丹参酮ⅡA对HUVEC细胞间缝隙连接的作用

【目的】探讨丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA)对人胎脐静脉上皮细胞(HUVEC)缝隙连接细胞通讯(GJIC)的影响及其机制。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测丹参酮ⅡA对HUVEC细胞生长的影响,荧光显微镜观察及流式细胞仪荧光示踪法分析GJIC功能变化,并与阳性对照药全反式维甲酸(ATRA)比较,采用荧光实时定量PCR(q RT-PCR)法分析Cx37、Cx40 m RNA的表达。【结果】丹参酮ⅡA作用HUVEC 24、48 h的半数致死量(IC50)分别为15、8.5μmol/L,32、64μmol/L丹参酮ⅡA作用HUVEC 48 h有明显细胞毒性,抑制率大于70%;选用0、4、8、16、32μmol/L丹参酮ⅡA作用HUVEC48 h,流式细胞仪检测结果显示:各组接受绿色荧光Calcein-AM的细胞数量与总细胞数比值明显升高,其中8、16、32μmol/L组可显著提高GJIC功能(P<0.01)。q RT-PCR分析结果显示:与空白对照组比较,8、16、32μmol/L丹参酮ⅡA组可显著提高Cx37、Cx40 m RNA表达(P<0.05或P<0.01),并有一定的浓度依赖关系。【结论】丹参酮ⅡA能够提高Cx37、Cx40 m RNA表达,这可能是丹参酮ⅡA增强上皮细胞GJIC功能的机制之一。

巨细胞病毒感染与新生儿连接蛋白Cx基因易感性及听力影响研究

目的探究巨细胞病毒感染与新生儿连接蛋白Cx基因的相关性及其对新生儿听力的影响。方法选取2017年1月-2018年4月于南通市妇幼保健院出生或就诊的新生儿为研究对象,其中发生先天性巨细胞病毒感染的86例新生儿为研究组,抽取未发生先天性巨细胞病毒感染的232例新生儿为对照组。比较两组新生儿血清总胆红素(TBiL)、谷氨酸转氨酶(ALT)以及天门冬氨酸转氨酶(AST)水平;比较两组新生儿连接蛋白Cx基因突变率及突变情况;比较两组新生儿听力随访结果以及不同程度耳聋人数占比。统计听力有问题的新生儿脑干听觉诱发电位。使用Pearson相关分析研究连接蛋白Cx基因突变与新生儿巨细胞病毒感染以及听力障碍之间的相关性。结果研究组新生儿TBiL、ALT、AST水平分别为(19.58±4.32)μmol/L、(48.76±10.43)U/L、(69.48±18.76)U/L,明显高于对照组新生儿(10.87±4.49)μmol/L、(28.77±9.35)U/L、(38.14±13.08)U/L,两组数据比较差异有统计学意义(P<0.05)。研究组新生儿连接蛋白Cx基因突变27例(31.39%),对照组新生儿连接蛋白Cx基因突变4例(1.72%),两组数据比较差异具有明显统计学意义(P<0.05)。听力随访结果比较发现,研究组新生儿未通过初筛47例(54.65%),对照组新生儿未通过初筛28例(12.06%),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果,连接蛋白Cx基因突变和新生儿发生先天性巨细胞病毒感染呈正相关关系。结论新生儿连接蛋白Cx基因突变与巨细胞病毒感染之间存在相关性,发生突变的新生儿更容易感染巨细胞病毒,且听力障碍发生率更高。