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New Octadecanoyl Diterpenoid Arabinoside from Conyza blinii 被引量:1
1
作者 CHEN Lei SU Yan-fang TU Guang-zhong 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2009年第4期458-460,共3页
A new octadecanoyl diterpenoid glycoside,(E)-8α,15-dihydroxy-15-(3S-hydroxy-octadecanoyl)-13-labdene-8-O-α-L-arabinopyranoside(1),was isolated from the aerial parts of Conyza blinii,and the structure was ident... A new octadecanoyl diterpenoid glycoside,(E)-8α,15-dihydroxy-15-(3S-hydroxy-octadecanoyl)-13-labdene-8-O-α-L-arabinopyranoside(1),was isolated from the aerial parts of Conyza blinii,and the structure was identified on the basis of a detailed spectroscopic analysis,including 2D NMR spectrometry and HRESI-MS. 展开更多
关键词 conyza blinii DITERPENOID LABDANE Arabinoside
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Phytochemical and Bioactive Studies on Conyza blinii 被引量:2
2
作者 For Ph. D. Degree: Su Yanfang Supervisors: Prof: Zheng Junhua, Prof: Guo Dean, and Prof: Ma Junjiang Department of Natural Medicines, School of Pharmaceutical Sciences, Peking University, Beijing 100083 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 2001年第2期106-108,共3页
关键词 COMPOSITAE conyza blinii Triterpenoidal saponins Chemical constituents Isolation and identification ANTIULCER ANTITUMOR
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金龙胆草化学成分及其抗溃疡活性研究(Ⅰ) 被引量:30
3
作者 苏艳芳 陈磊 +3 位作者 罗洋 柴欣 吕敏 果德安 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期332-334,共3页
目的研究金龙胆草Conyza blinii的化学成分及其抗溃疡活性。方法采用溶剂提取、重结晶和硅胶、聚酰胺柱色谱方法分离纯化,根据氢谱、碳谱、质谱以及与对照品共薄层色谱鉴定化合物的结构。用幽门结扎大鼠模型进行抗溃疡活性筛选。结果... 目的研究金龙胆草Conyza blinii的化学成分及其抗溃疡活性。方法采用溶剂提取、重结晶和硅胶、聚酰胺柱色谱方法分离纯化,根据氢谱、碳谱、质谱以及与对照品共薄层色谱鉴定化合物的结构。用幽门结扎大鼠模型进行抗溃疡活性筛选。结果从金龙胆草的乙醇提取物中分离鉴定了8个化合物:5,8,3’,4’-四羟基-7-甲氧基黄酮(Ⅰ)、5,8,4’-三羟基-7,3'-二甲氧基黄酮(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、菠甾醇(Ⅳ)、正二十六烷酸(Ⅴ)、5,7-二羟基-3,3’,4'-三甲氧基黄酮(Ⅵ)、5,7-二羟基-3,8,4’-三甲氧基黄酮(Ⅵ)和苦蒿素(Ⅶ)。苦蒿素能明显减少模型大鼠胃溃疡面积,明显减少胃黏膜组织中的MDA的水平。结论化合物Ⅰ~Ⅲ和Ⅴ~Ⅵ为首次从该植物中分离得到。苦蒿素对幽门结扎大鼠胃溃疡的形成有明显抑制作用,其可能作用机制与抑制胃黏膜组织中MDA的生成有关。 展开更多
关键词 金龙胆草 黄酮 苦蒿素 抗溃疡
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金龙胆草的化学成分研究(Ⅱ) 被引量:25
4
作者 徐丽萍 刘建生 +4 位作者 敏德 张治针 王三武 果德安 郑俊华 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第9期552-553,共2页
目的:对金龙胆草中的化学成分进行研究。方法:溶剂结合柱色谱进行成分分离,IR,1HNMR,13CNMR和MS测定其结构。结果:从金龙胆草中分离得3种成分,分别为木栓醇、正三十烷醇、胡萝卜甙。结论:均为首次从该植物中... 目的:对金龙胆草中的化学成分进行研究。方法:溶剂结合柱色谱进行成分分离,IR,1HNMR,13CNMR和MS测定其结构。结果:从金龙胆草中分离得3种成分,分别为木栓醇、正三十烷醇、胡萝卜甙。结论:均为首次从该植物中分离得到。 展开更多
关键词 金龙胆草 木栓醇 化学成分
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响应面法优化金龙胆草总黄酮的超声波提取工艺研究 被引量:7
5
作者 刘姗 胡洪利 陈惠 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第1期148-151,159,共5页
利用超声波辅助提取,结合响应面法(RSM)优化金龙胆草总黄酮的提取工艺。在单因素基础上选取试验因素水平,根据中心组合设计原理采用三因素三水平的响应面分析法进行最佳工艺的优化。结果表明,在分析各个因素的显著性和交互作用后,得出... 利用超声波辅助提取,结合响应面法(RSM)优化金龙胆草总黄酮的提取工艺。在单因素基础上选取试验因素水平,根据中心组合设计原理采用三因素三水平的响应面分析法进行最佳工艺的优化。结果表明,在分析各个因素的显著性和交互作用后,得出金龙胆草总黄酮的最佳提取工艺条件为:提取工作时间23.4min,间隔2s,乙醇体积分数73%,料液比1∶38,在此条件下实际提取的总黄酮含量为8.285%。采用超声波辅助提取金龙胆草总黄酮的提取工艺方便可行,得到的总黄酮含量较高,值得进一步开发研究。 展开更多
关键词 金龙胆草 总黄酮 超声波提取 响应面分析
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金龙胆草的化学成分研究(Ⅰ) 被引量:17
6
作者 徐丽萍 刘建生 +4 位作者 敏德 王三武 张治针 果德安 郑俊华 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期293-295,共3页
从金龙胆草的地上部分分离出5个化合物,根据其理化性质和光谱分析,分别鉴定为α-菠甾醇、5,8-二羟基-7,3′,4′,三甲氧基黄酮、咖啡酸、槲皮素和丁香酸,均为首次自该植物中分离得到。
关键词 金龙胆草 黄酮 有机酸 化学成分
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金龙胆草黄酮类成分的研究 被引量:20
7
作者 苏艳芳 刘建生 +3 位作者 果德安 李菁 郭洪祝 郑俊华 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期496-497,共2页
目的 研究金龙胆草的化学成分。方法 采用硅胶柱层析反复分离 ,光谱方法测定其结构。结果 从金龙胆草中分得 7个黄酮类化合物。根据其理化性质和光谱数据分别鉴定为芦丁 ( )、槲皮素 - 3- O-葡萄糖苷 ( )、圣草素 ( )、槲皮素 - 3,4... 目的 研究金龙胆草的化学成分。方法 采用硅胶柱层析反复分离 ,光谱方法测定其结构。结果 从金龙胆草中分得 7个黄酮类化合物。根据其理化性质和光谱数据分别鉴定为芦丁 ( )、槲皮素 - 3- O-葡萄糖苷 ( )、圣草素 ( )、槲皮素 - 3,4′-二甲醚 ( )、槲皮素 ( )、5 ,8-二羟基 - 7,3′,4′-三甲氧基黄酮 ( )和山柰酚 ( )。结论 化合物 ~ 为首次从该植物中分得 , 和 展开更多
关键词 菊科 金龙胆草 黄酮
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金龙胆草SRAP银染反应体系的建立与优化 被引量:2
8
作者 刘姗 高玉莲 +3 位作者 孙蓉 唐自钟 高静雷 陈惠 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期121-126,共6页
建立适宜金龙胆草DNA的SRAP-PCR扩增体系,为金龙胆草分子标记打下基础。针对常规银染方法从是否固定、银染液组成、银染时间、显影液组成等方面优化了金龙胆草SRAP扩增产物的检测方法,同时探索了金龙胆草SRAP-PCR反应程序,并对金龙胆草S... 建立适宜金龙胆草DNA的SRAP-PCR扩增体系,为金龙胆草分子标记打下基础。针对常规银染方法从是否固定、银染液组成、银染时间、显影液组成等方面优化了金龙胆草SRAP扩增产物的检测方法,同时探索了金龙胆草SRAP-PCR反应程序,并对金龙胆草SRAP-PCR反应体系的各影响因子进行优化。结果建立了一个银染步骤快速、高效的银染检查方法,筛选的退火温度为51.3℃,最佳SRAP-PCR反应体系(15μL)为:DNA 40 ng,引物浓度0.7μmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,Mg2+1.9 mmol/L,Taq聚合酶0.6 U,10×buffer 2μL,双蒸水补足。该程序和体系能很好地满足金龙胆草基因组SRAP扩增的要求,SRAP标记应用于金龙胆草遗传研究是可行的。 展开更多
关键词 金龙胆草 SRAP PCR体系优化
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毛细管电泳间接激光诱导荧光法测定苦蒿和青蒿中酸性成分 被引量:1
9
作者 刘海峰 薛洪宝 +3 位作者 焦艳娜 杨甲甲 庞国伟 李晖 《四川大学学报(工程科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第4期174-178,共5页
利用毛细管电泳建立了中药苦蒿和青蒿及其制剂中11种酸性化合物的同时定量分析方法。其最佳电泳条件为:熔融石英毛细管50 cm(40 cm处检测窗口)×75μm i.d.;分离电压:+15 kV;分离温度:25℃;缓冲液(含:35.7 mmol/L磷酸钠,2.86×1... 利用毛细管电泳建立了中药苦蒿和青蒿及其制剂中11种酸性化合物的同时定量分析方法。其最佳电泳条件为:熔融石英毛细管50 cm(40 cm处检测窗口)×75μm i.d.;分离电压:+15 kV;分离温度:25℃;缓冲液(含:35.7 mmol/L磷酸钠,2.86×10-5mol/L荧光素钠,少量甲醇,pH=11.42);进样压力:0.5 psi(3.45 kPa),进样时间5.0 s;荧光素钠为激光诱导荧光响应试剂;LIF激发光波长:488 nm,检测波长:520 nm。该方法线性范围宽、相对标准偏差低、精密度高、重现性好,用于实际样品的测定,获得满意结果。 展开更多
关键词 毛细管电泳 间接激光诱导荧光检测 酸性成分 苦蒿 青蒿
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金龙胆草基因组DNA的提取及均匀设计优化RAPD反应体系 被引量:5
10
作者 刘姗 胡洪利 陈惠 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1006-1010,共5页
目的探索金龙胆草DNA的提取并利用均匀设计方法对其RAPD反应体系进行优化。方法比较改良SDS法和试剂盒提取法提取的DNA效果,通过电泳、紫外分光光度仪检测及RAPD扩增效果确立适合实验操作的最佳方法;利用两次均匀设计实验确立最佳PCR反... 目的探索金龙胆草DNA的提取并利用均匀设计方法对其RAPD反应体系进行优化。方法比较改良SDS法和试剂盒提取法提取的DNA效果,通过电泳、紫外分光光度仪检测及RAPD扩增效果确立适合实验操作的最佳方法;利用两次均匀设计实验确立最佳PCR反应体系,并考察退火温度对扩增效果的影响。结果改良SDS法较适合金龙胆草基因组DNA提取,25μL体系中内含10xTaq reaction Buffer 2μL、Mg2+2.5 mmol/L,dNTPs 4.5 mmol/L,Primer3.5μmol/L,DNA模板60 ng,Taq酶1.5 U,退火温度为38.9℃。结论改良SDS法及金龙胆草的RAPD反应体系可以用于金龙胆草的DNA分析。 展开更多
关键词 金龙胆草 基因组DNA 均匀设计 RAPD
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金龙胆草化学成分的研究进展 被引量:2
11
作者 刘姗 梁冰 《广州化工》 CAS 2008年第6期16-17,共2页
金龙胆草为菊科白酒草属植物苦蒿(Conyza blinii Levl)的干燥地上部分,有性寒、味极苦,有清热、消炎、解毒祛淤消肿等功效,对祛痰、止咳、平喘、急慢性支气管炎、咽喉炎、支气管肺炎等有显著疗效。主要含生物皂甙、酚性物质、酸性物质... 金龙胆草为菊科白酒草属植物苦蒿(Conyza blinii Levl)的干燥地上部分,有性寒、味极苦,有清热、消炎、解毒祛淤消肿等功效,对祛痰、止咳、平喘、急慢性支气管炎、咽喉炎、支气管肺炎等有显著疗效。主要含生物皂甙、酚性物质、酸性物质和微量挥发油等化学成分,文章对金龙胆草的化学成分进行分类综述,为金龙胆草的化学和药学研究与产品开发提供了参考。 展开更多
关键词 金龙胆草 化学成分 研究进展
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野生型金龙胆草核型和亲缘地理结构分析 被引量:1
12
作者 杨鸣 郑天润 +4 位作者 周敏 布同良 唐自钟 李青峰 陈惠 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1414-1424,共11页
金龙胆草Conyza blinii H.Lév.为我国云贵川地区重要的中药材,具有良好的消炎,止咳,平喘的功效。为了探究野生金龙胆草居群间的差异及其产生原因,本试验采集了9个不同地区的野生金龙胆草样本,对其进行苦蒿素含量测定、土壤无机元... 金龙胆草Conyza blinii H.Lév.为我国云贵川地区重要的中药材,具有良好的消炎,止咳,平喘的功效。为了探究野生金龙胆草居群间的差异及其产生原因,本试验采集了9个不同地区的野生金龙胆草样本,对其进行苦蒿素含量测定、土壤无机元素含量测定、核型分析、叶绿体基因组以及亲缘地理结构分析。结果显示:在这9个居群中,攀枝花地区的野生金龙胆草次生代谢产物苦蒿素含量最高(4.8 mg/g),且该地区土壤Fe元素含量最高(5.52%)。核型分析显示金龙胆草为二倍体,染色体核型公式2n=2x=20=18m+2st。叶绿体基因组的系统进化分析表明,金龙胆草与匙叶紫菀(Aster spathulifolius Maxim.)亲缘关系较近。基于金龙胆草cpDNA的亲缘地理分析结果显示,Hap1为祖先型且金龙胆草经历过种群扩张事件,AMOVA分析显示6.2%的变异来自居群间,93.8%的变异来自居群内,居群间分化程度中等。综上,金龙胆草居群间并无显著的染色体变异,所以种群内部变异和土壤环境因素可能是金龙胆草居群间产生不同程度的苦蒿素含量差异的原因,本研究为金龙胆草野生资源的开发和利用提供理论基础。 展开更多
关键词 金龙胆草 核型 叶绿体基因组 亲缘地理结构
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Hemin-induced increase in saponin content contributes to the alleviation of osmotic and cold stress damage to Conyza blinii in a heme oxygenase 1-dependent manner 被引量:2
13
作者 Tianrun ZHENG Junyi ZHAN +4 位作者 Ming YANG Maojia WANG Wenjun SUN Zhi SHAN Hui CHEN 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2021年第8期682-694,共13页
Hemin can improve the stress resistance of plants through the heme oxygenase system.Additionally,substances contained in plants,such as secondary metabolites,can improve stress resistance.However,few studies have expl... Hemin can improve the stress resistance of plants through the heme oxygenase system.Additionally,substances contained in plants,such as secondary metabolites,can improve stress resistance.However,few studies have explored the effects of hemin on secondary metabolite content.Therefore,the effects of hemin on saponin synthesis and the mechanism of plant injury relief by hemin in Conyza blinii were investigated in this study.Hemin treatment promoted plant growth and increased the antioxidant enzyme activity and saponin content of C.blinii under osmotic stress and cold stress.Further study showed that hemin could provide sufficient precursors for saponin synthesis by improving the photosynthetic capacity of C.blinii and increasing the gene expression of key enzymes in the saponin synthesis pathway,thus increasing the saponin content.Moreover,the promotion effect of hemin on saponin synthesis is dependent on heme oxygenase-1 and can be reversed by the inhibitor Zn-protoporphyrin-IX(ZnPPIX).This study revealed that hemin can increase the saponin content of C.blinii and alleviate the damage caused by abiotic stress,and it also broadened the understanding of the relationship between hemin and secondary metabolites in plant abiotic stress relief. 展开更多
关键词 HEMIN SAPONIN conyza blinii Heme oxygenase Abiotic stress
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金龙胆草醇提取物对慢性牙周炎的体外抑菌抗炎作用研究 被引量:1
14
作者 陈海鹰 汪龙凤 +2 位作者 林清凡 王伟德 付东杰 《中医药导报》 2023年第2期28-34,共7页
目的:探讨金龙胆草醇提取物对慢性牙周炎常见致病菌牙龈卟啉单胞菌(Pg)、具核梭杆菌(Fn)的体外抑菌效果,观察金龙胆草醇提取物对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导人牙龈成纤维细胞(HGF)炎症反应的影响。方法:以乙醇为提取剂,采用索式... 目的:探讨金龙胆草醇提取物对慢性牙周炎常见致病菌牙龈卟啉单胞菌(Pg)、具核梭杆菌(Fn)的体外抑菌效果,观察金龙胆草醇提取物对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导人牙龈成纤维细胞(HGF)炎症反应的影响。方法:以乙醇为提取剂,采用索式提取法、热水浴浸提法和超声辅助提取法对金龙胆草进行提取,冷冻干燥后计算提取率;使用滤纸片扩散法观察提取物对Pg、Fn的抑菌效果;采用细胞计数试剂-8(CCK-8)检测金龙胆草醇提取物和Pg-LPS、HGF共同培养24 h、48 h对细胞增殖的影响;通过酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))分泌水平;应用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测HGF炎症模型中核因子-кB(NF-кB)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)蛋白表达水平,分析金龙胆草醇提取物对NF-кB信号通路的抑制情况。结果:3种提取方式的金龙胆草提取率比较,超声辅助提取法显著高于索式提取法和热水浴浸提法(P<0.05)。金龙胆草醇提取物对Pg、Fn的最小抑菌浓度分别为20 mg/mL和40 mg/mL,索式提取法的抑菌效果优于超声辅助提取法和热水浴浸提法。干预24、48 h后,10、20、50μg/mL药液组HGF活性与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);100、200、500、1000μg/mL药液组HGF活性显著低于对照组(P<0.05)。干预12、24 h后,Pg-LPS组HGF培养液上清液中TNF-α、IL-1β、PGE_(2)水平均高于对照组(P<0.05);干预12、24 h后,Pg-LPS+20μg/mL药液组、Pg-LPS+50μg/mL药液组TNF-α水平均低于Pg-LPS组(P<0.05);干预12 h后,Pg-LPS+10μg/mL药液组、Pg-LPS+20μg/mL药液组、Pg-LPS+50μg/mL药液组IL-1β水平均明显低于Pg-LPS组(P<0.05);干预12、24 h后,Pg-LPS+10μg/mL药液组、Pg-LPS+20μg/mL药液组、Pg-LPS+50μg/mL药液组PGE_(2)水平均低于Pg-LPS组(P<0.05)。干预12、24 h后,Pg-LPS组HGF中NF-κB、MMP-1蛋白相对表达量均高于对照组(P<0.05);干预12、24 h后,Pg-LPS+10μg/mL药液组、Pg-LPS+20μg/mL药液组、Pg-LPS+50μg/mL药液组NF-κB、MMP-1蛋白相对表达量均低于Pg-LPS组(P<0.05)。结论:金龙胆草醇提取物对Pg、Fn有一定的抑菌作用,索式提取法可提高抑菌效果;金龙胆草醇提取物可抑制Pg-LPS诱导HGF的TNF-α、IL-1β、PGE_(2)分泌,阻断NF-кB信号通路的激活,这可能是其发挥抗炎作用的机制之一。 展开更多
关键词 慢性牙周炎 金龙胆草 醇提取物 牙龈卟啉单胞菌 体外抑菌 牙龈卟啉单胞菌脂多糖 牙龈成纤维细胞 炎症 NF-кB
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非生物胁迫对金龙胆草主要成分积累的影响及隶属函数分析
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作者 高静雷 杨彩红 +1 位作者 孙蓉 刘姗 《安徽农业科学》 CAS 2023年第17期135-138,共4页
[目的]以中草药金龙胆草(Conyza blinii H.Lév)为材料,研究不同非生物胁迫对其重要次生代谢物含量的影响,为高品质金龙胆草的育种提供参考。[方法]采用模拟非生物胁迫盆栽试验的方法,检测高盐、低温、干旱、紫外和茉莉酸甲酯(MeJA... [目的]以中草药金龙胆草(Conyza blinii H.Lév)为材料,研究不同非生物胁迫对其重要次生代谢物含量的影响,为高品质金龙胆草的育种提供参考。[方法]采用模拟非生物胁迫盆栽试验的方法,检测高盐、低温、干旱、紫外和茉莉酸甲酯(MeJA)胁迫后金龙胆草皂苷、苦蒿素和黄酮含量的变化,利用隶属函数分析法评价不同非生物胁迫的效果。[结果]在各非生物因素胁迫下3种次生代谢物含量均呈增加趋势,其中紫外胁迫对皂苷和苦蒿素含量积累作用较明显,胁迫48 h皂苷含量增加了1.06倍,苦蒿素含量增加了0.43倍,而对黄酮含量影响较大的为茉莉酸甲酯,胁迫48 h黄酮含量增加了3.68倍。隶属函数分析显示,5种胁迫的效果由强到弱为紫外>茉莉酸甲酯>低温>高盐>干旱。[结论]利用非生物胁迫选育高次生代谢物含量的金龙胆草植株是可行的,且紫外胁迫为最优选择。 展开更多
关键词 金龙胆草 非生物胁迫 次生代谢物 含量积累 隶属函数
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滇西33种菊科植物体外降脂活性研究 被引量:1
16
作者 郎利娟 崔淑君 +4 位作者 朱起杰 杨丽 王影 姜北 肖朝江 《大理大学学报》 2022年第2期1-5,共5页
目的:研究滇西33种菊科植物的体外降脂活性,为发现植物来源的新型降脂天然产物奠定基础。方法:利用75%乙醇对33种菊科植物进行回流提取,采用人肝癌细胞HepG2高脂模型测定各植物提取物的体外降脂活性,以降脂率对其活性结果进行评价。结果... 目的:研究滇西33种菊科植物的体外降脂活性,为发现植物来源的新型降脂天然产物奠定基础。方法:利用75%乙醇对33种菊科植物进行回流提取,采用人肝癌细胞HepG2高脂模型测定各植物提取物的体外降脂活性,以降脂率对其活性结果进行评价。结果:24种菊科植物提取物具有不同程度的体外降脂活性,其中熊胆草、紫茎泽兰、狼杷草及肿柄菊提取物体外降脂活性显著,终浓度为0.5 mg/mL时,降脂率分别为(18.4±1.9)%、(18.4±9.7)%、(17.5±10.2)%、(15.1±13.4)%,此4种菊科植物提取物与辛伐他汀体外降脂率比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:熊胆草、紫茎泽兰、狼杷草、肿柄菊4种植物具有显著的体外降脂活性,值得后续深入研究。 展开更多
关键词 菊科 体外降脂活性 HepG2细胞模型 熊胆草 紫茎泽兰
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HPLC法测定楚雄本地苦蒿中芦丁的含量
17
作者 高垚 郭向群 《海峡药学》 2018年第9期43-44,共2页
目的建立HPLC法测定苦蒿中芦丁含量的方法。方法测定芦丁的色谱条件为:色谱柱InertsilODS-SP(5μm,250×4. 6mm);以甲醇-0. 3%醋酸水溶液(37∶63)为流动相进行洗脱,流速为0. 8000mL·min-1;检测波长为257nm;柱温为40℃。结果芦... 目的建立HPLC法测定苦蒿中芦丁含量的方法。方法测定芦丁的色谱条件为:色谱柱InertsilODS-SP(5μm,250×4. 6mm);以甲醇-0. 3%醋酸水溶液(37∶63)为流动相进行洗脱,流速为0. 8000mL·min-1;检测波长为257nm;柱温为40℃。结果芦丁进样量在0. 201~1. 605μg范围内(r2=1)线性关系良好,平均回收率为98. 69%(RSD%=1. 54,n=6)。结论本法操作简便、快捷、稳定、重现性好,为苦蒿作为药材的开发利用提供依据。 展开更多
关键词 HPLC 苦蒿 芦丁 含量测定
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四川道地中药金龙胆草叶片转录组特性研究 被引量:10
18
作者 孙蓉 刘姗 +3 位作者 唐自钟 晋海军 李成磊 陈惠 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2754-2760,共7页
本研究以道地药材金龙胆草叶片为研究对象,利用Illumina Hi Seq 2500高通量测序技术构建了金龙胆草转录组数据库,获得了42 903 527条Reads数据,通过与Nr、GO、COG、KOG、KEGG等数据库比对,最终获得了38 199个具有注释信息的Unigenes。... 本研究以道地药材金龙胆草叶片为研究对象,利用Illumina Hi Seq 2500高通量测序技术构建了金龙胆草转录组数据库,获得了42 903 527条Reads数据,通过与Nr、GO、COG、KOG、KEGG等数据库比对,最终获得了38 199个具有注释信息的Unigenes。其中以KEGG数据库为参考,依据代谢通路将Unigenes分成117类,包括萜类骨干合成、二萜类合成、黄酮类化合物生物合成及聚糖生物合成等路径,分别有99,23,161及70个Unigenes映射到上述途径,这些Unigenes可能参与金龙胆草主要活性成分三萜皂苷、特征成分苦蒿素、金龙胆草黄酮及金龙胆草多糖的生物合成。金龙胆草转录组测序工作的完成,极大地扩充了金龙胆草的基因资源,为药用功能基因的发掘与利用、遗传改良及有效成分含量的提高等研究奠定基础。 展开更多
关键词 金龙胆草 转录组注释 代谢途径 有效成分 生物合成
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金龙胆草鲨烯环氧酶基因的克隆及原核表达 被引量:7
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作者 孙蓉 罗吉 +4 位作者 刘姗 唐自钟 范明亮 李成磊 陈惠 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期3141-3146,共6页
本研究根据金龙胆草转录组数据库筛选获得了皂苷合成途径的一个关键酶基因——鲨烯环氧酶(SQE)。以筛选获得的基因序列,设计带有限制性内切酶Bam HⅠ和XhoⅠ位点的特异引物,通过RT-PCR方法对SQE基因进行克隆,并利用限制性内切酶和T4连... 本研究根据金龙胆草转录组数据库筛选获得了皂苷合成途径的一个关键酶基因——鲨烯环氧酶(SQE)。以筛选获得的基因序列,设计带有限制性内切酶Bam HⅠ和XhoⅠ位点的特异引物,通过RT-PCR方法对SQE基因进行克隆,并利用限制性内切酶和T4连接酶的共同作用,构建p ET30b(+)-SQE原核表达载体,导入大肠杆菌BL21(DE3)宿主细胞中,当OD600达到0.6时加入终浓度为1 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,最终以SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)检测蛋白的表达情况。结果表明本研究成功克隆了金龙胆草鲨烯环氧酶基因(Cb SQE),该基因开放阅读框为1 575 bp,编码525个氨基酸。系统发育树分析显示Cb SQE与毛曼陀罗及绞股蓝SQE基因亲缘关系比较近;酶切及测序结果表明,成功构建了Cb SQE基因原核表达载体;SDS-PAGE显示成功诱导表达了Cb SQE融合蛋白,蛋白分子量为57 k D,与理论预测结果相符合。本研究结果为解析金龙胆草的皂苷合成途径提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 金龙胆草 鲨烯环氧酶 克隆 原核表达
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金龙胆草3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及序列分析 被引量:7
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作者 孙蓉 高静雷 +3 位作者 刘姗 唐自钟 李成磊 陈惠 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期2732-2735,共4页
目的对金龙胆草Conyza blinii 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因进行克隆及序列分析,并检测其是否可作为金龙胆草的内参基因。方法采用RACE技术克隆金龙胆草GAPDH基因的cDNA全长序列,利用DNAMAN、BLAST、MEGA等工具对序列进行生物信息学分... 目的对金龙胆草Conyza blinii 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因进行克隆及序列分析,并检测其是否可作为金龙胆草的内参基因。方法采用RACE技术克隆金龙胆草GAPDH基因的cDNA全长序列,利用DNAMAN、BLAST、MEGA等工具对序列进行生物信息学分析,并以其为内参进行半定量RT-PCR。结果克隆获得了1个全长1 418 bp的GAPDH基因,完整开放阅读框1 020 bp,编码340个氨基酸,命名为GLGAPDH。序列比对结果显示,金龙胆草的GAPDH基因与紫背天葵的同源序列相似性达到96%,与薇甘菊的同源序列相似性为93%。通过系统进化树分析发现其与紫背天葵的亲缘关系最近。半定量RT-PCR分析GLGAPDH作为内参基因在不同组织中表达稳定,扩增效果良好,重现性强。结论首次克隆了金龙胆草GAPDH基因的全长cDNA序列,并通过半定量实验验证了其可作为内参基因用于基因表达量分析,为金龙胆草次生代谢物合成过程中关键酶表达分析及调控机制的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 金龙胆草 3-磷酸甘油醛脱氢酶基因 克隆 序列分析 内参基因
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