普伐他汀对柯萨奇病毒性心肌炎小鼠Connexin43mRNA表达的影响

背景多种心律失常为病毒性心肌炎(VMC)临床表现之一。心肌细胞缝隙连接(gap junction,GJ)与心律失常密切相关,每个GJ由连接蛋白(connexin,Cx)构成。Cx43是普遍存在于心脏的工作细胞和传导系统特化细胞的连接蛋白之一。目前VMC的炎症和免疫损伤机制日益明确。炎症和之后的免疫反应损伤心肌组织,使心肌细胞膜结构改变,可以影响电传导及兴奋性。正常的GJ分布被显著破坏,Cx异常可能是VMC心律失常与电机械异常的解剖学基础。目的通过比较干预组和模型对照组小鼠的Cx43表达水平,探索普伐他汀对VMC及心律失常的作用,及不同剂量疗效的差别,并探讨其可能的作用机制。方法取66只雄性4周龄BALB／c小鼠,随机60只腹腔接种柯萨奇病毒B组3型(CVB3,10-7TCID50)0．06 mL建立VMC模型。随机等分为;模型对照组、普伐他汀40 mg·kg-1·d-1治疗组和80 mg·kg-1d-1治疗组。剩余6 R作为空白对照组,予Eagle’s液0．06 mL腹腔注射。空白对照组和模型对照组予生理盐水0．2 mL灌胃;其余组给予相应剂量的普伐他汀灌胃,每日1次。给药14 d后处死所有存活小鼠,采用实时定量PCR法检测Cx43mRNA表达水平,免疫组织化学法检测心肌胞膜上Cx43蛋白的表达。结果模型对照组心肌病变严重,心肌细胞膜上Cx43蛋白明显少于40 mg·kg-1·d-1治疗组和80 mg·kg-1·d-1治疗组。普伐他汀40 mg·kg-1·d-1治疗组(1．32±0．096)的和80 mg·kg-1·d-1治疗组(1．55±0．126)的Cx43 mPNA表达显著高于模型对照组(P值均<0．05),仍显著低于正常对照组(P值均<0．05),两用药组间的差异无统计学意义(P>0．05)。结论普伐他汀对VMC有一定的疗效,减轻了VMC时Cx43基因及蛋白表达的降低,提示他汀类药物可能是改善VMC及其心律失常的方向。

丹参酮ⅡA增强HSV-tk/GCV旁观者效应及其与Cx43 mRNA表达的关系

目的 研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA ,Tan)对HSV tk/GCV旁观者效应的增强作用及其与间隙连接蛋白Cx4 3转录表达的关系。方法 应用polybrene转染、荧光定量RT PCR等技术 ,观察Tan对宫颈癌细胞ME180 (ME)、ME/TK转化细胞旁观者效应及诱导Cx4 3mRNA表达的作用。结果 在HSV tk/GCV系统中 ,Tan显著地提高了ME/TK细胞对GCV的敏感性。在 2 μg/mlGCV作用下 ,以1.3× 10 9mol/LTan与不加Tan的作用相比较 ,在ME与ME/TK不同比例混合细胞的各组中 ,细胞的存活率明显降低 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。并观察到Tan对GCV旁观者效应的增强作用 ,在一定范围内为 1.3× 10 -8mol/L和 1.3× 10 -9mol/L。RT PCR结果表明 ,经 1.3× 10 -8mol/L和 1.3× 10 -9mol/LTan处理的ME细胞 ,其Cx4 3mRNA的相对拷贝数比值增高约 8.83倍及 8.4 7倍。结论 在宫颈癌ME180细胞中 ,Tan在 1.3× 10 -8mol/L和 1.3× 10 -9mol/L范围内具有明显增强HSV tk/GCV旁观者效应的作用。Tan在转录水平诱导Cx4 3mRNA表达上调 ,与旁观者效应的增强作用密切相关。