宫颈癌中CSN6对E6AP的调节作用及其临床意义

目的:探讨宫颈癌中组成型光形态发生因子9信号复合体亚单位6(constitutive photomorphogenesis 9 signalosome subunit 6,CSN6)对E6AP的调节作用。方法:在癌症和肿瘤基因图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中检索CSN6和E6AP基因,比较分析其相关性。采用质粒转染、蛋白质印迹(Western blotting)、四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)、流式细胞术等方法检测CSN6对E6AP表达及细胞生物学的影响。通过在裸鼠皮下接种不同CSN6表达状态的Hela细胞株建立动物模型,观察CSN6对肿瘤生长的影响。结果:数据库资料显示,CSN6和E6AP在肿瘤中有过表达和突变的现象。CSN6可以上调E6AP蛋白的表达,抑制CSN6的表达可以使E6AP表达下降,细胞增殖能力降低,细胞周期停滞于G0-G1期。动物实验显示,敲除CSN6可以显著抑制肿瘤生长,且肿瘤中E6AP蛋白表达水平下降,p53蛋白表达水平增加。结论:CSN6可以通过上调E6AP蛋白的表达而促进宫颈癌的发生发展。

胃癌组织中CSN6的表达及临床意义

目的:观察组成型光形态发生因子9信号复合体亚基6(Constitutive photomorphogenesis 9 signalosome subunit 6,CSN6)在胃癌组织中的表达,并探讨其临床价值。方法:收集2019年11月~2020年2月手术切除的30例新鲜胃癌及癌旁组织,采用Western blot检测30例新鲜胃癌及癌旁组织中CSN6表达量。选取2013年1月~2015年9月病理科存档的170例胃癌石蜡组织及癌旁组织,采用免疫组化检测CSN6的表达情况。结果:新鲜组织胃癌中CSN6表达量为1.821±0.421,高于癌旁组织的0.976±0.311,差异有统计学意义(P<0.05)。石蜡组织中,CSN6在胃癌组织中的阳性率为55.3%,高于癌旁正常组织的28.8%。CSN6的阳性表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、病理分期有关。CSN6阳性患者的5年生存率为41.6%,低于阴性患者的60.1%,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析表明CSN6、肿瘤大小、分化程度、神经浸润、脉管癌栓、浸润深度、淋巴结转移、病理分期与患者预后有关。多因素分析表明,CSN6、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、病理分期是胃癌预后的独立危险因素,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CSN6参与胃癌的发生及发展,是判断胃癌预后及靶向治疗的重要分子标志物。

CSN6在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨食管鳞状细胞癌中组成型光形态发生因子9信号复合体亚单位6(CSN6)的表达及临床意义。方法选择2019年1月—2020年12月本院80例食管鳞状细胞癌患者、68例Barrett食管患者、120名健康体检者作为研究对象,收集所有研究对象的血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中CSN6蛋白的表达量,采用电化学发光法检测癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌相关抗原(SCCA)的表达量。绘制ROC曲线比较上述指标的诊断价值。采用免疫组织化学实验检测2013年9月—2016年1月本院病理科存档的食管鳞状细胞癌手术标本共180例,检测癌及癌旁石蜡组织标本中CSN6的表达,分析CSN6与临床病理特征及预后的关系。结果食管鳞状细胞癌患者血清中CSN6的表达量高于Barrett食管患者和健康体检者,差异具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线表明:CSN6、CEA和SCCA的诊断效能低于三者联合检测,差异具有统计学意义(P<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中CSN6的阳性率与癌旁正常组织比较,差异具有统计学意义,CSN6的阳性表达与肿瘤大小、病理分期、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05)。CSN6阳性表达患者的5年生存率与阴性表达比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素分析表明CSN6阳性表达是判断食管鳞状细胞癌不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论CSN6可能作为食管鳞状细胞癌早期诊断、预测不良预后的分子标志物。

去泛素化酶组成型光形态发生因子9信号复合体5上调甲硫氨酸腺苷转移酶2A表达促进肝癌细胞增殖

目的研究去泛素化酶组成型光形态发生因子9信号复合体5(CSN5)调控肝癌细胞增殖的的分子机制。方法采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法以及免疫组织化学法检测并比较CSN5在肝癌和癌旁组织表达的差异性。在肝癌细胞转染CSN5干扰片段并采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证CSN5和甲硫氨酸腺苷转移酶2A(MAT2A)表达的变化,同时用EdU法检测肝癌细胞增殖的变化。结果CSN5在肝癌组织和肝癌细胞中的表达水平明显增高(P<0.05)。干扰CSN5后肝癌细胞中CSN5 mRNA及蛋白的水平和肝癌细胞增殖能力显著降低(P<0.001)。在肝癌细胞中干扰CSN5的表达可以明显降低MAT2A蛋白水平(P<0.01)并进而影响肝癌细胞的增殖能力。结论CSN5可以通过调控甲硫氨酸腺苷转移酶2A的表达进而调控肝癌细胞的增殖。

CSN6对宫颈癌细胞自噬的调节作用

目的探讨组成型光形态发生因子9信号复合体亚基6(constitutive photomorphogenesis 9 signalosome subunit 6,CSN6)对宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞自噬能力的影响。方法用自噬双标腺病毒mRFP-GFP-LC3感染宫颈癌细胞示踪自噬流的水平,将阴性对照序列(siCtrl)、CSN6 siRNA(siCSN6)、空载体质粒(Vector)及CSN6过表达质粒(CSN6)分别转染宫颈癌细胞,Western blot检测CSN6及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated proteinl light chain 3,LC3)的表达。结果与siCtrl组相比,siCSN6组CSN6表达下降,而自噬体数量和LC3表达增加;与Vector组相比,CSN6组CSN6表达增加,而自噬体数量和LC3表达下降。结论转染小干扰CSN6增加宫颈癌细胞自噬水平,CSN6过表达抑制自噬活性。

COPS5在肿瘤中作用的研究进展

光发生因子9复合体第5亚基(COPS5)是一种进化保守的多功能蛋白质,在信号转导、细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、基因组不稳定和DNA损伤修复的调控中发挥重要作用。COPS5可通过抑制负调控蛋白和肿瘤抑制因子(P53、P27等)促进肿瘤发生,并与肿瘤进展及放化疗耐受性密切相关;针对COPS5的小分子抑制剂已被初步应用于临床。在不久的将来,COPS5可作为肿瘤治疗的潜在靶点,在肿瘤治疗中发挥更大的作用。文章系统回顾了COPS5在肿瘤发生、发展中的功能以及COPS5相关信号通路的研究进展。

CSN6对宫颈癌HeLa细胞与SiHa细胞自噬能力的影响研究

目的探讨组成型光形态发生因子9信号复合体亚基6(CSN6)对宫颈癌HeLa细胞与SiHa细胞自噬能力的影响。方法购置宫颈癌HeLa细胞与SiHa细胞,并测定腺病毒中GFP与mRFP表达水平,标记、追踪LC3,示踪自噬流的水平;将购置的细胞放置在6孔板中进行培养,随机分为对照序列组、CSN6 siRNA组、空载体质粒组与CSN6过表达组,各组细胞均进行相应的处理(连续完成24 h干预);采用Western Blot法测定各组细胞中CSN6、LC3蛋白、Beclin1、Atg5表达水平,荧光显微镜下检测两种细胞中自噬体个数,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞干预后增殖抑制率。结果siCSN6组不同宫颈癌细胞中自噬体个数高于siCtrl组,差异具有统计学意义(P<0.05);siCSN6组CSN6、LC3蛋白、Beclin1、Atg5表达水平高于siCtrl组、siCSN6组及CSN6组,差异具有统计学意义(P<0.05);CSN6组CSN6、LC3蛋白、Beclin1、Atg5表达水平低于siCtrl组、siCSN6组,差异具有统计学意义(P<0.05);siCSN6组干预后2、6、12、24、48 h细胞增殖抑制率高于siCtrl组、siCSN6组及CSN6组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论转染CSN6能提高宫颈细胞的自噬水平,而过表达CSN6则能抑制自噬活性,均会对细胞增殖抑制率产生影响。

FAP-α、CSN6在膀胱尿路上皮癌组织中的表达及临床意义

目的通过检测成纤维细胞活化蛋白-α(FAP-α)、组成型光形态发生因子9信号复合体亚基6(CSN6)在膀胱尿路上皮癌组织中的表达,解析其在膀胱尿路上皮癌中的临床意义。方法选择2015年1月至2017年5月本院收治的膀胱尿路上皮癌患者74例为研究对象,同期选取在本院经膀胱镜检查排除膀胱移行细胞癌,同时患有其他泌尿系统疾病并接受手术治疗留取正常膀胱组织的患者61例为对照组。免疫组织化学法检测两组受试者膀胱组织中的FAP-α、CSN6水平;分析膀胱尿路上皮癌组织中FAP-α、CSN6表达及二者与一般临床资料的相关性;对所有患者进行术后3年内随访,分析FAP-α、CSN表达对膀胱尿路上皮癌患者预后的影响;Cox分析影响膀胱尿路上皮癌预后不良的危险因素。结果与正常膀胱组织相比,膀胱尿路上皮癌组织中FAP-α、CSN6蛋白具有较高的阳性表达率(P<0.05);膀胱尿路上皮癌组织中FAP-α、CSN6蛋白的表达与患者病理分级及临床分期有相关性(P<0.05);FAP-α阳性表达组3年内复发率高于阴性表达组(P<0.05);CSN6阳性表达组3年内复发率高于阴性表达组(P<0.05);多因素Cox分析表明,病理分级、临床分期以及膀胱尿路上皮癌组织中FAP-α、CSN6阳性表达是影响膀胱尿路上皮癌患者不良预后的危险因素(P<0.05)。结论FAP-α、CSN6可能参与膀胱尿路上皮癌的发病机制,有望成为膀胱尿路上皮癌潜在的治疗靶点。

CSN5在胃癌中的表达及与患者预后的相关性

目的探讨CSN5在胃癌中的表达及与患者预后的关系。方法运用cBioportal分析工具,分析CSN5在胃癌中基因水平的改变情况;运用qRT-PCR方法检测CSN5 mRNA在永生化的正常胃黏膜细胞株及不同胃癌细胞株中的表达;运用Oncomine数据库(DErrico、Chen胃癌数据集)和TCGA数据库(375例胃癌组织和32例癌旁组织),分析CSN5 mRNA在胃癌组织与正常胃黏膜表达的差异性;运用生存期分析软件Kaplan-Meier plotter,分析CSN5对876例胃癌患者预后的影响;运用Chen胃癌数据集,分析胃癌患者5年生存状态与CSN5表达的关系。结果在胃癌中CSN5主要的基因改变形式为扩增;CSN5 mRNA在多种胃癌细胞株中的表达水平显著高于正常胃黏膜细胞株;CSN5 mRNA在胃癌中的表达显著高于正常胃黏膜。生存分析结果发现,CSN5高表达的患者总生存期较长,CSN5低表达的患者总生存期较短。结论 CSN5在胃癌组织中高表达,且其表达水平与胃癌患者的预后呈正相关,即CSN5高表达的患者,预后较好。

CSN与肿瘤关系的研究进展

目的总结近年来组成型光形态发生因子9信号复合体(CSN)在恶性肿瘤发生和发展中的研究进展。方法收集近年来国内外发表的关于CSN与恶性肿瘤关系的文献,就CSN及其主要亚单位(CSN5及CSN6)在恶性肿瘤中的研究进展进行综述。结果在许多恶性肿瘤中均发现有CSN的高表达。CSN主要是通过调控泛素化蛋白降解途径来降解p53等抑癌基因,从而发挥肿瘤促进作用。CSN5为CSN的脱nedd化活性中心,而CSN活性的发挥是以整个复合体的完整为前提的,即必须有CSN6(CSN结构的核心支架)的存在。CSN6通过多种信号传导途径促进肿瘤的发生及发展,而CSN5通过参与细胞周期调控及DNA损伤修复来促进肿瘤生长。结论研究CSN在恶性肿瘤进程中的作用,能为肿瘤的靶向治疗奠定基础,但其各亚单位的具体功能尚不明确,其上游调控因子亦有待于进一步发掘。