基于高通量测序的明日叶不同组织内生菌群落结构分析

【目的】分析明日叶不同组织内生菌的群落结构和多样性,为探究明日叶和内生菌互作机制及功能菌株筛选提供参考。【方法】以四川宜宾栽培的药食兼用型明日叶为试材,采用Illumina MiSeq高通量测序技术确定根、茎、叶和果实组织内生真菌和内生细菌群落多样性。【结果】根据97%的序列相似性水平,将内生真菌和细菌的reads分别归类为1023和1871个操作分类单元(OTU)。韦恩图和热图显示明日叶各组织内生真菌和内生细菌群落结构差异性较高,种群丰度存在一定的差异。α多样性分析发现明日叶的叶内生真菌种类数最多,根内生真菌群落多样性最低,果实内生真菌群落丰富度最低;而根含有内生细菌种类数最多,茎内生细菌群落多样性最低,果实内生细菌群落丰富度最低。β多样性分析表明,组织特征对明日叶内生真菌或内生细菌群落结构有显著影响。明日叶4个不同组织中的优势真菌门和细菌门分别为子囊菌门(Ascomycota)和变形菌门(Proteobacteria)。根、茎、叶和果实中内生真菌优势属分别为Serendipita、Paramycosphaerella、多臂菌属(Trichomerium)和Apiotrichum,内生细菌优势属分别为罗尔斯通菌属(Ralstonia)、罗尔斯通菌属、甲基杆菌属(Methylobacterium)和弧菌属(Vibrio)。线性判别分析(LEfSe)表明,除根外,明日叶的茎、叶和果实中内生真菌重要差异指示种分别是Paramycosphaerella、苍白尾孢属(Pallidocercospora)和横断孢属(Strelitziana);茎、叶和果实中内生细菌重要差异指示种分别是罗尔斯通菌属、甲基杆菌属和亮杆菌属(Leucobacter)。经FUNGuild和COG功能预测发现,不同组织内生菌群功能丰富,除具有固氮、促生和抑菌等功能的菌群外,还存在较大比例未知功能菌群。【结论】明日叶中蕴含丰富多样的内生菌群,在不同组织中的群落结构、多样性、优势菌属及差异指示种存在保守性与差异性,组织特征差异是影响内生菌群的重要因素;不同组织内生菌群生态功能亦差异较大,且大量为未鉴定出种属和未定义的功能菌群。

正交试验法优选铃兰总黄酮的提取工艺

采用正交试验法研究铃兰中总黄酮的提取工艺,考察了乙醇含量、提取时间、提取次数、以及料液比等5个因素对铃兰总黄酮含量的影响.确立了铃兰总黄酮最佳提取条件为:70%的乙醇,提取时间为0.5h,提取次数为3次,料液比为1:15.

水肥耦合对铃兰观赏品质及光合特性的影响

采用水（200（W1）、400（W2）、600（W3）m L 3水平）、肥（0.15（F1）、0.35（F2）、0.55（F3）、0.75（F4）g·kg-14水平）二因素随机区组试验设计,不设对照,分析各处理对铃兰观赏品质指标和光合特性的影响。结果表明：水肥耦合对铃兰观赏品质指标和光合特性影响显著。肥量一致条件下,随着水量增加,观赏品质指标数值也相应提高,净光合速率增大;水量增加同时增加肥量一定范围内可表现正效应,过量则起负作用;水肥耦合处理间差异显著（P〈0.05）,模糊综合评判观赏品质较好的为W2F3、W2F2、W3F2,较差的为W1F4,根据光强-光合响应模拟曲线得出铃兰光饱和点和光补偿点分别为430、45μmol·m-2·s-1,属耐阴植物;回归分析表明,光合速率与气孔导度、蒸腾速率呈正相关,相关系数分别为0.884 5、0.934 6,与细胞间二氧化碳摩尔分数呈负相关（R=-0.777 3）,对净光合速率影响较大的是蒸腾速率。水量400~600 m L,肥量0.35~0.55 g·kg-1的效果较好,与其他处理差异显著。

铃兰高效繁殖与栽培管理技术研究

铃兰属百合科铃兰属多年生宿根植物,耐寒喜阴湿环境,在农业、工业和医学领域应用范围广。文章从铃兰生物学特性出发,研究其种子繁殖、根状茎分株繁殖、实生苗分蘖繁殖和组培再生苗繁殖技术要点;在铃兰栽培管理中,对整地施肥、环境调控及生长发育促控技术进行阐述,旨在为铃兰植物进行高效繁殖、栽培管理和开发利用提供技术支撑。

铃兰染色体的核型分析

对铃兰体细胞染色体计数,并对其核型进行分析,结果表明:铃兰的染色体数目为2n=38;核型公式为2n=2X=38=24m+6sm+4st+4st(SAT),染色体相对长度组成为2n=38=4L+8M2+14M1+12S,属于“3B”型。核型不对称系数为64.31%。

铃兰组织培养及快速繁殖的研究

为保存野生资源,满足栽培对种苗的需要,以根茎为材料,采用组织培养的方法,进行了根茎的分化、分化芽生根及快速繁殖、试管苗的移栽和定植的研究。结果表明:MS+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L是根茎芽生长与分化的理想培养基;White+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.2 mg/L是根茎生长分化芽生长生根培养的理想培养基。延长生根培养时间,向培养瓶中加入液体培养基使根茎分化的方法,达到了快速繁殖的目的。由根茎繁殖的试管苗定植后,保持了野生铃兰的所有生物性状。

铃兰提取液对蟾蜍心肌活动的影响

本文通过化学方法提取的铃兰毒甙(convallataxin)液,铃兰皂甙(convauasaponin)液作用于蟾蜍离体心脏活动,发现铃兰叶、茎、根、全草浸液,水提取液皆有强心作用.

铃兰抗氧化性研究

以DPPH·清除能力作为考察指标,通过正交实验确定铃兰抗氧化物质的最佳提取方案,并测定铃兰提取物清除羟自由基(·OH)和过氧化氢(H2O2)的能力及还原力.结果表明:提取铃兰抗氧化物质的最优方案是用蒸馏水在75℃下提取30min,其对DPPH·的清除率达96.1%,且对DPPH·的清除能力随浓度的增加而增强;铃兰水提取物对·OH和H2O2表现出较强的清除能力及还原力,这说明铃兰水提物具有较好的抗氧化性.

超声波辅助铃兰总强心苷提取工艺的优化

采用8种低毒溶剂并结合超声波提取铃兰中总强心苷,通过单因素实验优选出提取工艺中溶剂种类、料液比、超声提取时间、提取温度4个因素的最佳条件,并通过正交实验探究最佳提取条件。最终优化得到以80%乙醇作为提取溶剂,料液比1∶10、超声提取时间120min、提取温度70℃时总强心苷得率最高,为0.25%。

不同栽培基质对铃兰光合特性的影响

以铃兰(Convallaria keiskei)为试验材料,采用7种基质(园土、泥炭、椰糠、河沙、蛭石、珍珠岩、腐殖质)并按一定配比配制成4种基质用于铃兰的栽培,通过研究不同栽培基质对铃兰光合特性的影响,判断出哪一种组合基质更适宜铃兰的生长发育。结果表明:不同栽培基质对铃兰的生长和光合特性的影响不同,以C3处理(泥炭∶椰糠∶腐殖质=5∶3∶2)培育铃兰,其物质积累量、叶绿素荧光参数及含量、光合特性等指标均优于其他处理的基质配方。由结果可知,C3处理的基质配方更有利于铃兰生长和光合作用,可以将其作为铃兰的栽培基质。