡ上调Cx43表达和增加P-ERK1/2活性。代谢标记和免疫沉淀测定显示AngⅡ处理组放射渗入Cx43的量明显高于对照组(P<0.01),缬沙坦(1μmol/L)能完全阻断AngⅡ增加放射渗入Cx43的量。电镜观察表明用AngⅡ0.1μmol/L刺激心肌细胞24h,AngⅡ处理组细胞间隙连接数目和大小大于对照组(P<0.05)。结论:AngⅡ通过AT1受体和ERK1/2促进培养心肌细胞合成Cx43,上调Cx43表达和增加间隙连接数目及大小。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ 心肌细胞 连接蛋白43 缝隙接合部 有丝分裂素激活蛋白激酶类
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Cx43、Bax和Bcl-2在胎膜早破患者胎膜组织中的表达及意义 被引量:4
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作者 王艳艳 崔世红 +4 位作者 程国梅 许雅娟 王晓娟 刘灵 张林东 《中国妇产科临床杂志》 2009年第1期45-48,共4页
目的检测间隙连接蛋白43(Cx43)在胎膜早破患者胎膜组织中的表达,分析其与凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的相关性,探讨三者与胎膜早破发生的关系。方法随机选择本院剖宫产分娩的孕32~42周胎膜早破孕妇30例(胎膜早破组),其中未足月胎膜早破... 目的检测间隙连接蛋白43(Cx43)在胎膜早破患者胎膜组织中的表达,分析其与凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的相关性,探讨三者与胎膜早破发生的关系。方法随机选择本院剖宫产分娩的孕32~42周胎膜早破孕妇30例(胎膜早破组),其中未足月胎膜早破(pPROM)15例,足月胎膜早破(tPROM)15例;无胎膜早破孕妇30例(对照组)。采用免疫组化法(PV法)检测Cx43、Bax和Bcl-2的表达并进行图像分析。结果①各组胎膜组织中均可见Cx43、Bax、Bcl-2不同程度的表达。②tPROM组Cx43、Bcl-2的表达明显低于对照组(P<0.01),而Bax的表达高于对照组,差异均有显著性(P<0.05)。tPROM组Cx43的表达高于pPROM组,差异有显著性(P<0.01);而Bcl-2、Bax在两组中比较,差异无显著性(P>0.05)。③PROM组人工胎膜破口附近Cx43、Bcl-2的表达低于非人工胎膜破口附近,Bax的表达则相反,两组比较,差异有显著性(均P<0.01)。④PROM组Cx43的表达水平与Bax呈负相关(r=-0.309,P<0.05)。结论胎膜组织中Cx43的低表达及细胞的过度凋亡可能对胎膜早破的发生起一定的促进作用。 展开更多
关键词 胎膜早破 间隙连接蛋白43 细胞凋亡 原癌基因蛋白质类 免疫组织化学
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糖尿病大鼠心肌组织缝隙连接蛋白43的表达及硫化氢的干预作用 被引量:2
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作者 李维正 刘同祥 +4 位作者 徐林林 王小龙 谢地成 刘源 王庆国 《潍坊医学院学报》 2015年第5期324-326,337,共4页
目的在大鼠糖尿病模型下,评价缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达和硫化氢(H_2S)对该蛋白的干预作用。方法将大鼠随机分为4组:PBS处理正常大鼠组(PBS-N)、H_2S处理正常大鼠组(H_2S-N)、H_2S处理糖尿病大鼠组(H_2S-Dia)、PBS处理糖尿病大鼠组(PB... 目的在大鼠糖尿病模型下,评价缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达和硫化氢(H_2S)对该蛋白的干预作用。方法将大鼠随机分为4组:PBS处理正常大鼠组(PBS-N)、H_2S处理正常大鼠组(H_2S-N)、H_2S处理糖尿病大鼠组(H_2S-Dia)、PBS处理糖尿病大鼠组(PBS-Dia)。大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病心肌模型;应用聚合酶链反应(PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot),分别检测Cx43在基因、蛋白上的表达。结果PBS-Dia组的Cx43 mRNA,Cx43蛋白表达较PBS-N组明显下降;H_2S-Dia组Cx43 mRNA,Cx43蛋白的表达较PBSDia组明显增加。结论糖尿病大鼠心肌组织Cx43在基因、蛋白水平上的表达均有不同程度下降,而H_2S可上调Cx43 mRNA,提高Cx43蛋白的表达水平,进而改善细胞间的传导。 展开更多
关键词 缝隙连接蛋白43 硫化氢 糖尿病心肌病 CX43 mRNA
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Cx43通过P38/MAPK信号途径增强膀胱癌细胞的侵袭能力 被引量:1
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作者 迟强 艾晓林 +2 位作者 李红阳 邱玙 王志勇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期533-537,共5页
目的:探讨连接蛋白43(connexin 43,Cx43)对膀胱癌细胞侵袭能力的影响及其可能的作用机制。方法:选取2014年6月至2015年9月间承德医学院附属医院泌尿外科52例膀胱癌手术组织标本及32例癌旁组织,以及人膀胱癌细胞株5637。用免疫组化方法... 目的:探讨连接蛋白43(connexin 43,Cx43)对膀胱癌细胞侵袭能力的影响及其可能的作用机制。方法:选取2014年6月至2015年9月间承德医学院附属医院泌尿外科52例膀胱癌手术组织标本及32例癌旁组织,以及人膀胱癌细胞株5637。用免疫组化方法检测膀胱癌组织中Cx43蛋白表达。将Cx43脂质体、空白脂质体、siRNA及siRNA对照质粒转染5637细胞,Western blotting验证过Cx43表达和干扰效果;用Transwell侵袭实验检测5637细胞侵袭能力的变化,用Western blotting检测5637细胞MMP-2、MMP-9和P-P38蛋白表达水平的变化。结果:膀胱癌组织中Cx43蛋白的表达水平明显高于癌旁组织[(5.21±0.33)vs(2.84±0.19),P<0.01]。转染Cx43脂质体和siRNA成功上调/下调5637细胞中Cx43的表达。Cx43过表达组5637细胞的侵袭能力高于对照组[穿膜细胞数:(1.36±0.04)vs(0.70±0.15)个,P<0.01],siRNA干扰组细胞的侵袭能力低于对照组[穿膜细胞数:(0.20±0.08)vs(0.59±0.13)个,P<0.05)。Cx43过表达组细胞MMP-2、MMP-9、P-P38/P38蛋白水平均高于对照组(P<0.01或P<0.05),siRNA干扰组均低于对照组低(均P<0.01)。结论:Cx43增强膀胱癌5637细胞的侵袭能力,其机制可能是通过激活P38/MAPK信号途径实现的。 展开更多
关键词 膀胱癌 细胞连接蛋白43 P38/丝裂原活化蛋白激酶 RNA干扰 侵袭
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Cx43、Skp2在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及临床意义 被引量:17
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作者 胡叶青 刘元姣 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第1期104-109,共6页
背景与目的:间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)是间隙连接蛋白家族的主要成员,在多种肿瘤细胞中表达下降。它在许多细胞系以依赖间隙连接(Gapjunction)的途径发挥抑癌作用。最近研究发现它还可能通过抑制S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase... 背景与目的:间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)是间隙连接蛋白家族的主要成员,在多种肿瘤细胞中表达下降。它在许多细胞系以依赖间隙连接(Gapjunction)的途径发挥抑癌作用。最近研究发现它还可能通过抑制S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein2,Skp2)的表达而起到抑制肿瘤生长的作用。Skp2是F鄄box蛋白家族的成员,它能特异性识别并促进某些调节G1期进程的关键性细胞周期调节物的降解,在许多肿瘤中表达升高。本研究检测Cx43和Skp2在卵巢上皮性肿瘤中的表达,探讨它们的表达与卵巢癌发展的关系,以及这两种蛋白表达的相互关系。方法:收集81例卵巢上皮性肿瘤的外科手术石蜡标本(良性13例、交界性12例、恶性56例),用免疫组化的方法检测Cx43和Skp2蛋白的表达水平。分析它们的表达水平与临床病理参数的关系以及二者的相互关系。结果:Cx43蛋白在卵巢上皮性良性、交界性及恶性肿瘤中阳性率分别为84.6%、66.7%和33.9%,经免疫组化半定量分析,其在上皮性卵巢癌中的表达水平明显低于良性肿瘤(P<0.01)和交界性肿瘤(P<0.01),在不同年龄及组织类型的卵巢癌中表达无显著性差异(P>0.05),而在中低度分化组、Ⅲ~Ⅳ期组及有淋巴结转移组分别明显低于高分化组(P<0.05)、Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05)及无淋巴结转移组(P<0. 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 CX43 SKP2 病理分级 临床分期 淋巴结转移
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酸枣仁汤对抑郁大鼠大脑皮质星形胶质细胞胶质原纤维酸性蛋白和缝隙连接蛋白43作用的研究 被引量:4
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作者 刘克洪 孙建伟 胡晓华 《新中医》 CAS 2019年第10期13-16,共4页
目的:探讨酸枣仁汤对抑郁大鼠大脑皮质星形胶质细胞胶质原纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)和缝隙连接蛋白43 (Connexin43,Cx43)的作用。方法:将80只大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组和中药组4组,每组20只;除... 目的:探讨酸枣仁汤对抑郁大鼠大脑皮质星形胶质细胞胶质原纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)和缝隙连接蛋白43 (Connexin43,Cx43)的作用。方法:将80只大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组和中药组4组,每组20只;除空白组外,以慢性不可预见性温和应激(Chronic unpredictability mild stress,CUMS)结合孤养建立大鼠抑郁模型;各组分别进行相应处理,对各组大鼠糖水消耗情况、旷场实验指标变化情况、大脑皮质神经阻滞细胞损伤情况及大脑皮质GFAP、Cx43表达情况等进行比较。结果:与空白组比较,模型组大鼠糖水消耗量、水平及垂直活动均明显减少,但神经损伤总评分、大脑皮质星形胶质细胞GFAP、Cx43表达均明显升高,差异均有统计学意义(P <0.05);与模型组比较,氟西汀组及中药组大鼠2组糖水消耗量、水平及垂直活动均明显增多,神经损伤总评分、脑皮质星形胶质细胞GFAP、Cx43表达均明显减小,差异均有统计学意义(P <0.05);中药组与氟西汀组各检测指标差异均无统计学意义(P> 0.05)。结论:酸枣仁汤可显著减轻抑郁大鼠糖水消耗量及大鼠神经细胞损伤情况,减弱其自主活动,并降低其GFAP、Cx43表达。 展开更多
关键词 抑郁症 酸枣仁汤 胶质原纤维酸性蛋白(GFAP) 缝隙连接蛋白43(Cx43) 动物实验 大鼠
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TRAP1、Cx43在胶质瘤患者组织中的表达及预测术后复发的价值分析 被引量:1
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作者 包辉 曲利明 +3 位作者 鞠佳妮 杨凯 海优尔·艾孜则 古丽仙·麦麦提明 《脑与神经疾病杂志》 CAS 2022年第12期738-743,共6页
目的探讨肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(TRAP1)、连接蛋白43(Cx43)在胶质瘤(GC)患者组织中的表达及预测术后复发的价值。方法选取2018年4月至2019年4月新疆医科大学第二附属医院病理科94例GC患者术中标本为病理组,同期25例头部创伤脑减压... 目的探讨肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(TRAP1)、连接蛋白43(Cx43)在胶质瘤(GC)患者组织中的表达及预测术后复发的价值。方法选取2018年4月至2019年4月新疆医科大学第二附属医院病理科94例GC患者术中标本为病理组,同期25例头部创伤脑减压术患者脑组织标本为正常组。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测TRAP1 mRNA、Cx43 mRNA表达。分析胶质瘤患者TRAP1 mRNA、Cx43 mRNA表达与病理特征的关系,分析GC复发因素,受试者工作特征曲线(ROC)分析TRAP1mRNA、Cx43 mRNA预测GC术后复发的价值。结果病理组TRAP1 mRNA表达高于正常组,Cx43mRNA表达低于正常组(P<0.05);GC患者TRAP1 mRNA、Cx43 mRNA表达与病理分级、分化程度有关(P<0.05);将分化程度、病理分级控制后,TRAP1 mRNA高表达、Cx43 mRNA低表达均为GC患者术后复发的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线显示,TRAP1 mRNA、Cx43 mRNA联合预测GC术后复发的AUC值为0.889,高于单独预测(P<0.05)。结论GC患者组织中TRAP1 mRNA、Cx43 mRNA均异常表达,且与GC恶性进展密切相关,可为复发预测提供参考。 展开更多
关键词 胶质瘤 肿瘤坏死因子受体相关蛋白1 连接蛋白43 病理特征 术后复发
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上调Cx43对心肌细胞间通讯及离子通道的影响 被引量:3
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作者 唐良虎 李德 +3 位作者 杨大春 王强 马双陶 张彦 《西部医学》 2016年第3期312-316,320,共6页
目的通过重组腺病毒介导缝隙连接蛋白Cx43在体外培养的心肌细胞中过度表达,观察心肌细胞间通讯及细胞离子通道变化。方法通过RT-PCR法克隆SD大鼠缝隙连接蛋白Cx43基因的全长cDNA,用基因重组的方法构建腺病毒pAdEasy-1-Cx43。行心肌细胞... 目的通过重组腺病毒介导缝隙连接蛋白Cx43在体外培养的心肌细胞中过度表达,观察心肌细胞间通讯及细胞离子通道变化。方法通过RT-PCR法克隆SD大鼠缝隙连接蛋白Cx43基因的全长cDNA,用基因重组的方法构建腺病毒pAdEasy-1-Cx43。行心肌细胞基因转染后,分别用RT-PCR和蛋白质免疫印迹技术检测Cx43在心肌细胞中的mRNA和蛋白表达,用免疫荧光技术分析Cx43在心肌细胞膜上的分布。采用划痕标记荧光染料示踪(SLDT)技术观察培养心肌细胞群之间的罗氏黄(lucifer yellow,LY)染色传输,检测上调Cx43对心肌细胞间通讯的影响;采用单细胞膜片钳技术分析各离子通道电流的变化,观察上调Cx43对心肌细胞膜离子通道表达的影响。结果腺病毒重组质粒pAdEasy-1-Cx43构建成功;转染心肌细胞后,pAdEasy-1-CX43转染组Cx43mRNA及蛋白表达上调,且心肌细胞膜上分布较多;细胞划痕荧光染料示踪提示转染后,心肌细胞间通讯增强;膜片钳全细胞膜电流提示转染后钙内流降低,钾离子电流未发现有明显改变。结论成功构建腺病毒重组质粒pAdEasy-1-Cx43载体,隙连接蛋白Cx43表达上调增强了心肌细胞间通讯以及钙内流,为Cx43改善心室肌电重构,减少或预防室性心律失常发生的进一步研究打下了基础。 展开更多
关键词 重组腺病毒转染 缝隙连接蛋白CX43 细胞划痕荧光染料示踪 细胞间通讯 膜片钳
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骨癌痛吗啡耐受疼痛模型大鼠脊髓缝隙连接蛋白43的表达情况及其对环磷酸腺苷/蛋白激酶A通路、炎症的影响 被引量:2
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作者 冯鹏玖 张爱民 +3 位作者 苏明 蔡海 赵秀霞 冉娅 《广西医学》 CAS 2019年第23期3017-3022,共6页
目的探讨骨癌痛吗啡耐受疼痛(BPT)模型大鼠脊髓缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达情况及其对环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)通路、炎症的影响。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、骨癌痛组、BPT组、BPT+阴性对照-小干扰RNA(siRNA)组(BPT-CS... 目的探讨骨癌痛吗啡耐受疼痛(BPT)模型大鼠脊髓缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达情况及其对环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)通路、炎症的影响。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、骨癌痛组、BPT组、BPT+阴性对照-小干扰RNA(siRNA)组(BPT-CS组)、BPT+Cx43-siRNA组(BPT-CXS组)。在大鼠左后肢胫骨上端进行穿刺后,假手术组骨髓腔内注射生理盐水,其余4组髓腔内注射鼻咽癌HONE1细胞建立骨癌痛模型。机械刺激回缩阈值(MWT)显著改变后,BPT组、BPT-CS组和BPT-CXS组大鼠给予皮下注射吗啡建立BPT模型,而骨癌痛组皮下注射等体积的生理盐水。MWT显著改变后,BPT组、BPT-CXS组、BPT-CS组大鼠分别鞘内注射生理盐水、Cx43-siRNA、阴性对照-siRNA。MWT显著改变后处死各组大鼠取L4~6脊髓组织,检测Cx43、cAMP、PKA蛋白表达水平,以及白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果(1)骨癌痛建模后7 d,其他4组大鼠的MWT均低于假手术组(均P<0.05);在建立BPT模型后9 d起,BPT-CXS组、BPT组、BPT-CS组大鼠的MWT均低于骨癌痛组(均P<0.05);在siRNA干预后6~9 d,BPT-CXS组的MWT低于骨癌痛组,但高于BPT组和BPT-CS组(均P<0.05),而BPT组和BPT-CS组之间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)与假手术组比较,其余4组大鼠脊髓Cx43、cAMP、PKA蛋白表达水平以及TNF-α、IL-1β水平增加(均P<0.05);与骨癌痛组比较,BPT组、BPT-CS组和BPT-CXS组以上指标表达水平增加(均P<0.05);与BPT组比较,BPT-CXS组的以上指标表达水平降低(均P<0.05)。结论BPT模型大鼠脊髓Cx43蛋白表达上调,抑制其表达可能是逆转BPT的重要途径;脊髓Cx43通过调节cAMP/PKA通路进而促进促炎性因子IL-1β和TNF-α表达,可能是BPT发生的关键机制之一。 展开更多
关键词 骨癌痛 吗啡耐受 缝隙连接蛋白43 环磷酸腺苷 蛋白激酶A 炎症 小干扰核糖核酸 大鼠
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益元灸通过AMPK-Cx43途径改善脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠储尿功能的机制研究
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作者 张芝兰 黄晓萌 +4 位作者 韦慧麟 黄靖 尚文雅 李冰 任亚锋 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期835-844,共10页
目的基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)-缝隙连接蛋白43(Cx43)途径探讨益元灸对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠储尿功能的影响及其机制。方法将80只雌性SD大鼠按随机数字表法选取12只作为假手术组,其余68只大鼠按照改良Hassan Shaker脊髓... 目的基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)-缝隙连接蛋白43(Cx43)途径探讨益元灸对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠储尿功能的影响及其机制。方法将80只雌性SD大鼠按随机数字表法选取12只作为假手术组,其余68只大鼠按照改良Hassan Shaker脊髓横断法制备骶上脊髓损伤模型,待脊髓损伤模型稳定后,筛选出符合标准的脊髓损伤后神经源性膀胱模型。将造模成功的大鼠按照随机数字表法分为模型组、益元灸组、抑制剂组、益元灸+抑制剂组,每组14只。益元灸组大鼠进行益元灸治疗,抑制剂组大鼠尾静脉注射AMPK抑制剂多索吗啡(0.2 mg/kg),益元灸+抑制剂组大鼠予益元灸联合尾静脉注射多索吗啡(0.2 mg/kg),假手术组和模型组不进行任何干预,连续14 d。干预结束后采用尿流动力学评价大鼠膀胱功能;HE染色观察膀胱组织形态学变化;比色法检测膀胱组织中三磷酸腺苷(ATP)含量;免疫组化法检测膀胱组织中磷酸化AMPK(p-AMPK)、Cx43、酪氨酸蛋白激酶受体(C-kit)阳性表达;蛋白质印迹法检测膀胱组织中AMPK、p-AMPK、Cx43、C-kit蛋白表达;实时荧光定量PCR法检测膀胱组织中Cx43、C-kit mRNA的表达。结果与模型组比较,益元灸组大鼠膀胱最大容量、膀胱顺应性增高,漏尿点压力降低;细胞相对规则有序,空泡细胞减少,组织水肿减轻;膀胱组织中ATP含量减少,p-AMPK阳性表达率升高,Cx43、C-kit阳性表达率下降,p-AMPK蛋白表达升高,Cx43、C-kit蛋白表达下降,Cx43、C-kit mRNA表达下降(均P<0.05)。与益元灸+抑制剂组比较,益元灸组大鼠膀胱最大容量、膀胱顺应性增高,漏尿点压力降低;细胞排列较紧密,组织水肿减轻;膀胱组织中ATP含量减少,p-AMPK阳性表达率升高,Cx43、C-kit阳性表达率降低,p-AMPK蛋白表达升高,Cx43、C-kit蛋白表达下降,Cx43、C-kit mRNA表达下降(均P<0.05)。结论益元灸可改善骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠的储尿功能,其作用机制可能与激活膀胱组织中AMPK-Cx43途径,降低膀胱逼尿肌细胞间兴奋传递,从而降低平滑肌收缩频率有关。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经源性膀胱 腺苷酸活化蛋白激酶-缝隙连接蛋白43途径 三磷酸腺苷 酪氨酸蛋白激酶受体
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