经后增殖方含药血清对超排卵大鼠卵巢颗粒细胞GDF9表达及凋亡的调控机制

【目的】观察益气血法经后增殖方含药血清对超排卵大鼠卵巢颗粒细胞生长分化因子9(GDF9)表达及凋亡的调控机制。【方法】制备超排卵大鼠血清(空白血清)和经后增殖方灌胃的超排卵大鼠血清(含药血清)。建立控制性超排卵(COH)大鼠模型,收集卵巢颗粒细胞。实验分为5组:空白血清组,含药血清组,含药血清+SB203580[p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂]组,含药血清+PDTC[核转录因子κB(NF-κB)抑制剂]组,含药血清+SB203580+PDTC组。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测p38MAPK、酪蛋白激酶2(CK2)、核转录因子κB抑制因子α(IκBα)、NF-κB、GDF9 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测GDF9蛋白表达水平,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测卵巢颗粒细胞凋亡。【结果】经后增殖方含药血清降低COH大鼠卵巢颗粒细胞的p38MAPK和NF-κB mRNA表达,升高CK2和IκBαmRNA表达,提高GDF9 mRNA和蛋白的表达水平,降低卵巢颗粒细胞的凋亡率。单独添加p38MAPK抑制剂SB203580与单独添加NF-κB抑制剂PDTC均能促进GDF9 mRNA和蛋白表达、降低卵巢颗粒细胞凋亡率。【结论】益气血法经后增殖方含药血清可促进超排卵大鼠卵巢颗粒细胞GDF9表达,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,其机制可能与调控p38MAPK和NF-κB双信号通路基因表达有关。

控制性超排卵中血清促黄体生成素浓度过低对体外受精-胚胎移植的影响

目的 :探讨控制性超排卵中血清促黄体生成素 (L H)浓度过低对体外受精 -胚胎移植的影响。方法 :为 2 0 0 0年 6月至 2 0 0 1年 8月在本所接受体外受精 (IVF)或卵母细胞单精子显微注射 (ICSI)助孕的不孕症患者 ,对其中具有正常促性腺激素功能的妇女 16 0例采用促性腺激素释放激素激动剂 (Gn RH- a)长方案并单纯用人基因重组促卵泡生长素 (r- FSH)进行控制性超排卵 (COH) ,以注射绒毛膜促性腺激素 (HCG)日血清 L H浓度分为两组 ,低 L H组为血清 L H≤ 0 .5 m IU/ml,对照组为血清 L H>0 .5 m IU/ml,其中低 L H组 72个周期 ,占 4 5 % ,对照组 88个周期 ,总共 16 0个周期。按本所常规方法过行 IVF/ICSI。我们对这 16 0例临床资料进行回顾性分析。结果 :低 L H组平均 r- FSH用药量和用药时间明显多于对照组 (30 .2 1± 8.12支与 2 7.17± 7.99支 ,10 .93± 1.2 5 d与 10 .0 2± 1.18d,P<0 .0 1) ;r- FSH刺激第 8天的血清 L H浓度和雌二醇 (E2 )浓度 (2 .0 5± 1.4 9m IU/ml与 2 .6 2± 1.5 8m IU/ml,182 7.3± 897.6 pg/ml与 2 0 93.3±92 3.7pg/ml,P<0 .0 5 )、注射 HCG日血清 L H浓度和 E2 浓度 (0 .15± 0 .16 m IU/ml与 1.6 0± 0 .92 m IU/ml,1916 .8±989.5 pg/ml与 3495 .2± 938.2 pg/ml,P<0 .0 0 1)?

促超排卵周期中瘦素水平的变化

目的 探讨促超排卵周期外周血瘦素 (Leptin)水平的变化、穿卵时卵泡液Leptin水平与同步外周血Leptin水平之间的关系。 方法 采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测 1 8例不孕患者、2 1个促超排卵周期不同阶段外周血、卵泡液Leptin水平及对照组排卵前外周血Leptin水平。结果 促超排卵周期中应用GnRH a卵巢功能被最大抑制时外周血Leptin水平最低 ,穿卵前显著升高 (P <0 .0 0 1 ) ;促超排卵患者穿卵前外周血Leptin水平高于正常对照组排卵前Leptin水平(P <0 .0 5 ) ;卵泡液Leptin水平与同步外周血Leptin水平呈正相关 (r=0 .947,P <0 .0 5 )。结论①卵巢功能与Leptin之间相互影响 ;

多囊卵巢综合征患者控制性超促排卵过程AMH和INHB浓度变化的临床研究

目的探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)患者控制性超促排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)过程中血清抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)和抑制素B(inhibin B,INHB)浓度的变化及其对COH结局的预测价值。方法 PCOS组患者37例,对照组患者41例。检测患者月经周期第2/3天(D2/3)、促性腺激素(gonadotrophin,Gn)刺激第5天(D5)、人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)日(D-hCG)血清AMH及INHB浓度及取卵日卵泡液中AMH及INHB浓度,观察其动态变化及其对COH结局的影响。结果在COH过程中,血清AMH浓度逐渐降低,而血清INHB浓度逐渐升高。PCOS组患者hCG日血清雌二醇(estrodiol,E2)浓度、获卵数、冷冻胚胎数较对照组明显升高(P<0.05,P<0.001),而Gn用量、受精率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),2组患者的临床妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。血清AMH和INHB浓度与Gn剂量、hCG日E2浓度具有相关性(P<0.05,P<0.001),但是与获卵数、临床妊娠率无相关性(P>0.05)。结论 PCOS患者AMH和INHB浓度在COH过程中呈现动态变化,可以预测COH中卵巢的反应性,但是对超促排卵结局的预测价值还有待进一步研究。

拮抗剂与高孕激素下促排卵方案用于多囊卵巢综合征患者IVF治疗效果比较

目的比较拮抗剂方案与高孕激素状态下促排卵(PPOS)方案在多囊卵巢综合征(PCOS)患者行IVF助孕治疗中的应用效果。方法回顾性分析2016年11月至2017年11月在本院行IVF助孕治疗的138例单纯PCOS不孕症患者的临床资料,根据促排卵方案的不同将患者分为两组:PPOS组(57例)和拮抗剂组(81例)。比较两组患者的一般资料、促排卵情况及胚胎实验室指标。结果两组患者的年龄、月经周期、不孕年限、体重指数(BMI)、基础窦卵泡数、基础FSH、基础LH及基础E2等比较均无显著性差异(P>0.05)。拮抗剂组的Gn总量显著低于PPOS组[(1 725.5±612.9)vs.(2 147.3±811.5)U],早发LH峰发生率(7.4%vs.0%)、直径≥14mm卵泡数[(15.2±8.2)vs.(12.7±7.2)个]、E2峰值[(16 573.7±8 844.7)vs.(12 980.8±7 486.8)pmol/L]、HCG日孕酮(P)水平[(3.15±1.53)vs.(2.68±1.53)nmol/L]、获卵数[(17.2±9.7)vs.(13.0±8.3)个]、轻中度OHSS发生率(6.2%vs.0%)均显著高于PPOS组(P<0.05)。两组间的Gn用药天数、2PN受精率、卵裂率、优质胚胎数、重度OHSS发生率比较均无显著性差异(P>0.05)。结论 PPOS方案能获得与拮抗剂方案相似的优质胚胎数,且能更好地抑制早发LH峰,减少轻中度OHSS发生率,可作为PCOS患者促排卵方案的选择之一。

常规体外受精-胚胎移植与卵胞浆内单精子注射临床结果比较

目的 :比较常规体外受精 胚胎移植 (invitrofertilizationandembroytranfer,IVF ET)与卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmicsperminjection ,ICSI)两种助孕技术的临床结果。方法 :97例对夫妻进行 99个周期 (IVF6 0周 ,IC SI39周期 ) ,比较两组每周期平均获卵数、正常受精卵数、卵裂数、移植胚胎数、生化妊娠率和临床妊娠率。结果 :ICSI组平均每周期平均获卵数、正常受精卵数、卵裂数、移植胚胎数与IVF组相似 (ICSI组 9.31、6 .4 0、5 .6 3、4 .11;IVF组 10 .0 2、7.5 3、4 .32 ,P >0 .0 5 ) ,ICSI组平均每周期妊娠率与IVF组相似 (ICSI组 38.5 % ,IVF组 4 0 % ,P >0 .0 5 )。结论

HOXA-10、HOXA-11、Esr2、Pgr在控制性超排卵小鼠围着床期子宫内膜表达的研究

目的:检测同源框基因HOXA-10、HOXA-11以及雌激素受体Esr2、孕激素受体Pgr在控制性超排卵(COH)小鼠围着床期子宫内膜中的表达,探讨COH对子宫内膜容受性的影响。方法:将30只SPF级雌性昆明小鼠随机分为模型组(GnRH-a+HMG+HCG)和对照组(生理盐水),每组15只,造模成功后,计算子宫脏器指数,光学显微镜观察子宫内膜组织学变化;应用RT-PCR和Real-time PCR方法检测小鼠子宫内膜中HOXA-10、HOXA-11、Esr2、Pgr mRNA的表达。结果:模型组围着床期小鼠子宫脏器指数较对照组显著降低(P<0.05),子宫内膜发育延迟,子宫内膜成熟度及厚度降低;模型组小鼠HOXA-10、HOXA-11、Pgr mRNA表达较对照组显著下降(P<0.05),而Esr2 mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论:COH引起HOXA-10、HOXA-11、Pgr mRNA表达下降,Esr2mRNA表达升高,致使围着床期内膜准备不足,子宫内膜容受性下降。

两种不同剂量生长激素在体外受精超排卵中的作用比较

目的 探讨不同剂量生长激素 (GH)在体外受精 -胚胎移植 (IVF -ET)中 ,对低反应患者超排卵周期的作用。方法 前一IVF周期卵巢低反应的患者 30例 ,她们在前一周期采用促性腺激素释放激素激动剂 (GnRH -a)和促性腺激素(Gn)治疗 ,本周期采用GnRH -a、Gn、GH(两种不同剂量 )治疗 ,比较两种不同剂量生长激素的作用。结果 两种剂量生长激素均可提高受精率 ,增加优质胚胎数 ,提高妊娠率 ,且不同剂量生长激素间的作用无显著差异。结论 生长激素在IVF超排卵中有辅助作用 。

两种国产短效曲普瑞林减量长方案在IVF/ICSI中应用的临床效果比较

目的:分析2种国产短效曲普瑞林减量长方案在IVF/ICSI中应用的临床效果,探寻减量长方案中更为方便有效的曲普瑞林减量方法。方法:回顾性分析采用长方案降调节行IVF/ICSI治疗的284个周期,根据启动日短效曲普瑞林不同减量方法分为A、B两组。A组于启动日开始曲普瑞林改为0.05mg/日直至HCG日;B组启动日开始曲普瑞林改为0.1mg/隔日直至HCG日。比较两组患者曲普瑞林用量,Gn总量、Gn天数、平均获卵数、移植胚胎数、优质胚胎率、胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率、中重度OHSS发生率。结果:两组患者曲普瑞林用量和天数,Gn总量、Gn天数、平均获卵数、移植胚胎数、优质胚胎数、胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率及OHSS发生率之间无统计学差异(P>0.05);两组均没有出现早发LH峰及提前排卵,两组间HCG日LH、E2及P值比较均无统计学差异。结论:在短效曲普瑞林降调节长方案超排中,曲普瑞林半量每日注射和原量隔日注射均能达到相同的效果,但曲普瑞林原量隔日注射的临床妊娠率有增高趋势,而且由于减少了注射次数,可以提高患者的依从性。

卵泡输出率与体外受精-胚胎移植中卵巢反应性的研究

目的探讨卵泡输出率(FORT)对实施体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者卵巢反应性及妊娠结局的预测效力。方法按FORT值将200个IVF-ET患者分为高、低2组,回顾性分析2组间控制性超排卵数据及实验室指标。结果高FORT值组降调后窦卵泡数少于低FORT值组[(10.9±3.5)与(11.1±6.2)个,P<0.001],而HCG日E2水平明显高于低FORT值组[(2 701.2±102)与(2 183±86)pg/ml,P<0.001)],但2组间基础FSH及E2水平、促性腺激素总量及排卵前卵泡数差异无统计学意义(P>0.05)。高FORT值组获卵数(11.8±0.6)与(8.6±0.4)个;MⅡ卵数(10.0±0.6)与(7.4±0.4)个;可移植胚胎数(7.4±0.4)与(5.7±0.3)个;胚胎种植率37.7%与23.3%;临床妊娠率62.8%与33.8%,均高于低FORT值组(P<0.05)。结论 FORT可有效地预测IVF-ET过程中卵巢的反应性,高FORT值患者将具有更好的妊娠结局。

三种长方案降调节在控制性超排卵中效果比较

目的 探讨三种促性腺激素释放激素激动剂长方案降调节案在控制性超排卵中的作用.方法 回顾性分析比较本中心接受长方案控制性超排卵降调节的1 248个周期,根据达菲林的用量和方法分成A组：低剂量长效达菲林超长方案234个周期;B组：短效达菲林长方案116个周期;C组低剂量长效达菲林长方案878个周期,比较各组间的超促排卵情况及妊娠结局.结果 B组促性腺激素总用量明显多于C组（t=10.05,均P〈0.05）;平均获卵数、可移植胚胎数明显少于C组（t值分别为-9.44、-7.77,均P〈0.05）;B组胚胎种植率、妊娠率明显低于C组（χ2值分别为-2.60,-1.95,均P〈0.05）.上述指标,A组促性腺激素总用量、妊娠率高于C组（（t=-2.50、χ2=2.38,均P〈0.05）,但平均获卵数、可移植胚胎数和种植率相比无统计学差异（t值分别为-1.24、-1.41、χ2=1.15,均P〉0.05）.结论 低剂量超长方案和长方案在控制性超排卵治疗效果相似,但均优于短效长方案组.

长方案促超排卵对子宫内膜中转化生长因子-β及胞饮突的实验研究

目的 观察促性腺激素释放激素激动剂（GnRHa）促超排卵对子宫内膜转化生长因子-β（TGFβ1）蛋白表达的影响,及其与胞饮突和血清E2、P水平之间的相关性,探讨GnRHa方案低妊娠率的原因,为临床提高体外受精-胚胎移植（IVF-ET）妊娠率提供理论依据.方法 随机将96只雌鼠分成两组,自然周期组和控制性促超排卵组.应用扫描电镜观察子宫内膜胞饮突的表达,应用免疫组化SP法观察子宫内膜TGFβ1蛋白的表达,应用放射免疫法检测雌二醇（E2）、孕酮（P）水平.结果 GnRHa促超排卵可能通过改变血清E2、P水平,使子宫内膜TGFβ1蛋白表达高峰前移,使子宫内膜种植窗异常,导致子宫内膜发育与胚胎发育不同步,降低子宫内膜容受性,影响IVF-ET妊娠率.结论 GnRH促超排卵影响子宫内膜的植入窗.

经皮附睾/睾丸穿刺取精结合卵母细胞单精子注射治疗严重男性因素不育

目的 :评价经皮附睾 /睾丸穿刺取精 (microsurgicalepididymalspermaspiration ,MESA/testicularspermextrac tion ,TESE)结合卵母细胞单精子注射 (intracytoplasmicsperminjection ,ICSI)治疗严重男性因素不育的临床效果。方法 :采用MESA/TESE结合ICSI技术治疗严重男性因素不育的夫妻 ,长方案超排卵 ,对处于细胞分裂中期(MetaphaseⅡ ,MⅡ)的成熟卵母细胞进行单精子注射。结果 :共注射了 12 1个MⅡ 期卵母细胞 ,其中 71个正常受精 ,正常受精率为 5 8.7% ,临床妊娠率为 33.3 % ,已分娩了 2个婴儿。结论 :MESA/RESE结合ICSI技术为治疗严重男性因素不育患者提供了一种快速、方便、无痛。

抑制素B在IVF—ET周期中预测卵巢反应性

目的通过测定体外受精-胚胎移植治疗周期的不孕症患者血清内抑制素B的水平变化，预测卵巢的反应性，为选择最佳的超促排卵方案提供理论依据。方法选择接受体外受精-胚胎移植治疗的妇女63例，在治疗的不同阶段分别抽取外周静脉血，应用酶联免疫吸附法检测血清中抑制素B的浓度变化，记录相应患者年龄、获卵数、月经周期第2天雌二醇水平、卵泡刺激素水平及胚胎移植结局，并根据获卵数，将63例患者分为卵巢低反应组（A组）及正常反应组（B组），比较两组注射重组卵泡刺激素后抑制素B水平的变化及其与获卵数、妊娠结局的相关性。结果①两组患者均未发生卵巢过度刺激综合征，其年龄比较无统计学意义（t=1．926，P=0．358）；②A组与B组月经周期第2天血清抑制素B水平分别为：45．80±29．53pg／mL、87．60±30．94pg／mL，A组显著低于B组，经比较差异有统计学意义（f=-4．615，P=0．000）。A组与B组月经周期第2天血清卵泡刺激素水平分别为：8．88±2．76mU／mL、6．68±2．08mU／mL，A组显著高于B组，经比较差异有统计学意义（t=2．850，P=0．010）；③A组和B组注射重组卵泡刺激素后5天，患者血清抑制素B水平分别为132．27±18．45pg／mL、169．83±51．04pg／mL，A组显著低于B组，经比较差异有统计学意义（t=-4．282，P=0．000）。A组和B组注射人绒毛膜促性腺激素当日患者血清抑制素B水平分别为205．77±40．70pg／mL；④患者获卵数与月经周期第2天血清抑制素B水平、注射卵泡刺激素第5天血清抑制素B水平呈显著正相关（r分别为0．502、0．307，P分另4为0．000、0．014）。结论月经周期第2天血清卵泡刺激素、抑制素B水平均可预测卵巢的反应性，而血清抑制素B水平具有更高的预测价值；经卵泡刺激素刺激后第5天，血清抑制素B水平能较敏感地预测卵巢对重组卵泡刺激素刺激的反应性。

黄体生成素与辅助生殖

黄体生成素是在下丘脑促性腺激素释放激素刺激下 ,由垂体前叶分泌的促性腺激素 ,对女性体内雌激素的合成、卵子的成熟、受精及胚胎的质量等起着重要作用。黄体生成素在体内还有其它许多靶器官 ,能影响非性腺组织的功能 。

中重度卵巢过度刺激综合征临床特点及治疗

目的:探讨中重度卵巢过度刺激综合征的临床特点及治疗、预防的方法。方法:回顾性分析我院生殖中心自2007-06～2009-06发生的35例中重度卵巢过度刺激综合征的临床资料。结果:在500个超排卵周期中有35例发生中重度卵巢过度刺激综合征(发生率为7%),临床表现为腹痛、腹胀、恶心、呕吐、体重增加,重度出现胸水、腹水、呼吸困难、血液浓缩,卵巢增大等,经综合治疗,均缓解好转出院,无1例终止妊娠。结论:在实施药物超促排卵过程中要坚持个体化方案,及早预防,对中重度患者严密观察、合理治疗。

三种助孕技术治疗多囊卵巢综合征不孕的疗效比较

目的：观察３种助孕技术：ＩＶＦＥＴ、ＧＩＦＴ和控制性超促排卵（ＣＯＨ）后自行同房对多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）不孕患者的疗效。方法：应用３种方法治疗，观察各组的临床妊娠率和发生卵巢过度刺激综合征（ＯＨＳＳ）的情况。结果：ＩＶＦＥＴ和ＧＩＦＴ与ＣＯＨ相比能得到更高的临床妊娠率，而前二者发生ＯＨＳＳ的危险性明显低于后者。结论：为避免ＣＯＨ后发生ＯＨＳＳ，建议对因ＰＣＯＳ不孕的患者采取体外助孕技术治疗。应用何种技术要根据患者的具体情况而定。如果有至少１ 条输卵管完全正常，可先试行ＧＩＦＴ。此外，须将多余的卵子进行体外授精试验，观察其受精及卵裂情况，从而对今后的治疗提出指导性建议，并要将得到的胚胎进行冷冻保存，以备今后使用。

促超排卵时相与临床妊娠率关系的初步研究

目的研究IVF-ET及ICSI过程中控制性促超排卵的时相与临床妊娠率之间的关系,及其对胚胎质量、子宫内膜状态的影响。方法选取本院生殖中心的112个IVF-ET及ICSI周期,包括黄体中期长方案、短方案、超短方案等模拟自然周期的促超排卵方案,研究促性腺激素(Gn)启动日、Gn使用天数、hCG日等时相性因素与临床妊娠率之间的关系,并分析Cn使用天数对胚胎质量及hCG日对子宫内膜状态的影响。结果Gn启动日与临床妊娠率无显著相关性,Gn使用天数为9～10d或hCG日在月经第12～14d的临床妊娠率显著升高(P分别<0.01及=0.001),而且,Gn使用天数为9～10d所获得的胚胎质量提高(P<0.05)。结论IVF-ET及ICSI的临床妊娠率与促超排卵的时相相关,适当的Gn使用天数可以提高胚胎质量、适宜的hCG日则通过同步胚胎与子宫内膜的发育发挥作用。

控制性超排卵明显降低小鼠卵母细胞水通道蛋白的表达

目的了解控制性超排卵(COH)对小鼠卵母细胞上表达水通道蛋白(AQP3)的影响。方法模拟人类超排卵周期,对小鼠进行超促排卵,按随机表顺序分为COH组和对照组,每组各10只ICR小鼠,用半定量实时荧光PCR方法检测小鼠MⅡ卵母细胞上AQP3mRNA的表达。结果卵母细胞膨胀实验显示,ICR小鼠卵母细胞上有AQP3的表达,用半定量实时荧光PCR方法检测时以β-肌动蛋白(β-actin)作为内参照,COH组和对照组ΔCT值分别是0·65±0·23和2·49±0·05,ΔΔCT值是1·84±0·18,两组比较P<0·001,具有统计学意义。结论控制性超排卵(COH)明显降低了ICR小鼠卵母细胞上AQP3mRNA的表达,这也可能是导致卵母细胞低冻融复苏率低的原因之一。

卵巢对控制性超排卵反应的回顾性研究

目的探讨在体外受精-胚胎移植中卵巢对控制性超排卵的反应性。方法回顾性分析57例实施体外受精-胚胎移植的治疗周期，病例组43例，均为因输卵管因素不孕者；对照组14例，因男性因素不孕或多囊卵巢综合征者。比较两组血清基础卵泡刺激素、黄体生成激素、雌二醇、人绒毛膜促性腺激素、日雌二醇水平、促性腺激素总量、促性腺激素天数及每组患者左右侧卵巢窦卵泡数、停促性腺激素日卵泡直径、获卵数、成熟卵子数。结果两组血清基础黄体生成激素、雌二醇、人绒毛膜促性腺激素日雌二醇水平无明显差异，病例组基础卵泡刺激素水平、促性腺激素总量及促性腺激素天数均高于对照组（t值分别为1.21、1．65、2．62，均P〈0．05）；两组患者左右侧卵巢停促性腺激素日8-14mm、15-19mm卵泡数无明显差异，但右侧卵巢窦卵泡数、停促性腺激素日20mm以上卵泡数、获卵数、成熟卵子数均高于左侧（病例组：t值分别为1．70、2．81、2．64、1．23，对照组：t值分别为1．25、2．17、1．82、2．98，均P〈0．05）。结论在体外受精-胚胎移植的控制性超排卵治疗周期中。右侧卵巢的反应性明显优于左侧。